自噬在缺氧条件下视网膜色素上皮细胞表达趋化因子IL-8、MCP-1中的作用

•论著：实验研究•
自噬在缺氧条件下视网膜色素上皮细胞表达
趋化因子IL-8'MCP-l中的作用
李蓉，姚国敏，姚杨
O摘要］目的研究自噬在缺氧条件下视网膜色素上皮(RPE)细胞表达趋化因子白细胞
介素8(IL-8)和单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)中发挥的作用&方法将培养良好的ARPE-
19细胞分为对照组、缺氧组、3-甲基腺嗥吟(3-MA)+缺氧组和氯喳(CQ)+缺氧组。

对照组细
胞在常氧条件下培养；缺氧组细胞在缺氧箱中培养；3-MA+缺氧组和CQ+缺氧组分别先用
10mM3-MA或50“M CQ预处理细胞2h,然后置于缺氧箱中继续培养&24h后采用
ELISA法检测细胞上清液中趋化因子IL-8、MCP-1的浓度；采用Western blot法检测细胞的
自噬关键蛋白微管相关蛋白1轻链3B(LC3B)、Beclin-1及p62的相对表达水平&对4组
细胞表达的IL-8、MCP-1浓度和LC3B-II/I、Beclin-1及p62水平进行统计分析&结果4组
中IL-8、MCP-1浓度组间比较，差异均有统计学意义(IL-8：F=539.27,"=0.000；MCP-1：!=
56.16,"=0.000)；两两比较发现，缺氧组的IL-8、MCP-1浓度明显高于其它3组，差异均有
统计学意义(IL-8:均"=0.000；MCP-1：缺氧组vs.对照组"=0.000；缺氧组vs.3-MA组"=
0.001；缺氧组vs.CQ组"=0.000)。

4组细胞中的LC3B-II/I、Beclin-l及p62的相对蛋白表
达量组间比较，计学意义(LC3B-II/I:!=80.65，"=0.000；Beclin-1：!=139.29，"=
0.000；p62:!=70.64，"=0.000)。

两两比较发现，缺氧组细胞中LC3B-II/I的相对蛋白表达量
明显高于对照组和3-MA组(缺氧组vs.对照组"=0.000；缺氧组vs.3-MA组"=0.001)；缺氧
组中LC3B-II/I的相对蛋白表达量低于CQ组，差异有统计学意义("=0.000)；缺氧组细胞中
Beclin-1的相对蛋白表达量均明显高于其它3组(缺氧组vs.对照组"=0.000；缺氧组vs.3-MA
组"=0.001；缺氧组vs.CQ组"=0.000)；缺氧组细胞中\62相对蛋白表达量明显低于其它3
组，差异均有统计学意义("<0.05)。

