编制说明-飞行时间质谱校准规范-v12

3、术语和计量单位
本部分对《飞行时间质谱仪校准规范》中使用的名词术语进行了定义，包括 相对相对原子质量、质荷比、分辨（能）力、信噪比、稳定性等。
4、概述
本部分主要用文字和图示的方式阐述了飞行时间质谱仪的用途、原理和结 构。
5、计量特性
本部分规定了飞行时间质谱仪的计量特性，经过对厂家和用户的调研（附录 A），选择了示值误差、信噪比、分辨力、重复性、稳定性 5 个指标作为飞行时间 质谱仪的计量特性指标。根据《JJF 1071 - 2010 国家计量校准规范编写规则》的 要求，计量特性指标中没有给出各项计量特性指标的具体限定值，但是，当用户 要求时，可以根据用户提供的计量特性的最大允许误差质谱仪校准规范》 （报批稿） 编写说明
中国计量科学研究院 广东省计量科学研究院 南京市计量监督检测院
2013 年 5 月
《飞行时间质谱仪校准规范》（报批稿） 编写说明
一、任务来源 根据国家质量监督检验检疫总局 2009 年国家计量技术法规计划（国质检量
函〔2009〕393 号）立项，由中国计量科学研究院、广东省计量科学研究院和南 京市计量监督检测院共同承担《飞行时间质谱仪校准规范》的制定工作。 二、规范制定的必要性
在标准物质部分，规定了进行飞行时间质谱仪校准时所用的标准物质。考虑 到用户要求的不同，示值误差校准时应选择能够均匀覆盖所校区间内 3-5 个质荷 比的一种或多种分子量国家有证标准物质进行校准，具体种类不做要求；重复性 和稳定性校准时应选择所校区间中段附近一种分子量国家有证标准物质进行校 准，其不确定度水平应当满足用户对校准结果的需求；信噪比和分辨力校准时使 用[Glu1]-人纤维蛋白肽 B 国家有证标准物质，其含量定值结果相对扩展不确定 度不应大于 10%（k=2）。飞行时间质谱仪校准时应采用国家有证标准物质，如果 标准物质证书中已经规定了标准物质的使用方法，按照标准物质证书中要求使用 即可；如果标准物质证书中没有给出具体的使用方法或配制方法，则需要检定员 自行配制校准用的标准溶液，所需化学试剂包括：水、甲酸、乙腈、三氟乙酸、 α-氰基-4-羟基肉桂酸、芥子酸，应优先选用质谱级的试剂。具体的配制方法在 附录 A 中进行了描述。
论列入校准证书。
6、校准条件
本部分主要规定了飞行时间质谱仪校准时需要满足的环境条件，以及使用的 标准物质。
在环境条件中，首先要求了实验室环境应当满足仪器的安装要求，不得存在 强烈的机械振动和电磁干扰，校准温度时实验室温度应当控制在（15-30）℃， 相对湿度不大于 80％。为防止环境温度改变引起的飞行时间质谱测定结果的漂 移，要求校准过程中环境温度变化小于 3 ℃。
《飞行时间质谱仪校准规范》包括封面、扉页、目录、引言、范围、引用文 件、术语和计量单位、概述、计量特性、校准条件、校准项目和校准方法、校准 结果表达、复校时间间隔以及附录几个部分，根据《JJF 1071-2010 国家计量校 准规范编写规则》撰写。
1、引言
《飞行时间质谱仪校准规范》主要参考了《GB/T 6041-2002 质谱分析方法通
7、校准项目和校准方法
本部分主要针对飞行时间质谱仪示值误差、信噪比、分辨力、重复性、稳定 性的计量特性的具体测定方法作出了要求。并对电喷雾质谱仪和基质辅助激光诱 导解吸飞行时间质谱仪两类不同原理的仪器分别具体描述了校准方法。
