巴氏染色法
精子形态学染色液(巴氏法)
精子形态学染色液(巴氏法)简介：细胞学常规染色普遍使用巴氏(Papanicolaou)法，Papanicolaou Stain 最初仅用于检测阴道上皮雌激素水平以及生殖道念珠菌、滴虫等病原体。
橘黄G6与EA36或EA50联合使用，可将胞浆染成颜色鲜明的绿色、蓝色和粉色。
目前大多数实验室采用成品染液，所以每种染液应注意其改良后的最佳条件。
最终胞浆染色应透明可见，核染色质应很容易辨别出来。
目前改良的巴氏染色液含有多种离子，具有多色性染色效能。
染色后胞质鲜艳、透明性好以及核膜、核仁、染色质结构清晰。
Leagene 精子形态学染色液(巴氏法) 因精子及细胞内不同等电点的蛋白质在相同的酸度下带不同的电荷，能选择性地结合相应的染料而着色。
胞核由酸性物质组成，它与碱性染料的亲和力较强；而胞浆则相反，它含有碱性物质和酸性染料的亲和力较大细胞质染色特别采用针对于精子染色的改良EA50染色液，细胞核染色采用Leagene 自主研发的无毒改良型苏木素染色液，特别适用于精子的染色，亦可用于胸水、腹水、痰液等细胞样本的染色。
组成：自备材料：1、 固定液(如95%乙醇-乙醚固定液)2、 系列乙醇3、 0.5%盐酸乙醇分化液操作步骤(仅供参考)：1、 细胞涂片用等量95%乙醇-冰乙酸固定液固。
2、 80%的乙醇浸泡1min 。
3、 70%的乙醇浸泡1min 。
4、 50%的乙醇浸泡1min 。
编号 名称DA0191 4×20ml DA0191 4×100ml Storage 试剂(A): Lea 苏木素染色液 20ml 100ml RT 避光 试剂(B): 蓝化液20ml 100ml RT 试剂(C): 橘黄G6染色液 20ml100ml RT 避光使用说明书1份5、 蒸馏水或自来水浸泡或冲洗。
6、Lea 苏木素染色液染色。
7、自来水冲洗。
8、盐酸乙醇分化液分化或盐酸水溶液分化。
9、自来水冲洗。
10、蓝化液中蓝化4min 。
巴氏染色技术要点
巴氏染色巴氏（Papanicolaou）染色法是脱落细胞染色中最好的染色方法。
其适用于上皮细胞及间皮组织的标本。
是阴道脱落细胞检查中最常用的染色方法。
该染色法不但具有显示细胞核结构清晰，分色明显，透明度好，胞浆受色鲜艳等特点，而且所染标本不易脱色，可长久保存。
对如何染好巴氏染色，笔者有以下几点体会，报告如下。
1 EA 36染液pH值的测试EA 36染液的酸碱度对巴氏染色的成功起着关键性作用，EA 36染液由伊红、亮绿、桔黄及俾麦棕等染料配成。
伊红、亮绿、桔黄及俾麦棕等属于酸性染料。
在溶媒中其发色团是负离子部分。
发色团可与蛋白质中带正电的氨基结合，从而使胞浆显蓝色、绿色、桔黄色或红色。
但蛋白质所带正负电荷的多少是随溶液的pH值而改变的。
在偏碱环境中，蛋白质的羧基游离增多（带负电）。
在偏酸环境中蛋白质氨基游离增多（带正电）。
所以必须把染液pH值调至5.2为宜［1］。
EA 36染液pH的调节，可用石蕊试纸法，也可用酸度计测试。
当然用酸度计法最为准确。
但以上方法均比较麻烦，同时还要受到仪器设备的限制，不方便。
本文采用一种简单方便的方法。
即用10%磷钨酸及饱和碳酸锂溶液直接测试。
具体做法是，拿一张滤纸先滴少量染液于纸上，若滴染液处呈紫色，说明染液偏碱，则滴加少量10%磷钨酸。
若显绿色，说明染液偏酸，则滴加少量饱和碳酸锂。
并充分混匀。
直至染液滴在纸上既显绿色又有红色，颜色鲜艳为宜。
用此法测试染液pH同用石蕊试纸法测试一样，同样可获得满意的染色效果。
磷钨酸在染色过程中，不但作为媒染剂可增加染料的着色力。
同时磷钨酸与碳酸锂还是一对弱酸弱碱，实际上是一对缓冲剂。
可中和分色及蓝化时可能留下的少量酸或碱。
保证染色达到理想效果。
2 分色分色或酸化，对染色效果也很重要。
分色目的是去掉胞浆中染上的多余的苏木素，使胞核着色显示特异性。
因此，经分色后的胞浆在镜下观察应无色为佳。
若胞浆中还残留有苏木素染料，会影响EA 36染液的着色。
巴氏染色快速方法
95％乙醇固定（15min）→80%，50%酒精中各30秒—清水冲洗多次→苏木素染液
（3-5min）→清水冲洗三次→盐酸酒精分化数秒—碳酸锂蓝化30秒→水洗1-2分钟—50%，80%酒精中各30秒—95％乙醇漂洗2分钟→橙黄染液（1-3分钟）→95％乙醇漂洗2次，各10-20秒→EA36（2-5分钟）→95％乙醇漂洗2-5秒→95％乙醇漂洗2-5秒→无水乙醇漂洗→无水乙醇（2min）→二甲苯（2min时间浸泡）→中性树胶封片
1、取自然干燥涂片。
或涂片未干时放入95％
酒精固定（湿固定）涂片。
2、加A液4-6滴，染6-10分钟（夏天6分钟、冬天10分钟），用75%酒精冲洗。