结论在缺氧条件下，自噬水平升高可促进RPE细胞趋
化因子IL-8和MCP-1的表达&
［关键词］自噬;视网膜色素上皮;炎症；白细胞介素&单核细胞趋化蛋白-1；缺氧
中图分类号：R774.1文献标识码:A8章编号:1002-4379(2020)05-0313-06
Role of autophagy in expression of IL-8and MCP-1in retinal pigment epithelium
cells under hypoxia LI Rong,YAO Guomin,YAO Yang.The First Affiliated Hospital of Xi'an
Medical University,Xi'an710077,China
[Abstract]OBJECTIVE To investigate the role of autophagy in the expression of interleukin
(IL)-8and monocyte chemokine protein(MCP)-1in retinal pigment epithelium(RPE)cells under
the hypoxia conditions.METHODS Well cultured ARPE-19cells were divided into control
group,hypoxia group,3-methyladenine(3-MA)+hypoxia group and chloroquine(CQ)+hypoxia
D0I:10.13444/ki.zgzyykzz.2020.05.003
基金项目：1国家自然科学基金项目(81500726)
2陕西省卫生健康科研基金项目(2018D074)
3陕西省普通高校青年杰出人才支持计划
4西安市科技局医学研究项目(201805097YX5SF31(4))作者单位：陕西省西安医学院第一附属医院，西安710077
通信作者:姚国敏,E-mail: dxsygm@ group.The cells in the control group were cultured under the normoxia conditions, the cells in the hypoxia group were cul­tured in the hypoxia box.The cells in the 3-MA+hypoxia group and the CQ+hypox-ia group were pretreated with10mM3-MA or50|“M CQ for two hours respec -
tively,and then were placed in the hypoxic box for further culture.After24hours,the concentra­tions of IL-8and MCP-1in the supernatant were detected by ELISA.The relative expression lev­els of autophagy-associated key proteins,which included microtubule associated protein1light chain3B(LC3B),Beclin-1and p62,were detected by Western blot method.The concentrations of IL-8,MCP-1as well as the level of LC3B-II/I,Beclin-1and p62expressed in the four groups were statistically analyzed.RESULTS The concentration of IL-8and MCP-1among the four g roups were compared in general,and the differences were statistically significant(IL-8:!=539.27, P"0.000；MCP-1：!=56.16,"=0.000).By pairwise comparison,the concentration of IL-8and MCP-1in the hypoxia group was significantly higher than those in other three groups,and the dif­ferences were statistically significant(IL-8：all P=0.000；MCP-1:hypoxia group vs control group P=0.000；hypoxia group vs.3-MA group P=0.001；hypoxia group vs.CQ group P=0.000).The rela­tive protein expression of LC3B-II/I and Beclin-1among the four groups of cells were compared in general,and the differences were statistically significant(LC3B-II/I:!=80.65,P=0.000；Beclin-1: !=139.29,P=0.000；p62：!=70.64,P=0.000).By pairwise comparison,the relative protein expres­sion of LC3B-II/I in the hypoxia group was significantly higher than that in control group and3­MA group(hypoxia group vs.control group P=0.000,hypoxia group vs.3-MA group P=0.001). The relative protein expression of LC3B-II/I in the hypoxia group was lower than that in CQ group, the differences were statistically significant(P=0.000).The relative protein expression of Beclin-1 in the hypoxia group of cells was significantly higher than that in the other three groups(hypoxia group vs.control group P=0.000,hypoxia group vs.3-MA group P=0.001；hypoxia group vs.CQ group P=0.000).The relative protein expression of p62in the hypoxia group of cells was signifi cantly lower than that in other three groups,and the differences were statistically significant(Pb 0.05).CONCLUSIONS Under the condition of hypoxia,elevated autophagy level could promote the expression of chemokines IL-8and MCP-1in RPE cells.
[Keywords]autophagy;retinal pigment epithelium;inflammation;interlukin-8;monocyte chemokine protein-1;hypoxia
自噬（autophagy,AP）是一种普遍存在于真核生物中的、由溶酶体介导的降解细胞内受损的蛋白质或细胞器的正常代谢过程。

