211115562_毛蕊异黄酮对肺腺癌SPC-A1细胞生长及凋亡的影响

毛蕊异黄酮对肺腺癌SPC-A1细胞生长及凋亡的影响
刘佳芹1，周立霞2，陈文现3，杨航4
1.遵义医科大学，广东珠海519041；
２.遵义医科大学第五附属(珠海)医院，广东珠海519100；
３.遵义医科大学，广东珠海519041；４.遵义医科大学，贵州遵义563000
【摘要】目的建立肺腺癌SPC-A1细胞裸鼠移植瘤模型，探讨毛蕊异黄酮对肺腺癌移植瘤生长及凋亡的影
响。

方法30只裸鼠(6~8周龄)适应性饲养一周后，将制备好的SPC-A1细胞悬液(浓度为5×105个/mL)经腋下皮下注射，拟建造SPC-A1肺腺癌细胞移植瘤模型；按照裸鼠的重量及瘤体的体积大小，随机分为模型组、毛蕊异黄酮组、顺铂组，每组6只；记录各组裸鼠实验前后的体质量、瘤重、瘤体横径和纵径，并分析各组裸鼠模型的肿瘤抑制率，测估SPC-A1裸鼠移植瘤的体积大小及生长状况；通过末端脱氧核苷酸转移酶介导的脱氧尿苷三磷酸缺口末端标记(TUNEL)测定法测定SPC-A1细胞裸鼠移植瘤的凋亡状况；蛋白免疫印迹法(Western blot)测定各组瘤体中凋亡相关蛋白Bax 、Bcl -2的表达水平。

结果顺利构建了肺腺癌SPC-A1细胞裸鼠移植瘤的模型。

与模型组比较，毛蕊异黄酮组裸鼠瘤的瘤重[(1.20±0.19)g vs (0.98±0.14)g]明显降低，差异有统计学意义(P <0.05)，且抑瘤率为18.33%，表明毛蕊异黄酮能有效抑制SPC-A1细胞裸鼠移植瘤的生长；TUNEL 法检测的各组裸鼠移植瘤细胞的凋亡结果分析表明，与模型组比较，毛蕊异黄酮组凋亡率[(10.00±0.82)%vs (32.43±1.99)%]明显增加，差异有统计学意义(P <0.05)，证实毛蕊异黄酮可有效诱导肺腺癌SPC-A1细胞的凋亡作用；Western blot 结果显示，毛蕊异黄酮能明显上调促凋亡相关蛋白Bax 的表达水平，同时能明显下调抑凋亡相关蛋白Bcl -2的表达水平，差异有统计学意义(P <0.05)。

