过敏原的提取
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一、尘螨提取步骤
1、将研钵用液氮预冷,称取一定量的尘螨放入其中,用液氮研磨约5-10次。
2、加入一定量的PBS提取液。
3、将粗提液与螨体一并倒入小烧杯中,用匀浆机匀浆5-10次,每次5min。
4、匀浆完后放在冰上摇约2h。
5、离心取上清,上清液即为尘螨粗提液。
(沉淀可再加适量提取液重新提取一次)
二、花粉提取
1、将研钵用液氮预冷,称取一定量的花粉放入其中,用液氮研磨约5-10次。
2、加入丙酮,置4°冰箱自然沉降,待花粉沉淀下来,可多次置换丙酮,直至颜色变透明。
3、将多余丙酮倒掉,冷冻干燥或者通风厨风干。
4、风干后,加入一定量的PBS提取液。
5、将加入提取液的花粉用匀浆机匀浆5-10次,每次5min。
6、匀浆完后放冰箱2-8h。
7、离心取上清,上清液即为花粉粗提液。
(沉淀可再加适量提取液重新提取一次)
三、食物过敏原的提取
1、将研钵用液氮预冷,称取一定量的食物放入其中,用液氮研磨约5-10次。
2、加入丙酮,置4°冰箱自然沉降,待花粉沉淀下来,可多次置换丙酮,直至
颜色变透明。
3、将多余丙酮倒掉,冷冻干燥或者通风厨风干。
4、风干后,加入一定量的PBS提取液。
5、将加入提取液的食物用匀浆机匀浆5-10次,每次5min。
6、匀浆完后放冰箱2-8h。
7、离心取上清,上清液即为食物粗提液。
(沉淀可再加适量提取液重新提取一
次)。