作为维持细胞内环境自稳的一种自我保护机制，自噬已成为近年来生物学
及生命科学领域的研究热点01-23$据报道，细胞自噬对炎症反应有重要的调控作用，而炎症反应也能影响细胞自噬033$（retinal pigment ep­ithelium cells,RPE）细胞是一种有种生生
功能的细胞，理条件下可分泌括炎在内
的多种细胞眼的发生043$炎性因子白细胞介8（interlukin-8，IL-8）细胞蛋白-1（monocyte chemokine protein1，MCP-1）于
，与炎症、机体、生成：
$对于自噬RPE细胞的已有报道，对自噬在RPE细胞表达趋化因IL-8MCP-1中的作用报道$研究察细胞自噬在缺氧条件下RPE细胞表达IL-8和MCP-1中发挥的作用，为进一步研究自噬与眼部疾的$
1材料与方法
1.1材料
ARPE-19细胞系（武汉普诺赛生命科技有限公司）；DMEM/F12培养基及0.25%胰酶（美国Gibco ）；3-MA（美国Selleck公司）；CQ（Sigma公）；蛋白13B（microtubule associated protein1light chain3B，LC3B）、
Beclin-1及p62（CST）；GAPDH（生物有）；HRP
（生物程有）；IL-8 MCP-1ELISA（生物科有）$
（科学器有，
HF-100）；差显微镜（日本Olympus，型号IX51）；微型高速离心机（美国Labnet公司，号
C2500-R-230V);全自动酶标仪(美国Thermo sci­entific公司，型号Multiskan MK3)%
1.2方法
1.2.1细胞处理及分组用不含EDTA的0.25%胰酶消化ARPE-19细胞，用DMEM/F12培养基(含10%胎牛血清+1%青霉素和链霉素)终止消化,轻轻吹打混匀成单细胞悬液,传代至培养皿中,在37"、5%CO2及饱和湿度条件下培养%取处于对数生长期的ARPE-19细胞(5〜10代)按照每孔5x105个接种于6孔板内，待细胞贴壁细胞分为对照组、
组、3-甲基腺瞟吟(3-methyladenine,3-MA)+缺氧组和缺氧组(简称：3-MA组)和氯座(chloroquine,CQ) +组(:CQ组),中对照组在条件下培养；组置于O2：CO2：N2体积比为1：5：94的培养箱中培养;3-MA组先用10mM3-MA预处理细胞2h,然处理方法同缺氧组；CQ组先用50!M 预处细胞2h,然后处组％
1.2.2RPE细胞IL-8和MCP-1的表达细胞培养及分组方法，培养24h后将处的细胞. ELISA试剂盒的96孔板中，每孔加入100^L,盖上 封纸，置于37"90min%,液体，不清，每孔100!L的A, ,置于37"1h,，移出液体,用350^L的洗脱液96孔3,清液在孔中停留1〜2min，吸干液体,于每孔加100!L稀释后的检测试剂B,,37"30min,，移出液体，用350!L液将96孔板洗4,方法，吸干液体，于孔中加100!L液, ,15min,,于每孔加入100!L终止液终止反应,酶标仪在450nm波长处孔的度(0D)%IL-8和MCP-1标度为标,0D为标，，待3本的0D在标的IL-8和MCP-1度对%
1.2.3RPE细胞自的表达收集各组细胞,用PBS3,含酶
的RIPA裂解液400^L,混匀,4"&1300r/min离心15min,取上清,BCA法度,取50憾等%SDS-PAGE,，用含5%的TBST溶液2h,TBST洗涤3,每次10min%加入一抗LC3B(1:1000)、Beclin-1(1: 1000)、p62(1:1000)及GADPH(1:1000,4"摇床过夜,TBST3,每次10min，加入辣根过氧化酶标记的二(1:50000),2h,显色，凝胶成像分析系统扫描分析。

以GAPDH为内参，以目的/GAPDH条带灰度作为其相对％实验进行3生物学重复％
1.3统计学处理
采用SPSS19.0统计软件对数据进行处理及分析，计量资料以均数土标准差(兀土")表示,多组间比较采用方差分析,组间两两比较采用LSD-#检验，以$<0.05为差异统计学意义％
2结果
2.1ARPE-19细胞形态
培养24h,ARPE-19细胞呈现扁圆形、梭形、多角形或者不规则形的细胞形态,贴壁良，胞浆内未见明显黑色素颗粒％不同处理组之间的细胞形态未见明显差异，但3-MA组和CQ组凋亡细胞数量增多(图1)%
图14组ARPE-19细胞在倒置显微镜下的形态(X100)%1A对照组；1B缺氧组；1C3-MA组；1D CQ组
2.2RPE细胞中IL-8和MCP-1的
ELISA检测各组ARPE-19细胞上清液中IL-8、MCP-1水平,对照组、缺氧组&3-MA组、CQ组的IL-8浓度(pg/mL)分别为28.98±3.66&129.95±2.29& 100.47±4.03和54.94±3.27；4组细胞的MCP-1浓度(pg/mL)分别为170.33±9.31、526.65±52.43、390.87±44.18和301.73±4.13。