结论毛蕊异黄酮能够明显抑制SPC-A1裸鼠移植瘤的生长并促进肺癌细胞的凋亡。

【关键词】裸鼠；毛蕊异黄酮；肺腺癌；SPC-A1细胞；凋亡【中图分类号】R -332【文献标识码】A 【文章编号】1003—6350（2023）07—0913—06Effect of calycosin on proliferation and apoptosis of lung adenocarcinoma cell line SPC-A1in nude mice.LIU Jia-qin 1,ZHOU Li-xia 2,CHEN Wen-xian 3,YANG Hang 4.1.Zunyi Medical University,Zhuhai 519041,Guangdong,CHINA;2.Fifth Affiliated (Zhuhai)Hospital of Zunyi Medical University,Zhuhai 519100,Guangdong,CHINA;3.Zunyi Medical University,Zhuhai 519041,Guangdong,CHINA;4.Zunyi Medical University,Zunyi 563000,Guizhou,CHINA
【Abstract 】Objective To establish transplanted tumor models of lung adenocarcinoma cell SPC-A1in nude mice and investigate the effect of calycosin on the proliferation and apoptosis of transplanted tumor of lung adenocarci-noma.Methods After the adaptive feeding of 30nude mice (6to 8weeks old)for one week,the prepared SPC-A1cell suspension (at a concentration of 5×105cells/mL)was injected under the armpit to establish a SPC-A1lung cancer cell transplanted model.According to the weight of nude mice and the volume size of the tumor body,the mice were random-ly divided into model group,calycosin group,and cisplatin group,with six mice in each group.The weight,tumor weight,transverse diameter,and longitudinal diameter of nude mice were recorded to analyze the tumor suppression rate of each nude mouse model and assess the tumor size and growth of SPC-A1nude mice.The apoptosis of SPC-A1cells in transplanted nude mice was determined by Terminal deoxynucleotide transferase-mediated dUTP nick-end labeling (TUNEL).The expression of the apoptosis-related proteins Bax and Bcl -2in each group was determined through west-ern blot.Results The transplanted tumor models of SPC-A1cells in lung adenocarcinoma were successfully construct-ed.In comparison with the model group,the tumor weight in calycosin group was decreased significantly:(1.20±0.19)g vs (0.98±0.14)g,P <0.05,and the tumor suppression rate reached 18.33%,which indicated that calycosin can effectively inhibit the growth of SPC-A1cell transplanted tumors in nude mice.TUNEL showed that the apoptosis rate of the trans-planted tumor cells was increased significantly in the calycosin group than the model group:(10.00±0.82)%vs (32.43±1.99)%,P <0.05,which conformed that calycosin can effectively induce the apoptosis of SPC-A1cells in lung adenocar-cinoma.Western blot results showed that calycosin can significantly up-regulate the expression level of the apoptosis-re-lated protein Bax and also significantly down-regulate the expression level of the apoptosis-related protein Bcl -2(P <0.05).Conclusion Calycosin can markedly restrain the growth of SPC-A1cell transplanted tumor in nude mice and promote the apoptosis of lung adenocarcinoma cells.
【Key words 】Nude mice;Calycosin;Lung adenocarcinoma;SPC-A1cells;Apoptosis
·论著·
doi:10.3969/j.issn.1003-6350.2023.07.001
基金项目：贵州省科学技术厅科技计划项目(编号：黔科合基础-ZK[2021]一般543)；贵州省卫生健康委员会科学技术基金项目(编号：
gzwjkj2020-1-036)。

第一作者：刘佳芹(1994—)，女，研究生在读，主要研究方向为肺癌基础研究。

通讯作者：周立霞(1981—)，女，博士，研究生导师，副主任医师，主要研究方向为肺癌基础研究，E-mail：****************。

肺癌是一种常见肿瘤，根据2020年的统计，确诊肺癌患者的人数高达220万，是全球第二大癌症，也是癌症死亡数之首[1]。

肺癌高死亡率与早期症状体征、影像结果不明显，吸烟人群庞大，环境因素改变等有关，且大部分的患者确诊时已是中晚期[2]。

尽管临床上针对中晚期肺癌患者给予放化疗、靶向、免疫等多种综合治疗方法，但5年生存率因继发或原发耐药、严重不良反应、个体差异等诸多问题并没有得到显著的改善。

因此仍需寻找肺癌新的有效治疗靶点和药物。

近几年来，中医在肿瘤的治疗当中，逐渐成为非常重要的一部分。

中医药具有不良反应小、抗肿瘤作用、改善肿瘤免疫微环境等优势[3]。

王素芬等[4]的研究结果显示，在AP方案治疗非小细胞肺癌中应用黄芪多糖有增效减毒的功效。

在一项回顾性分析中，与单纯TP化疗方案相比，联合脾多肽伊可明显提高局晚期非小细胞肺癌治疗效果和减少不良反应发生，并降低免疫逃逸相关因子Toll样受体4(Toll-like receptor4，TLR4)、程序性死亡受体1(programmeddeath-1，PD-1)、高迁移率族蛋白B1(high mobility group box1，HMGB1)的表达水平[5]。

章钰辰等[6]的研究结果显示，给乳腺癌荷瘤小鼠尾静脉注射脾多肽后，可增强乳腺癌荷瘤小鼠的抗肿瘤免疫能力及增加乳腺癌肿瘤免疫微环境中CD4+T淋巴细胞和CD8+T淋巴细胞的比例。

亦有许多研究表明多种中药活性成分有控制肿瘤细胞的生长、减少侵袭转移、促使肿瘤细胞凋亡、抑制血管生成等多种抗肿瘤疗效[7-11]。

毛蕊异黄酮(calycosin，CA)是黄芪中的一种异黄酮类化合物，有低毒性、靶点丰富等优点[12]。

有研究报告显示，毛蕊异黄酮可显著控制乳腺浸润性癌、肝细胞癌、宫颈癌、结直肠癌、骨肉瘤等多种肿瘤细胞的发生发展，并且在一定程度上能增加肿瘤细胞的凋亡[13-18]。