（如浸染：先用水冲去多余染料，在放入75%酒精中1-2分钟取出，滴去多余酒精
后放入B液）
3、加B液4-6滴，染2-4分钟（夏天2分
钟、冬天4分钟），水洗，镜检。
巴氏染色原理
巴氏染色原理
巴氏染色原理是一种用于细胞核的染色方法，由德国科学家巴氏于1882年首次提出。
该方法通过染色剂与细胞核中的染色质结合，使其显现出不同的颜色，从而帮助科研人员观察和研究细胞核的结构和功能。
巴氏染色原理在生物学、医学和生物技术领域具有重要的应用价值。
巴氏染色原理的基本步骤包括固定、染色和洗涤。
首先是固定，即利用甲醛等化学物质使细胞固定在载玻片上，保持其形态和结构不变。
接着是染色，通过染色剂如甲苯胺蓝、伊红等与细胞核中的染色质结合，使其显现出特定的颜色。
最后是洗涤，将载玻片在适当的溶液中洗涤，去除多余的染色剂，使细胞核清晰可见。
巴氏染色原理的应用范围非常广泛。
在医学领域，巴氏染色原理被用于研究疾病的发病机制和病理变化，如癌症细胞的形态学特征和染色体异常。
在生物技术领域，巴氏染色原理被应用于基因工程和细胞工程中，帮助科研人员观察和分析基因的表达和调控。
在生物学领域，巴氏染色原理被用于研究细胞核的结构和功能，如染色体的形态和数量。
巴氏染色原理的优点在于操作简便、成本低廉、结果清晰可见。
然而，也存在着一些局限性，如染色效果受到固定和染色条件的影响，染色质与其他细胞结构的区分度不高等。
总的来说，巴氏染色原理作为一种重要的细胞核染色方法，在生物学、医学和生物技术领域具有重要的应用价值。
随着科学技术的不断进步，相信巴氏染色原理将会在更多领域得到广泛应用，为人类健康和科学研究做出更大的贡献。
宫颈液基细胞学涂片巴氏染色评分标准
宫颈液基细胞学涂片巴氏染色评分标准
宫颈刮片是指子宫颈刮片，子宫颈刮片巴氏的分级可以分为巴氏I级、巴氏II级、巴氏III级、巴氏IV级、巴氏V级五级，是子宫颈癌筛查的重要方法。
1、巴氏I级：属于正常范围，为正常的子宫颈细胞涂片。
2、巴氏II级：提示有炎症，细胞核增大，核染色质较粗，但染色质分布尚均匀，一般属良性改变或炎症。
临床分为IIA及IIB，IIB是指个别细胞核异质明显，但又不支持恶性，其余为IIA。
3、巴氏III级：可能存在可疑病变，主要是核异质，表现为核大深染，核形不规则或双核。
对不典型细胞，性质尚难肯定。
4、巴氏IV级：为高度可疑癌，细胞有恶性特征，但在涂片中恶性细胞较少。
5、巴氏V级：通常可以确诊为癌症，具有典型的多量癌细胞。
巴氏分级法的缺点是以级别来表示细胞学改变的程度，易造成假象，巴氏分级法已逐步被TBS分类法所取代。
巴氏染色原理
巴氏染色原理
巴氏染色原理是一种常用的细胞染色技术，用来对细胞或组织进行染色。
该原理是基于酚醛固定的原理，通过将细胞或组织固定在玻片上，然后处理它们使得它们能够与染料发生反应。
巴氏染色的步骤如下：
1. 固定：将细胞或组织浸泡在酚醛液中，使其固定在玻片上。
酚醛能够保持细胞或组织的形状和某些结构的完整性。
2. 脱水：通过将样本逐渐浸泡在濃度递增的酒精溶液中，使其逐渐失去水分。
这样做是为了减少细胞或组织内的水分，以便尽可能地提高染料对细胞或组织的亲和力。
3. 渗透：将细胞或组织浸泡在骨胶液中，使其充分浸润。
骨胶液能够渗透到细胞或组织的内部，使得染料更容易地与它们发生反应。
4. 染色：将染料溶液滴在样本上，使其与细胞或组织结合。
染料能够结合到不同的细胞或组织结构中，从而显示出不同的颜色或形态。
5. 清洗：将多余的染料以及其他杂质通过浸泡在去离子水中进行清洗。
这样可以让染色的结果更加清晰。
6. 封片：在玻片上涂上封片剂，以保护样本并固定染料。
这样可以使染色的结果保持较长时间。
通过巴氏染色原理，我们可以对细胞或组织进行染色，并观察它们的结构，从而得到更多关于它们的信息。
这种染色方法在细胞学和组织学研究中广泛应用，为我们研究生物体内部的结构和功能提供了重要的工具。
巴氏染色原理
巴氏染色原理
巴氏染色液的染色原理：
核酸等电点为PH1.5-2.0,当PH＞2.0时，能结合带正电荷的苏木素。
染料中的伊红、亮绿、橙黄等为酸性染料，俾士麦棕为盐基性染料，能与细胞浆中相反电荷的蛋白质结合，从而染出鲜艳的结构。
细胞学常规染色普遍使用巴氏（Papanicolaou）法，橘黄G与EA36或EA50联合使用可将胞浆染成颜色鲜明的绿色、蓝色和粉色，细胞中的细胞核是由酸性物质组成，它与碱性染料的亲和力较强；而细胞浆则相反，它含有碱性物质和酸性染料的亲和力较大。
巴氏染色液正是利用这一特性对细胞进行多色性染色，细胞经染色后能清晰地显示细胞的结构，胞质透亮鲜丽，各种颗粒分明，细胞核染色质非常清楚，从而较容易发现异常细胞。
