橡胶树α-维管蛋白基因HbTUA1的克隆及表达分析
橡胶树胶乳HbPLDα1基因及其启动子的克隆与生物信息学分析
ｆｒｗ ｕ ｄ－ｎ ｕ ｅ ａｍｏ ｉ ｃｄ ｆＡ’ ｒｄ ｃｉｎ Ｔｈ ｎ ｅ ｔ ａｉｎ ｏ Ｌ ｄ ｘ ｒｓｉｎｗｏ ｌ ａ ｉｔｔ ｎａ ｅｉｇｔｅ ｏ ｏ ｎ ｉｄ ｃ ｄ ｉｓ ｎｃａ ｉ Ｊ Ｉ ｏ ｕ ｔ ． ｅｉｖ ｓｉ ｔ ｆ Ｄｏ ｅ ｐｅ ｓｏ ｕｄｆｃｌ ａｅｕ ｒｖ ｌ ｈ ｐ ｏ ｇ ｏ Ｐ ｉ ｎ
热 带作 物 学 报 ２ １ ，３ （ ） ３ ６ ０ ２ ３ １ ：６ — ９
Ｃ ｉｅｅ Ｊｕ ｎ ｌｏ ｒ ｐｃ ｌＣ ｏ ｓ ｈｎ ｓ ｏ ｒ ａ ｆ ｏ ｉａ ｒｐ Ｔ
橡胶树胶 乳 Ｈｂ Ｌ ｒ 因及其启 Ｐ Ｄｔ ｌ基 动子 的克 隆与生物信 息学分析
夏 可 灿 １，康 桂 娟２ ， ２ ，黎 瑜 ２ 智 毅ｚ ，聂 ， 代 龙 军２ ．段 翠 芳ｚ 曾 日中 ， ． ２
键 酶 之 一 橡 胶 树 胶 乳 Ｐ Ｄ ｔ 因 （ Ｐ Ｄ Ｊ 表 达 的研 究 将 有 助 于 揭 示 橡 胶 树 乳 管 细 胞 Ｊ Ｌｏ ｌ基 Ｈｂ Ｌ ａ ） Ａ信 号 转 导 及 其 调 控
巴西橡胶树HbHEX1基因的克隆及表达分析
农 部 带 物物 术 点放 验 ’ ７ １ 裹 奈 鲂 秉 黧 耋 口５１ 业 热作 生技 重 开 实 室 ０ 曼 囊 嚣 羞 蓥 妻 莽 篓 墨海 １
２ 海 南大学农 学 院 ．海 １ ５ ０ ２ ： ７２８ ７
含有由 ６ ０个氨基 酸组 成 的高度保 守 的结 构域一 同源 异型域 （ｏ ｏ ｅｄ ｍ ｉ ．ＨＤ）】 ｈ ｍ ｍ ｏ ｏ ａｎ 【 ｌ 。第一个 编码同源异型 盒 蛋 白的基 因在果 蝇 中 被发 现 ．因其 突变 或 异位 表达 均 能 引起 同源 异 型 突变 而 得名 。随 后在 其 它 动物 、 植物 和真 菌 中相继 发现 了类 似的 同源异 型盒蛋 白基 因［ ］ ２ － ３ Ｋ ＯＴ Ｅ （ Ｎ１ ｍ Ｎ１ 是第一 个从植 物 中分离 出来 的同源 异型盒 基 因 ．该 基 因突变 造成 叶脉 附近 Ｎ Ｔ Ｄ１Ｋ 或Ｚ Ｋ ） 形成 手指状 突起结 构［ 目前从 拟南 芥 、水 稻 、大麦 、番茄 等植物 中克 隆到大 量 同源异 型盒基 因［ｏ ４ １ 。 ｓ］ － 。在植 ｌ 物 中 ，同源异 型盒 蛋 白除 了 Ｈ Ｄ结 构域外 ．还 包 含 了其 他保 守结 构域 。根 据植 物 ＨＢ蛋 白中 Ｈ Ｄ基序 的位
ｄ ｉ １． ６／ｉ ｎ１０ － ５ １ ０ ０ ３０ ３ ｏ ０３ ９ ．ｓ．００ ２ ６ ． １ ． ．１ ９ ｊｓ ２ ０
中凋 分类 号 ￥９． ７ ４１
同源异 型盒 （ｏ ｅｂ ｘ ｈ ｒ ｏｏ ，ＨＢ 蛋 白是 一类与发 育有关 的重要转 录 因子 这类转 录 因子 的一个 显著特征是 ｎ ）
重 要 的作用 ，如维 管发 育 、器官 形成 、分 生组 织 的维持 和 逆境 应答 等［１ 目前 在橡 胶树 中还 未 见到 相关 ８６ － １
橡胶树HbRAN1基因的克隆与表达分析
可作 为 橡 胶 树 抗 逆 分 子 育 种 的靶 标 基 因
关键词 橡 胶 树 ；Ｒ Ａ Ｎ 小 Ｇ蛋 白 ；死 皮 病 ；非 生 物 胁 迫 ；表 达 分 析
￥ ７ ９ ４ ． １ 文献 标 识 码 Ａ 中图分类号
Ｉ ｓ ｏ ｌ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ａ ｎ ｄ Ｃｈ ａ ｒ ａ ｃ ｔ ｅ ｒ ｉ ｚ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ｏ ｆ ａ Ｇｅ ｎ ｅ Ｃｏ ｄ ｉ ｎ ｇ
１海 南大学农 学院 ．海 南海 口 ５ ７ ０ ２ ２ ８ ２ 中 国热带农 业 科 学院橡 胶研 究 所 ．海 南儋 州 ５ ７ １ ７ ３ ７
摘 要 利 用 本 课 题 组 获 得 的 二 代 测 序 （ Ｆ Ｌ Ｘ ４ ５ ４ ） 转 录 组 数 据 库 ，筛 选 并 克 隆 获 得 到 １ 条９ ６ ９ ｂ ｐ的 核 苷 酸 序 列 ，
ａ Ｓ ｍａ ｌ ｌ ＲＡＮ ＧＴＰａ ｓ ｅ ｉ ｎ
ｖ ｅ ａ ｂ ｒ ａ ｓ ｉ ｌ Байду номын сангаас ｅ ｎ ｓ ｉ ｓ
Ｈ Ｕ ＡＮ Ｇ Ｙ ａ ｃ ｈ ｅ ｎ ｇ ，Ｑ Ｉ Ｎ Ｙ ｕ ｎ ｘ ｉ ａ ＝ ，Ｌ Ｉ Ｕ Ｌ ｉ ｎ ｙ ａ ，Ｈ Ｕ Ｃ ｕ ｉ ， Ｔ Ａ Ｎ Ｇ Ｃ ｈ ａ ｏ ｒ ｏ ｎ ｇ
ａ Ｈｅ ｕ ｅ ａ ＲＡＮ ＧＴ Ｐ ａ ｓ ｅ ｌ ｎ ａ ｍｅ ｄ ａ ｓ Ｈｂ Ｒ ＡＮｉ Ｇｅ ｎ Ｂａ ｎ ｋ ａ ｃ ｃ ｅ ｓ ｓ ｉ ｏ ｎ ：ＫＣ５ ７ ７１ ５ ｗａ ｓ ｃ ｌ ｏ ｎ ｅ ｄ ．Ｔ ｈ ｅ ｆ ｕ １ １ 一 ｌ ｅ ｎ ｇ ｔ ｈ ｃ ＤＮＡ ｏ ｆ
Ｈｂ ＲＡＮ１ ｗａ ｓ ｆ ｉ ｒ ｓ ｔ ｏ ｂ ｔ ａ ｉ ｎ ｅ ｄ ｆ ｒ ｏ ｍ ｌ ａ ｔ ｅ ｘ ｏ ｆ Ｈ．ｂ ｒ ａ ｓ ｉ ｌ ｉ ｅ ｎ ｓ ｉ ｓ ．ｗｈ ｉ ｃ ｈ ｉ Ｓ ９ ６ ９ ｂ ｐ ｌ ｏ ｎ ｇ ．ｅ ｎ ｃ ｏ ｄ ｅ ｓ ａ ｐ ｒ ｏ ｔ ｅ ｉ ｎ ｏ ｆ ２ ５ ． １ １ ｋ ｕ
橡胶树乳管HbPMP1基因的克隆与表达分析
ＮＯ Ｖ ．２０１ ３
热 带 农 业 科 学
Ｃ ＨＩ ＮＥＳ Ｅ Ｊ ＯＵＲＮ ＡＬ ＯＦ Ｔ ＲＯＰ Ｉ ＣＡＬ ＡＧＲＩ ＣＵＬ Ｔ ＵＲＥ
第 ３ ３ 卷第 １ ｌ 期
Ｖｏ １ ． ３ ３ ，Ｎｏ． １ １
橡胶树乳 管 Ｈ ｂ Ｐ ＭＰ １ 基 因的克隆与表达分析①
Ｉ ｎ ｈｉ ｔ ｓ ｓ ｔ ｕ ｄ ｙ ，ａ ＡＢＣＤ ｓ ｕ ｂ ｆ ａ ｍｉ ｌ ｙ ＡＢＣ ｔ ｒ ａ ｎ ｓ ｐ ｏ ｒ ｔ ｅ ｒ ｇ ｅ ｎ ｅ Ｈｂ ＰＭＰ１ ｗａ ｓ ｃ ｌ ｏ ｎ ｅ ｄ ｂ ｙ ＲＡ ＣＥ， ｗｈｉ ｃ ｈ ｃ ｏ ｎ ｔ ａ ｉ ｎｓ ａ ＯＲＦ ｗｉ ｔ ｈ ４ Ｏ１ １ ｂ ｐ ａ ｎ ｄ ｅ ｎ ｃ ｏ ｄ ｅ ｓ ａ ｐｏ ｌ ｙ ｐｅ ｐ ｔ ｉ ｄｅ ｏ ｆ １ ３ ３ ７ ａ ｍｉ ｎ ｏ ａ ｃ ｉ ｄ ｓ ，Ｈｂ Ｐ Ｍ Ｐ１ ｈ ａ ｄ ｈ ｉ ｇ ｈ ｅ ｒ ｓ ｉ ｍｉ ｌ ａ ｒ ｉ ｔ ｙ ｗｉ ｈ ｔ
