乙型肝炎患者血清内LTD4含量的检测及其意义

乙型肝炎患者血清内LT D4含量的检测及其意义
张继舜,吴龙仁,崔鹤松,朴红心,韩学吉,尹明实,孟繁平
(延边大学附属医院感染症科,吉林延吉133000)
收稿日期:2006-05-30 修订日期:2006-07-07
作者简介:张继舜(1970—),男,硕士研究生。

研究方向:I gE 及其介导的Ⅰ型超敏反应在乙肝发病机制中的作用。

通讯作者:吴龙仁(1960—),男,博士,教授,Email:l ongrenway@ya 2
hoo
【摘要】通过观察与Ⅰ型超敏反应相关的乙型肝炎患者血清中LT D4水平及其与肝细胞损害相关性的研究,进一步论证Ⅰ型超敏反应与乙型肝炎发病机制的关系。

应用E L I S A 和全自动生化分析仪,检测42例急、慢性乙型肝炎患者及35例正常对照组血清中LT D4、ALT 和AST 水平,并观察三者间的相关性。

结果显示,急性组血清中
LT D4含量明显高于对照组和慢性组;慢性组血清LT D4含量也明显高于对照组,慢性轻度组、中度组及重度组之间
无显著性差异;LT D4水平与ALT 、AST 含量呈显著的正相关关系。

提示,乙型肝炎患者血清LT D4水平可反映肝损害程度,而且对病情和预后的判定有一定的参考价值;作为Ⅰ型超敏反应性炎症的重要指标,LT D4可能参与了乙型肝炎的发病和肝细胞的免疫损伤过程。

【关键词】乙型肝炎;发病机制;Ⅰ型超敏反应;白三烯
【中图分类号】R51216+
2 【文献标识码】B 【文章编号】1001-5256(2007)03-0172-02
D eter m i n a ti on of levels of leucotr i enes i n pa ti en ts w ith hepa titis B .　ZHAN G J i -shun,WU L ong -ren,CU I He -song,et al .
(D epart m ent of Infectious D iseases,A ffiliated Hospital of Yanbian U niversity,J ilin,Yanji 133000,China )
Abstract:T o investigate the relati onshi p bet w een type Ⅰhypersensitivity and pathogenesis of hepatitis B by observati on of seru m level of leucotrienes (LT D4)and liver da mage in patients with hepatitis B.The seru m fr om 42cases with acute or chr onic hepatitis B and 35contr ol subjects were analyzed .The level of seru m LT D4was deter m ined by sand wich E L I S A.And the levels of seru m ALT and AST were measured using omni aut omatic bi oche m istry analyzer .The levels of seru m LT D4in patient gr oup was higher than those in contr ol gr oup.Further more,the correlati on bet w een the level of LT D4and the level of ALT and AST was als o observed .The level of seru m LT D4reflects the liver da mage in the patients with acute or chr onic hepatitis B.It indicated that LT D4m ight p lay s ome r ole in the pathogenesis of hepatitis B.Key words:hepatitis B;pathogenesis;type Ⅰhypersensitivity;LT D4
许多学者认为,HBV 感染人体后,机体的免疫
应答特别是Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ型超敏反应是引起肝细胞损伤的重要原因。

但是,我们发现,在乙型肝炎患者血清中,与Ⅰ型超敏反应相关的I gE 、组织胺、I L -4水平显著升高。

另外,我们用自行设计的能阻止Ⅰ型超敏反应各个环节的联合抗过敏疗法治疗急性乙型肝炎,收到了较好的疗效。

通过以上基础研究和临床观察,我们首次提出,Ⅰ型超敏反应可能参与乙型肝炎发病机制的观点。

LT D4也是参与Ⅰ型超敏反应的重要物质。

因此,我们通过检测乙型肝炎患者血中LT D4的含量和与ALT 、AST 相关性分析,进一步论证Ⅰ型超敏反应与乙型肝炎发病机制。

1　材料和方法111　病例选择　所有病例参照2000年西安会议修订的《病毒性肝炎防治方案》诊断标准进行筛选。

在42例乙型肝炎患者中男28例、女14例,平均年
龄为35165±13167岁;急性肝炎8例,慢性肝炎34例,其中轻度13例、中度11例、重度10例,均为2004年3月至2005年6月延边大学医院感染科住院患者。

在35例正常对照组中男18例,女17例,平均年龄为40124±13125岁,均为门诊健康体检者,所有病例均排除各种炎症、自身免疫性疾病、糖尿病、器官移植、艾滋病、肿瘤等能影响血清LT D4水平的疾病,并排除甲、丙、丁、戊型肝炎病毒的感染。

