双参田七散对大鼠动脉粥样硬化的影响

双参田七散对大鼠动脉粥样硬化的影响
傅智丽;冯崇廉
【摘要】Objective To observe the effect of Shuangshen Tianqi pulvis (SSTQ) on the rat model of atherosclerosis. Methods The animal model of atherosclerosis was established by feeding high-fat diet and vitamin D3. Male SD rats were randomly assigned into normal group, model group, SSTQ-treated group and simvastatin-treated group. The serum levels of total cholesterol ( TC), low density lipoprotein cholesterol ( LDLC), high density lipoprotein cholesterol ( HDL-C ), triglyceride ( TG), malonaldehyde ( MDA ) and superoxide dismutase (SOD) were measured after 12 weeks. Meantime, the ultrastructure of aortic arch was observed under the electron microscope. Results Compared to the model group, serum levels of TC,TG, LDL-C and M DA were significantly decreased ( P ＜ 0.01 or P ＜0.05 ), and serum SOD level was remarkably increased ( P ＜ 0.01 ) in SSTQ-treated group. The pathological damage of aortic arch was also markedly ameliorated in SSTQ-treated group. Conclusion The protective effect of SSTQ on the rat model of atherosclerosis is related to regulating the lipid metabolism, suppressing oxygen free radical damage, and preventing aortic intimal injury.%目的观察双参田七散(SSTQ)对大鼠动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)的防治作用.方法应用高脂饲料联合维生素D3建立动脉粥样硬化模型,将52只SD大鼠随机分成空白组、模型组、双参田七散组及辛托伐他汀组,第12周检测大鼠血清总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白(LDL-C)、高密度脂蛋白(HDL-C)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)的水平,并用电镜观
察主动脉弓的超微结构.结果双参田七散组血清TC、TG、LDL-C、MDA较模型组显著降低(P<0.01,P<0.05);双参田七散组血清SOD较模型组显著升高(P<0.01);双参田七散组主动脉病变程度与模型组比较明显减轻.结论双参田七散对AS有防治作用,可能机理是通过改善脂质代谢、抗自由基氧化损伤而防止主动脉内膜损伤.【期刊名称】《广东药学院学报》
【年(卷),期】2011(027)003
【总页数】4页(P292-295)
【关键词】双参田七散;动脉粥样硬化;血脂;超氧化物歧化酶;大鼠
【作者】傅智丽;冯崇廉
【作者单位】广州医学院第三附属医院,广东广州510150;广州医学院第三附属医院,广东广州510150
【正文语种】中文
【中图分类】R285.5
动脉粥样硬化(atherosclerosis，AS)是导致心脑血管疾病的主要原因。

近年来，随着生活模式的改变，我国AS的发病率呈上升趋势，防治AS相关疾病成为医学界面临的严峻挑战。

AS的病因复杂，遗传因素、年龄、吸烟、高脂血症、高血压病、糖尿病和肥胖等都是动脉粥样硬化的危险因素，其中血脂在AS的形成和发展中扮演着重要的角色[1-2]，是导致动脉粥样硬化和心脑血管各种疾病的“罪魁祸首”。

本研究通过动物实验观察双参田七散对动脉粥样硬化大鼠的血脂、丙二醛(MDA)超氧歧化物酶(SOD)、血管超微结构的影响，为临床应用双参田七散防治心
脑血管疾病提供实验依据。

1 材料
1.1 实验动物
SPF级SD大鼠，体质量180～220 g，雄性，广州中医药大学实验动物中心提供，生产许可证号： SCXK(粤)2008-0001。

1.2 药物及试剂
双参田七散由西洋参、丹参、田七三味中药等组成(三味中药的质量比=1∶1∶1,由广州医学院第三附属医院中药房提供)；辛托伐他汀片(杭州默沙东制药有限公司，批号：09403)；维生素D3注射液(上海通用药业股份有限公司，批号：080603)；SOD试剂盒(南京建成科技有限公司)；硫代巴比妥酸(青岛海泰生物技术有限公司)；四甲氧基丙烷(常州市隆兴化工有限公司)；牛血清白蛋白(广州威佳科技有限公司)。

1.3 仪器
7060型日立全自动生化分析仪(日立株式会社)；UV-754型紫外可见分光光度计(上海第三分析仪器厂)；OLYMPUS系统生物显微镜(日本奥林巴斯株式会社)；
XL-30ESEU型环境扫描电子显微镜(荷兰菲利普光学有限公司)。

2 方法
2.1 动物分组与模型制备
取SPF级SD大鼠52只，在实验条件下给普通饲料适应性喂养1周后，将实验动物随机分为4组：空白组10只、模型组14只、双参田七散组14只 (1 g/kg)、辛托伐他汀组14只(4 mg/kg)，除空白组外均一次性腹腔注射维生素D3注射液(60万IU/kg)，并饲喂高脂饲料(配方：3%胆固醇+0.5%胆酸钠+0.2%丙基硫氧嘧啶+5%白糖+10%猪油+81.3%基础饲料)，空白组注射同等体积的生理盐水，饲喂普通饲料，各药物组在高脂饲料的基础上按5 mL/kg灌胃给予相应药物，空白组
和模型组给予同体积的生理盐水,每天 1次,连续给药 12 周。

