第二节细胞工程简介二动物细胞工程
2.2动物细胞工程
培养液和培养用具杀菌消毒 (4)无菌、无毒环境培养过程加抗生素杀菌 无菌、 无菌 定期更换培养液，清除代谢产物 定期更换培养液，
4．实践应用 ． (1)生产生物制品：病毒疫苗、干扰素、单克 生产生物制品： 生产生物制品 病毒疫苗、干扰素、 隆抗体等。 隆抗体等。 (2)与基因工程相结合。 与基因工程相结合。 与基因工程相结合 (3)检测有毒物质，判断某种物质的毒性。 检测有毒物质， 检测有毒物质 判断某种物质的毒性。 (4)科研方面：筛选抗癌药物、治疗和预防疾 科研方面： 科研方面 筛选抗癌药物、 病。
(2009年山东高考题 人类在预防与诊疗 年山东高考题)人类在预防与诊疗 年山东高考题 传染性疾病过程中，经常使用疫苗和抗体。 传染性疾病过程中，经常使用疫苗和抗体。 已知某传染性疾病的病原体为RNA病毒，该 病毒， 已知某传染性疾病的病原体为 病毒 病毒表面的A蛋白为主要抗原 蛋白为主要抗原， 病毒表面的 蛋白为主要抗原，其疫苗生产和 抗体制备的流程之一如下图。 抗体制备的流程之一如下图。
三、动物细胞融合与单克隆抗体制备 1．原理：细胞膜的流动性。 ．原理：细胞膜的流动性。 2．诱导融合的因素：聚乙二醇 ．诱导融合的因素：聚乙二醇(PEG)、灭活 、 的病毒、电激等。 的病毒、电激等。 3．意义：最重要的用途是制备单克隆抗体。 ．意义：最重要的用途是制备单克隆抗体。
4．单克隆抗体的制备 ． (1)过程： 过程： 过程
【答案】 (1)逆(反)转录 (2)限制性核酸内 答案】 逆 反 转录 限制性核酸内 切酶(限制性内切酶 限制酶) 限制性内切酶、 切酶 限制性内切酶、限制酶 DNA连接酶 连接酶 (注：两空顺序可颠倒 (3)细胞融合 杂交瘤 注 两空顺序可颠倒) 细胞融合 基因)序列 细胞 (4)A蛋白 核酸 基因 序列 抗A蛋白 蛋白 核酸(基因 蛋白 的单克隆抗体
动物细胞工程
二 动物细胞工程
动物细胞工程常用的技术手段
• • • • • 动物细胞培养 动物细胞融合 单克隆抗体 胚胎移植 核移植
动物细胞培养(目的)
1、过程：
动物胚胎或幼龄动 物的组织、器官
胰蛋白酶
动物组织细胞间隙中 分解蛋白质 细胞悬浮液 含有一定量的弹性纤 维等蛋白质，将细胞 原代培养 网络起来形成具有一 10代细胞 定弹性和韧性的组织 细胞株 和器官。
• 用于科学研究（生理、病理、药理）
动物细胞融合
1、过程： 细胞A 细胞B
仙台病毒
灭活的病毒 疱疹病毒
杂种细胞
新城鸡瘟病 丧失感染活 毒 性 保留融合活 性
2、用途： 制备单克隆抗体
植物、动物细胞融合的比较
比较项目 植物体细胞杂交 动物细胞融合 细胞膜的流动性 细胞的全能性 细胞膜的流动性
原理 细胞融合的方法
去除细胞壁后诱 使细胞分散后诱 导原生质体融合 导细胞融合 物理、化学方法 物理（离心、 振动、电刺激） （同左） 灭活的病毒（诱导剂） 化学（聚乙二醇）
诱导方法
用途
获得杂种植株
主要用于制备 单克隆抗体
灭活的病毒颗粒黏附于细胞表面
细胞Байду номын сангаас被病毒颗粒穿通
细胞膜连接
细胞融合，形成杂种细胞
抗原
一、单克隆抗体
应用：
• 生产蛋白质生物制品 • 检测有毒物质
– （许多致畸、致癌物质加入培养液后，培养细胞会发 生染色体结构和数目的变异。根据变异细胞占全部培 养细胞的百分数，可以判断某种物质的毒性。）
• 为烧伤病人植皮
– 利用动物细胞培养技术中细胞的贴壁生长和接触抑制 特点，可以用烧伤病人自己的健康皮肤细胞培养出大 量的自身薄层皮肤细胞供植皮所需。
人教版教学课件人教新课标版(选修3)细胞工程—第二节动物细胞工程1
植物组织培养和动物细胞培养的比较