结果显示培养的细胞在正常的情况下仅仅产生少的IL-8和MCP-1,在条件下,细胞的IL-8和MCP-1迅速增加，而3-MA或CQ预处理可以明显抑制IL-8、MCP-1的分泌(图3)%4组比较,IL-8：%&539.27,$&0.000；MCP-1：%&56.16,$&0.000,差异均有统计学意义％组间两两比较发现，缺氧组的IL-8、MCP-1浓度明显高于对照组&3-MA组和CQ组，
差异均有统计学意
义（IL-8:均！a 0.000；MCP-1 :缺氧组 vs.对照组，！二
0.000；缺氧组 vs. 3-MA 组，！二0.001 ；缺氧组 vs. CQ
组,!二
0.000）（图 2）。

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注：*与对照组比较,！＜0.05；#与缺氧组比较,！＜0.05
图2 ELISA 检测四组细胞表达IL-8和MCP-1蛋白浓度的比较。

2A IL-8蛋白浓度比较；2B MCP-1蛋白浓度比较o IL-8:白细
胞介素-8；MCP-1 :单核细胞趋化蛋白-1
! $ Westernb-ot BC 四./G L&3'、'ec-in —1 1 p62 宋帀囹
2・3 各组RPE 细胞自噬标记蛋白LC3B-II/I 、Be - clin-1 和 p62 的表达
Westernblot 检测结果显示，对照组、缺氧组、3-MA
组和CQ 组细胞中的LC3B-II/I 、Beclin-1及p62的
相对蛋白表达量分别为（0.24土0.02、0.50土0.05、
0.34土0.01 和 0.67土0.05）、（0.32土0.03、0.97土0.05、
0.78±0.06 和 0.54±0.01）和（1.03 ±0.02、0.32±0.10、
0.78±0.08和0.96±0.02）。

与对照组比较,缺氧组细
胞自噬水平升高,表现为LC3B-II/I 比值、Beclin-1
这两种蛋白表达增加和p62蛋白表达下降°与缺氧 组比较,采用自噬抑制剂3-MA 预处理细胞时,
LC3B-II/I 和Beclin-1的表达明显下降,p62的表达
明显增加；采用自噬抑制剂CQ 预处理细胞,Beclin-
1的表达明显下降,LC3B-II/I 和p62的表达明显增
加（图3）°
4组间比较差异,均有统计学意义（LC3B-II/I : F 二80.65 ,!二0.000 ； Beclin -1:F 二 139.29,P 二0.000；
p62:F $70.64,P $0.000）°组间两两比较发现,缺氧组 中LC3B-II/I 的相对蛋白表达量明显高于对照组和
3-MA 组（缺氧组vs.对照组,P $0.000；缺氧组vs. 3-
MA 组,！二0.001）；缺氧组中LC3B-II/I 的相对蛋白 表达
CQ 组,差异有统计学意义（P $0.000）°
缺氧组细胞中Beclin-1的相对蛋白表达 均明显高
于其它3组（缺氧组vs.对照组,P $0.000；缺氧组vs. 3-MA 组,P a 0.001 ；缺氧组 vs. CQ 组,P $0.000）° 缺 氧组中p62相对蛋白表达量明显
3组，差
异均有
义（均P A0.000）（图4）°3讨论
RPE 是眼底一层重要的细胞结构，其分泌的许汕1
# S 1-5!
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注:*与对照组比较,！＜0.05；#与缺氧组比较,！＜0.05
图4 四组细胞LC3'-II/I 、'eclin-1和p62的相对蛋白表达量比
较° 4A LC3B-II/ I 相对蛋白表达量；4B Beclin-1相对蛋白表
达量；4C p62的相对蛋白表达量
多细胞因子对维持眼内微环境具有重要作用。

在病
理状态下，RPE 细胞可通过分泌IL-4、IL-6、IL-8、 IL-10和MCP-1等多种炎性细胞因子参与增生性
玻璃体视网 膜病变（proliferative vitreoretinopathy ,
PVR ）、年龄相关性黄斑变性（age-related macular de ­
generation ,AMD ）及糖尿病视网膜病变（diabetic retinopathy ,DR ）的发生和发展⑸。

