中药质量控制方法

中药质量控制方法
一、中药指纹图谱技术：1、色谱指纹图谱：它包括薄层色谱(TLC)、气相色谱(GC)、高效液相色谱(HPLC)和高效毛细管电泳色谱(HPCE)等指纹图谱。

目前，色谱指纹图谱在中药研究领域中应用广泛。

例如，吕美红等采用 GC 技术建立了苍术的指纹图谱，在 14批样品
测定的基础上，初步总结出不同产地苍术指纹图谱的共性，为苍术质量控制标准的建立提供了参考依据。

张胜娜等采用水蒸气蒸馏法提取鲜肿节风挥发油，首次采用 GC技术建立鲜肿节风挥发油的共
有指纹图谱。

随着科学技术的迅速发展，HPCE 指纹图谱日益广泛地应用于中药化学成分的分离、鉴别和含量测定。

李峰等建立土鳖虫药材的高效毛细管电泳指纹图谱鉴别方法，通过中药色谱指纹图谱相似度评价系统，确定 6 个共有峰构成土鳖虫药材指纹图谱的特征峰，为药材品种鉴定与质量控制提供了依据。

，色谱技术已成为获取中药指纹图谱的主要手段之一。

米莉莉等对不同虫草样品建立荧光淬灭薄层色谱指纹图谱，得到的荧光淬灭薄层色谱指纹图谱，能为人工虫草和天然虫草提供直接的指纹鉴别，方法快速简便、重现性好。

Rana Ajay等使用 C12反相色谱柱，采用一种快速、简便、灵敏的 H PLC-DAD法对茶黄素进行了分析与含量测定。

Aviv Am irav 等采用一种新型的气相色谱 - 质谱联用技术半在线地监控反应的最佳化回收率、阐明其反应机理，并且获得反应产物特性及纯度。

Gu M ing等采用高速逆流色谱法（H SCCC）分析丹参药材中 12 种成
分并获取指纹图谱，根据其相对保留时间、相对峰面积、相对保留
时间的相对标准偏差值、相对峰面积的相对标准偏差值、差异率及特征指纹图谱建立数字化色谱，结果表明高速逆流色谱 - 数字化指纹图谱（H SCCC-DCFS）是一种能够定量、直观的获取丹参药材指纹图谱的方法。

2、光谱指纹图谱：光谱指纹图谱包括紫外、红外、荧光光谱等。

根据不同中药材所含成分不同，相对应的光谱性质也会有所差别。

红外光谱(IR)指纹图谱是对整个化合物分子的鉴别，中药中若各种化学成分的质和量相对稳定，且样品处理方法按要求进行，则其 IR 也应相对稳定。

郑春松等采用衰减全反射－傅里叶变换红外光谱(FTIR)法，建立川芎、白芍及药对川芎、白芍挥发油的红外线(IR)，该方法能直接快速、准确地测定样品的 FTIR 图谱，直观揭示二者配伍后的化学特征。

3、核磁共振氢谱：核磁共振氢谱(1H － NMR)对有机化合物所提供的结构信息具有高度的特征性，通过化学成分分离纯化后各化合物的结构鉴定和核磁共振氢谱谱图研究，可实现植物类中药1H －NMR 指纹图谱的解析。

莫善烈等应用这一技术，对吴茱萸和其伪品花椒、蚕砂进行鉴别，结果显示三者间 1H －NMR 指纹图谱的区别较大。

4、 X 射线衍射法：X 射线衍射法的原理是当某一物质受到 X 射线照射会产生不同程度的衍射现象。

该物质产生特有的衍射图谱反映了物质的组成、晶型、分子内成键方式及分子的构型等特征。

王丽娟等用粉末 X 射线衍射技术建立了麋鹿角 X 射线衍射 Fourier指
纹图谱分析方法，并与鹿角进行指纹图谱比较分析，为麋鹿角的开
发利用、药材品质评价提供了依据与方法。

W ang S 等采用粉末 X 射线衍射傅里叶指纹图谱模式获得五批当归药材的特征性衍射峰，
以此对当归药材进行鉴定。

5、分子生物学法：理论基础是基因的多态性，而基因多态性可在分子水平上进行检测，检测方法包括电泳技术、免疫技术和 DNA 分子遗传标志技术。

DNA 指纹图谱：随着分子生物学的发展已有文献报
道用 DNA 指纹图谱作为药材鉴定方法，李晓波等的研究预示 DNA
指纹技术逐渐成为中药鉴定的一种新方法。

近年来随机扩增多态DNA(RAPD)标记得到广泛应用，可在特异 DNA 序列不是很清楚的情
况下检测 DNA 的多态性，有效地用于中药材的分类和鉴别。

徐红等采用 RAPD 分子标记对秦艽的基因组DNA 进行 PCR 扩增，利用NTSYSpc2． 1 和 Popgene3． 2 软件分析 3 种秦艽间的亲缘关系
建立树系图。

从中筛选获得了区分 3 种秦艽的多态性 RAPD 指纹图谱，有效地将秦艽的 3种基源植物区分鉴别。

二、化学计量学方法：1、主成分分析法（principal com ponent analysis，PCA）：PCA 是对多变量数据进行统计处理的一种线性投影判别方法，是在不明显减少有用信息的前提下，将高维
空间压缩到低维空间，通过对原特征（经标准化后的）变量进行线
性组合，形成若干个新的特征矢量，要求它们之间相互正交，并能
最大限度地保留原样本集所含的原始信息，这些矢量即称为主成分。

张兴辉等应用主成分分析法（PCA）对来源于全国不同产地的女贞子
进行了化学模式识别研究，结果显示不同产地的女贞子化学成分的差异较大，炮制后也对成分有较大影响，表明 PCA 分析法化学模式识别研究可用于女贞子的质量评价。