摘 要 过 氧 化 物 酶体 膜 蛋 白 Ｐ Ｍ Ｐ是 Ａ Ｂ Ｃ转 运 蛋 白 Ａ Ｂ Ｃ Ｄ亚 家 族 蛋 白之 一 ，存 在 于 过 氧 化 物 酶 体 膜 上 。研 究 表
明 ．拟南 芥 中 的 Ａ Ｂ Ｃ Ｄ亚家 族 Ａ Ｂ Ｃ转 运 蛋 白 Ａ ｔ Ａ Ｂ Ｃ Ｄ １ 主 要 通 过 参 与 部 分 物 质 运输 进 入 过 氧 化 物 酶 体 ，其 中包 括 茉 莉酸合成的前体 Ｏ Ｐ Ｄ Ａ 。本 研 究 通 过 Ｒ Ａ Ｃ Ｅ技 术 克 隆 了 一个 Ａ Ｂ Ｃ Ｄ亚 家 族 Ａ Ｂ Ｃ转 运 蛋 白基 因 Ｈ ｂ Ｐ ＭＰ １ ，并 进 行 表 达
聂 智毅② 黎 瑜 段 翠 芳 曾 日中③
天然橡胶生物合成相关基因的克隆与分析
天然橡胶生物合成相关基因的克隆与分析天然橡胶是一种广泛应用于工业领域的重要材料。
然而，其高成本和供应量短缺一直是制约其进一步应用的主要问题。
为了解决这一问题，科学家们已经开始观察天然橡胶的生物合成过程，并试图通过克隆与分析相关基因来推动其产业化。
本文将就天然橡胶生物合成相关基因的克隆与分析进行介绍与探讨。
一、天然橡胶生物合成的基本过程天然橡胶是一种由多种生物合成产生的高分子有机物。
其生物合成的基本过程可以分为五个步骤：MVA 途径、MEP 途径、异戊二烯焦磷酸酯合成、天然橡胶分子聚合和成熟。
其中，MVA 途径与 MEP 途径通过生成异戊二烯焦磷酸酯作为共同前体，进而促进了天然橡胶聚合的进行。
因此，天然橡胶的生物合成过程中与其产生相关的基因主要涉及到这两个途径的关键酶类。
二、相关基因的克隆与研究现状在现代基因克隆技术的帮助下，科学家们已经成功克隆并研究了许多与天然橡胶生物合成相关的基因。
其中，以 MVA 途径为基础的克隆研究较早，2010 年左右，一些相关酶基因，如 HMG-CoA 还原酶、MVK 等基因已经被克隆。
在这些基因的研究中，科学家们通过对基因序列的分析和构建表达载体，成功实现这些基因在 E. coli 中的大量表达，并鉴定了其中关键的基因变化位点。
同时，各种实验手段也帮助他们发现这些基因变异对于天然橡胶的产生量和质量均具有不同程度的影响，这些研究完成了在基因水平上针对天然橡胶生产过程的关键基因进行了初步鉴定。
然而，MEP 途径相关基因的克隆研究要相对较新。
因此，该途径的关键酶和基因序列的研究还相对欠缺，也缺乏较多的官方和权威性。
当然，科学家们相信，随着技术的不断进步，这些问题都会迎刃而解，并有利于推动相关领域的更深入的发展。
三、相关基因的生物学功能与进一步研究方向天然橡胶生物合成相关的基因已经通过基因克隆的方式得到了一定程度的研究和验证。
从目前的研究结果来看，这些基因的表达与天然橡胶的产生量和质量具有一定的联系。
巴西橡胶树HbNAC1基因的克隆和表达分析
ｃａ ｓｆ ｄｉｔ ｅ Ⅱ ｓ ｂ ａ ｉ ｆ ｌｓｉ ｅ ｏ ｔ ｉ ｎ ｈ ｕ ｆｍ ｌ ｏ ｙ ＮＡＣ ｆｍｉ ． ｅ ．ｕ ｎｉ ｔ ｅＩ ＰＣ ａ ａｙ ｉ ｉｄｃ ｔｄ ｔａ ｈ ｘ ｒ ｓｉｎ ａ ｌ Ｓ ｍｉｑ ａ ｔ ａｉ ｙ ｔ ｖ Ｒ ｎ ｌｓｓ ｎ ｉａｅ ｈ ｔ ｅｅ ｐ ｅ ｓｏ ｔ
关键词 ： 巴西橡胶树 ； ＡＣ类转 录因子 ；乙烯利 ； Ｎ 基因表达
ｄ ｉ１ ． ６ ￣ｉ ｎ１０ － ３ ５２ １．５ ０ ｏ： ０３ ９ ．ｓ．０ ５ ３ ９ ． ２０ ． ７ ９ ｓ ０ ０
Ｃｌ ｎｉ ｎｄ Ｅｘ ｅ ｓｏ ｏ ｎｇ ａ ｐｒ ｓ ｉ ｎ Ａｎａ ｙ ｉ ｆＨｂ ｌ ｓｓｏ ＮＡ ｎ ｅ ｅ ａ ｉ ｎｓ Ｃ１ ｉ Ｈ ｖ ａｂｒ ｓＨｅ ｉ
Ｔｏ ｉ ｌ ｇ ｉ ｌ ｒｌ ｃｅｃｓ Ｈ ｉｏ ７ １Ｃ ｉａ３ Ｈａｎ ｎＡ ａ ｅ Ａｇｉｕｔｒｌ ｃ ｎ ｅ， ｉｏ ７ ０ ０ Ｃ ｉａ ｒｐｃ ｒ ｕｔ ａ ｉ ｅ， ａｋ ｕ５ １０ ， ｈｎ ； ． ｉａ ｃ ｄｍｙｏ ｒ ｌ ａ ｉ ｃｓＨａｋ ｕ５ １０ ， ｈｎ ） ａＡ ｃ ｕ Ｓ ｎ １ ｆ ｃ ｕ Ｓｅ
其 ｅ Ｎ 全长为 １ １ ｐ 含有 完整 的开 放阅读框 ， Ｄ Ａ ４ ９ｂ ， 编码 ３ ９ 氨基酸 。推 导的氨基 酸序列含有 １ Ｎ ０个 个 ＡＭ 结构 域 ， 有典型 具 的 ＮＡＣ类 蛋 白的结构特 征 ， 与毛果 杨（ｏ ｕｕ ｉ ｏａｐ ） 蓖麻（ｉｉｕ ｏ Ｐ ｐ ｌ ｔ ｃ ｃｒａ 、 ｓ ｒｈ Ｒｃ ｓｃｍｍｕ ｉ 、 稻（ ｒｚ ａｉ ）＇ ｎ ｎｓ 水 ） Ｏ ｙａｓｔ ａ ￣ 拟南芥 ｆｒｂｄｐ ｉ ｖ Ｈ Ａ ａ ｉｏ ｓ ｓ
ＯｆＮ ＡＣ ａ ｉｙ，ａ ｍ ｏｌ ｏｕｓ ｔ ＡＣｓ ｉ ｐｕ ｕ ｒ ｃ ｏｃ ｐａ ｆｍ ｌ ｎｄ ｈｏ ｏｇ ｏＮ ｎ Ｐｏ ｌ ｓ ｔｉ ｈ ａｒ ，Ｒｉ ｎｕ ｏｍｍｕｎｉ，Ｏｒ ｚ ａｔｖ ｎ ｃｉ ｓ ｃ ｓ ｙ ａ ｓ ｉａ ａ ｄ Ａｒ ｂｉ ｐ ｉ ｈ ｌａ ａ Ｏ ９ ，８ ％ ，５ ％ ａ ％ ， ｅ ｐｅ ｔｖ ｌ ． ｙｌ ｇ ｎ ｔｃ ａ ａ ｙｓｓｓ ｗｅ ｈａ ＮＡＣ ｗａ ａ ｄｏ ｓｓ ｔ ａ ｉ ｎ ｆ７ ％ ０ ７ ｎｄ ６０ ｒ ｓ ｃｉ ｅ ｙ Ｐｈ ｏ ｅ ｅ ｉ ｎ ｌ ｉ ｈｏ ｄ ｔ ｔＨｂ ｌ ｓ
巴西橡胶树中碱性转化酶HbNINa基因的克隆和表达模式分析
重要 作 用 。
关 键 词 巴西 橡 胶 树 ； 中碱 性 转 化 酶 ；基 因 结 构 ；表 达 分 析 ；叶 片发 育
中图分类号 ￥ ７ ９ ４ ． １ 文 献 标 识 码 Ａ
Ｃｌ ｏ ｎ ｉ ｎ ｇ ａ ｎ ｄ Ｅｘ ｐ ｒ ｅ ｓ ｓ ｉ ｏ ｎ Ａｎ ａ ｌ ｙ ｓ ｉ ｓ ｏ ｆ ａ ｎ Ａｌ ｋ ａ ｌ ｉ ｎ ｅ ／ Ｎ ｅ ｕ ｔ ｒ ａ ｌ Ｉ ｎ ｖ ｅ ｒ ｔ ａ ｓ ｅ Ｇｅ ｎ ｅ ｉ ｎ ｖ ｅ ａ ｂ ｒ ａ ｓ ｌ ｉ ｅ ｎ ｓ
肖小 虎・ 一，戚 继艳ｚ ，方 永 军 ，曹 冰 ， 龙翔 宇 ，唐 朝 荣
１ 海南 大学农 学 院 ．海 南海 口 ５ ７ ０ ２ ２ ８ ２ 中 国热 带农 业科 学 院橡 胶研 究所 ．海 南儋 州 ５ ７ １ ７ ３ ７