但毛蕊异黄酮对肺腺癌细胞凋亡的体内抑制研究较少。

为此，本课题组将以裸鼠作为研究对象，拟进一步探讨中药黄芪中的毛蕊异黄酮对肺腺癌细胞发生发展和凋亡的影响，为临床应用提供更多实验依据。

1材料与方法
1.1主要材料人肺腺癌细胞株SPC-A1(美国ATCC公司)，DMEM培养基(美国Invitrogen公司)，胎牛血清(天津灏洋公司)，毛蕊异黄酮(美国Selleck公司)，顺铂(江苏豪森药业股份有限公司)。

1.2方法
1.2.1实验药品及制备(1)毛蕊异黄酮配制：取毛蕊异黄酮对照品适量，用DMSO溶解，制成质量浓度为100μg/mL的贮备液，于4℃保持备用。

临用前，用磷酸盐缓冲液(PBS)将上述贮备液稀释至所需质量浓度即得。

(2)顺铂：原药为5g/L，用生理盐水稀释25倍，即0.2g/L，常温保存。

1.2.2细胞培养取人肺腺癌细胞株SPC-A1适量，用含10%FBS的RPMI1640培养基(以下简称“完全培养基”)于37℃、5%CO2培养箱(下同)中培养，每
36h更换1次培养基。

待细胞融合至80%~90%时，用0.25%胰酶消化传代，选取对数生长期的细胞进行后续试验。

并制备5×105个/mL浓度的细胞悬液，准备给裸鼠接种。

1.2.3动物模型建立及分组干预SPF级BCLB/C 裸鼠(购自遵义医科大学实验动物中心)适应性饲养1周后，按体质量标记1~30号，并记录实验前体质量。

然后腋下碘伏消毒后，将制备好的SPC-A1细胞悬液经腋下皮下注射，浓度为5×105个/mL，每只裸鼠0.2mL，肉眼观察形成皮丘，确认皮下注射无误，正常饲养一周，令裸鼠荷瘤。

每隔一日观察裸鼠成瘤情况。

一周后，根据裸鼠成瘤情况，以肉眼可见的直径大于等于0.5cm 的实体瘤为成瘤标准，剔除未成瘤裸鼠。

保留已建立成功的肺腺癌SPC-A1细胞裸鼠18只，根据裸鼠体质量及瘤体大小将荷瘤裸鼠随机均分为模型对照组、毛蕊异黄酮组、顺铂对照组，每组6只。

各组经腹腔注射分别予以0.9%生理盐水、毛蕊异黄酮、顺铂进行干预
(0.5mL/只，1次/d，连续7d)。

1.2.4标本采集末次给药后2h，称量裸鼠实验后体质量，并记录。

然后经腹腔注射10%水合氯醛，过量麻醉法处死裸鼠，将裸鼠尸体置于冰面上，以游标卡尺测定瘤体横径和纵径，并记录。

然后，切开瘤体表面皮肤，剥离瘤体，称量瘤体质量量并记录后，以手术刀切开，均分为两部分，一部分放2mL冻存管中，-80℃冰箱保存，以便之后用于Western blot法检测蛋白表达水平；另一部分浸泡于4%多聚甲醛溶液中，常温固定，用于TUNEL法检测细胞凋亡的发生率。

1.2.5记录裸鼠瘤重及抑瘤率切开瘤体表面皮肤，剥离瘤体，电子天平称量瘤体质量量并记录，根据各组肿瘤重量计算抑瘤率；抑瘤率=[模型组瘤重－实验组瘤重]/模型组瘤重。

1.2.6TUNEL法检测各组裸鼠瘤细胞凋亡数将处理好的切片标本用PBS液将预处理的样本漂洗两次，再用滤纸吸干样本周围水滴；每个样本滴加50μL TdT酶反应液，加盖盖玻片37℃避光湿润反应60min (阴性对照片不加TdT酶)，PBS漂洗三次，DAB显色；荧光显微镜下观察肿瘤细胞凋亡情况，并计算凋亡细胞数，操作严格按说明书进行。

结果判断：每只裸鼠选取3张切片进行观察,每张切片在显微镜下(20×10)选取5个互不重叠视野,计数阳性细胞数，取均值为一只裸鼠的结果。

1.2.7蛋白免疫印迹法(Western blot，WB)检测裸鼠移植性肺癌细胞凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax的表达配置裂解液，碧云天生产的WB及IP细胞裂解液，加入蛋白酶抑制剂，置于冰面上备用。