比较项目 植物组织培养 动物细胞培养
原理 培养基性质
培养基特有成分
细胞的全能性 固体培养基 植物激素
细胞增殖 液体培养基 动物血清
培养结果
培养目的
植物体
快速繁殖、培育 无病毒植株等
细胞株、细胞系
大量获得细胞 或细胞产物
动物细胞培养应用
生产有价值的蛋白质制品（病毒疫苗、干扰素、
动物细胞工程
动物细胞与组织培养 细胞核移植与动物体细胞克隆
细胞融合和单克隆抗体制备
漯河高中丁鹏举 dpj7210@
动物细胞培养
定义：是指在体外模拟动物体内环境，将动物细
胞或组织在无菌、温度适宜和营养充足的条件下 培养，使其继续生长、增殖并维持原有结构和功 能的技术。
4.如何界定原代培养和传代培养；细胞株和细胞 系？
随细胞增多，细胞会出现接触性抑制
细胞株 细胞系遗传物质改变
细胞 悬浮 液
10代 细胞
50代 细胞
传代培养
无限传 代
原代培养
多数组织细胞粘附在培养 瓶表面生长和分裂。
动物细胞培养条件：
1、无菌、无毒的环境： （添加一定量的抗生素；定期更换培养液，以便清除代 谢产物。） 2、营养物质： （葡萄糖、氨基酸、核酸、无机盐、维生素、动物血清等。） 3、温度和pH： 37摄氏度左右, 7.2-7.4 4、气体环境： O2和CO2（95%空气和5% CO2 ）
A.动物细胞融合
C.胚胎移植
B.单克隆抗体
D.动物细胞培养
3、用于动物细胞培养的组织和细胞大都取自胚 胎或出生不久的幼龄动物的器官或组织，其主 要原因是这样的组织细胞 （ D ） A.容易产生各种变异 B.具有更强的全能性 C.取材十分方便 D.分裂增殖的能力强
高二动物细胞工程知识点
高二动物细胞工程知识点动物细胞工程是指运用细胞生物学、遗传学、分子生物学等理论和技术，对动物细胞进行研究、操作和改良的一门学科。
它在农业、医学和科学研究等多个领域具有重要的应用价值。
本文将介绍一些高二动物细胞工程的基础知识点。
一、细胞培养基础动物细胞培养是动物细胞研究中最基本的技术手段之一。
常见的细胞培养基包括无血清培养基和含血清培养基。
无血清培养基不含动物血清，通过添加人工合成的营养物质来满足细胞生长所需。
而含血清培养基则利用动物血清中所含有的生长因子和营养物质来维持细胞的生长。
二、细胞培养技术1. 细胞传代：细胞传代是指将原始培养的细胞分为若干个小培养皿中，使细胞继续生长和分裂。
细胞传代的目的是为了扩增细胞数量，以满足后续的实验需求。
2. 细胞冻存：细胞冻存是将细胞在低温下保存，以便日后使用。
通过添加特定的保护剂和冷冻液，可以在极低温度下减少细胞的代谢活动，避免细胞死亡。
3. 细胞鉴定：细胞鉴定是通过观察细胞的形态、生长特性、标记物等来确定细胞的身份和纯度。
常用的方法包括细胞形态观察、细胞分子标记和遗传分析等。
4. 细胞转染：细胞转染是将外源基因导入细胞的过程。
常用的转染方法有化学法、电穿孔法和病毒介导的转染法等。
三、动物细胞培养的应用1. 药物筛选：动物细胞培养可以用于药物的筛选和评价。
通过将药物添加到细胞培养系统中，观察其对细胞的影响，可以评估药物的毒性和疗效。
2. 组织工程：动物细胞培养可以为组织工程提供细胞来源。
通过培养和增殖体外的细胞，可以获得大量的细胞用于组织重建和移植。
3. 基因工程：动物细胞培养可以用于基因工程研究。
通过导入外源基因，可以改变细胞的性质和功能，用于疾病基因治疗和基因表达研究。
四、动物细胞工程的挑战与展望尽管动物细胞工程在许多领域都已取得了重要的成果，但仍面临着一些挑战。
例如，细胞培养过程中的细胞衰老、细胞突变和污染等问题需要得到解决。
此外，细胞工程的应用还需要更深入的研究和探索，以满足不断发展的医学和科学需求。
2。2动物细胞工程
5.
