溶血性链球菌讲义

生物学性状
1. 形态结构 2. 培养特性 3. 分类 4. 生化反应 5. 抵抗力
形态与染色
❖ 球形或卵圆形, 直径0.5～ 1 μm, 链状排列, 链 长短不一, 短者4～8个细胞组成, 长者20～30 个
❖ 无芽胞, 无鞭毛, 培养早期（2~4h）形成透明 质酸的荚膜
培养特性
❖ 需氧或兼性厌氧 ❖ 营养要求较高, 需补充血液、血清、葡萄糖等 ❖ 在血清肉汤中易形成长链, 管底呈絮状沉淀 ❖ 在血琼脂平板上, 不同菌株溶血不一 ❖ 最适生长温度为37℃, 最适pH为7.4-7.6
抵抗力
❖ 该菌抵抗力一般不强, 60℃30min即被杀死 ❖ 对常用消毒剂敏感 ❖ 在干燥尘埃中生存数月 ❖ 乙型链球菌很少有耐药性
微生物学检查
溶血性链球菌检测流程（GB/T4789.11）
25g(ml)样品+225ml无菌生理盐水
葡萄糖肉浸液肉汤 或匹克氏肉汤
36+1 ℃ 24h
血平板 36+1℃ 24h
链激酶试验
---方法
吸取草酸钾血浆0.2mL, 加0.8mL灭菌生理盐 水, 混匀, 加入链球菌18-24h36℃肉浸液肉汤 培养物0.5mL及0.25%氯化钙0.25mL , 混匀, 置于36℃水浴10min,血浆混合物自行凝固, 观 察凝块重新完全溶解的时间, 完全溶解为阳性, 如24h后不溶解即为阴性。同时用肉浸液肉汤 做阴性对照, 用已知的链激酶阳性的菌株做阳 性对照。
杆菌肽敏感试验
❖ 取乙型溶血性菌落的浓菌液涂布于血平板上, 用灭菌镊子夹取每片含有0.04单位的杆菌肽 纸片置于上述平板上, 36℃培养18-24h, 如有 抑菌圈出现即为阳性。用已知的阳性菌株做 对照
结果报告
在 25g(ml）样品中检出或未检出溶血性 链球菌
谢谢
培养特性 ---血平板
血平板上菌落为灰白色, 半透明或不透明, 表 面光滑, 有乳光, 直径约0.5～0.75 mm, 为圆 形突起的细小菌落, 乙型溶血链球菌周围有 2～4 mm界限分明、无色透明的溶血圈
生化反应
❖ 分解葡萄糖, 产酸不产气。对乳糖、甘露醇、 水杨苷、山梨醇、棉子糖、蕈糖、七叶苷的 分解能力因不同菌株而异
❖ 一般不分解菊糖, 不被胆汁溶解 ❖ 触酶阴性(与葡萄球菌相区别)
毒素及侵袭性酶
❖ 链球菌溶血素 ❖ 致热外毒素: 曾称红疹毒素或猩红热毒素 ❖ 透明质酸酶: 又称扩散因子，溶解细胞间质 ❖ 链激酶: 又称链球菌纤维蛋白溶酶 ，能使血液中纤维蛋白酶
原变成纤维蛋白酶，具有增强细菌在组织中的扩散作用，该 酶耐热，100℃50分钟仍可保持活性。 ❖ 链道酶: 又称链球菌DNA酶 ❖ 杀白细胞素: 能使白细胞失去动力
溶血性链球菌检验
分布
❖ 溶血性链球菌在自然界中分布较广, 存在于水、 空气、尘埃、粪便及健康人和动物的口腔、 鼻腔、咽喉中, 可通过直接接触、空气飞沫传 播或通过皮肤、粘膜伤口感染, 被污染的食品 如奶、肉、蛋及其制品也会对人类进行感染。 上呼吸道感染患者、人畜化脓性感染部位常 成为食品污染的污染源。引起化脓性感染、 中毒性感染、超敏反应性疾病
血平板(分纯培养)
36+1 ℃ 24h
链激酶试验
杆菌肽敏感试验
观察溶血 革兰氏染色
报告
鉴定步骤
❖ 溶血及菌落形态的观察 ❖ 革兰氏染色 ❖ 链激酶试验 ❖ 杆菌肽敏感试验
链激酶试验 ---原理
致病性乙型溶血性链球菌能产生链激酶(即 酶, 而后溶 解纤维蛋白