牛结节性皮肤病诊断

牛结节性皮肤病又称牛结节疹、牛结节性皮炎，是由痘病毒科、脊椎动物痘病毒亚科、山羊痘病毒属的牛结节性皮肤病病毒（LSDV）引起的一种急性、亚急性传染病。

牛是LSDV的天然宿主，各年龄和品种的牛均易感，发病率在2%～45%，死亡率一般在10%以下。

节肢动物的机械性间接传播被认为是LSDV传播的主要途径。

病牛临床特征是发热、消瘦，淋巴结肿大，皮肤水肿，局部形成坚硬的结节或溃疡，其皮张鞣制后具有凹陷或孔洞，利用价值大大降低。

1临床症状
患牛头、颈、躯干、四肢皮肤有散在的直径约1～2cm的硬结节，结节处皮温较高，触之牛痛感明显。

病牛精神、食欲无明显变化。

2实验室诊断
2.1实验材料采集病牛血样及口、鼻拭子和结节创口拭子。

检测试剂：牛结节性皮肤病病毒实时荧光PCR检测试剂盒。

2.2病毒DNA提取样品处理后使用核酸提取试剂盒（磁珠法）和核酸自动提取仪进行核酸提取。

2.3实时荧光PCR反应严格按照检测试剂说明书操作。

反应体系：无菌无核酸酶水5.9μL，PCR反应液10μL，荧光探针2.1μL，模板DNA 2μL，总反应体积20μL。

反应条件：95℃2min，循环95℃5s，60℃35s，共40次，每次循环的第二步（60℃35s）收集荧光信号（报告基团“FAM”，淬灭基团“None”）。

2.4结果判定阳性对照Ct值≤30并出现特定的扩增曲线，阴性对照无Ct值并且无特定扩增曲线，实验结果成立。

被检样品Ct值≤36并出现特定的扩增曲线，为牛结节性皮肤病病毒阳性。

被检样品均呈阳性。

3小结
牛结节性皮肤病病毒与山羊痘病毒、绵羊痘病毒同属山羊痘病毒属，三者基因组的同源性高，羊痘病毒属的病毒可产生共同的中和抗体，故依赖血清学方法较难鉴别该属病毒，常规检测方法不能对早期发病动物进行快速准确的诊断。

采用实时荧光PCR方法检测牛结节性皮肤病病毒是既快速又准确的检测方法。

为防止该病扩散，应严格按照《牛结节性皮肤病防治技术规范》的要求扑杀病牛并做好无害化处理，同群牛进行隔离，限制牛只、牛产品和饲料及相关用具的移动，圈舍和隔离环境彻底消毒，做好蚊虫的消杀工作，同时对周边养牛场（户）开展排查，限制周边牛只移动交易。

必要时，牛可采用山羊痘疫苗（按照山羊的5倍剂量）紧急免疫。

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周莉媛1，陈斌1，裴超信1，邵靓1，王强2，车从成3，丁梦蝶1
（1.四川省动物疫病预防控制中心，四川成都610041；
2.四川省绵阳市动物疫病预防控制中心，四川绵阳621000；
3.四川省三台县动物疫病预防控制中心，四川三台621100）
中图分类号：S823.75文献标识码：C文章编号：1001-8964（2020）12-0060-01收稿日期：2020-10-28
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