6.
如B1G,B2G---BnG。而BB,GG在此培养基上不能存活。） 第二次筛选：在“多孔培养板上”培养杂交瘤细胞系列 ，每 孔只放一个杂交瘤细胞。“克隆化培养”每个杂交瘤细胞，并 进行“单一抗体检测”，“检测阳性”的孔内即是所需要的杂 交瘤细胞。 选择所需要的杂交瘤克隆细胞群，体外培养或注射到小鼠腹腔 内增殖。 提取单克隆抗体。
经免疫的小鼠
提取
B淋巴细胞
小鼠骨髓瘤细胞
灭活的病毒等手段
杂交 细胞
用特定的选 择性培养基
第一次筛选
杂交瘤细胞 第二次筛选 能产生特定抗体、培养条件 下能无限增殖的杂交瘤细胞
注射到小鼠腹腔
体外培养
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ提取单克隆抗体
1.
动物特异性免疫
1、单抗的制备过程要点：
2.
3. 4.
分离B淋巴细胞（B）；找到骨髓瘤细胞（G）。注意B淋巴细
B淋巴细胞在体外不能无限增殖。
单克隆抗体的制备—极富创造性的方案
将能够产生特定抗体的B淋巴细胞和具有无限增殖能 力的骨髓瘤细胞融合在一起，形成杂交瘤细胞。杂交 瘤细胞既能在体外快速生长，又能持续分泌成分单一 的特异性抗体。这种单一类型的只针对某一特定抗原 决定簇的抗体分子，就是单克隆抗体。 • 米尔斯坦(阿根廷)和科勒(德国)因此在1984年获诺贝 尔奖。
细胞系：传代50代以后不能再传下去，部 分细胞遗传物质发生了改变，能连续传代， 获得不死性，叫细胞系。
问题1：为什么选用动物胚胎或幼龄个体的器官或组织做动物细胞 培养材料？ 因为其细胞生命力旺盛，分裂能力强，分化程度低。 问题2、为什么培养前要将组织细胞分散成单个细胞？ 扩大细胞与培养液的接触面积，利与细胞吸收营养。 问题3：为什么用胰蛋白酶处理？ 动物组织细胞间隙中含有一定量的弹性纤维等蛋白质，胰 蛋白酶处理动物组织，可以使动物组织细胞间的蛋白质和 细胞外的其他成分酶解，获得单个细胞。 问题4：为什么用胰蛋白酶处理而不用胃蛋白酶？
人教版教学课件2.2 动物细胞工程
需抗体的细胞(很多种杂交瘤细胞),需经克隆化培
养和抗体检测,经多次筛选后就可获得足够数量的
能分泌所需抗体的细胞。
(4)2个培养提取场所
①体外培养——培养液提取。
②体内小鼠腹腔中培养——小鼠腹水中提取。
提醒
取相应B细胞前必需先注射相应抗原,形
象地说先“打针”,否则失败。 (5)原理：细胞膜的流动性和细胞增殖。 拓展提升 植物体细胞杂交和单克隆抗体的制备的比较
障碍,大大扩展杂交的亲本 组合范围 (2)克服有性杂交的母系遗 传现象、获得细胞质基因的 杂合子、研究细胞质遗传
(1)制备单克隆抗体 (2)诊断、治疗、预
防疾病。例如:单抗
诊断盒、“生物导
弹”治 疗癌症
对位训练
3.利用细胞工程方法，以SARS病毒核衣壳蛋白为抗 原制备出单克隆抗体。下列相关叙述正确的是 （ D ） A.用纯化的核衣壳蛋白反复注射到小鼠体内，产 生的血清抗体为单克隆抗体 B.体外培养单个B淋巴细胞可以获得大量针对SARS 病毒的单克隆抗体 C.将等量B淋巴细胞和骨髓瘤细胞混合，经PEG诱 导融合后的细胞均为杂交瘤细胞 D.利用该单克隆抗体与SARS病毒核衣壳蛋白特异 性结合的方法可诊断出病毒感染者
