E-cadherin启动子调控的慢病毒荧光报告载体的构建

E-cadherin启动子调控的慢病毒荧光报告载体的构建
何倩;杨耿兵;姚超;钱程
【期刊名称】《浙江理工大学学报》
【年(卷),期】2012(029)006
【摘要】E钙黏素(E-cadherin)的缺失是上皮-间质转化(EMT)的重要标志,而EMT 可促进肿瘤细胞的侵润及转移.为进一步研究E-cadherin与EMT的关系,研究构建了E-cadherin启动子驱动的黄色荧光蛋白慢病毒表达载体,构建的载体经酶切鉴定正确;采用磷酸钙法包装出慢病毒,取病毒上清感染人肝癌PLC/PRF/5细胞株,通过荧光观察和qRT-PCR实验结果显示E-cadherin在靶细胞中稳定高表达.该载体的构建为深入研究E-cadherin相关的EMT现象提供了良好的工具.%The loss of E-cadherin is a significant marker of epithelial-mesenchymal transition (EMT), which promotes the progression of tumor invasion and metastasis. To further examine the relationship between E-cadherin and EMT, the lentiviral vector with yellow fluorescent protein reporter gene driven by E-cadherin promoter is successfully constructed. The supernatant of virus-producing cells transfected by calcium phosphate is then used to transfect PLC/PRF/5 cells. The fluorescent microscopy and qRT-PCR results show that the E-cadherin gene is expressed highly and stably in the target cells. This work is expected to provide a high-quality transfection vector for further research on the relevant functions of the E-cadherin gene and EMT.【总页数】5页(P843-846,862)
【作者】何倩;杨耿兵;姚超;钱程
【作者单位】浙江理工大学生命科学学院,杭州310018;浙江理工大学生命科学学院,杭州310018;浙江理工大学生命科学学院,杭州310018;浙江理工大学生命科学学院,杭州310018
【正文语种】中文
【中图分类】Q78
【相关文献】
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