试验小篮子法测定种子呼吸速率

注意事项
? 防止口中呼出的气体进入广口瓶！ ? 滴定时使用有孔的盖子，通过小孔进行滴定！
思考题
? 本实验中哪些操作步骤对结果影响较大？
实验七 种子活力的测定 （p215－218）
? 测压法、氧电极法是测定植物呼吸过程对 O2的 吸收，样品用量少，且精确度高。利用红外线 CO2气体分析仪测定植物呼吸速率比较快速、 准确，是科研上常采用的方法。
1. 实验目的
1）学习呼吸强度的碱吸收测定方法； 2）比较不同类型植物材料的呼吸强度； 3）了解环境因素（如温度）对呼吸强度的
影响。
2. 实验原理（小篮子法）
实验六 环境温度对种子呼吸速 率的影响（p165－166）
小篮子法测定种子呼吸速率
呼吸速率的测定方法
? 呼吸速率是植物生命活动最重要的指标之一。 测定呼吸速率的方法很多，可以分成两大类： 测定吸氧速率或者测定放出 CO2速率。前者有 测压法、氧电极法；后者有小篮子法、红外线 CO2气体分析仪（ IRGA）等方法。
? 每毫升1／44 mol/l 的草酸相当于 1mg CO 2
3. 材料和仪器设备
1）材料：
发芽的小麦种子和煮死的小麦种子
2）仪器设备：
呼吸测定装置（小篮子）； 电子天平； 酸式及碱式滴定管。
3）试剂：
饱和Ba(OH)2 溶液 1／44mol/l 草酸溶液 酚酞指示剂
4. 实验步骤
1）取500ml 广口瓶3个， 标记为 1、 2、3号，瓶 口用橡皮塞塞紧，瓶塞 下面挂一铁丝小篮，以 便装植物样品，整个装 置即谓“广口瓶呼吸测 定装置”。
种子 （10g）
温度
死种子 室温
活种子 低温4°C
活种子 室温
3 活种子 高温40°C
Ba(OH)2 反应时间
20ml 20min
草酸体积
V0
V1
V2
V3
5. 数据记录与处理
处理 低温
空白滴定 处理滴定 空白与处理 呼吸速率
草酸用量 草酸用量 草酸用量差 （mgCO 2·g－1 （ml ） （ml ） 值（ml ） fw ·h－1）
Ba(OH)2 溶液
2）称取 10g 死种子，放入其中的一个小篮子中；再 称取3份活种子，每份 10g ，分别放入另外 3个小 篮子中；
3）分别在 4个广口瓶中准确加入 20ml 饱和Ba(OH) 2 溶液；
4）将3个放有活种子的小篮子分别挂在编号为 1－3 的广口瓶内，盖紧瓶塞，在低温（ 1号，冰箱冷 藏室）、室温（ 2号）和高温（ 3号，40°C）中 处理，经常摇动，以破坏碱液表面的硬膜；
5百度文库将放有死种子的小篮子挂在 0号广口瓶内，在 室温中按以上步骤处理；
6）20min 后，取出广口瓶中的小篮子，加入 1－ 2滴酚酞指示剂，盖紧瓶盖；
7）用草酸滴定广口瓶中的碱液至红色刚好消失 为止，记录空白及各个温度处理下的草酸用 量（记为 V0、V1、V2、V3）；
实验处理情况列表
编号
0
1
2
室温 高温
结果计算与分析
呼吸速率 v（mgCO 2·g－1 fw. ·h－1）：
v = （V0-Vn）X 草酸浓度 X CO2分子量 种子质量（ g）X 反应时间（ h）
=
（V0-Vn）X
1 44
20
X 44
10 X
60
= 0.3 X（V0-Vn）
上式中， V0：空白滴定用去的草酸量（ ml ） Vn：处理滴定用去的草酸量（ ml ）
? 植物进行呼吸时放出 CO2，计算一定的植物样 品在单位时间内放出 CO2的数量，即为该样品 呼吸速率。
? 呼吸放出的 CO2可用氢氧化钡溶液吸收，实验 结束后用已知浓度的草酸溶液滴定剩余的碱液， 从空白和样品二者消耗草酸溶液之差即可计算 出呼吸过程中释放的 CO2的量。
? Ba(OH)2 +CO2 →BaCO 3↓+ H2O ? Ba(OH) 2（剩余） + H2C2O4→BaC 2O4↓+ 2H2O