冷冻（或超低温、 （5）在细胞培养过程中，通常在________________ 液氮） 条件下保存细胞。因为在这种条件下，细 胞中 酶 的活性降低，细胞 新陈代谢 的速率降低。
（6）给患者移植经细胞培养形成的皮肤组织后，发
生了排斥现象，这是因为机体把移植的皮肤组织当
作 抗原 进行攻击。
考点二
动物体细胞核移植技ຫໍສະໝຸດ 与克隆动物植物体细胞杂交 动物细胞融合(单克隆抗体 的制备)
理论基础 细胞膜的流动性、细胞的 细胞膜的流动性、细胞增殖 (原理) 全能性 融合前 酶解法去除细胞壁(纤维 注射特定抗原,免疫处理正 处理 素酶、果胶酶) 常小鼠
第十七章 细胞工程(胡以平)
4.灌注培养系统（perfusion culture system） • 可使细胞始终处于一个较好的营养状态和生存环境 • 可以在 “旧”培养基中连续收集培养细胞所分泌
的某些产物
• 可以根据特殊的要求，通过改变培养液的组成实现 对于细胞状态的人为调控
BB CC
DD
AA
（三）影响细胞生长的因素
1.量化评估大规模培养细胞的营养需求 2.探索大规模培养细胞合适的生存环境 3.鉴定细胞的健康状况
GCS technology enables life science researchers to mimic in vivo morphology in an in vitro environment
Glass Ball Spinner System
（2）中空纤维（hollow fiber ）
胞团细胞为供核细胞获得克隆后代。 • 1984年， Willadsen，世界上第一只以未分化的胚
胎细胞为供核细胞的核移植绵羊。 • 1995年7月，Wilmut等，已分化的胚胎细胞作为供
核细胞，克隆了Megan和Morag。
克隆羊Megan和Morag
2．成体细胞核移植
• 1962年，Gorden，紫外线照射方法，非洲爪蟾 的未受精的卵细胞的核失活，同种爪蟾的小肠 上皮细胞的核植入其中，结果约1％的重组卵发 育为成熟的爪蟾。这一成功，标志着由体细胞 核培育动物的技术体系在两栖类获得了成功。
二、核移植（nuclear transfer）
是指利用显微注射装置，将一个细胞的核植入于另 一个已经去核的细胞中，以得到重组细胞的技术。通常 所说的核移植，则是指将一个二倍体的细胞核植入于另 一个已经去核的细胞（受精卵或处于MⅡ期的卵母细胞） 中，以得到重组细胞，并使其在一定环境中生长发育， 最后获得新的个体的综合技术体系。
《动物细胞工程》课件
1
2
3
利用动物细胞工程可以将外源基因导入动物细胞，培育出转基因动物，提高其生产性能和抗病能力。
转基因技术
动物细胞工程可用于生产疫苗，通过培养动物细胞并表达病毒抗原，制备出高效、安全的动物疫苗。
动物疫苗
动物细胞工程可以用于构建生物反应器，通过大规模培养动物细胞生产各类蛋白质和生物活性物质。
生物反应器
选择适当的细胞
通过物理、化学或生物方法诱导细胞融合。常用的物理方法有电融合和激光融合，化学方法有聚乙二醇（PEG）诱导融合，生物方法有病毒诱导融合。
诱导细胞融合
通过特定的筛选和鉴定方法，从大量细胞中筛选出融合细胞，并进行鉴定。常用的筛选和鉴定方法有荧光染色法、免疫学检测法和分子生物学检测法等。
筛选和鉴定融合细胞
技术难度大
动物细胞工程的实施需要高超的技术水平和精细的操作技巧，如何提高技术成熟度和降低成本是亟待解决的问题。