HE染色和巴氏染色两种不同方法在宫颈液基细胞检查中应用价值
HE染色和巴氏染色两种不同方法在宫颈液基细胞检查中应用价值1. 引言1.1 背景介绍宫颈液基细胞检查是一种常见的癌症筛查方法，通过对宫颈细胞进行染色和观察，可以及早发现潜在异常细胞的存在，从而帮助医生及时进行治疗和干预。
而在宫颈液基细胞检查中，HE染色和巴氏染色是两种常用的染色方法。
HE染色是指用苏木精红染色液对细胞组织进行染色，然后通过镜检查细胞结构和形态的变化，从而判断细胞是否正常。
HE染色在宫颈液基细胞检查中具有较高的分辨率和清晰度，可以清晰显示细胞的核质比和细胞核的形态，有利于医生进行细胞学分析和诊断。
巴氏染色是一种特殊的染色方法，可以通过染色剂对细胞核进行染色，使异常细胞核在显微镜下呈现出特殊的形态和颜色。
巴氏染色在宫颈液基细胞检查中常用于检测细胞的DNA含量和核型，可以帮助医生判断细胞的恶性程度和预后。
HE染色和巴氏染色在宫颈液基细胞检查中发挥着重要的作用，它们可以相互补充，提高检测的准确性和灵敏度，为患者提供更准确的诊断和治疗方案。
1.2 研究目的研究目的是通过比较分析HE染色和巴氏染色两种不同方法在宫颈液基细胞检查中的应用价值，探讨它们在临床实践中的优劣势和适用范围。
具体来说，我们的研究目的包括以下几个方面：1. 比较HE染色和巴氏染色在宫颈液基细胞检查中的染色效果和细胞形态学分析的准确性，评估它们对细胞结构和形态的显现能力。
2. 探讨HE染色和巴氏染色在宫颈液基细胞检查中的操作流程和技术难易度，比较它们的操作成本和时间消耗。
3. 调查HE染色和巴氏染色在宫颈液基细胞检查中的临床应用情况和效果评价，探讨它们在筛查、诊断和预后评估等方面的作用及价值。
通过深入研究HE染色和巴氏染色在宫颈液基细胞检查中的不同应用价值，我们旨在为临床医生提供更具参考意义的细胞学诊断方法，促进宫颈疾病的早期发现和治疗，提高宫颈液基细胞检查的准确性和可靠性。
1.3 意义宫颈液基细胞检查是一种重要的筛查方法，可用于早期发现宫颈病变及癌变，对于提高宫颈癌的早期发现率和治疗效果具有重要意义。
巴氏染色流程及注意事项
巴氏染色流程及注意事项
以下是 8 条关于巴氏染色流程及注意事项的内容：
1. 嘿，你知道巴氏染色第一步是干啥不？那就是涂片的制作呀！就像建房子得先打牢地基一样重要呢！把样本均匀地涂在玻片上，可不能马虎哦！你想啊，要是涂得不好，后面不就全乱套啦？例子：你看这涂片，是不是得像精心雕琢的艺术品一样呀！
2. 接下来，固定可不能小看呀！就好比把东西紧紧抓住一样。
固定不好，后面染色就容易出问题哦！你说，这重要不重要呀？例子：要是不固定好，那颜色不就乱跑啦。
3. 染色啦染色啦！这可是关键的步骤哟！就像给画上色一样，得仔细把握好颜色的深浅和均匀度呀！你能想象颜色乱七八糟的样子吗？例子：看这颜色，得染得恰到好处才行呢。
4. 冲洗也得注意呀！冲得太狠或者不够都不行，就跟洗车似的，不能太粗暴也不能太温柔呀！不然会咋样呢？例子：哎呀，冲洗可得小心点，不能把好不容易染上的颜色给冲没了呀！
5. 脱水干燥也很关键呢！这就好像让东西变得干脆利落一样，可不能拖泥带水哟！要不然会影响效果呀！例子：这脱水干燥，得迅速干脆呀。
6. 透明也不能马虎呢！就像给东西罩上一层清晰的外衣一样。
做不好的话，前面的努力不就白费啦？例子：你想想，不透明好怎么能看清呀。
7. 封片也很重要哦！把染好的片子保护起来，就像给宝贝穿上保护衣一样。
这你能不重视吗？例子：封片封得好，才能好好保存呀。
8. 哎呀呀，整个巴氏染色流程就是这样啦，每个步骤都得认真对待呀！可千万别掉以轻心哦，不然就达不到好的效果啦！注意事项都记住了吗？一定要记住呀！
我的观点结论：巴氏染色需要仔细按照流程操作并注意各项事项，才能保证染色的质量和效果。
巴氏染色法的原理及结果判读
巴氏染色法的原理及结果判读巴氏染色法，这个名字听起来像是某个高深莫测的化学实验，其实它就是一招能让细菌乖乖现身的“魔法”。
想象一下，科学家们在实验室里忙得不可开交，手里拿着一根小刷子，像是在给细菌涂抹化妆品，其实他们是在为细菌“上妆”，把它们变得更加引人注目。
这样一来，我们就能一眼看出它们是好是坏了，真是方便极了。
说到原理，巴氏染色法其实就是通过不同的染料，把细菌染成不同的颜色。
你瞧，染料有的像春天的花朵一样鲜艳，有的则深沉得像秋天的落叶。
比如，细菌被染上了紫色，那就说明它们是革兰阳性菌，换句话说，它们就像是穿着紫色外套的小可爱。
而如果是红色的，那就不那么讨喜了，说明它们是革兰阴性菌。
这时候，不妨想象一下，紫色的菌儿在舞台上跳舞，红色的则在角落里默默呜咽，生怕被发现。