摘 要 检 索橡胶树 Ｅ Ｓ Ｔ和 基 因组 数 据 库 ． 发 现 了 １ 个 在 叶片 中 高 丰 度 表 达 的 中碱 性 转 化 酶 基 因 。 采 用 Ｒ Ｔ —
守结 构域。基因组结构分析显示 日６ Ｍ№ 基因包含 ４个外显子和 ３个 内含子 。Ｑ Ｐ Ｃ Ｒ分析结果表 明 ，日６ Ⅳ， Ⅳ Ⅱ基 ｌ
因 在 在 胶 乳 中表 达 水 平 极 低 ．而 在 其 他 组 织 如 树 皮 、树 叶 和 雌 花 中 的表 达 丰 度 相 对 较 高 。 在 叶 片 发 育 过 程 中 ， ６ 在 叶 片 发育 的初 期 高 丰 度 表 达 ．推 测 日 ６ 可 能 参 与 叶 片 蔗 糖 利 用 ．进 而 在 橡 胶 树 叶 片 发 育 过 程 中起
Ｐ Ｃ Ｒ和 Ｒ ＡＡ 和 基 因 组 序 列 ，命 名 为 Ｈ ｂ Ｎ Ｉ Ｎ ａ 。 序 列 分 析 结 果 显 示 ，日６ Ⅳ ， Ⅳ Ⅱ基 因
巴西橡胶树HbHDT1基因的克隆及表达分析
化 酶基 因是一 个 多家 族 ．有 复 杂 的组 织 特异 性表 达 ，广泛 参 与调 节 真核 生 物 的生 长 发育 过 程 。在 很 多 物
织 、胚 、叶 、芽 、胶 乳 中 均 有 表 达 。在 体 细 胞 胚 发 生 过 程 中 Ｈｂ ＤＴ 表 达 出现 明显 的差 异 ，在 培 养 １ 体 细 Ｈ １ ２ｄ的 胞 胚 中表 达 量 最 低 ，在 培 养 ５ 体 细 胞胚 中表 达 量 最 高 。茉 莉 酸 和 乙烯 处 理 对 胶 乳 中 Ｈ ＨＤ １的 表 达无 影 响 。 ３ｄ的 ｂ Ｔ
种 的基 因组 中 ．一些 Ｈ Ａ ｓ 因被 鉴定 ，可 以划分 为 三个 类 型 ：Ｒ Ｄ ／ Ｄ 、Ｈ ２ Ｈ Ａ ｓ —ｕｎ Ｄ Ｃ 基 Ｐ ３Ｈ Ａ１ Ｄ 一 Ｄ Ｃ ／ ＨＤ ｔｉｓ和
Ｎ Ｄ依 赖性 酶 的 ｓ ｔｉｓ ，其 中 ＨＤ 一 Ｄ Ｃ 家族 是植 物 中特有 的一 种类 型［ Ａ ｉｕｎ问 ｒ ２Ｈ Ａ ｓ ８ ］ 。 巴西橡胶 树 （ 口ｂａｉｅｓ ） Ｈｅｅ ｒｓ ｉ ｉ 幼态无性 系是 一种新 型 的橡 胶种植 材料 ，它 生长速 度快 、产胶量 高 、抗 ｌｎ ｓ 逆性 强［０ 为探究 幼态 无性 系高 产 的原 因 。本课 题 组 通 过抑 制 差 减 杂交 获 得 了一 些 在 幼态 无性 系 和老 态 ９］ － １
关 键词
组 蛋 白去 乙 酰 化 酶 ；巴西 橡 胶 树 ：表 达 ；茉 莉 酸 ；乙烯
ｄ ｉ １． ６ ／ｉ ｎ１０ — ５ １ ０ ００ ．１ ｏ ０３ ９ｊｓ ． ０ ２６ ． １ ．１ ２ ９ ．ｓ ０ ２ ０
巴西橡胶树类甜味蛋白基因HbTLP1的克隆及表达分析
１ ＆ａ ｅ ｏｏａ ｒｆ ｒ ｗ￡ ｆ Ｕｉｚｔ ｎｏ ｏ ｉａＢｏｅｏｒｅ Ｈ ｉａ ｎｖｒｉ ， ｉｏ Ｈａ ｎＫ ｙＬｂ ｒｔ ｙ ｏ ｎ ｅ ｔｉａｏ Ｔ ｐｃｌ ｉｒｓｕｃ， ａｎ ｎＵ ｉ ｓｔ Ｈａｋｕ，Ｈ ｎ ５ ０ ２ ， ｈｎ ｏ Ｓ ｌ ｉ ｆｒ ｅ ｙ ｍ ７ ２ ８ Ｃ ｉａ
．
日６ ．Ｔ ｅ ｓ ｑ ｅ ｃｎ ｅ ｕ ｔ ｈ ｗｅ ｔ ａ ｈ ｏ ｅ ｅ ｄ ｎ ａ ｆ Ｈ６ 化 ｈ ｅ ｕ ｎ ｉｇ ｒ ｓ ｌ ｓ ｏ ｄ ｈ ｔ ｔ ｅ ｐ ｎ ｒ ａ ｉ ｇ ｆ ｍｅ ｏ 化 ｒ
ａ ｉ ｗｉ ａ ｏ ｓ ｒ ｅ ＴＨＡＵＭ ＡＴＩ —Ｌｉ ｄ ｍ ａｎ ｉ ｉ ｒ ｃｄｓ ｔ ｈ ｃ ｎ ｅ ｖ ｄ Ｎ ｋｅ ｏ ｉ ｓｍ ｌ ｗｉ ａ ｔ ｈ ＴＬＰ ｒ ｍ ｏ ｈ ｒ ｆｏ ｔ ｅ ｐｌｎ ｓ Ｂｉｉ ｆｒｎａｉ ｓ ｎａｙ ｉ ａｔ ｏ ｎ ｏｉ ｔｃ ａ ｌ ｓｓ
过 Ｒ —Ｃ Ｔ Ｐ Ｒ方 法 扩 增 巴西 橡 胶 树 Ｔ Ｐ同源 基 因 的 ｃ Ｎ 片段 ．命 名 为 Ｈｂ Ｌ １ 该 片 段 包 含 一 个 ９４ｂ Ｌ Ｄ Ａ ＴＰ 。 ８ Ｄ的 开 放 阅读 框 ．编 码 ３７个 氨 基 酸 的 多 肽 生 物 信 息 学 分 析 结 果 表 明 ．该 氨 基 酸 序 列 含 有 一 个 超 级 Ｔ Ａ ＭＡ Ｉ — ｉｅ ２ Ｈ Ｕ Ｔ Ｎ Ｌｋ 结 构 域 ．与 杨 树 、大 豆 、葡 萄 和 拟 南 芥 的 Ｔ Ｌ蛋 白有 较 高 的 同 源 性 。半 定 量 分 析结 果 表 明 ．该 基 因 的表 达 受水 Ｐ
ｂ ｔｎ ｔＪ ｕ ｏ ｎ． Ａ ｌ ｈ ｄ ｔ ｉｄｃ ｔｄ ｈ ｔ １ ｔｅ ａａ ｎ ｉａｅ ｔａ Ｈｂ Ｐ１ ｓ ｈ Ｔ Ｐ ｏ ｌｇ ｉ ｒｂ ｅ ｎ ｉ ｅａｅ ｔ Ｓ ｍｅ ｉｔｄ ｉ ｔｅ Ｌ ｈ ｍｏｏ ｎ ｕ ｂ ｒ ａ ｄ Ｓ ｌｔｄ ０ Ａ ｒ ｄａｅ
巴西橡胶树AnnHb1基因的克隆及表达分析
为进一 步 了解 Ａ ｎ ｘｎ在橡 胶树 中的生物 学功 能打 下基 础 ｎｅｉ
１ 材 料 与 方 法
１１ 植 物 材 料 ．
巴西 橡胶 树 （ ｅｅ ｒｓ ｉｎｉ Ｍｆ１ Ａ ｇ７ ３ — ７来 自中国热 带农业 科学 院 的实 验农 场 。胶乳 的采 样 Ｈ ｖａ ｂａｉｅｓ ｉ ． ｒ） — ３ ９ ｌ ｓ ｌ
经从 多种植 物 如拟南芥 、玉米 、苜蓿 、芥 菜等 中得 到 了 Ａ ｎｘｎ ７ ｎ ｅｉ［／ ￣ 。研究 结果 表 明 ，植 物 Ａ ｎ ｘ ｓ ｎ ｅ ｉ 与动 物 ｎ 细胞 中 的 Ａ ｎ ｘｎ 相似 ．由多基 因家族 编码 ．参 与 调节 多 种生 理过 程＿８ ｎ ｅ ｉｓ ｌ】 １。植 物 Ａ ｎ ｘ ｓ 能参 与植 物 细 ｎ ｅｉ 可 ｎ 胞 的分泌作 用 、胞 吐作 用 、液 泡化 过程［，可 能具 有磷 酸 二酯 酶［ ８ １ ９ １ 、过氧 化物㈣和 钙通 道等 活性ｌ ，也 可能 １ １ ］ 参 与 低 温 、机械 刺激 和 氧化 胁 迫应 答… １，还可 能 与 果实 的 成熟 有关 阎 一］ ５ 。到 目前 为止 。还 未 见 到橡 胶树 相
摘要 根 据 一个 从 巴 西橡 树 胶 乳 ｃ Ａ 文 库 中获 得 的 Ｅ Ｔ片 段 的序 列 设 计 引 物 ．通 过 ＲＡＣ 的方 法 获 得 了 橡 胶 ＤＮ Ｓ Ｅ