伦理和法律问题
动物细胞工程的实践涉及到伦理和法律问题，如人道关怀、动物权益保护等，需要在实践中严格遵守相关法规和伦理准则。
安全性和有效性问题
动物细胞工程产品的安全性和有效性需要经过严格的评估和验证，以确保其不会对人类健康和生态环境造成不良影响。
1970年代
随着技术的不断进步和应用领域的拓展，动物细胞工程在医学、农业、工业等领域得到广泛应用。
1990年代至今
02
动物细胞培养技术
细胞具有增殖和分化的能力
动物细胞具有自我复制和分化的能力，可以在适宜的环境下生长和繁殖。
03
动物细胞融合技术
选择要进行融合的细胞，通常选择同种或同种的细胞进行融合。
感谢观看
THANKS
基因转移技术
02
第二章 细胞工程-【必背知识】2021-2022学年高二生物章节知识清单人教版2019选择性必修3
新人教版生物学选择性必修3《生物技术与工程》知识梳理第二章 细胞工程 第一节 植物细胞工程细胞工程： 细胞工程是指应用细胞生物学 、分子生物学 和发育生物学 等多学科的原理和方法，通过细胞器、细胞或组织水平上的操作，有目的地获得 特定的细胞、组织、器官、个体 或其产品的一门综合性生物工程。
1．原理和方法：细胞 生物学和分子 生物学。
2．操作水平：细胞 水平或细胞器 水平。
3．目的：按照人的意愿来改变细胞内的遗传物质 或获得细胞产品 。
一、植物细胞工程的基本技术1. 细胞的全能性：细胞经_分裂_和_分化_后，仍然具有_产生完整生物体_或__分化成其他各种细胞__的_潜能_，即细胞具有_全能性_。
2. 细胞具有全能性的原因（物质基础）生物体的细胞中都含有该物种的全套遗传物质_，都有_发育成为完整个体所需的全部遗传信息_。
1. 生物体生长发育过程中细胞不表现全能性的原因（不离体的细胞无法表现出全能性的原因） 在特定的时间时间和空间条件下，细胞中的基因会选择性地表达 2. 全能性大小比较（1）受精卵、体细胞、生殖细胞 __受精卵＞生殖细胞＞体细胞____（2）分化程度高的细胞、分化程度低的细胞__分化程度低的细胞＞分化程度高的细胞_____ （3）分裂能力强的细胞、分裂能力弱的细胞 __分裂能力强的细胞＞分裂能力弱的细胞____ （4）植物细胞、动物细胞__植物细胞＞动物细胞__________ （5）幼嫩的细胞、衰老的细胞__幼嫩的细胞＞衰老的细胞____ （一）植物组织培养技术1. 概念：植物组织培养是指将_离体_的植物_器官__、_组织_或_细胞_（称为_外植体_）等，培养在人工配制的_培养基_上，给予_适宜的培养条件_，诱导其形成__完整植株_的技术。
2. 原理：__植物细胞的全能性__3. 生殖方式：_无性生殖__4. 分裂方式：__有丝分裂__5. 过程：外植体――愈伤组织―再分化胚状体或丛芽――→发育植株脱分化：在一定的_激素_和_营养_等条件的_诱导_下，_已经分化_的细胞_失去其特有的结构和功能__，转变成_未分化的细胞__的过程。
2.2 动物细胞工程
第2章细胞工程第2节动物细胞工程一、动物细胞培养1.概念：从动物体中取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后在适宜的培养条件下，让这些细胞生长和增殖的技术。
2.原理：细胞增殖3.地位：动物细胞工程的基础4.关键操作：原代培养和传代培养。