哎，说到这里，不得不提一下这个染色过程。
实验室里总是弥漫着各种奇怪的气味，仿佛是化学实验的调色板。
科学家们会把细菌涂抹在玻璃片上，然后用火焰轻轻烤烤，嘿，这一步就像是给细菌做个小烤箱烤熟的感觉。
加入染料，紫色的、红色的，调皮的细菌们就开始“洗澡”了。
洗完澡之后，水一冲，染料随之而去，留下的就是那一抹亮丽的色彩。
结果判读就是另一番风味了。
你瞧，显微镜就像是一扇魔法窗户，让我们能看到那些微小的细菌世界。
科学家们紧盯着显微镜，像是在看一场精彩的戏剧。
紫色的小家伙们个个活泼好动，像是在舞台上肆意挥洒，红色的则显得有些沉闷，仿佛在琢磨人生的哲学。
通过这些颜色的对比，科学家们能够判断细菌的种类和特性，真是了不起。
不过，巴氏染色法并不是一成不变的。
这些细菌也会耍点小花样，颜色不够明显，或许是染料不够给力，或者细菌太顽皮。
这时，科学家们就得耐心对待，重复实验，调试染料的浓度，像是在调配一杯完美的鸡尾酒。
只有这样，才能让细菌们的真实面貌展现无遗。
对于那些刚入门的小伙伴来说，巴氏染色法就像是一场有趣的游戏。
每一步都充满了惊喜，结果也让人忍不住想要分享。
巴氏染色原理及操作步骤
巴氏染色原理及操作步骤巴氏染色法就是脱落细胞染色中最好得染色方法.苏木素染液，细胞核内得染色质主要就是去氧核糖核酸（DNA，DNA得双螺旋结构中,两条链上得磷酸基向外，带负电荷，呈酸性，很容易与带正电荷得苏木素精碱性染料以离子或氢键结合而被染色。
苏木精在碱性溶液中呈蓝色，所以细胞核被染成蓝色。
分化：苏木素染色之后，用水洗去未结合在细胞上得染液，但就是在细胞核中结合过多得染料与细胞浆中吸附得染料必须用分化液 1 %盐酸酒精脱去，才能保证细胞核与细胞浆染色得分明，把这个过程称为染色得分化作用.因酸能破坏苏木素得醌型结构，使色素与组织解离，分化不可过度。
蓝化：分化之后苏木素在酸性条件下处于红色离子状态，在碱性条件下处于蓝色离子状态，而呈蓝色，所以分化之后用水洗去酸而中止分化，再用弱碱性水使苏木精染上得细胞核变呈蓝色，称蓝化作用,一般多用自来水浸洗即可变蓝，也可用温水（50度温水最佳）变蓝。
E A50 染液得酸碱度对于巴氏染色得成功起着关键作用,EA50染液由伊红、亮绿、等染料配成。
伊红、亮绿、橘黄等属于酸性染料，在溶解媒中其发色团就是负离子部分，发色团可与蛋白质中带正电得氨基结合，从而就是胞浆显蓝色、绿色、橘黄色或红色，但蛋白质所带正负电荷得多少就是随溶液得PH值而改变得，在偏碱环境中,蛋白质得羧基游离增多（带负电），在偏酸环境中蛋白质氨基游离增多（带正电），磷钨酸在染色过程中，不但作为媒染剂可增加染料得着色力，同时磷钨酸与碳酸锂还就是一对弱酸弱碱，实际上就是一对缓冲剂，可中与分化及蓝化时可能留下得少量酸或碱，保证染色达到理想效果，其适用于上皮细胞及间皮组织得标本,就是阴道脱落细胞检查中最常用得染色方法，该染色法不但具有显示细胞核结构清晰、分色明显、透明度好、胞浆受色鲜艳等特点•巴氏染色法将胞核染为深蓝色；鳞状上皮底层、中层及表层角化前细胞胞质染绿色，表层不全角化细胞胞质染粉红色，完全角化细胞胞质呈桔黄色；细菌:灰色；滴虫：淡蓝灰色；黏液：淡蓝色或粉红色；中性粒细胞与淋巴细胞、吞噬细胞胞质均为蓝色；红细胞染粉红色；高分化鳞癌细胞可染成粉红色或桔黄色；腺癌胞质呈灰蓝色。
巴氏染色的原理及临床应用
巴氏染色的原理及临床应用1. 原理介绍巴氏染色是一种常用的组织学和细胞学染色方法，用于将细胞核内的染色质显色出来。
这种染色方法起源于19世纪末的德国，由柏氏提出并得到广泛应用。
巴氏染色的原理是用甲醛固定切片中的细胞核，然后使用甲铋绿染色荧光染料，该染料能够选择性地结合DNA，从而使细胞核显色。
2. 巴氏染色步骤巴氏染色可以分为以下几个步骤：•备制甲铋绿染色溶液：将适量的甲铋绿溶解在染色液中，配制成甲铋绿染色溶液。
•制备切片：将待染色的组织细胞固定在切片上，通常使用甲醛进行固定。
固定后，再进行脱水和清洁等处理，使细胞能够完整地附着在切片上。
•染色处理：倒入甲铋绿染色溶液，对切片进行染色处理。
可以使用扩散法或浸漆法染色。
•清洁固定：用甲醇对切片进行清洁固定，使甲铋绿染色质牢固地附着在细胞核上，不易褪色。
3. 临床应用巴氏染色在临床中有广泛的应用，主要用于以下方面：3.1 组织学研究巴氏染色技术能够显色出细胞核以及核内的染色质，对于细胞结构的观察和研究具有重要意义。
通过巴氏染色，可以观察细胞核的形态、大小、排列以及核内的染色质分布情况，从而提供组织学研究的依据。
3.2 细胞学诊断巴氏染色在细胞学诊断中有着重要的应用价值。
通过观察细胞核的形态、核仁和核内的染色质分布情况，可以帮助医生诊断细胞异常和病变。