树 编码 ａ ｎ ｘｎ的 ｃ Ｎ ｎ ｅｉ Ｄ Ａ，命 名 为 Ａ ｎ １ ｎ Ｈｂ 。序 列 分 析 表 明 ，Ａｎ Ｈｂ ｎ １长 为 ｌ１ ８ ｐ ９ ，含 有 ９ ５ｂ ｂ ４ ｐ的 阅读 框 ，６ ｐ ２ｂ 的 ５－ Ｔ ＂ Ｒ和 １ １ ｐ的 ３－ Ｔ Ｕ ９ ｂ ＂Ｕ Ｒ，编 码 ３ ４个 氨 基 酸 ．分 子量 为 ３ ． ｕ ｌ ５ ９ｋ ，等 电点 为 ８１ 。 该 氨 基 酸 序列 与 蓖麻 、 ９ ．８ 麻 疯 树 、棉 花 、苜 蓿 、烟 草 和 拟南 芥 中 的 ａ ｎ ｘ ｎ ｅ ｉ 同 源 性 分 别 为 ８ ％ 、７ 、７ ％ 、６ ％ 、６ ％ 和 ６ ％ 。 半 ｎ的 ２ ２ ２ ４ ０ ０
巴西橡胶树胶乳表达ABC转运蛋白HbGCN1的克隆与表达研究
巴西橡胶树胶乳表达ABC转运蛋白HbGCN1的克隆与表达研究聂智毅;黎瑜;李波;夏可灿;段翠芳【期刊名称】《热带作物学报》【年(卷),期】2012(033)009【摘要】橡胶生物合成是一种典型的植物类异戊二烯次生代谢,它是影响橡胶产量的首要因素.ABC转运蛋白(ATP Binding Cassette transporter,ABC transporter)是一类与植物次生代谢密切相关的蛋白大家族.筛选已构建的茉莉酸诱导橡胶树胶乳消减文库,并克隆了1个GCN(general control non-repressible)亚族ABC转运蛋白基因EST,通过RACE技术获得其全长cDNA序列,命名为HbGCN1.该基因开放阅读框共1 815 bp,编码605个氨基酸残基.表达分析表明:HbGCN1主要在橡胶树树皮及胶乳中表达,且在乙烯、茉莉酸或伤害诱导下上调表达,推测其可能与橡胶生物合成相关.原核表达该基因,为进一步的研究奠定基础.%Rubber biosynthesis, a typical isoprenoid biosynthesis pathway, has been the key important factor limiting rubber latex yield. ABC (ATP-BindingCassette)transporters are a large protein family which is closely involved in the plant secondary metabolites. Through screening a jasmonic -induced latex SSH cDNA library combined with RACE, one EST encoding ABC transporter of GCN subgroup and its full-length cDNA, named as HbGCNl were obtained. HbGCNl contains a ORF with 1 815 bp and encodes a polypeptide of 605 amino acids. The expression patterns show that HbGCNl is primarily expressed in latex or bark. Under ethylene,jasmonic acid and wounding induction, its expression is up-regulated. Based on the above analysis, it is speculated that HbGCNl may be closely correlated to the rubber biosynthesis. Moreover, the prokaryotie expression of the gene lay the foundation for further research.【总页数】5页(P1598-1602)【作者】聂智毅;黎瑜;李波;夏可灿;段翠芳【作者单位】中国热带农业科学院橡胶研究所农业部橡胶树生物学与遗传资源利用重点实验室省部共建国家重点实验室培养基地-海南省热带作物栽培生理学重点实验室海南儋州571737;中国热带农业科学院橡胶研究所农业部橡胶树生物学与遗传资源利用重点实验室省部共建国家重点实验室培养基地-海南省热带作物栽培生理学重点实验室海南儋州571737;海南大学农学院,海南海口570228;海南大学农学院,海南海口570228;中国热带农业科学院橡胶研究所农业部橡胶树生物学与遗传资源利用重点实验室省部共建国家重点实验室培养基地-海南省热带作物栽培生理学重点实验室海南儋州571737【正文语种】中文【中图分类】S794.1【相关文献】1.一个新的巴西橡胶树胶乳UEP基因的克隆与表达分析 [J], 杨云;张治礼;刘宽灿;李维国;苏火生2.一种测定巴西橡胶树胶乳中过氧化氢含量及其在胶乳各组分中分布的方法研究[J], 蔡甫格; 王立丰; 史敏晶; 田维敏3.一种测定巴西橡胶树胶乳中过氧化氢含量及其在胶乳各组分中分布的方法研究[J], 蔡甫格; 王立丰; 史敏晶; 田维敏4.巴西橡胶树氰丙氨酸合成酶基因HbCAS的克隆与表达分析 [J], 张议文;刘辉;冯成天;胡义钰;王真辉;袁坤5.橡胶树一个胶乳高表达MDR型ABC转运蛋白的克隆与表达研究 [J], 聂智毅;李波;白瑞璞;黎瑜因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
巴西橡胶树生长素响应HbJAR1基因克隆与表达分析
４ 三亚 ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ现代 农 业检验 检 测预 警 防控 中心 ，海 南三 亚
摘 要
５ ７ ２ ０ ０ ０
． ＲＪ基 因 是 植 物 生 长 素 响 应 基 因 ，具 有 维 持 植 物 体 内 生 长 素 浓 度 动 态 平 衡 和 增 强 植 物 抗 逆 性 的 功 能 。
ｐ ｌ ａ ｎ ｔ ｔ ｏ ｌ ｅ ｒ ａ ｎ ｃ ｅ ａ ｂ ｉ ｌ ｉ ｔ ｙ ｓ ｔ ｒ ｅ ｓ ｓ ． Ｔ ｏ ｃ ｌ ａ ｒ ｉ ｆ ｙ ｔ ｈ ｅ ｇ ｅ ｎ ｅ ｓ ｔ ｒ ｕ ｃ ｔ ｕ ｒ ｅ ａ ｎ ｄ ｆ ｕ ｎ ｃ ｔ ｉ ｏ ｎ ｏ ｆ Ｊ Ａ Ｒ １ ｉ ｎ ｕｂ ｒ ｂ ｅ ｒ ｔ ｒ ｅ ｅ（ Ｈ ｅ ｖ ｅ ａ ｂ ｒ ｃ ａ ￣ ｉ ｌ ｉ ｅ ｎ ｓ ｉ ｓ