（一）动物细胞培养的条件1.营养（1）成分①已知成分将细胞所需的营养物质（糖类、氨基酸、无机盐、维生素等）按其种类和所需量严格配制而成的培养基，称为合成培养基。
①未知成分使用合成培养基时，通常需加入血清等一些天然成分。
（2）培养基的物理性质培养动物细胞一般使用液体培养基，也称为培养液。
2.无菌、无毒的环境①对培养液和所有培养用具进行灭菌处理；①在无菌环境下进行操作；①还需要定期更换培养液。
3.温度、pH和渗透压（1）适宜的温度：哺乳动物细胞培养的温度多以36.5±0.5①为宜。
（2）适宜的pH：多数动物细胞生存的适宜pH为7.2~7.4。
（3）适宜的渗透压：维持适宜渗透压的目的维持细胞正常的形态和功能。
4.气体环境（1）组成：动物细胞培养所需气体主要有O2和CO2。
（2）气体作用：①O2：O2是细胞代谢所必需的；①CO2：CO2的主要作用维持培养液的pH。
（二）动物细胞培养的过程①原代培养：将分瓶之前的细胞培养，即动物组织经处理后的初次培养称为原代培养。
①传代培养：将分瓶后的细胞培养称为传代培养；①细胞贴壁：大多数体外培养的细胞需要贴附于某些基质表面才能生长增殖，这类细胞往往贴附在培养瓶的瓶壁上，这种现象称为细胞贴壁；①接触抑制：当贴壁细胞生长到表面相互接触时，细胞通常会停止分裂增殖。
1.取动物组织（1）取材：动物胚胎或幼龄动物的组织、器官。
（2）取材原因：细胞分化程度低，增殖能力强，容易培养。
2.制成细胞悬液（1）制成细胞悬液的步骤：①将组织分散成单个细胞；①用培养液将细胞制成细胞悬液。
（2）将组织分散成单个细胞的原因：①从动物体取出的成块组织中，细胞与细胞靠在一起，彼此限制了生长和增殖；①能使细胞与培养液充分接触，更易进行物质交换。
2.2 动物细胞工程
动物细胞培养 动物细胞培养的过程 （4）传代培养。 将原代培养的细胞从培养瓶中取出，配制 成细胞悬浮液，分装到两个或两个以上的培养 瓶中继续培养。 a、传至10-50代左右时： 大部分细胞增殖会逐渐缓慢，直至完全 停止，丧失增殖能力，这种细胞属于细胞株。 b、50代以后： 少部分细胞的细胞核型发生变化，经继 续传代培养会发生突变，发展成癌细胞，属于 细胞系。
• 体细胞核移植技术的应用前景
• • • • • • （1）繁育优良品种; （2）保护濒危物种； （3）生产医用蛋白； （4）医学上可克隆组织、器官； （5）了解胚胎发育及衰老过程; （6）用克隆动物做疾病模型，能使人们更好的 追踪研究疾病的发展过程和治疗疾病。
动物体细胞核移植技术和克隆动物 体细胞核移植技术存在的问题
动物体细胞核移植技术和克隆动物
• 动物核移植与克隆动物 • （1）概念：将动物的一个细胞的细胞核， 移 入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中， 使其 重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎 ①卵母细胞体积大，易操作 最终发育为动物个体。用核移植的方法得到 ②成熟促进因子的活性最高 的动物称为克隆动物。 ③细胞质已成熟，支持胚胎的全程发育 • （2）类型：胚胎细胞核移植与体细胞核移植 • 体细胞核移植的过程 • 体细胞核移植和克隆动物的成功 • 说明了： • 高度分化细胞的细胞核仍具有全能性， 因为含有保持该物种的全部遗传基因。