112　标本的采集及保存　均于清晨空腹抽静脉血3m l,抽血过程中避免溶血,待血块收缩后,以8000r/m in 离心10分钟,取血清置-70℃冰箱保存,同时把剩余留取的血标本,分别用于检测血清ALT 和AST 。

113　实验方法　血清LT D4的检测试剂盒由天津华生生物科技有限公司提供,采用酶联免疫吸附实验-双抗体夹心法进行检测,操作严格按试剂盒说明书进行;血清ALT 、AST 水平的检测,采用本院检验科东芝产全自动生化分析仪进行。

114　统计学处理　各指标相关分析用Spear man 等
271Chin J Clini Hepat ol,June 2007,Vol 123,No 13
级相关分析,所有数据由SPSS1115f or window统计软件处理。

2　结果
211　各临床类型乙型肝炎患者及对照组血清LT D4水平　见表1。

表1　乙型肝炎患者及对照组血清LT D4水平(x±s)分　组例数LT D4(ng/m l)
对照组354121±1143
急性组812109±21153
轻度组136143±11333
中度组117161±21193
重度组107196±21193
3急性组与对照组比较t=141248、P<0101;3轻度组与对照组比较t=91035、P<0101;3中度组与对照组比较t=61027、P<0101; 3重度组对照组比较t=91240、P<0101
212　乙型肝炎患者血清LT D4水平与肝功能的关系　LT D4与ALT呈显著正相关关系,r=01792,P <0101;LT D4与AST也呈显著正相关关系,r= 01597,P<0101。

提示,乙型肝炎患者肝细胞受损越多,血清LT D4含量的升高也越明显。

3　讨论
白三烯(Leukotrienes,LTs)是花生四烯酸经5-脂氧合酶途经生成的具有高度生物活性的炎性介质,是属于在细胞内新合成的参与Ⅰ型超敏反应的慢反应物质,在Ⅰ型超敏反应患者血清中其含量明显升高。

因此,白三烯还可作为检测Ⅰ型超敏反应的一项重要指标。

它是由具有化学趋向性的L I B4和脂类LT C4、LT D4、LTE4组成。

Sa muelss on[1]等阐明了这些慢反应物质的结构,并因其来源于白细胞,结构上具有特征性的三烯结构,从而用白三烯来命名这些脂类衍生物。

白三烯参与过敏反应、休克、炎症反应[2]和血浆外渗等病理生理过程。

内源性LTs 主要由炎细胞合成和释放,LT B4主要由多形核中性白细胞产生,因其具有5-L0和LT A4脱氢酶[3]。

嗜酸性白细胞、肥大细胞和嗜碱性白细胞具有5-L0和LTC4合成酶,优先合成LT C4[4],而单形核细胞、巨噬细胞具有5-脂氧化酶途径的2种终端酶,既产生LT B4,又产生LTC4。

肝脏内的Kupffer细胞、肥大细胞和内皮细胞可产生LTs,而且在肝内LT C4经过LT D4代谢为LTE4。

另外,LTs还来源于人体血液中的其他炎性细胞。

白三烯在肝炎的发生和发展过程中也起重要作用。

内毒素诱导小鼠急性肝损害时,血中LT B4浓度明显升高,用LTs合成抑制剂AA861可以明显降低内毒素诱导的LT B4浓度,并显著减少肝细胞坏死的发生。

W endel[5]等给小鼠直接注入LT B4和LT D4,并加用D-氨基半乳糖,结果表明,单纯LT D4对肝细胞仅轻度损伤作用,但是LT D4可显著促进D-氨基半乳糖的肝细胞毒性作用,因此认为, LT D4是诱发急性肝损害的重要介质。

本项研究结果显示,在急性乙型肝炎和慢性乙型肝炎患者血清中LT D4水平显著升高,并与ALT 和AST水平呈正相关,即肝细胞受损越重,LT D4水平升高也越显著。

急性乙型肝炎及慢性乙型肝炎患者的血清LT D4水平,均显著高于正常对照组P< 0101,慢性中度组与重度组明显高于慢性轻度组,P <0101。

等级相关分析表明,LT D4与ALT呈显著的正相关关系,r=01792,P<0101,LT D4与AST呈显著正相关关系,r=01597,P<0101。

因此,在乙型肝炎患者血清中LT D4水平升高的原因之一,是因为HBV感染人体后,诱发了Ⅰ型超敏反应,致使血清中的LT D4升高,而升高的LT D4又能导致肝细胞的损伤。

所以,本研究为论证Ⅰ型超敏反应与乙型肝炎发病机制的关系,提供了新的理论依据。

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371
临床肝胆病杂志　2007年第23卷第3期。