Ｒｅ ｓ ｐ ｏ ｎ ｓ ｉ ｖ ｅ Ｈｂ Ｊ ＡＲ１ ｉ ｎ Ｒｕ ｂ ｂ ｅ ｒ Ｔｒ ｅ ｅ
ＬＩ Ｘｉ ａ ｏ ｎ ａ ，ＸＩ ＡＯ Ｈｏ ｕ ｚ ｈｅ ｎ ，Ｗ ＡＮ Ｓａ ｎ ｌ ｉ ａ ｎ ，ＺＨＡＮＧ Ｄｏ ｎ ｇ ，ＺＨＡＮＧ Ｙｕ
１ Ｉ ｎ ｓ ｔ ｉ ｔ ｕ ｔ ｅ ｏ ｆ Ｓ ｃ ｉ ｅ ｎ ｔ ｆｃ ｉ ｗ ｔ ｄ Ｔ ｅ ｃ ｈ ｎ ｉ ｃ ａ ｌ Ｉ ｎ ｆ ｏ ｒ ｍａ ｔ ｉ ｏ ｎ ，Ｃ Ａ Ｔ ＡＳ ，Ｈ ａ ｉ ｋ ｏ ｕ ，Ｈａ ｉ ｎ ａ ｎ ５ ７ １ １ ０ １ ，Ｃ ｈ ｉ ｎ ａ ２ Ｈ ａ ｉ ｎ ａ ｎ Ｋｅ ｙ Ｌ ａ ｂ ｏ ｒ ａ ｔ ｏ ｒ ｙ ｆ ｏ ｒ Ｓ ｕ ｓ ｔ ａ ｉ ｎ ｂｌ ａ ｅ Ｕ ｔ ｉ ｌ ｉ ｚ ｔ ａ ｉ ｏ ｎ ｏ ｆ Ｔ ｒ ｏ ｐ ｉ ｃ ａ ｌ Ｂ ｉ ｏ — ｒ ｅ ｓ ｏ ｕ ｒ ｃ ｅ ｓ ／ Ｃ ｏ ｌ ｌ ｅ ｇ ｅ ｏ ｆ Ｔ ｒ ｏ ｐ ｉ ｃ ｌ ａ Ａ ｇ ｒ ｉ ｃ ｕ ｌ ｔ ｕ ｒ ｅ
巴西橡胶树SUMO活化酶基因HbSAE1的克隆及表达
硫 酯 键相 连 接 ；然 后 活化 的Ｓ ＭＯ Ｓ Ｅ Ｕ 经 Ａ 传递 ￣ Ｓ Ｅ（ ｂ ９ 上，其Ｃ ｇ ｌ与Ｕ ｃ 的Ｃ ｓ 过硫 酯 键 相 连； ］ ＪＣ Ｕ ｃ ） 端 ２Ｇ ｙ ｂ９ ｖ 通
９期
郭 冬 等 ：巴西 橡 胶 树 Ｓ ＭＯ活 化 酶 基 因 ＨｂＡ １的克 隆及 表 达 Ｕ ＳＥ
１４ ４７
１ 材 料 与 方 法
１பைடு நூலகம் 植 物 材 料 ．
巴西 橡胶 树 （ ０ ｂａｉｅｓｓ ７ ３ — ７来 自中国热 带农 业 科学 院 的试 验 农 场 。胶乳 的采样 按 Ｔ ｎ 等 Ｈｅｅ ｒｓ ｉｎｉ）— ３ ９ ｌ ａｇ
打 断异肽 键 ，Ｓ ＭＯ Ｕ 与靶 蛋 白分离 ，恢 复到解离 状态 ，并 不断循 环［３ 乙ｊ 。研究 表 明 ， 植物Ｓ ＭＯ Ｕ 化修 饰 参与植
物 生长发 育［１ 素 信号转 导ｌ ３ 、激 － ６ ７ 一、抗 病 防御［１以及 逆境 应答… － ］ 生理过 程 。 ９０ ，］ 一等 １ ６ 到 目前 为 止 ．还 未 见 到 橡 胶 树 中 Ｓ ＭＯ 化修 饰 途 径 的研 究 报 道 本研 究 利用 一 个 从 巴西 橡 树 胶乳 Ｕ
第 一 作 者 简 介 ：郭
冬 ，男 ，１７ ９ ８年 生 ，博 士 。研 究 方 向 ：植 物 分 子 遗 传 学 。
｝通 讯 作 者 ，彭 世 清 ，Ｅ ｍ ｉ：ｓｑ ｅｇ ６ ． ｎ。 － ａｌ ｈ ｐ ｎ＠１３ｃ ｏ 收 稿 日期 ：２ １— ７ ２ ０００—９ 修 回 日期 ：２ １— ９ ０ ０００ —８
橡胶HbJAZ1基因的原核表达与纯化分析
橡 胶
Ｚ１基 因 的 原 核 表 达 与 纯 化 分 析
刘 伟 ， 翟金玲 ， 许慧敏 ， 黄 惜
（ 海南省 热带 生物资源可持续利用 重点实验室／ 海南 大学 农学院 生物科学技术 研究所 ， 海南 海 口 ５ ０ ２ ） ７２ ８ 摘 要 ：为了鉴定 巴西 橡胶 树 中存 在 与 ＪＺ蛋 白特异 性 结合 的蛋 白 ， Ａ 利用 ｐ Ｅ －ｐ１载体 构建 橡 胶 ｚ Ｇ Ｘ６ －
收 稿 日期 ： ０ １ ０ ０ ２ １ — ４— ５
基 金项 目：国家 自然科 学 基 金 项 目（ １６ １７ ； 育 部 高 等 学 校 博 士 学 科 点 专 项 科 研 基 金 博 导 类 项 目 ３ ００ ０ ） 教 （０ ０ ６ １ ０ ３ ； 南大学 ２ １工程项 目“ 带作物遗传育种与生态保 育” ２ １４ ０ １ ０ ） 海 １０ ｌ 热 经费资助 。 作者简 介 ： 刘伟 （９３ ） 男 ， １８ 一 ， 天津人 ， 海南大学农 学院生物化学 与分 子生物学 ２０ 级硕士研究生． ０８ 通信作 者 ： 黄惜 ，ｉｕｎ０ ＠ｇ ａ ．ｏ ｘ ａｇ ｌ ｍ ｉ ｔｍ ｈ ｌ
关键 词 ：巴西橡胶 树 ； Ａ 原 核表达 ； 白纯化 Ｊ ｚ； 蛋
中 图 分 类 号 ：Ｑ７ １ ８ 文 献 标 志 码 ：Ａ
天 然橡 胶 是一 种重 要 的 战略物 资 ， 巴西 橡胶 树 （ ｅｅ ｒ ｉｅｓ ） 天然 橡 胶 的 主要 来 源 。乳 管 是橡 Ｈｖａｂａ ｌｎｉ 是 ｓｉ ｓ 胶树 合 成和 贮存 胶 乳 的重要 器 官 … 。在橡 胶 乳管 分化 和产 胶 机理 的研 究 中 ， 现机 械损 伤和 排胶 能 够促 发
进乳管分化 ， 外施 茉莉 酸也 能够诱 导乳 管分 化 ， 这说 明茉莉 酸是 调控 橡胶 树乳 管分化 的重要 信号 分 子 Ｊ 。茉莉酸（ ｓ ｏｉ ａｉ， ） ｊ ｍ ｎ ｃ Ｊ 是植物体中十八碳脂肪酸（ ａ ｃ ｄ Ａ 亚麻酸 ） 的衍生物， 它是一种重要 的植物激 素， 不仅参与植物对机械损伤 、 虫害和病害的反应 ， 还在植物生长和发育中起重要作用 。茉莉酸信号 途径被认为是早期陆地植物适应环境 中存在 的大量 生物胁 迫与非 生物胁迫所使用 的信号传导方式 。 对于茉莉酸信号途径的研究 ， ２０ 在 ０７年 ，ｈ ｉ Ｃ ｉ 等和 Ｔ ｉ ｓ ｎ ｈ ｅ 等在拟南芥突变体 中鉴定到茉莉酸信号调控途 ｎ 径中起关键作用 的 ｚ基因家族将几个信号传递通路连接起来 ， 这使人们对茉莉酸信号途径有了一个相 对完整的认识 。 属于一个叫 ＴＦ ＩＹ蛋 白的大基因家族 ， 它们具有一个定位于 ＺＭ ｄｍ ｉ Ｉ ｏ ａ ｎ中的高 度保守的 ＴＦ Ｆ Ｙ］ Ｇ序列 Ｊ Ｉ［ ／ Ｘ 。 不含有任何已知的 Ｄ Ａ结合结构域 ， Ｎ 但是有些 被证 明定位于 细胞核＂ 。 ｚ蛋 白的明显特征是定位于 ｃ端 附近的 ｊｓ ａ 基序 （ Ｌ ２ ｘ Ｋ ） Ｒ ５ Ｙ） ｓ Ｘ Ｆ ２ Ｒ（ ｘ Ｐ 。 。到 目前为 ２ 。 止， 只在 拟南 芥上 鉴 定 了 １个受 ｚ调控 的 ＭＹ ２转 录 因子 ， Ｃ 该基 因的 Ｋ ｏ—ｕ 突 变体 并未 完 全终止 茉莉 ｎｔ ｔ ｏ 酸信号 ， 这说明还有其他茉莉酸相关调控 因子未被鉴定 ， ｚ蛋白可能还有其他 目 标基因。橡胶 ｚ基因 最近 已被鉴定＿ ， １ 但在橡胶中与 ｚ互作 的蛋 白尚未见报道。为 了鉴定 巴西橡胶树 中与 ｚ蛋 白特异 性结合的蛋 白， 者采用 Ｒ ．Ｃ 笔 ＴＰ Ｒ扩增 ｍ ｚ １基 因， 用 ｐ Ｅ － 一 载 体 ， 利 Ｇ Ｘ６ １ ｐ 构建橡 胶 ｍ ｚ 与 Ｇ Ｔ ｌ Ｓ （ ｌ ａ ｉ ｅＳ ｒ ｓ ｒ ｅ 融合表达载体 ， Ｇｕ ｔ ｏ －ａ ｆ ａ ） ｔｈ ｎ ｔ ｎ ｅ ｓ 然后进行原核表达和融合蛋 白的纯化研究 ， 其结果报道如下。
