实验3 细菌淀粉酶产生菌的碳源谱

实验3 细菌淀粉酶产生菌的碳源谱
一、实验目的
（1）学习并掌握物理诱变实验操作基本技术。

（2）学习不同碳源对细菌淀粉酶产生菌的影响
二、实验原理
微生物的生长繁殖需要一定的营养物质，如碳源、氮源、无机盐、微量元素、生长因子等，如果缺少其中一种，或不能利用其中的某一种营养物质，便不能生长。

据此，把微生物接种在基本培养基上，把待测营养物质点植于基本培养基上，由于营养物可以在琼脂培养基中扩散，若微生物需要此种营养物质，便可生长出菌落。

未点植营养物质的其他各处，则不出现菌落。

此种测定微生物营养要求的方法称为生长谱法，生长谱法可以定性，定量地测定微生物对各种营养物质的需要。

三、实验材料与器材
（1）碳源：10%葡萄糖1.0g；10%木糖 1.0g；10%麦芽糖1.0g；10%蔗糖 1.0g；10%乳糖1.0g；10%果糖 1.0g。

每种碳源用9 mL蒸馏水配制，105℃灭菌20-25分钟。

（2）器材：培养皿〔2个〕、1mL移液管〔2支〕、玻璃刮铲〔1支〕、厌氧管〔6支〕、镊子、酒精灯、记号笔、牙签〔2根〕等。

（3）试剂：
碘 1 g
碘化钾 2 g
蒸馏水 300 mL
配制时，先将碘化钾溶于5~10 mL 水中，再加入碘1 g，使其溶解后，加水至300 mL。

四、实验内容
1.菌悬液的制备：取实验2的细菌淀粉酶产生菌，将3~5mL无菌水倒入斜面，洗下菌苔，摇床振荡15分钟，制成菌悬液。

2.每组取无菌培养皿两套，先用记号笔在平板底面划分六个区，记上欲滴加的各种碳源的名称，皿盖注明班级、组别。

然后将融化的基础培养基，倾注于无菌培养皿中，每皿约20mL，待凝备用。

3.向倒有培养基的培养皿各加入上述菌悬液0.1mL，用无菌玻璃刮铲涂布均匀。

用镊子将浸泡过各种碳源的小圆滤纸片，分别放在平板相应的培养基上，37℃恒温培养箱培养x小时后，观察生长情况。

4. 在平板菌类计数后，分别向菌落数在每个平板内加碘液数滴，在菌落周围将出现透明圈，分别测量透明圈直径与菌落直径并计算比值(HC 值)，与对照平板进行比较.
根据结果说明紫外线对细菌产淀粉酶诱变的效果，选取HC 比值大的菌落移接到新鲜牛肉
膏斜面上培养。

五、实验结果报告 （1）.
（2）
碳源类型
葡萄糖
木 糖 麦芽糖
蔗 糖 乳 糖 果 糖 菌 体 生 长
状 况 菌落颜色 培养皿1 培养皿2 pH 值
培养皿1 培养皿2 菌落数量
培养皿1 培养皿2。