例如，在细胞学涂片中，巴氏染色可以帮助诊断宫颈癌、乳腺癌等恶性肿瘤。
3.3 分子生物学研究巴氏染色在分子生物学研究中也有着重要的应用。
通过观察细胞核的染色与分布情况，可以了解DNA的含量、形态和排列方式。
这对于研究遗传物质的结构与功能具有重要意义。
此外，巴氏染色染料甲铋绿还可以选择性地染出核仁，从而帮助研究核仁的结构与功能。
4. 研究进展近年来，随着生物学技术的发展和突破，巴氏染色技术也在不断更新和改进。
一些新型的染色剂和染色方法被提出并得到应用。
例如，用于核糖核酸的新型染色剂mORANGE，可以实现DNA和RNA的同步染色。
巴氏染色原理及操作步骤
巴氏染色原理及操作步骤巴氏染色法是脱落细胞染色中最好(de)染色方法.苏木素染液,细胞核内(de)染色质主要是去氧核糖核酸（DNA）,DNA(de)双螺旋结构中,两条链上(de)磷酸基向外,带负电荷,呈酸性,很容易与带正电荷(de)苏木素精碱性染料以离子或氢键结合而被染色.苏木精在碱性溶液中呈蓝色,所以细胞核被染成蓝色. 分化：苏木素染色之后,用水洗去未结合在细胞上(de)染液,但是在细胞核中结合过多(de)染料和细胞浆中吸附(de)染料必须用分化液1%盐酸酒精脱去,才能保证细胞核和细胞浆染色(de)分明,把这个过程称为染色(de)分化作用.因酸能破坏苏木素(de)醌型结构,使色素与组织解离,分化不可过度.蓝化：分化之后苏木素在酸性条件下处于红色离子状态,在碱性条件下处于蓝色离子状态,而呈蓝色,所以分化之后用水洗去酸而中止分化,再用弱碱性水使苏木精染上(de)细胞核变呈蓝色,称蓝化作用,一般多用自来水浸洗即可变蓝,也可用温水（50度温水最佳）变蓝.EA50染液(de)酸碱度对于巴氏染色(de)成功起着关键作用,EA50染液由伊红、亮绿、等染料配成.伊红、亮绿、橘黄等属于酸性染料,在溶解媒中其发色团是负离子部分,发色团可与蛋白质中带正电(de)氨基结合,从而是胞浆显蓝色、绿色、橘黄色或红色,但蛋白质所带正负电荷(de)多少是随溶液(de)PH值而改变(de),在偏碱环境中,蛋白质(de)羧基游离增多（带负电）,在偏酸环境中蛋白质氨基游离增多（带正电）,磷钨酸在染色过程中,不但作为媒染剂可增加染料(de)着色力,同时磷钨酸与碳酸锂还是一对弱酸弱碱,实际上是一对缓冲剂,可中和分化及蓝化时可能留下(de)少量酸或碱,保证染色达到理想效果,其适用于上皮细胞及间皮组织(de)标本,是阴道脱落细胞检查中最常用(de)染色方法,该染色法不但具有显示细胞核结构清晰、分色明显、透明度好、胞浆受色鲜艳等特点.巴氏染色法将胞核染为深蓝色；鳞状上皮底层、中层及表层角化前细胞胞质染绿色,表层不全角化细胞胞质染粉红色,完全角化细胞胞质呈桔黄色；细菌：灰色；滴虫：淡蓝灰色；黏液：淡蓝色或粉红色；中性粒细胞和淋巴细胞、吞噬细胞胞质均为蓝色；红细胞染粉红色；高分化鳞癌细胞可染成粉红色或桔黄色；腺癌胞质呈灰蓝色.巴氏染色(de)操作方法及注意事项染色有4个步骤：1、固定；2、核染色；3、胞浆染色；4、透明.主要达到以下要求：1、核(de)结构清晰；2、透明度高；3、分色恰当.一、固定固定(de)目(de)细胞制片(de)迅速固定是制片过程中关键(de)一步,否则会影响细胞学诊断(de)准确性.对于不同(de)标本需要不同(de)固定方法.最为常用(de)固定方法是95％酒精作为固定液(de)湿固定法.酒精作为一种脱水剂能够防止细胞内(de)酶捋蛋白质分解而自容,并凝固细胞内(de)物质如蛋白质、脂肪和糖类等,使其保持与组织生活相仿(de)成分,从而使细胞各部分,尤其核染色质易于着色.对于巴氏染色来说,酒精固定最为重要(de).如果酒精浓度不足引起(de)固定不佳,可造成细胞(de)人为变化,并可导致假阳性或假阴性(de)诊断.1、固定方法湿固定法：作为用95％酒精固定液固定(de)细胞学标本一定使用湿固定法.制片制备完后,趁标本新鲜而又湿润时,立即放入盛有95％酒精(de)固定缸内.制片在固定液内至少保持15-30min.固定时间通常不超过1周.这种制片染色后,颜色鲜艳,结构清晰.如果细胞制片需要送至另一实验室或邮寄他处染色时,可以固定15min后,把制片取出后立即密封(de)容器中或者使用甘油防止制片干燥.因为无论固定前或固定后(de)制片,如果发生干燥后都会影响染色(de)效果.2、固定注意事项固定液(de)过滤：为了防止细胞污染,凡是使用过(de)固定液,必须过滤后才能再使用.使用过长(de)固定液,必须用酒精相对密度计测定,酒精浓度低于90％时应该及时更换新液.湿固定(de)重要性：标本再新鲜时及时固定时保证染色效果(de)重要因素.