取出裸鼠肿瘤样本，称重，按照样本重100mg与裂解液体积1mL的比例加入裂解液。

高速电动匀浆机制备匀浆液，然后将匀浆液置于冰面上静置，在0℃下以12000r/min离心15min，取上清液，即为总蛋白。

采用BCA法进行蛋白定量。

严格按相应试剂盒说明书方法操作。

蛋白经5×蛋白上样缓冲液以体积比1∶4稀释，在沸水浴中变性5min，于-80℃保存，备用。

每组取上述蛋白30μg，进行SDS-PAGE电泳，电泳结束后转移至PVDF膜上，浸泡于5%BSA封闭液中，室温摇床上封闭1h。

将其放入一抗稀释液中，4℃孵育过夜。

次日取出PVDF膜，以TBST缓冲液充分洗涤6次。

用5%BSA封闭液稀释二抗，然后将PVDF 膜浸泡其中，室温摇床上孵育2h。

二抗反应结束后，以TBST缓冲液充分洗涤6次。

暗室中用X胶片感光、显影、定影。

扫描胶片，用凝胶图像处理系统分析目标条带灰度值，并以目的蛋白灰度值/内参蛋白灰度值的比值作为该蛋白的相对表达水平。

1.3统计学方法应用SPSS21.0统计软件分析所有数据。

计量资料以均数±标准差(x
-±s)表示，多组间比较采用单因素方差分析或重复测量设计的方差分析，进一步两两比较采用LSD-t检验。

以P<0.05为差异有统计学意义。

2结果
2.1成功建立肺腺癌SPC-A1细胞裸鼠移植瘤模型SPC-A1细胞悬液接种后一周，成功建立裸鼠移植瘤模型。

经实验前后对比，实验前各组裸鼠体质量比较差异无统计学意义(P>0.05)；实验后，模型对照组裸鼠体质量较毛蕊异黄酮组下降更明显，差异有统计学意义(P<0.05)；顺铂组较毛蕊异黄酮组体质量下降更明显，差异有统计学意义(P<0.05)。

表明毛蕊异黄酮对体质量的影响不大，与其低毒性的优势具有一致性，见表1。

2.2毛蕊异黄酮对SPC-A1裸鼠移植瘤生长的影响干预后的裸鼠经麻醉后处死，取出瘤体，并称重，比较实验后裸鼠瘤体变化；实验后毛蕊异黄酮组瘤重较模型对照组明显降低，差异有统计学意义(P<0.05)；毛蕊异黄酮组与顺铂组瘤重比较差异无统计学意义(P>0.05)，毛蕊异黄酮组抑瘤率为18.33%，提示毛蕊异黄酮对肺腺癌的生长有一定抑制作用，见图1和表2。

表1各组小鼠实验前后的体质量比较(x
-±s，g)
Table1Comparison on the weight of the mice among the three groups before and after experiment(x-±s,g)
组别
模型对照组
毛蕊异黄酮组
顺铂组
F值
P值
只数
6
6
6
实验前
20.50±0.36
20.13±0.48
20.02±0.43
0.343
0.715
实验后
16.75±0.30b
19.63±0.39ab
14.67±0.59a
31.63
0.001
注：与模型对照组比较，a P<0.05；与顺铂组比较，b P<0.05。

Note:Compared with the model group,a P<0.05;Compared with the cisplatin group,b P
<0.05.
图1各组小鼠瘤体纵径情况
Figure1Longitudinal diameter of the mice in each group
注：A，模型对照组；B，毛蕊异黄酮组；C，顺铂组。

Note:A,The model group;B,the calycosin group;C,the cisplatin group.
表2各组小鼠SPC-A1肿瘤生长情况比较(x
-±s)
Table2Comparison on the tumor growth of SPC-A1cell among the
three groups(x-±s)
组别
模型对照组
毛蕊异黄酮组
顺铂组
F值
P值
只数
6
6
6
瘤重(g)
1.20±0.19
0.98±0.14ab
0.83±0.12a
8.653
0.003
抑瘤率(%)
-
18.33
30.83
注：与模型对照组比较，a P<0.05；与顺铂组比较，b P<0.05。

Note:Compared with the model group,a P<0.05;Compared with the
cisplatin group,b P<0.05.
2.3毛蕊异黄酮对SPC-A1裸鼠移植瘤组织中细胞凋亡的影响TUNEL实验结果显示，毛蕊异黄酮组细胞凋亡数较模型对照组明显增加，但不及顺铂组，差异均有统计学意义(P<0.05)，表明毛蕊异黄酮对SPC-A1肺腺癌细胞具有一定的促进细胞凋亡的作用，见图2和表3。