橡胶树胚胎晚期丰富蛋白基因HbLEA1的克隆和表达分析
Ｃｌ ｏ ｎ ｉ ｎ ｇ ａ ｎ ｄ Ｅｘ ｐ ｒ ｅ ｓ ｓ ｉ ｏ ｎ ｏ ｆ ａ ＬＥＡ Ｇｅ ｎ ｅ ， Ｈｂ Ｌ ＥＡ１， ｆ ｒ ｏ ｍ Ｈｅ ｖ ｅ ａ ｂ ｒ ａ ｓ ｌ ｉ ｅ ｎ ｓ ｉ ｓ
Ｑ Ｉ Ｊ ｉ ｙ ａ ｎ ， Ｘ Ｉ Ａ Ｏ Ｘ ｉ பைடு நூலகம் ｏ ｈ ｕ ，Ｆ Ａ Ｎ Ｇ Ｙ ｏ ｎ ｇ ｊ ｕ ｎ
ｔ ｈｅ ｒ ｅ ｆ ｏ ｒ ｅ ｗａ ｓ ｃ ｌ ａ ｓ ｓ ｉ ｉｅ ｆ ｄ ｉ ｎ ｔ ｏ ｔ ｈ ｅ ＬＥＡ 一 ２ ｓ ｕ ｂｆ ａｍｉ ｌ ｙ ｏ ｆ ＬＥＡ ｆ ａ ｍｉ ｌ ｙ ． Ｔｈ ｅ ｒ ｅ ｓ ｕｌ ｔ ｓ ｏ ｆ ｔ ｉ ｓ ｓ ｕｅ —ｓ ｐｅ ｃ ｉ ｉｃ ｆ ｅ ｘ ｐｒ ｅ ｓ ｓ ｉ ｏ ｎ ａ ｎａ ｌ ｙ ｓ ｉ ｓ
戚 继 艳 ， 肖小 虎 ，方 永 军 ，龙 翔 宇 ，唐 朝 荣
中国热带农 业科 学院橡胶 研 究所 ．海南儋 ９ ’ Ｉ ， Ｉ ５ ７ １ ７ ３ ７
摘 要 胚 胎 晚 期 丰 富 蛋 白 （ Ｌ Ｅ Ａ） 是与植物抗逆反应 相关的一类重要 蛋白 本 研 究 克 隆 了橡 胶 树 Ｌ Ｅ Ａ家 族 一 个 新 基 因 的全 长 ｃ Ｄ Ｎ Ａ 序 列 ，命 名 为 Ｈ ６ ， Ｊ 。该 ｃ Ｄ Ｎ Ａ全 长 １ １ ８ ３ ｂ ｐ ，其 中 ５ ＂ Ｕ Ｔ Ｒ区６ ０ ｂ ｐ ，３ ＂ Ｕ Ｔ Ｒ区 １ ５ ４ ｂ ｐ ，
Ｃ Ｄ Ｓ区 ９ ６ ９ ｂ ｐ ，共 编码 ３ ２ ２个 氨 基 酸 ，分 子 量 大小 为 ３ ６ ｋ ｕ ，等 电 点 ４ ． ８ ４ ． 含有 Ｌ Ｅ Ａ 一 ２和 Ｗ Ｈ ｙ （ Ｗａ ｔ ｅ ｒ Ｓ ｔ ｒ ｅ ｓ ｓ ａ ｎ ｄ Ｈ ｙ ｐ ｅ ｒ ｓ ｅ ｎ ｓ ｉ ｔ ｉ ｖ ｅ ｒ ｅ ｓ ｐ ｏ ｎ ｓ ｅ ）结 构 域 ．属 于 Ｌ Ｅ Ａ ２类 Ｌ Ｅ Ａ 蛋 白 。 组 织 表 达 分 析 结 果 表 明 ，Ｈｂ Ｌ Ｅ Ａ，在 种 子 中 表 达 量 最 高 ，其 次 是 胶 乳 和 稳 定 叶 ，在 芽 中 的 表 达 量 最 低 。 在 未 开 割 树 的 胶 乳 中 ．机 械 伤 害 和 割 胶 处 理 均 明显 下 调 Ｈ ｂ Ｌ Ｊ表 达 在 橡 胶 树 幼 苗 中 ，低 温 胁 迫 处 理 后 该 基 因 在 叶 片 、树 皮 和根 中 的 表 达 呈 上 升 趋 势 ，而 在 高 温 和 干旱 胁 迫 中其 表 达 变 化 并 不 明显 。结 果 显示 ．Ｈ ｂ Ｌ Ｅ Ａ Ｊ基 因 可 能 参 与 橡 胶 树 的胁 迫 应 答 和胶 乳 代 谢 调 控 关 键 词 巴西 橡 胶 树 ；Ｌ Ｅ Ａ；基 Ｌ 太 Ｊ 克 隆 ；表 达 分 析 ；胁 迫 处 理 中 图分 类 号 ￥ ７ ９ ４ ． １ 文 献标 识 码 Ａ
巴西橡胶树生长素响应HbJAR1基因克隆与表达分析
巴西橡胶树生长素响应HbJAR1基因克隆与表达分析李晓娜;肖厚贞;万三连;张冬;张宇【摘要】JA R1, a auxin response gene, maintains dynamic balance of auxin concentration in plant, strengthens plant tolerance ability stress. To clarify the gene structure and function of JAR1 in rubber tree (Hevea brasiliensis Müll. Arg.), HbJAR1 gene was cloned in the leaves of rubber tree CATAS7-33-97 by RT-PCR. The deduced amino acid of HbJAR1 protein has special GH3 superfamily domain structure, no signal peptide, no transmembrane region, located in the cytoplasm. The gene expression of HbJAR1 in the leaves of rubber tree was significantly affected by light intensity, mechanical wounding and powdery mildew infection. IAA, GA3, ET, JA and ABA treatments also induced HbJAR1 expression at different levels. The results suggested that HbJAR1 is a member of plant JAR1 gene family, involved in stress response such as light and wounding signal in rubber tree, etc.%JAR1基因是植物生长素响应基因,具有维持植物体内生长素浓度动态平衡和增强植物抗逆性的功能.为了阐明巴西橡胶树中JAR1基因的结构与功能,本研究利用Q-PCR技术在橡胶树CATAS7-33-97叶片中扩增了JAR1基因,其推导氨基酸含有JAR1蛋白特征性的GH3 superfamily结构域,无信号肽,无跨膜区域,定位在细胞质中,命名为HbJAR1.表达分析结果表明:该基因在橡胶树叶片中的表达量受光照强度、机械伤害和白粉菌侵染显著上调,吲哚乙酸(IAA)、茉莉酸(JA)、乙烯利(ET)、脱落酸(ABA)和赤霉素(GA3)对HbJAR1在橡胶树中的表达也起到不同程度的上调作用.