2、聚类分析法：聚类分析的目标是在模式空间中找到客观存在的类别，“物以类聚”是聚类分析的基本出发点。

该法不但用于中药品种的鉴别，还用于中药真伪的鉴别、成分分析、质量优劣的评价、新旧工艺的比较等方面。

戴荣华等采用高效液相色谱法对中药牛膝进行了分析测定，将所获得的化学数据用于化学模式识别研究，用系统聚类分析对牛膝的真伪和质量优劣进行判别，再根据判别结果采用逐步判别分析进行回判，正确率达100％，表明聚类分析法能够运用于中药的质量优劣划分。

3、判别分析法：判别分析是类别明确的一种分类技术，其根据观测到的某些指标对所研究的对象进行分类。

在中药质量控制实验中，判别分析是指在已知研究对象分成若干类型并取得各种类型的一批已知样品的观测数据，在此基础上建立判别式，然后对未知类型的样品进行判别分类。

王艳华等用系统聚类分析将半夏样品分为生品和炮制品两类，用逐步判别分析对样品的鉴定和质量分级结果进行回判，正确率达 100% 。

初步建立了只通过H PLC 分析即可对半夏进行质量评价的模型。

4、人工神经网络（artificial neural network，ANN）：ANN 又称神经网络，起源于本世纪40 年代，是由大量的、同时也是简单的处理单元广泛连接构成的复杂网络系统，反映了人脑的基本功能，
是对人脑所作的某种简化、抽象和模拟。

张亮等运用人工神经网络和非线性映射技术对戊己丸进行了省缺药材的定性识别研究，实验数据为药材浸出物的红外光谱，结果表明人工神经网络能对多种情况进行识别，正确识别率为 85% ，明显优于非线性映射技术。

5、模糊数学与灰色系统理论：模糊数学主要是为解决自然界及人类思维中普遍存在的模糊性现象而提出和建立的。

而模糊技术则是在模糊数学理论基础上发展起来的一种高新技术即是模糊数学与计算机、信息、自动控制技术相结合的产物。

苏薇薇等采用模糊数学方法处理黄芩的微量元素数据，对10 个不同产地的黄芩样品进行了分类，获得满意结果。

三、一测多评法：利用中药有效成分内在的函数关系，比例关系，测定一个成分含量，从而实现多个成分的含量同步测；近年，“一测多评”法已在某些中药材多指标性成分含量测定中得到应用。

2010 版中国药典一部中，已经收录利用该法测定黄连中小檗碱、巴马汀、黄连碱、表小檗碱、药根碱等成分的含量。

李发美等以淫羊藿药材为研究对象，药材中 4 种主要成分为指标成分，分别建立淫羊藿苷与朝藿定 A、B、C 的相对校正因子，计算朝藿定 A、B、C 的含量(计算值)，实现一测多评;同时采用外标法测定药材中该 4 个指标成分的含量(实测值)，并比较计算值与实测值的差异，结果显示一测多评法和外标法所得的含量结果无显著性差异。

陈君等以芒柄花素为内参物，建立芒柄花素与毛蕊异黄酮苷、芒柄花苷和毛蕊异黄酮的相对校正因子，并用该校正因子进行毛蕊异黄酮苷、芒柄花苷、
毛蕊异黄酮和芒柄花素的含量计算，实现一测多评，结果表明利用相对校正因子实现对这 4 种异黄酮含量测定进行质量评价是准确可行的。

冯伟红等以中药秦皮为研究对象，建立秦皮甲素与秦皮乙素、秦皮苷和秦皮素对吴茱萸内酯、吴茱萸碱的含量进行测定，一测多评的质量评价模式在中药秦皮的多指标质量评价中得到验证。

四、有效成分与药效结合：利用现代药物分析技术、生物活性测定、细胞膜生物色谱法等；近年来分子生物学技术的快速发展，为药用植物的品质评价和质量标准的制定提供了新的方法和手段，其中生物活性筛选/化学在线分析技术在国内外取得了瞩目的进展，吴茜等介绍了生物色谱法、脂质体平衡透析/液相色谱－质谱联用方法、细胞固相萃取/液相色谱－质谱联用法和微透析生物取样/液相色谱－质谱联用法的原理及其在中药活性成分筛选和药效物质基础研究中的应用。

同时，肖贵南等提出通过生物活性测定法与现代药物分析技术结合，使现有质量标准的评价更全面更合理，并相信此方法能在质量控制及中药现代化研究中发挥应有的作用。

在上述研究基础上，一些学者又研究出了细胞膜生物色谱法并已用于药用植物和中药物质基础的研究，筛选和发现天然药物中的有效部位和有效成分，从而对中药作用机理和新药研究筛选提供了参考。

五、生物效价检测方法：:现今，利用生物效价来检验药物的方法通常有生物实验法及同位素示踪法，通过利用该检测方法来对中药的病毒性及活性等要素进行测验。

经过具体实践得知：这种检测方法虽然能够弥补传统质量评价方法的不足，但同时也存在着一定的缺
陷，它一般来说有具体的指向性，不能完全适用于任何药种，也有一定的实验前提，操作过程相对而言比较复杂，且不能满足复杂混合药剂的检测。

另外一种以研究生物体内部能量及热量转移的变化来对药物质量进行评价的方法能够作为有效的生物效价方法。

评价中药药物的有效性及安全性实际上是对药物在具体生物体的新陈代谢过程中的作用进行评价。

生物体内的药物作用在一定程度上会引起该生物体内的能量变化，因此，通过此种方法能够有效评价药物质量，进而对其实施控制。