实验期间每周称体质
量,根据体质量变化调整给药量。

喂养期间,辛伐他丁组死亡 1只,模型组死亡 3只。

于第12周末禁食12 h,眼眶静脉采血2 mL，水合氯醛麻醉处死，分离血清,-20 ℃下保存备用，迅速分离主动脉弓至髂总动脉分叉处的整条主动脉以制作透射电镜标本。

2.2 检测指标
实验第12周末，各组动物眼眶静脉采血2 mL，用酶比色法检测总胆固醇(TC)、
三酰甘油(TG)；沉淀法检测低密度脂蛋白(LDL-C)、高密度脂蛋白(HDL-C)；黄嘌
呤氧化酶法测定超氧化物歧化酶；TBA法测定丙二醛。

2.3 主动脉形态学检查
采血完毕后，各组动物水合氯醛麻醉处死，迅速分离主动脉弓至髂总动脉分叉处的整条主动脉,去除血管外的脂肪和结缔组织,采用主动脉弓，冷冻生理盐水洗主动脉
血管壁的血迹，切取3 mm×5 mm动脉环制作透射电镜标本，用透射电镜观察。

2.4 统计学处理
采用SPSS13.0软件，各实验数据以均数±标准差(±s)表示，组间比较采用单因素
方差分析(ANOVA)，方差齐者采用LSD法，方差不齐者采用Dunnet′s T3检验，P<0.05为差异有统计学意义。

3 结果
3.1 对血脂水平的影响
连续给予高脂饲料12周后，模型组血脂代谢出现异常，血清TC、TG和LDL-C
显著升高，与空白组比较，差异有统计学意义(P<0.01)；双参田七散组血清TC、TG、LDL-C较模型组显著降低,HDL-C升高(P<0.01)。

见表1。

3.2 对血清MDA、SOD水平的影响
模型组大鼠血清MDA上升，SOD下降，与空白组比较，差异有统计学意义
(P<0.01)；双参田七散组大鼠血清MDA下降，SOD升高,与模型组比较，差异有
统计学意义(P<0.01)。

见表2。

3.3 对大鼠主动脉形态学的影响
透射电镜结果显示，空白组：主动脉弓内膜内皮细胞形态正常，排列整齐，表面平滑完整，细胞间连接紧密，内皮下间隙较小，无细胞肿胀和破损，无脂滴沉积(图1A)。

模型组：主动脉弓内膜不光滑，不连接，病变部位内皮细胞排列不规则，肿胀，体积增大，内皮细胞连接明显扩大，内见多个空泡，有斑块突起和大量的巨噬细胞黏附病变部位，内皮细胞破损，且有泡沫细胞形成(图1B)。

双参田七散组：主动脉弓内膜内皮细胞形态基本完整，部分凸显腔面，内皮细胞连接紧密，出现内皮细胞愈合，有斑块逐渐消失，较模型组、辛伐他丁组显著改善(图1C)。

辛伐他丁组：主动脉弓内膜内壁不光滑，内皮细胞排列不规则，有斑块形成，附着巨噬细胞，有纤维斑块形成(图1D)。

表1 双参田七散对血清TC、TG、HDL-C和LDL-C水平的影响Table 1 The effect of SSTQ on the serum levels of TC,TG,HDL-C and LDL-C(±s)
c/(mmol·L-1)组别n剂量/(g·kg-1)TCTGHDL-CLDL-C空白组10 -
2.08±0.820.57±0.16 0.76±0.110.35±0.11模型组11-
11.41±2.59△△1.31±0.60△△0.67±0.21△△10.32±2.68△△双参田七散组14
1.03.25±0.79∗∗△0.80±0.59∗∗△1.21±0.09∗∗△△1.22±0.13∗∗△辛托伐他汀组134.0
2.23±0.50∗∗0.77±0.06∗∗0.92±0.14∗∗0.97±0.23∗∗与模型组比
较:**P<0.01；与空白组比较:△P<0.05，△△P<0.01。

表2 双参田七散对血清MDA和SOD水平的影响Table 2 The effect of SSTQ on the serum levels of MDA and SOD(±s)组别n剂量/(g·kg-
1)c(MDA)/(mmol·L-1)SOD/(U·mL-1)空白组10-4.14±1.05162.38±2.15模型组11-12.23±8.47△△141.72±23.81△△双参田七散组
141.02.83±1.70∗∗168.48±3.54∗∗辛托伐他汀组
134.04.04±1.03∗∗164.24±4.77∗∗与模型组比较:**P<0.01；与空白组比
较:△△P<0.01。