细胞自噬与炎症
, 制 多 冋，
表明，细胞自噬眼 的 、 中
的作用眾-9］。

因此,
ARPE-19细胞分泌
的趋化因子IL-8和MCP-1为检测指标,
自噬
RPE 细胞分
因子 与眼部
的。

趋化因子（chemokines '是一类由组织细胞或炎 性细胞 的、对各种白细胞有趋化 和
的细胞因子， 白细胞
的
中国中#眼科杂志2020(5月第30+第5期-317-
游走和组织内聚集。

趋化因子与相应受体结合后主
要通过G蛋白偶联的磷脂酰肌醇途径而发挥免疫炎性和血管生成等多种生物活性。

自发现以来，趋化因子与肿瘤的关系一直是研究的热点。

趋化因子超家族与相应受体结合可影响多种恶性肿瘤的进展、生物学行为和后°IL-8、MCP-1±!
要生的趋化因子，肿瘤的发生、发展、
及转移中起着复杂的。

一般而言，阳性达进展，炎性，血管生，发生，侵袭能力强及预后[10"11]o IL-8是Yoshimur在1987发现的趋化因子,是研究多、进血管生的一种趋化因子[12]o在许
多肿瘤组织中IL-8的达和，而在相应的正常组织中IL-8不表达达。

研究发现，IL-8肿瘤血管生，血管性，与多种肿瘤的生,和[12-13]O MCP-1是主要的/炎、肿瘤
的趋化因子，一的免疫炎性应，趋化和/，生炎性因子一过；另一和
性血管生成吟呵。

研究发现,的，RPE 细胞仅产生少量的IL-8和MCP-1。

,细胞表达的IL-8和MCP-1,与文献报道的结果相似叫随着近年来对肿瘤血管生的广泛研究，人们发现各种多种生长因子都具有血管生成的功。

除内皮生长因子VEGF家族和血管生成
素家族之外，血管生成相关性趋化因子和因子被认其很强的促血管生成活性。

因此，进RPE细胞表达IL-8和MCP-1,可能进一步参与眼部新生血管的形成。

普遍存于真核生物细胞内的一种机制,细胞自对内环境稳定进行自我维持，且在胚胎发育、细胞自我保护和生存等过程中发挥关键作用。

当处于应状态时，的自水平会短时间内升。

自噬的发生需要多种自相蛋白参与，任何一种自噬基因的失或突变都会影响自噬相进，从而造成各种眼病的发生1161,例如白内障,AMD,青光眼,葡萄膜炎,视网膜和眼肿瘤等。

作为自标记蛋白，LC3,Beclin-1和P62等被广泛于自的相研中，研究中结合起来综合判断自噬活性的强弱[17-191o已有研究发现自噬相
蛋白视网膜色素上皮层、视网膜神层、内
层、外核层达㈣，当自处于失
状态时会导致相关的视网膜的发生。

本研究发现,,RPE中LC3、Beclin-1 P62蛋白都的表达，与相符。

外,于自制的机制存,
研种自制对RPE进行
预。

其中,3-MA是Class III PI3K的抑制剂，它作用于自阶段，可特异性阻断自噬体的形[21/o CQ 是一种溶酶体自制剂，可阻止自体与溶酶体的结合，抑制自噬的解，使得自噬体内加，后LC3-I LC3-"的[221O 本研究发现在缺氧条件下，RPE细胞的LC3B-II/I (LC3B是LC3的主要亚型Beclin-1蛋白表达增加p62蛋白表达下降,而3-MA或CQ处理后这3种自键蛋白的达发生，力
导了RPE的自噬激活。

可进RPE IL-8和MCP-1达,3-MA或CQ处理后减少了二者的表达。

3-MA 和CQ处的结果一，制自
少RPE细胞表达IL-8和MCP-1。

结合以往的研究结果，自活可进视网膜血管生成过⑴別,提示自噬激活促进RPE细胞分泌趋化因子IL-8和MCP-1可能是自噬参与视网膜和脉络膜新生血管形成的另一要途径。