动物细胞融合与单克隆抗体
动物细胞融合与单克隆抗体
单克隆抗体 1、制备抗体的传统方法及存在的不足 方法： 向动物体内反复注射某种抗原，使动物产 生抗体，再从动物血清中分离所需抗体。 不足： 产量低、纯度低，抗体特异性差。 每一个B 淋巴细胞只分泌一种特异性抗体， 且在体外培养不可能无限增殖的。
第二章 第二节 动物细胞工程
二、动物细胞培养
动物细胞生长特性：
• 细胞贴壁：在适宜条件下，悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶 壁上，称为细胞贴壁。 • 要 求：培养瓶或培养皿的内表面光滑、无毒、易于贴附。 • 细胞的接触抑制：当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细 胞就会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的接触抑制。
动物细胞培养条件：
生物（选修3) 现代生物科技专题
专题二：细 胞 工 程
第二节 动neering
一、引
植物细胞工程常用的技术手段有哪些？
• 植物组织培养技术
• 植物体细胞杂交技术
动物细胞工程常用的技术手段：
• • • • 动物细胞培养技术 动物细胞核移植技术 动物细胞融合技术 生产单克隆抗体技术
二、动物细胞培养
动物细胞培养过程
动物胚胎或幼龄动物的 组织、器官
胰蛋白酶 动物组织细胞间隙中含有 （分解弹性纤维） 细胞“一代”指从细胞接种到分离再培养的一段期间，与细胞世 一定量的弹性纤维等蛋白质， 单个细胞 代或倍增不同。在一代中，细胞培增 3～ 6次。细胞传代后，一般 将细胞网络起来形成具有一定 传代培养：将贴满瓶壁的细胞需要重新用胰蛋白酶等处理，然后 经过三个阶段：游离期、指数增生期和停止期。 加培养液 弹性和韧性的组织和器官。
• 动物细胞培养技术是其他动物细胞工程技术的基础。
二、动物细胞培养
知识回顾 植物组织培养：在无菌和人工控制的条件下,将 离体的植物器官、组织、细胞，培养在人工控制的培 养基上，给予适宜的培养条件，诱导其产生愈伤组织、 丛芽，最终形成完整的植株。
动物细胞培养概念？
从动物机体中取出相关的组织, 将它分散成单个细胞，然后,放在 适宜的培养基中,让这些细胞生长 和增殖。
二、动物细胞培养
细胞工程
抗原
注 射入小鼠 体内
细 胞 融 合 筛 选
体内或体外
B淋巴细胞
细 胞 培 养 杂交瘤细胞
骨髓瘤细胞
选 出 能 产 生 特 定 抗 体 的 细 胞 群 ， 继 续 培 养
动物细胞培养
体外培 杂养 交 瘤 细 胞 体内 培养
放入培养瓶中培 养
从培养
瓶中提 取 单克隆抗体
注射入小鼠的腹腔 中
从小鼠 的腹水 中提取
2、根据上述选择，请你设计一个实验来探究 “三氯生”对人体是否有危害。 （1）该实验的原理是
许多致畸物质加入动物细胞培养液后，培养细胞会发 生染色体结构或数目的变异。根据变异细胞占观察培 养细胞的百分数，可以判断某种物质的毒性
（2）实验方法步骤： ① 材料准备：从医院妇产科获得所需要的原始 材料组织，浓度为0.09%的三氯生试剂,高倍 显微镜,培养瓶若干,配置好的培养液,剪刀, 培养箱,所需要的酶.