A.空白组;
B.模型组;
C.双参田七散组;
D.辛代他丁组图1 各组透射电镜结果(1
000×)Figure 1 SSTQ improves the pathological damage of aortic arch(1
000×)
4 讨论
血清TC、TG、LDL的升高被视为AS的危险因素[3]。

AS的主要病变特征是动脉
某些部位的内膜下脂质沉积，并伴有平滑肌细胞及纤维成分的增生，逐渐发展形成局部的斑块,动脉壁也因而增厚变硬，斑块组织内部坏死崩解与沉积的脂质结合，
形成粥样物质的病理改变。

胆固醇和胆固醇酯是构成粥样斑块的主要成分。

当体内胆固醇过高，胆固醇及其酯质则沉积在动脉内皮的巨噬细胞中，引起内皮下变形，进而导致血小板在动脉内壁聚集，若同时伴有动脉壁损伤或胆固醇转运障碍，则易在动脉内膜形成脂斑，最后，血管壁隆起、向管腔内突起形成粥样斑块。

祖国医学认为，AS属本虚标实。

血淤、痰浊等病理产物聚积为病机之关键。

补益肝肾、健脾益气、滋阴养血、活血化淤、祛痰降浊等为其主要治法[4]。

双参田七
散是冯崇廉主任医师多年在大量的临床实践基础上，根据AS患者大多有气虚血淤的病理特点，筛选出具有益气养阴、活血化淤,功效的药方，是治疗AS疾病的有
效方剂，且在临床应用中未发现明显的不良反应。

该方由西洋参、丹参、田七三味中药等量组成，益气活血并用，补中有通，通中有补，活血而不伤正。

补气之药应首推人参，而人参性偏温，虽有大补元气功，长期服用易致机体燥热，故选用性凉功能益气生津之西洋参；丹参性凉，功能活血兼能养血，古人有“一味丹参赛四物”之美誉；田七性微温，具有活血止血双重功效，老年患者使用既能活血又不必担心继发出血，是难得的中药双向调节佳品；全方寒温并用，相互制衡，药性平和，适合中老年AS患者长期服用。

现代药理学研究表明,西洋参提取物PQFs能改善实验
性心肌缺血犬的冠状动脉血流，减低心肌耗氧量，缩小心梗范围，降低谷草转氨酶(AST)、肌酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH-L)的活性，降低MDA含量，增加SOD
活性[5]；丹参具有抗凝、调血脂[6] 、改善微循环、抗动脉粥样硬化[7]等作用；
田七能显著降低家兔AS模型TG、TC、LDL-C的水平[8-9],并有减少心肌耗氧量，增强心肌耐缺氧能力[7]等作用。

本研究结果表明,双参田七散可以调节脂质代谢，降低血清中TG、TC、LDL-C、MDA含量，增加SOD活性，升高HDL-C含量，抑制脂质过氧化损伤，抑制主动脉斑块形成，改善主动脉病变情况，提示双参田七散具有抗AS的作用。

今后将从抗炎、影响内皮功能等方面进一步研究双参田七散抗AS的作用机制,为其进一步
开发利用提供实验依据。

参考文献:
【相关文献】
[1] NILSSON J，WIGREN M，SHAH P K. Regulatory T cells and the control of modified lipoprotein autoimmunity- driven atherosclerosis[J]. Trends Cardiovasc Med，2009，
19(8):272.
[2] SCHFERS M，SCHOBER O， HERMANN S. Matrix-metalloproteinases as imaging targets for inflammatory activity in atherosclerotic plaques[J]. J Nucl Med，2010，
51(5):663.
[3] 李世英,刘斌，刘昊.急性脑梗死患者颈动脉粥样硬化斑块与相关危险因素关系的研究[J].陕西医
学杂志,2007,36(8): 9772-9801.
[4] 薛文隽,吴国忠.中药抗动脉粥样硬化的药理学研究进展[J].上海中医药杂志,2003,7(37):582-601.
[5] 卢爱萍,刘金平,卢丹,等. 西洋参果总皂苷对冠状动脉结扎犬血流动力学及心肌缺血的影响[J].吉林大学学报，2006，32(3)：383-386.
[6] 庞家秉.银杏达莫丹参注射液联用治疗脑梗塞76例[J].药物与临床，2008，5(1):132.
[7] 张喜平，齐丽丽，刘达人.三七及其有效成分的药理作用研究现状[J].医学研究杂志，2007，
36(4):97.
[8] 何雪峰,李晓辉,李淑惠,等.三七总皂苷对家兔实验性动脉粥样硬化的预防作用[J].中国药
房,2007,18(6):408-409.
[9] 李韬，曲德英，雷菠，等.三七粉对家兔实验性动脉粥样硬化的影响[J].中医研究,2006,19(1):17-19.。