表明HbJAR1基因属于植物JAR1家族,与橡胶树对光照、伤害等逆境响应有关.【期刊名称】《热带作物学报》【年(卷),期】2017(038)008【总页数】7页(P1478-1484)【关键词】巴西橡胶树;HbJAR1;基因克隆;生物信息学;表达分析【作者】李晓娜;肖厚贞;万三连;张冬;张宇【作者单位】中国热带农业科学院科技信息研究所, 海南海口 571101;海南大学材料与化工学院, 海南海口 570228;三亚市现代农业检验检测预警防控中心, 海南三亚 572000;海南省热带生物资源可持续利用重点实验室海南大学热带农林学院海南海口 570228;海南省热带生物资源可持续利用重点实验室海南大学热带农林学院海南海口 570228【正文语种】中文【中图分类】S794.1doi10.3969/j.issn.1000-2561.2017.08.017JAR1(JASMONATE RESISTANT 1)基因是植物生长素早期响应基因之一，这类基因与植物的生长发育密切相关[1]。
橡胶树乳管表达HbHMGR1基因双元表达载体构建与鉴定
橡胶树乳管表达HbHMGR1基因双元表达载体构建与鉴定贺永国;李哲;黄绵佳;曾宪海;林位夫;刘洁琼;张春红;马晓晓【摘要】[目的]克隆橡胶树乳管特异性强启动子HEV2.1(PHEV2.1),构建天然橡胶生物合成途径关键限速酶基因(HbHMGR1)的乳管特异性植物表达载体,为橡胶树遗传转化奠定基础.[方法]根据已报道的HEV2.1序列(GenBank登录号AY247789.1)设计1对特异引物,采用PCR从橡胶树热研7-33-97基因组DNA中克隆PHEV2.1,与HbHMGR1基因融合构建橡胶树乳管特异性植物表达载体,并以PCR和限制性内切酶酶切进行鉴定.[结果]用特异引物可从热研7-33-97基因组DNA中扩增获得1852bp的PHEV2.1片段,其与AY247789.1启动子序列的同源性为98.6％.将PHEV2.1与HbHMGR1基因融合构建乳管特异性植物表达载体pCAMBIA230 1-PHEV2.1-HbHMGR1,经PCR和限制性内切酶酶切鉴定证明植物表达载体构建成功.[结论]将PHEV2.1和HbHMGR1基因先构建到pCAMBIA3301载体上再克隆至pCAMBIA2301载体上,能有效解决直接克隆至pCAMBIA2301载体上出现PstⅠ突变、阻碍载体构建的难题,成功构建获得乳管特异性植物表达载体pCAMBIA2301-PHEV2.1-HbHMGR.【期刊名称】《南方农业学报》【年(卷),期】2016(047)002【总页数】6页(P163-168)【关键词】橡胶树;乳管特异性启动子PHEV2.1;HbHMGR1基因;植物表达载体;构建;鉴定【作者】贺永国;李哲;黄绵佳;曾宪海;林位夫;刘洁琼;张春红;马晓晓【作者单位】海南大学园艺园林学院,海口570228;中国热带农业科学院橡胶研究所/农业部橡胶树生物学与遗传资源利用重点实验室,海南儋州 571737;海南大学园艺园林学院,海口570228;中国热带农业科学院橡胶研究所/农业部橡胶树生物学与遗传资源利用重点实验室,海南儋州 571737;中国热带农业科学院橡胶研究所/农业部橡胶树生物学与遗传资源利用重点实验室,海南儋州 571737;中国热带农业科学院橡胶研究所/农业部橡胶树生物学与遗传资源利用重点实验室,海南儋州 571737;中国热带农业科学院橡胶研究所/农业部橡胶树生物学与遗传资源利用重点实验室,海南儋州 571737;海南大学农学院,海口 570228【正文语种】中文【中图分类】S794.1【研究意义】转录水平调控是基因表达调控的主要环节，对植物启动子功能进行研究不仅可以揭示相应基因的表达模式，还能为利用植物基因工程技术实现基因的高效特异性表达提供有效途径。
橡胶树HbSiR基因克隆与表达分析
橡胶树HbSiR基因克隆与表达分析魏芳;郑乾坤;罗世巧;仇键;杨文凤;王启超;吴明;校现周【摘要】硫醇是橡胶树胶乳中重要的抗氧化剂,半胱氨酸是硫醇合成的前体,亚硫酸盐还原酶在半胱氨酸合成过程中起重要作用.从橡胶树中克隆编码铁氧还型亚硫酸盐还原酶的cDNA.结果表明:该cDNA全长2417 bp,包含2 070 bp的开放阅读框、183 bp的5'UTR和164 bp的3'UTR,命名为HbSiR(GenBank:KF765492).组织表达分析结果显示:HbSiR在橡胶树的根、叶、木质部、树皮及胶乳均有表达;在‘热研8-79'的胶乳中HbSiR基因的表达量高于‘PR107’胶乳中的表达量,但随着排胶时间的延长,‘热研8-79’和‘PR107’胶乳中HbSiR的表达量均降低.初步推测HbSiR与胶乳硫醇的含量有关.【期刊名称】《热带作物学报》【年(卷),期】2014(035)006【总页数】6页(P1084-1089)【关键词】亚硫酸盐还原酶基因;橡胶树;硫醇【作者】魏芳;郑乾坤;罗世巧;仇键;杨文凤;王启超;吴明;校现周【作者单位】中国热带农业科学院橡胶研究所农业部橡胶树生物学与遗传资源利用重点实验室海南儋州 571737;海南大学农学院,海南海口570228;中国热带农业科学院橡胶研究所农业部橡胶树生物学与遗传资源利用重点实验室海南儋州571737;中国热带农业科学院橡胶研究所农业部橡胶树生物学与遗传资源利用重点实验室海南儋州 571737;中国热带农业科学院橡胶研究所农业部橡胶树生物学与遗传资源利用重点实验室海南儋州 571737;海南大学农学院,海南海口570228;中国热带农业科学院橡胶研究所农业部橡胶树生物学与遗传资源利用重点实验室海南儋州 571737;中国热带农业科学院橡胶研究所农业部橡胶树生物学与遗传资源利用重点实验室海南儋州 571737【正文语种】中文【中图分类】S794.1doi10.3969/j.issn.1000-2561.2014.06.008硫醇是橡胶树乳管亚细胞膜非酶促防御系统的重要抗氧化剂，胶乳中的硫醇包括谷胱甘肽、半胱氨酸、甲硫氨酸等，可抵御由于逆境和衰老所产生的活性氧的毒害，是乳管的保护因子和胶乳的稳定剂之一。
橡胶树类萌发素蛋白基因HbGLP01的克隆及其表达分析