2.4毛蕊异黄酮对SPC-A1裸鼠移植肿瘤组织中凋亡的影响Bax、Bcl-2与细胞凋亡密切相关，根据Western blot结果显示：与模型对照组比较，毛蕊异黄酮组促凋亡相关蛋白Bax的蛋白表达量明显升高，抑凋亡相关蛋白Bcl-2的蛋白表达量明显降低，差异均有统计学意义(P<0.05)。

结合TUNEL检测的细胞凋亡数，表明毛蕊异黄酮对SPC-A1肺腺癌细胞的凋亡确有一定的促进作用，见图3。

表3各组瘤体细胞凋亡情况(x
-±s，%)
Table3Apoptosis of tumor cells in each group(x-±s,%)
组别
模型对照组
毛蕊异黄酮组
顺铂组
F值
P值
只数
6
6
6
凋亡率(%)
10.00±0.82b
32.43±1.99ab
111.47±7.02a
158.258
0.001
注：与模型对照组比较，a P<0.05；与顺铂组比较，b P<0.05。

Note:Compared with the model group,a P<0.05;Compared with the cisplatin group,b P
<0.05.
图2各组裸鼠肿瘤细胞凋亡情况(FITC，×200倍)
Figure2Apoptosis of tumor cells in nude mice in each group(FITC,×200)
注：A，模型对照组；B，毛蕊异黄酮组；C，顺铂组。

Note:A,The model group;B,the calycosin group;C,the cisplatin
group.
图3Western blot法检测各组裸鼠SPC-A1肺癌细胞凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax蛋白表达Figure3The expression of the apoptosis-related proteins Bcl-2and Bax in SPC-A1cells of nude mice was determined by Western blot 注：A，各组凋亡相关蛋白柱状图；B，各组凋亡相关蛋白检测条带图。

与模型对照组比较，a P<0.05；与顺铂组比较，b P<0.05。

Note:A,Histogram of apoptosis-related proteins in each group;B,Bands of apoptosis-related proteins in each pared with the model group,
a P<0.05;Compared with the cisplatin group,
b P<0.05.
3讨论
在中医中认为，肺癌是由外来邪毒、内伤七情、饮
食不节、脏腑功能失调等多种因素长期共同作用的结
果，正气虚损是形成肿瘤的内因，邪毒外侵是形成肿
瘤的外因，其主要是由于正气虚损、阴阳失调，六淫之
邪乘虚入肺，导致肺脏功能失调，从而致病。

中医在
中国有几千年的诊治历程，在肿瘤综合治疗中具有特
殊的临床地位。

由林丽珠等[19]专家编写的专家共识当
中，根据肺癌整个治疗过程中的不同证型，予以相应
的中医药治疗，可增强肺癌患者免疫力、提高患者生
活质量等。

段海婧等[20]的关于非小细胞肺癌的一项中
医证型及可视化分析中显示，非小细胞肺癌病位在
肺，以肺脾气虚和气阴两虚证为主，其中黄芪在肺癌
的使用中频次较高，中医药方中应用较为广泛。

黄芪
药性甘温，主归肺、脾经，是补中益气的要药，善补脾
肺，用于肺气虚弱，咳喘日久等治疗。

毛蕊异黄酮作为黄芪的活性成分之一已有研究
报道，毛蕊异黄酮在抑制肿瘤的发生发展中具有一定
疗效，如降低肿瘤细胞的黏附、阻止癌症细胞的浸润和转移、对细胞信号传导的调节、防止致癌和突变等多种药理效应。

细胞凋亡与肿瘤进展息息相关，多种肿瘤经毛蕊异黄酮干预后，对抑制肿瘤细胞生长、促进肿瘤细胞凋亡有一定作用。

刘金程等[21]的实验结果表明，毛蕊异黄酮通过调节Cleaved Caspase-3、Bax/ Bcl-2等的蛋白表达高低来提高肿瘤细胞凋亡率。

历婷等[22]的研究提示，毛蕊异黄酮可能通过激活p53和Caspase-3通路来抑制人卵巢上皮性癌细胞SKOV3增殖和诱导凋亡，达到抗肿瘤的作用。

Liu等[23]的生物信息学的发现以及相关验证表明，毛蕊异黄酮抗鼻咽癌的靶点可能包括TP53、MAPK14、Caspase-8等，经过毛蕊异黄酮处理后，可增加鼻咽癌细胞的凋亡率和降低鼻咽癌细胞的存活率。