在进行示值误差校准时，如果是电喷雾质谱仪，直接采用流动注射的方式进 行校准。为了保证质荷比测定结果的准确性，在校准之前应当调节合适的流动注 射流速和调谐条件，确保仪器工作状态正常，信号灵敏度适中，检测器未达到饱
则》，依据《JJF 1071-2010 国家计量校准规范编写规则》、《JJF 1059.1-2012 测量 不确定度评定与表示》等完成规范的制定，这是本规范的首次发布。
2、范围
本规范适用于电喷雾-飞行时间质谱仪和基质辅助激光诱导解吸飞行时间质 谱仪的校准，其它类型的飞行时间质谱仪可参照本规范进行校准。
飞行时间质谱仪是一种高分辨质谱仪，这类仪器的质量分析器是一个离子漂 移管。由离子源产生的离子加速后进入无场漂移管，并以恒定速度飞向离子接收 器。离子质量越大，到达接收器所用时间越长，离子质量越小，到达接收器所用 时间越短，根据这一原理，可以把不同质量的离子按质荷比的大小进行分离。与 高端的傅立叶变换离子回旋共振质谱仪、离子阱静电场轨道阱质谱仪相比，飞行 时间质谱仪具有可检测的分子量范围大，扫描速度快，仪器结构简单，价格便宜 等优势。近年来随着蛋白质组学和代谢组学的发展，各实验室飞行时间质谱仪的 数量迅速增加，这些仪器除了被用于基础科研外，还被广泛地用于样品检测。据 不完全统计，各个检测和校准实验室每年使用飞行时间质谱仪出具的报告数量达 到 1000 份以上。根据《ISO/IEC 17025:2005 检测和校准实验室能力的通用要求》， 检测校准实验中使用的分析设备都应当经过检定或校准，以保证仪器的准确性和 测定结果的可溯源性，从而保证各个检测和校准实验室在不同时间、不同地点测 定结果的准确、可比。飞行时间质谱仪由于没有检定规程或者校准规范，无法对 仪器进行检定校准，已经成为当前实验室认可工作中的瓶颈之一。通过制定飞行 时间质谱仪校准规范，实现仪器的校准，可以保证我国飞行时间质谱仪出具检测 报告的准确有效，保护人民大众的健康，保证国际贸易的公平。 三、《飞行时间质谱仪校准规范》的制定过程
式中，
I M m,i M c,i M c,i
（1）
Mm,i:第 i 个质谱峰质荷比三次测定结果的算术平均值，单位 u；
Mc,i:第 i 个质谱峰质荷比的标准值，单位 u。
根据飞行时间质谱仪的结构及特点、飞行时间质谱仪在实际中的应用和仪器 生产厂家提供的信息，确定飞行时间质谱仪的计量特性；计量特性确定过程中也 参照了现行有效的质谱仪校准规范如《JJF 1164-2006 台式气相色谱-质谱联用仪 校准规范》、《JJF 1120-2004 热电离同位素质谱计校准规范》、《JJF 1158-2006 稳 定同位素气体质谱仪校准规范》中的计量特性指标。 4、标准物质选则的原则
（二）原则
1、架构 根据《JJF 1071-2010 国家计量校准规范编写规则》的要求，本规范架构上
包括封面、扉页、目录、引言、范围、引用文件、术语和计量单位、概述、计量 特性、校准条件、校准项目和校准方法、校准结果表达、复校时间间隔、附录几 个部分。 2、术语与计量单位的选择
术语和计量单位的选择遵照《JJF 1001-2011 通用计量术语及定义》选择使 用。 3、计量特性确定原则