橡胶树类萌发素蛋白基因HbGLP01的克隆及其表达分析陈珊;李博勋;陈奕鹏;刘先宝;黄贵修【期刊名称】《热带作物学报》【年(卷),期】2016(037)004【摘要】类萌发素蛋白(GLPs)是一类重要的胁迫响应蛋白,参与植物的多种生理调控过程.试验前期通过cDNA-AFLP技术,从橡胶树转录组中筛选到一个与麻风树JcGLP(XM_012225699.1)高度同源的差异表达片段.在此基础上,通过基因预测和PCR扩增克隆到一个GLPs类基因HbGLP01.该基因包含2个外显子和1个内含子,cDNA全长696 nt,编码231个氨基酸,预测蛋白分子量和等电点分别为24.8 ku和5.54.同源比对表明,该蛋白与麻风树JcGLP1-13蛋白的同源性最高,达到81％.聚类分析研究表明,该蛋白与JcGLP1-13、胡杨PeGLP1-13及三角叶杨PtGLP等聚为一个分支.qRT-PCR分析发现,多主棒孢病菌侵染能诱导橡胶树HbGLP01基因的上调表达,其中高抗棒孢霉落叶病品种IAN873在侵染后24 h时表达量达到峰值,高感品种PR107在48 h后达到峰值,而且在IAN873中的表达峰值显著高于PR107.【总页数】7页(P715-721)【作者】陈珊;李博勋;陈奕鹏;刘先宝;黄贵修【作者单位】海南大学农学院,海南海口 570228;中国热带农业科学院环境与植物保护研究所农业部热带作物有害生物综合治理重点实验室海南省热带农业有害生物监测与控制重点实验室海南海口 571101;中国热带农业科学院环境与植物保护研究所农业部热带作物有害生物综合治理重点实验室海南省热带农业有害生物监测与控制重点实验室海南海口 571101;中国热带农业科学院环境与植物保护研究所农业部热带作物有害生物综合治理重点实验室海南省热带农业有害生物监测与控制重点实验室海南海口 571101;中国热带农业科学院环境与植物保护研究所农业部热带作物有害生物综合治理重点实验室海南省热带农业有害生物监测与控制重点实验室海南海口 571101;中国热带农业科学院环境与植物保护研究所农业部热带作物有害生物综合治理重点实验室海南省热带农业有害生物监测与控制重点实验室海南海口 571101【正文语种】中文【中图分类】S794.1【相关文献】1.东亚砂藓类萌发素蛋白基因RjGLP的克隆及表达分析 [J], 张梅娟;沙伟;刘博;徐红红2.巴西橡胶树钙调蛋白基因的克隆和表达分析 [J], 肖小虎;隋金蕾;戚继艳;阳江华;秦云霞;唐朝荣3.巴西橡胶树镁离子转运蛋白基因HbMGT10的克隆及表达分析 [J], 阳江华;秦云霞;方永军;唐朝荣4.巴西橡胶树类甜味蛋白基因HbTLP1的克隆及表达分析 [J], 闫志烨;秦云霞;罗红丽5.亚麻类萌发素蛋白基因LuGLP1-13的克隆及表达分析 [J], 于莹;袁红梅;程莉莉;赵东升;陈晶;吴建忠;张树权;吴广文因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
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Ｇｅ ｎ ｅ ｆ ｒ ｏ ｍ Ｈｅ ｖ ｅ ａ ｂ ｒ ａ ｓ ｉ ｌ ｉ ｅ ｎ ｓ ｉ ｓ（ Ｐ ａ ｒ ａ Ｒ ｕ ｂ ｂ ｅ ｒ Ｔ ｒ ｅ ｅ ）
Ｔ Ａ Ｎ Ｇ Ｃ ｈ ａ ｏ ｒ ｏ ｎ ｇ ，Ｑ ｉ Ｊ ｉ ｙ ａ ｎ ， Ｆ Ａ Ｎ Ｇ Ｙ ｏ ｎ ｇ ｊ ｕ ｎ ， Ｌ Ｏ Ｎ Ｇ Ｘ ｉ ａ ｎ ｇ ｙ ｕ
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唐 朝 荣 ，戚 继 艳 ，方 永 军 ，龙翔 宇
中国热 带农 业科 学 院橡 胶研 究所 ．海 南儋 州 ５ ７ １ ７ ３ ７
摘 要 利用橡胶树胶乳 Ｅ Ｓ Ｔ文 库 克 隆 到一 个 Ｔ Ｕ Ａ基 因 ，命 名 为 Ｈｂ Ｔ Ｕ Ａ （ Ｇ ｅ ｎ Ｂ ａ ｎ ｋ登 录 号 ：Ｋ Ｃ ３ ３ ３ ４ ５ ４ ） 。该 基
Байду номын сангаас
因ｅ Ｄ Ｎ Ａ全 长 １ ５ ８ ０ ｂ ｐ ，其 中 ５ Ｕ Ｔ Ｒ长 ４ ５ ｂ ｐ ，３ Ｕ Ｔ Ｒ长 １ ６ ７ ｂ ｐ ，编码 区长 １ ３ ６ ８ ｂ ｐ ，编 码 ４ ４ ９个 氨 基 酸 。 Ｈ ｂ Ｔ Ｕ Ａ １蛋 白具 有 Ｔ Ｕ Ａ类 蛋 白保 守 的 Ｇ Ｔ Ｐ结 合 域 荧光 定 量 Ｐ Ｃ Ｒ分 析 显 示 ．日 ６ Ｔ Ｕ Ａ Ｊ 基 因在 橡 胶 树 胶 乳 中 的表 达 量 最 高 ，其 次 是 树 皮 和 芽 ，而 在 种 子 和 叶 片 中 的 表 达 量 最 低 ；在 胶 乳 中 ．Ｈｂ Ｔ Ｕ Ａ ｊ基 因 的 表达 显 著 受 割 胶 和 伤 害 诱 导 ，在 不 同死 皮 程 度 的橡 胶 树 中也 存 在 明显 差 异 初 步表 明 Ｈｂ Ｔ Ｕ Ａ 基 因可 能 参 与 橡 胶 树 胶 乳 再 生 与胁
Ｒ ｕ ｂ ｂ ｅ ｒ Ｒ ｅ ｓ ｅ ａ ｒ ｃ ｈ Ｉ ｎ ｓ ｔ ｉ ｔ ｕ ｔ ｅ ， Ｃ ｈ ｉ ｎ ｅ ｓ ｅ Ａ ｃ ａ ｄ ｅ ｍ ｙ ｏ ｆ Ｔ ｒ ｏ ｐ ｉ ｃ ａ ｌ Ａ ｇ ｒ ｉ ｃ ｕ ｌ ｔ ｕ ｒ ａ ｌ Ｓ ｃ ｉ ｅ ｎ ｃ ｅ ｓ ， Ｄ ａ ｎ ｚ ｈ ｏ ｕ ， Ｈ ａ ｉ ｎ ａ ｎ ５ ７ 】 ７ ３ ７ ， Ｃ ｈ ｉ ｎ ａ
迫 应 答 调 控 关 键 词 橡 胶 树 ：０ 【 一 维 管 蛋 白 ：基 因 克 隆 ：表 达 分 析
中图 分 类 号 ￥ ７ ９ ４ ． １ 文 献标 识码 Ａ
Ｃｌ ｏ ｎ ｉ ｎ ｇ ａ ｎ ｄ Ｅｘ ｐ ｒ ｅ ｓ ｓ ｉ ｏ ｎ ａ ｌ Ａｎ ａ ｌ ｙ ｓ ｉ ｓ ｏ ｆ Ｈｂ ＴＵ Ａ１ ，ａ ｎ ａ－ ｔ ｕ ｂ ｕ ｌ ｉ ｎ
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热 带 作物 学 报 ２ ０ １ ３ ，３ ４ （ １ １ ） ：２ １ ５ ８ — ２ １ ６ ３
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橡胶树 ０ 【 一 维管蛋 白基 因 Ｈｂ Ｔ Ｕ Ａ １的 克隆及表达分析