，通过自噬进眼部疾病已成为一种新的思路，攵更解自RPE IL-8和MCP-1的具体机制很可视网膜和膜新生血管等眼新方法。

参考文献
[1]GREEN DR,GALLUZZI L,KROEMER G.Mitochondria and the
autophagy-inflammation-cell death axis in organismal aging.J].Sci­ence,2011,333(6046):1109-1112.
[2]ROSENFELDT MT,RYAN KM.The multiple roles of autophagy in
cancer.J].Carcinogenesis,2011,32(7):955-963.
[3]何贤辉，何健，欧阳东云•细胞自噬与炎症反应相互作用的研究进
展[J]•暨南大学学报(自然科学与医学版),2013,34(2)\125-128. [4]SIM o R,VILLARROEL M,CORRALIZA L,et al.The retinal
pigment epithelium:something more than a constituent of the blood-retinal barrier-implications for the pathogenesis of diabetic retinopathy[J].J Biomed Biotechnol,2010,2010:190724.
[5]LEUNG KW,BARNSTABLE CJ,TOMBRAN-TINK J.Bacterial en­
dotoxin activates retinal pigment epithelial cells and induces their degeneration through IL-6and IL-8autocrine signaling[J].Mol Im­munol,2009,46(7):1374-1386.
[6]JONES SA,MILLS KH,HARRIS J.Autophagy and inflammatory
diseases[J].Immunol Cell Biol,2013,91(3):250-258.
(下转323页)
中国中医眼科杂志2020年5月第30卷第5期・323・
参考文献
%1]FUMA S,NISHINAKA A,INOUE Y,et al.A pharmacological ap­proach in newly established retinal vein occlusion model[J].Sci Rep, 2017,7:43509.
%2]赵充充，秦梅•视网膜分支静脉阻塞治疗研究现状[J]•眼科新进展, 2018,38(5):485-489.
%3]龙盘，，陈涛，等•光化学法建立视网膜分支静脉阻塞大鼠模型及相关研究%J].国际眼科杂志,2018,18(5):801-806.
[4]吴烈,桑子瑾，，等•凉血止血法与活血调节RVO兔模
血因子及微循环作用机制的研究[J].中国中医眼科杂志, 2013,23(1):2-6.
[5]，李明新•不同色素兔光化学法诱导视网膜静脉阻塞模
型的对比[J]•中国眼耳鼻喉科杂志,2014,14(3)：171-176.
[6]林小波，，杜军辉，等.眼底新生血管疾病动物模型研究进
展[J]•临床医药文献电子杂志,2017,4(54):10669,10672.
[7]YAMAMOTO T,KAMEI M,KUNAVISARUT P,et al.Increased
retinal toxicity of intravitreal tissue plasminogen activator in a cen­tral retinal vein occlusion model[J].Graefes Arch Clin Exp Ophthal-mol,2008,246(4):509-514.
[8]NANDA SK,HATCHELL DL,TIEDEMAN JS,et al.A new method
for vascular occlusion.Photochemical initiation of thrombosis[J].
Arch Ophthalmol,1987,105(8):1121-1124.
[9]BANKS JG,BOARD RG,CARTER J,et al.The cytotoxic and pho­
todynamic inactivation of micro-organisms by Rose Bengal[J].J Ap-pl Bacteriol,1985,58(4):391-400.
[10]李波,董子奕•兔实验性视网膜静脉阻塞造模方法改进后的评
价[J]•广东医学,2010,31(24):3173—3176.
[11]翁欢，李秋华,张瑞帆•光化学法诱导兔视网膜静脉阻塞的实验研
究[J].中国眼耳鼻喉科杂志,2009,9(3):142-144,205.
[12]SUN C,LI XX,HE XJ,et al.Neuroprotective effect of minocycline in
a rat model of branch retinal vein occlusion[J].Exp Eye Res,2013,
113(8):105-116.
[13],,,等.用对实验网膜
塞的作用[J]•临床眼科杂志,2019,27(1):78-83.
[14]刘岩,张瑞帆，翁欢，等•光化学法诱导兔视网膜动脉阻塞模型的
建立[J]•复旦学报(医学版),2010,37(1):106-109.
[15]丘红红.用于影检查眼底血管的安全性及
不良反应特点[J]•临床眼科杂志,2015,23(1):78-80.
[16]黄硕，张海林,张树泉•光化学法大鼠脑梗死模型的研究进展[J]•中
西医结合心脑血管病杂志,2015,13(5):610-611,650.