如苏木素对细胞核(de)染色,巴氏染色中胞浆(de)特殊着色作用,均可因标本干燥后固定而大受影响.制片标本(de)邮寄：标本再固定15min后取出,立即加甘油数滴于制片上,装入密封(de)小盒中.实验室在收到标本后,先浸入95％酒精中,使甘油溶去,再进行染色.二、核染色1、苏木素液浸染时间一般在3-5min,但是必须随气温和燃料情况而酌情改变.夏季或放置较久(de)苏木素染液容易着色,时间要缩短；冬季或新配制(de)苏木素染液和应用已久较稀释(de)苏木素液不易着色,时间要延长.在使用苏木素染色时,一般有2种方法：1）过染法：首先有意识地进行深染,然后通过盐酸酸化过程使核染色趋于合适.这种方法能够在酸化过程中把胞浆内黏附多余(de)苏木素染料去掉,使胞浆染色更为鲜艳、清晰、多用于黏液多(de)标本.2）淡染法：在核染色过程中,严格掌握染色时间,使核染色适宜而不用盐酸酸化,但是胞浆中少量(de)苏木素会影响EA染色(de)质量.主要用于黏液少(de)标本,避免在酸化和自来水冲洗(de)过程中使细胞成片地脱落.在使用苏木素染色时,一定要每日进行过滤,否则苏木素结晶会影响染色(de)质量.一般苏木素染液可以使用较长时间,所以每日增加少量新鲜染液即可.2、碱化碱化亦称返蓝过程,可以使用饱和碳酸锂或3％氨水碱化,目(de)使苏木素及早显色,时间约数秒.更重要(de)是流水冲洗,可使蓝色显(de)更鲜艳.碱性溶液亦需要充分漂清才不会妨碍下一步(de)胞浆着色及标本制成后(de)颜色保存.分化和碱化溶液至少每天更换新液.三、胞浆染色胞浆染色在巴氏方法中亦称为OG—EA染色,它包括橘黄G（OG）和EA两部分染色.由于橘黄G是一种小分子染料,能够很快地作用于胞浆,一般染色时间不宜过长,通常1-2min.对于宫颈、阴道上皮中非正常角化细胞和角化型鳞癌细胞(de)胞浆中都可以出现鲜艳(de)橘黄色.四、封固制片封固制片对于避免空气干燥(de)影响,制片经长期存放不褪色是非常重要(de).一般使用24mm×50mm或24mm×60mm(de)盖玻片,用二甲苯调配(de)中性树胶进行封固.五、透明染色(de)最后一步是透明,使细胞(de)色度与细胞(de)重叠不致影响镜下检查.这是在脱水与制片封固之间(de)一项重要步骤.最常用(de)透明溶剂使二甲苯,二甲苯(de)折射率在,载玻片(de)折射率在,两者较为匹配.如果二甲苯溶液出现颜色或变得浑浊,一定要更换新液. 巴氏染色操作流程 95％乙醇固定（15min）→清水冲洗多次→苏木素染液（3-5min）→清水冲洗三次→蓝化→95％乙醇漂洗→橙黄染液（1-10s）→95％乙醇漂洗→95％乙醇漂洗→100%乙醇漂洗→EA50（3-5m）→95％乙醇漂洗→95％乙醇漂洗→无水乙醇漂洗→无水乙醇（2min）→二甲苯（2min）→中性树胶封片染色注意事项1、细胞核着色不佳（1）细胞核着色过浅：1）盐酸分化时间过长或苏木素染液时间过长.需要缩短分化时间或延长碱化时间；每日加入少量新鲜苏木素染液或重新配制苏木素液.2）在固定之前制片干燥.所以对巴氏染色(de)制片需要严格遵守湿固定(de)原则.3）自来水(de)PH值偏酸性.使用碱性溶液.（2）细胞核着色过深：1）盐酸溶液浓度不够.适当加入几滴盐酸以增加浓度.2）制片用高于95％以上浓度(de)酒精固定后可以出现染色过深.应用95％酒精固定.2、细胞浆着色不佳（1）如果全片内胞浆都淡染,则需要延长染色时间或更换新液.（2）如果胞浆不分色,均为浅红色.制片在固定前干燥或制片被有大量球菌样细菌影响胞浆染色.此情况可以适当增加染色时间能够部分纠正不分色状况.（3）胞浆染成灰色或紫色,是由于苏木素染色时间过长或盐酸分化不佳.经过褪色后重新苏木素可以纠正.（4）由于标本(de)不同,同样配方(de)EA染液可造成偏蓝、偏绿和偏红,对不同(de)标本应该使用不同(de)EA染液.一般认为,EA36和EA50用于妇科标本,而EA65或改良EA用于非妇科标本.（5）胞浆不分色(de)另一重要原因是由于EA染液(de)PH值不恰当所致.如染色为红色,可以加少许磷钨酸溶液纠正；如染色均为蓝色或绿色,可以加少许饱和碳酸锂溶液纠正.对于改良EA染液,每100ml 染液加入2ml冰醋酸后染色效果更佳；染液使用更持久。
HE染色和巴氏染色法
HE染⾊和巴⽒染⾊法HE染⾊和巴⽒染⾊法普通染⾊⼜称常规染⾊或HE（Haematoxylin and eosin）染⾊。
它是病理技术中最常⽤的⼀种⽅法，通过它可以做出病理诊断和发现寻求别的辅助⽅法，以达到准确，完整的病理诊断。
⼀、染⾊⽬的病理学的所有切⽚，都必须通过⼀种以上的染料，通过各种不同的⽅法，将切⽚中各种不同的物质，在不同染液的作⽤下，将其显⽰出来，使之在光学显微镜下，能够完全的观看各种结构。