基质辅助激光诱导解吸飞行时间质谱仪的校准应在线性模式下进行，如需在 反射模式下校准，可参照线性模式下的校准进行。校准前首先对仪器进行调谐， 确保仪器工作状态正常，信号灵敏度适中，检测器未达到饱和状态。在一级质谱 (MS)模式下进行质荷比测定相对示值误差校准时，应分别将能够均匀覆盖所校 区间内 3-5 个质荷比的一种或多种相对分子质量国家有证标准物质点在靶上，待 自然干燥后推入 MALDI 源中分别记录各个质谱峰的质荷比。每个质谱峰重复测 定三次取其平均值，根据公式（1）计算各个质谱峰质荷比测量值与标准值之间 的相对示值误差。测定二级质谱（MS/MS）模式下质荷比的相对示值误差时， 选择所校区间内至少 1 个子离子的质谱峰，所选子离子的质荷比应当覆盖用户提 出的校准区间或与用户感兴趣的校准点接近。重复测定三次质荷比取其平均值， 计算质谱峰质荷比测量值与标准值之间的相对示值误差。同样的，单级飞行时间 质谱仪不进行二级质谱（MS/MS）模式下质荷比测定示值误差的校准。由于受 到基质的干扰，基质辅助激光诱导解吸飞行时间质谱仪一般不对 500 以下质荷比 范围进行校准。
1、2008 年 4 月 28 日，起草小组向主要飞行时间质谱仪生产厂家安捷伦、沃 特斯、布鲁克、AB 和岛津公司发函，要求其提供各自生产的各种型号的飞行时 间质谱仪的质量数范围、质量准确度、信噪比、分辨力、质量数漂移、校准品等 信息，作为规范制定时的参考。随后，各个厂家相继返回相应信息。
2、随后，规范制定小组根据仪器生产厂家提供的信息起草了飞行时间质谱 仪校准规范初稿，2010 年 8 月在国林宾馆召开了第一次专家意见征求会。会议 邀请了长期从事计量和质谱分析的专家，规范起草小组向专家汇报了《飞行时间 质谱仪校准规范（初稿）》，专家针对《飞行时间质谱仪校准规范（初稿）》提出 了宝贵的意见和建议。
考虑到用户对质量轴校准范围及不确定度水平要求的不同，飞行时间质谱仪 校准时除信噪比、分辨力指标需要使用[Glu1]-人纤维蛋白肽 B 含量国家有证标准 物质外，其余指标校准均使用分子量国家有证标准物质，具体对象不做要求。根 据用户对校准结果不确定度的需求不同，选择具有合适不确定度分子量的国家有 证标准物质进行校准。 五、规范制定说明
（一）依据
《飞行时间质谱仪校准规范》主要参考了《GB/T 6041-2002 质谱分析方法 通则》，依据《JJF 1071-2010 国家计量校准规范编写规则》、《JJF 1059.1-2012 测量不确定度评定与表示》等完成规范的制定，这是本规范是首次发布。在本规 范制定过程中，也参考了现行有效的质谱仪校准规范，如《JJF1317-2011 液相色 谱-质谱联用仪校准规范》、《JJF 1164-2006 台式气相色谱-质谱联用仪校准规 范》、《JJF 1120-2004 热电离同位素质谱计校准规范》、《JJF 1158-2006 稳定 同位素气体质谱仪校准规范》等。
和状态。在对一级质谱（MS）模式下质荷比测定结果的示值误差进行校准时， 应当注入能够均匀覆盖所校区间内 3-5 个质荷比的一种或多种相对分子质量国家 有证标准物质进行校准，并在一级质谱（MS）模式下分别记录各个质谱峰的质 荷比。每个质谱峰重复三次取其平均值，根据公式（1）计算各个质谱峰质荷比 测量值与标准值之间的相对示值误差。测定二级质谱（MS/MS）模式下质荷比 的相对示值误差时，选择所校区间内至少 1 个子离子的质谱峰，所选子离子的质 荷比应当覆盖用户提出的校准区间或与用户感兴趣的校准点接近。重复测定三次 子离子质谱峰的质荷比并取其平均值，计算测量值与标准值之间的相对示值误 差。单级飞行时间质谱不进行二级质谱（MS/MS）模式下质荷比测定示值误差 的校准。