(收稿日期：2019-06-16)
(上接317页)
[7]LEVINE B,MIZUSHIMA N,VIRGIN HW.Autophagy in immunity
and inflammation[J].Nature,2011,469(7330):323-335.
[8]许君/，张晓梅.线粒体自噬在眼科相关疾病中的研究进展[J].
国际眼科杂志,2018,18(3):478-481.
[9]刘滨，郭大东,孙园园，等•自噬调控眼部疾病进程的研究进展[J].
眼科新进展.2017,37(8):797-800.
[10]ZENG L,WANG XY,ZHOU LX,et al.Clinicopathological signifi­
cance of chemotactic factor IL-8,MCP-1and MIP-1!expressions in gallbladder carcinoma[J].Chinese-German J Clin Oncol,2013, 12(10):481-486.
[11]邹文,胡铁辉•趋化因子IL-8,MCP-1和M IP-1对非小细胞肺癌
血管生成的作用和意义[J]•中南大学学报(医学版),2007,32(4)：665-670.
[12]MASUYA D,HUANG C,LIU D,et al.The intratumoral expression of
vascular endothelial growth factor and interlelukin-8associated with angiogenesis in nonsmall cell lung carcinoma patients[J].Cancer, 2001,92(10):2628-2638.
[13]REN Y,POON RT,TSUI HT,et al.Interleukin-8serum levels in
Patients with hepatocellular carcinoma:correlations with clinico-pathological features and prognosis[J].Clin Cancer Res,2003,9(16): 5996-6001.
[14]LIU H,ZHANG Z,TABUCHI T,et al.The role of pro-inflammatory
cytokines and immune cells in colorectal carcinoma progression[J].
Oncol Lett,2013,5(4):1177-1182.
[15]TANG M,WANG Y,HAN S,et al.Endogenous PGE(2)induces
MCP-1expression via EP4/p38MAPK signaling in melanoma[J].
Oncol Lett,2013,5(2):645-650.
[16]孙文杰，葛红岩,赵楚楚，等.自噬在晶状体发育及白内障的研究
进展[J].现代生物医学进展,2015,15(30):5998-6000,5964. [17]PARK HY,KIM JH,PARK CK.Activation of autophagy induces
retinal ganglion cell death in a chronic hypertensive glaucoma mod-el[J].Cell Death Dis,2012,3(4):e290.
[18]RUSSO R,BERLIOCCHI L,ADORNETTO A,et al.In search of new
targets for retinal neuroprotection:is there a role for autophagy?[J].
Curr Opin Pharmacol,2013,13(1):72-77.
[19]YAO J,TAO ZF,LI CP,et al.Regulation of autophagy by high glu­
cose in human retinal pigment epithelium[J].Cell Physiol Biochem, 2014,33(1):107-116.
[20]JARRETT SG,LEWIN AS,BOULTON ME.The importance of mi­
tochondria in age-related and inherited eye disorders[J].Oph­thalmic Res,2010,44(3):179-190.
[21]LI R,TIAN J,DU J,et al.Manipulation of autophagy:a novelly po­
tential therapeutic strategy for retinal neovascularization卩].BMC Ophthalmol,2018,18(1):110.
[22]MITTER SK,RAO HV,QI X,et al.Autophagy in the retina:a po­
tential role in age-related macular degeneration[J].Adv Exp Med Biol,2012,723:83-90.
[23]LI R,DU J,CHANG Y.Role of autophagy in hypoxia-induced an­
giogenesis of RF/6A cells in vitro[J].Current Eye Research,2016, 41(12):1566-1570.
[24],辉，姚杨，等•缺氧条件下自噬在视网膜血管内皮细胞
血管生成中的作用[J].中华实验眼科杂志,2018,36(3):187-193.
(收稿日期：2019-06-13)。