例如，HE染⾊，好质量的切⽚可以清晰地显⽰出许多不同的结构，细胞核着蓝⿊⾊，细胞浆着粉红⾊，软⾻着蓝⾊等。
清晰的结构为诊断提供可靠的依据，因此，染⾊技术也是病理技术中的重要组成部分，必须不断地总结，⽅能提⾼。
如果染⾊不好，切⽚染⾊⼀团糟，红蓝不分，结构不清，层次不明，影响了镜下的观察，直接影响了临床诊断，染⾊结果的好坏直接关系到诊断的准确性。
⼆、染⾊的作⽤1．化学作⽤：所有的染⾊液中，可把它们分为两种类型，⼀种为酸性，另⼀种为碱性。
酸性染料中有染⾊作⽤的为阴离⼦；碱性染料中有染⾊作⽤的为阳离⼦，每个细胞也存在着两种物质，细胞核含的是酸性物质，细胞浆含的是碱性物质。
在染⾊时，细胞核中的酸性物质与苏⽊素染液中的阳离⼦发⽣作⽤，细胞浆中的碱性物质与伊红染液中的阴离⼦发⽣作⽤，由于反应的部位不同，结果着⾊有异。
2．物理作⽤：在染⾊过程中，染液中的⾊素微粒⼦浸⼊到被染组织的粒⼦间隙内，此时，因受分⼦的引⼒作⽤，⾊素微粒⼦被吸附⽽着⾊。
由于各种组织有不同的吸附能⼒和不同的吸附程度，因此就可显出来不同的颜⾊来。
⼀般来说，染⾊的学说还有许多，但说服⼒强的仅有上述两种。
但不管怎么样解释，实际上完成的每⼀种染⾊，都与上述两种学说分不开，它们的作⽤是相辅相成，同时存在的。
三、染⾊⽅法及步骤1．⼈⼯苏⽊素，伊红染⾊法（HE法）(1)切⽚浸⼊⼆甲苯中5-10min；(2)切⽚浸⼊⼆甲苯中5-10min；(3)100%酒精1min。
HE染色和巴氏染色法
HE染色和巴氏染色法普通染色又称常规染色或HE（Haematoxylin and eosin）染色。
它是病理技术中最常用的一种方法，通过它可以做出病理诊断和发现寻求别的辅助方法，以达到准确，完整的病理诊断。
一、染色目的病理学的所有切片，都必须通过一种以上的染料，通过各种不同的方法，将切片中各种不同的物质，在不同染液的作用下，将其显示出来，使之在光学显微镜下，能够完全的观看各种结构。
例如，HE染色，好质量的切片可以清晰地显示出许多不同的结构，细胞核着蓝黑色，细胞浆着粉红色，软骨着蓝色等。
清晰的结构为诊断提供可靠的依据，因此，染色技术也是病理技术中的重要组成部分，必须不断地总结，方能提高。
如果染色不好，切片染色一团糟，红蓝不分，结构不清，层次不明，影响了镜下的观察，直接影响了临床诊断，染色结果的好坏直接关系到诊断的准确性。
二、染色的作用1．化学作用：所有的染色液中，可把它们分为两种类型，一种为酸性，另一种为碱性。
酸性染料中有染色作用的为阴离子；碱性染料中有染色作用的为阳离子，每个细胞也存在着两种物质，细胞核含的是酸性物质，细胞浆含的是碱性物质。
在染色时，细胞核中的酸性物质与苏木素染液中的阳离子发生作用，细胞浆中的碱性物质与伊红染液中的阴离子发生作用，由于反应的部位不同，结果着色有异。
2．物理作用：在染色过程中，染液中的色素微粒子浸入到被染组织的粒子间隙内，此时，因受分子的引力作用，色素微粒子被吸附而着色。
由于各种组织有不同的吸附能力和不同的吸附程度，因此就可显出来不同的颜色来。
一般来说，染色的学说还有许多，但说服力强的仅有上述两种。
但不管怎么样解释，实际上完成的每一种染色，都与上述两种学说分不开，它们的作用是相辅相成，同时存在的。
三、染色方法及步骤1．人工苏木素，伊红染色法（HE法）(1)切片浸入二甲苯中5-10min；(2)切片浸入二甲苯中5-10min；(3)100%酒精1min。
(4)100%酒精1min。
巴氏染色评分标准
巴氏染色评分标准
巴氏染色是一种用于检测细胞形态和结构的常用染色方法，常用于细胞学检查。
其评分标准通常包括以下几个方面：
1. 细胞核的形态：正常的细胞核应该呈现圆形或卵圆形，核膜完整，核仁清晰。
如果细胞核形态异常，如核畸形、核深染或核仁不明显等，可能表示细胞存在病变。
2. 细胞质的颜色和质地：正常的细胞质应该呈现浅蓝色或浅粉色，质地均匀。
如果细胞质颜色异常，如变黄、变红或变绿等，或者细胞质质地不均匀，可能表示细胞存在病变。
3. 细胞的大小和形态：正常的细胞大小和形态应该相对一致。
如果细胞大小不一或形态异常，如出现多核、巨核或小核等，可能表示细胞存在病变。
4. 细胞核与细胞质的比例：正常的细胞核与细胞质的比例应该适中。
如果细胞核相对较大或细胞质相对较少，可能表示细胞存在病变。
5. 其他特征：还可能观察其他特征，如细胞的排列方式、是否有异常细胞群体等。
巴氏染色评分标准的具体细节和权重可能会因不同的实验室和临床应用而有所差异。
在解读巴氏染色结果时，通常需要结合临床病史、其他检查结果以及医生的专业知识进行综合判断。
HE染色和巴氏染色两种不同方法在宫颈液基细胞检查中应用价值