实验数据显示，毛蕊异黄酮经过EGFR/P13K/Akt、p38-MAPK、EGFR/MAPK等通路诱使细胞凋亡或激活线粒体等途径调控肿瘤细胞的一系列行为[14,16，24-25]。

本研究项以裸鼠为主要研究对象，顺利构建肺腺癌SPC-A1细胞裸鼠移植瘤模型。

通过裸鼠实验前后体质量对比，模型组较毛蕊异黄酮组下降更明显，考虑肿瘤对裸鼠自身的消耗所致；顺铂组较毛蕊异黄酮组下降更明显，考虑部分原因与顺铂对消化道毒副作用有关，从而导致营养摄入不足；而毛蕊异黄酮组实验前后体质量变化不大，这与毛蕊异黄酮的低毒性具有一致性。

结合本研究的瘤重结果，毛蕊异黄酮组较模型对照组明显下降，差异有统计学意义(P<0.05)，其抑瘤率为18.33%，推测毛蕊异黄酮对肺腺癌细胞的生长具有一定的阻抑作用；毛蕊异黄酮组和顺铂组对比，两组瘤重的差异无统计学意义(P>0.05)，顺铂组抑瘤率为30.83%，顺铂对肿瘤的生长抑制更加显著。

参照前期体外试验结果显示，随着毛蕊异黄酮剂量的增加，对SPC-A1细胞的诱导凋亡作用更加明显[26]。

本研究进一步完成体内实验，采用TUNEL法检测毛蕊异黄酮对裸鼠肺腺癌移植瘤凋亡作用的影响，数据揭示，经毛蕊异黄酮作用于SPC-A1肺腺癌荷瘤裸鼠后，该组裸鼠的凋亡细胞数目明显增加，差异有统计学意义(P<0.05)。

细胞凋亡是为了维持内环境稳定所进行的一项自主性的有序的死亡，其受到许多基因的激活、表达等一系列复杂的调控才能完成。

细胞凋亡的机制尚不完全清晰，目前所探索到的通路主要有细胞凋亡的膜受体通路、细胞色素C释放和Caspases激活的生物化学途径。

后者的调控通路中，线粒体是细胞凋亡的调控中心，Bcl-2家族在其间发挥着重要作用。

在Bcl-2家族中，Bcl-2与Bax是调控凋亡的重要参与因子，Bcl-2作为线粒体膜上的癌基因，通过调节内源途径发挥抑制凋亡的作用，而Bax基因是目前人体中最关键的凋亡基因，编码的Bax蛋白与Bcl-2蛋白组成异二聚体，促进细胞的凋亡，两者的高低变化对细胞凋亡产生直接影响[27-28]。

在大量研究中揭示，毛蕊异黄酮呈剂量依赖性的对Bax/Bcl-2进行调节从而促进乳腺癌、宫颈癌、骨肉瘤、肝癌的凋亡作用[13,18,29-30]。

为进一步探索毛蕊异黄酮促进肺癌细胞凋亡的机制，本研究的Western blot结果揭露毛蕊异黄酮能上调促凋亡相关蛋白Bax的表达，同时减少抑凋亡相关蛋白Bcl-2的表达。

再结合TUNEL法的检测结果，揭示毛蕊异黄酮确实能有效诱导SPC-A1肺癌细胞凋亡的作用，推断毛蕊异黄酮诱导凋亡的机理可能与凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax的表达以及两者对线粒体的形态及功能的影响有关。

此外，根据本研究实验后体质量及瘤重结果显示，毛蕊异黄酮对SPC-A1肺腺癌细胞有一定杀伤作用，并且可显著降低肿瘤生长速度，这与前期的实验结果不谋而合。

结合本实验结果，毛蕊异黄酮能在一定程度上抑制肿瘤生长，并且对诱导肺腺癌SPC-A1细胞的凋亡具有一定作用，这种作用可能与线粒体途径调控中凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax的表达有关。

本研究为肺癌的防治研究提供了一定的新思路，但毛蕊异黄酮对肺腺癌SPC-A1细胞的凋亡的详细机制以及是否能运用于临床仍有待于后续的研究进一步明确。

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(收稿日期：2022-06-25)。