HE染色和巴氏染色两种不同方法在宫颈液基细胞检查中应用价值宫颈液基细胞检查是一种常见的肿瘤筛查方法，能够有效地发现宫颈癌前病变和早期宫颈癌。
在宫颈液基细胞检查中，HE染色和巴氏染色是两种常用的染色方法，它们各自具有不同的特点和应用价值。
本文将针对这两种方法在宫颈液基细胞检查中的应用价值进行分析。
首先我们来介绍一下HE染色和巴氏染色的基本原理和特点。
HE染色是一种目前使用最广泛的组织染色方法之一，它通过染色剂荧光素和伊红对组织细胞核和胞质进行染色，从而呈现出细胞的形态结构和细胞器的位置。
HE染色可以清晰地显示细胞核的形态和大小，有利于观察细胞的核质比和核浆比，对于评估细胞形态学特征具有重要的意义。
而巴氏染色则是一种着重于核糖核蛋白染色的方法，通过对细胞核蛋白质进行染色，能够显示核仁和染色质的位置和数量，有助于判断细胞增殖活性和核仁形态的异常。
在宫颈液基细胞检查中，HE染色和巴氏染色各自具有独特的应用价值。
HE染色能够清晰地显示细胞核的形态和大小，对于宫颈上皮细胞的形态学评估具有重要的意义。
宫颈液基细胞中如果出现异常细胞，通过HE染色可以清晰地显示细胞核的形态特征，有利于对细胞的形态学异常进行准确的判断。
巴氏染色能够显示细胞增殖活性和核仁形态的异常，对于宫颈上皮细胞的增生异常和恶性变化具有重要的提示作用。
通过对宫颈液基细胞的巴氏染色观察，可以发现细胞核仁的增生情况，有助于提醒医生对细胞增生异常的关注。
HE染色和巴氏染色在宫颈液基细胞检查中还能够相互补充，提高细胞检查的准确度。
通过两种染色方法的结合应用，可以更全面地观察和评估宫颈上皮细胞的形态学特征和细胞增生活性，有助于准确判断细胞是否出现异常，并提高对于宫颈癌前病变和早期宫颈癌的检出率。
综合应用HE染色和巴氏染色在宫颈液基细胞检查中具有重要的临床应用价值。
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巴氏染色液说明书
【产品名称】 巴氏染色液 【包装规格】
货号：DA0082
单瓶(盒)包装规格：100ml 、250ml 、500ml 、5000ml ；
套组(盒)包装规格：4×100ml/盒、4×250ml/盒、4×500ml/盒。
【预期用途】
主要用于对脱落细胞的组织细胞学染色。
【检验原理】
细胞学常规染色普遍使用巴氏(Papanicolaou)法，橘黄G 与EA36或EA50联合使用可将胞浆染成颜色鲜明的绿色、蓝色和粉色，细胞中的细胞核是由酸性物质组成，它与碱性染料的亲和力较强；而细胞浆则相反，它含有碱性物质和酸性染料的亲和力较大。
巴氏染色液利用这一特性对细胞进行多色性染色，细胞经染色后能清晰地显示细胞的结构，胞质透亮鲜丽，各种颗粒分明，细胞核染色质非常清楚，从而较容易发现异常细胞。
通过巴氏染色可反映出细胞在炎症刺激下和癌变后的形态学变化，对早期发现和诊断一些病变和肿瘤具有较重要意义。
【主要组成成分】
试剂组成
主要成分 l 、苏木素染色液
苏木素 2、1%盐酸乙醇分化液 盐酸、乙醇 3、橘黄G 染色液
橘黄G
4、EA50染色液或EA36染色液
EA50染色液：淡绿、伊红、磷钨酸、冰乙酸； EA36染色液：淡绿、伊红、磷钨酸
【储存条件及有效期】
5℃～35℃环境保存，原包装未开封染色液的有效期为18个月，在有效期内的已开封染色液建议在开封后6个月内使用完，每次用后应及时拧紧瓶盖，以免挥发或变质。
【样本要求】
新鲜标本涂片后，应尽快用95%乙醇固定，以避免细胞变形。
【检验方法】
1、固定：将细胞涂片置于95%乙醇中固定；
2、染色，按要求进行染色。
3、二甲苯透明，中性树脂封片，镜检。
【检验结果的解释】
【检验方法的局限
性】
仅供形态学初检观察染色使用。
【注意事项】
1、冬季气温较低时，苏木素染色液不易着色，可适当延长染色时间。
细胞核
蓝紫色或黑色 非角化细胞的胞质 淡蓝色或淡绿色 角化细胞的胞质 粉红或橘黄色 红细胞 鲜红色或橙红色 粘液
淡蓝或粉红色
2、橘黄G染色液染色时间不宜过长，且在乙醇中要尽量洗净多余的染色液，否则会影响EA50染色液或EA36染色液的着色。
3、请不要将新旧批号的EA50染色液或EA36染色液混合使用。
4、该试剂盒贮存时，尽量避免高温及光亮环境以免影响品质和效果
5、本产品仅用于体外诊断，应由专业人士使用及进行结果的判读。
6、使用前应详细阅读说明书，并做好个人卫生防护，在有效期内使用，生产日期、生产批号和失效日期见包装。
7、用后应按医院或环保部门要求处置废弃物。
【基本信息】
备案人/生产企业名称：安徽雷根生物技术有限公司
住所：淮北凤凰山经济开发区凤冠路三期标准化厂房三号厂房。