1.利用动物细胞培养技术可生产疫苗、干扰素 、单克隆抗体。 2.用于检测有毒物质，判断某种物质的毒性。
3.临床医学的应用：皮肤的移植、器官移植等
动 胚胎或幼龄动物的脏器 物 组 单个细胞 织 检测有毒物质、 培 致癌物质等 原 代 培养 养
培养液 某物质 传代培养 药物 研究治疗癌症的药物及其疗效 细胞株或细胞系
机械消化、胰蛋白酶消化
葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素、动物 血清等
2005年4月,美国一家非官方癌症研究中心发布 信息说,“高露洁”牙膏中含有的抗菌化学物质 三氯生可能是致癌物质。公众对此表示怀疑。 科研人员欲采用一定的技术手段探究三氯生对 人体是否有危害。请回答：
1、根据所学的动物细胞工程知识，采取下列哪种技术 手段最合适 A、动物细胞融合 B、动物细胞培养 C、胚胎移植 D、核移植
第二节细胞工程简介──动物细胞工程
第二节细胞工程简介──动物细胞工程第二节细胞工程简介──动物细胞工程教学目标1、知识方面（1）动物细胞培养（知道）。
（2）动物细胞融合（知道）。
（3）单克隆抗体的制备及应用（知道）。
2、态度观念方面（1）初步培养学生勇于探索，不断创新的精神和合作精神。
（2）通过向学生介绍几大动物细胞工程技术的发展动态及一些新的研究成果，使学生明确人们对生命奥秘的揭示愈加广泛和深入，知识不断更新并向前发展。
认识到学无止境，形成终生学习的意识。
3、能力方面（1）在学习动物细胞培养过程中，学生通过阅读、自学、质疑、讨论、训练、总结等环节，逐步提高独立获取知识的能力、逻辑思维能力、分析问题和解决问题的能力。
（2）由植物体细胞杂交技术导出动物细胞融合过程，培养学生的知识迁移能力、思维能力。
（3）让学生尝试设计革克隆抗体的制备过程，指导学生掌握获取知识和探索生物科学的基本方法，使学生了解生物科学认识模式以发展学生的创造性能力。
重点、难点分析单克隆抗体既是本小节的重点，也是难点内容。
分析：动物细胞工程常用的技术手段有动物细胞培养、动物细胞融合、单克隆抗体、胚胎移植、核移植等。
其中前三大技术为本节教材的主体内容，而胚胎移植、核移植技术以小字科普读物的形式出现，意在使学生在有所侧重的前提下对动物细胞工程发展概况有一个较全面的了解。
在教材重点介绍的三大动物细胞工程技术中，动物细胞培养是其他技术（如单克隆抗体、胚胎移植、核移植等）的基础，其价值更多的`是通过其他技术成果来体现的。
而动物细胞融合技术目前较为成熟的最重要的用途便是制备单克隆抗体。
由此可见，单抗技术应属较高层次的动物细胞工程技术。
对它的学习有助于学生较深刻地领悟动物细胞工程的真谛，并从两位诺贝尔奖获得者对单抗独具匠心的实验设计中，深刻体会科学态度、科学方法，尤其是创造性的思维品质在科学研究、发明创造中的决定性作用。
基于以上认识，单克隆抗体应列为本节的重点内容，同时单克隆抗体技术本身环节多、技术复杂，加之学生对此缺乏必要的感性认识，所以也是本课的难点所在。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
髓瘤细胞能无限增殖，杂交瘤细胞既能 产生抗体又能无限增殖。 ❖ 实验材料：小白鼠 ❖ 实验器材：培养皿、针筒等等。 ❖ 实验过程：如下页
单 克 隆 抗 体 制 备 过 程
单克隆抗体的应用
❖ 主要用于疾病的诊断、治疗和预防。与常规 抗体相比，具有特异性强、灵敏度高的优点。 如；各种癌症、肝炎病毒、SARS病毒、细 菌及血吸虫等数百种疾病的诊断；在疾病治 疗方面，单克隆抗体犹如人体卫士，能识别 “自己”与“异己”，一旦发现 致病因素便 与之结合将其杀死。若在单抗上带上抗癌药 物制成“生物导弹”，将药物定向带到癌细 胞所在部位，既消灭了癌细胞又不会伤害健 康细胞。
中央电教馆资源中心 2003.10
2. 检测有毒物质 3. 用于某些器官移植
动物细胞融合
物理法 化学法 生物法
紫外线 仙台病毒
丧失感染活性 （不感染细胞）
保留融合活性 （诱导细胞融合）
融 合 过 程 示 意 图
单克隆抗体的概念
❖ 单: 单个细胞 ❖ 克隆: 无性繁殖 ❖ 抗体: 化学性质单一、特异性强
根据阿根廷科学家米尔斯坦和德国科学家柯 勒设计的 实验方案:
第二节细胞工程简介二动物细胞工程
动物细胞培养过程
胚胎成幼龄动物的组织器官（细胞来源） 剪碎胰蛋白酶 分离细胞 单个细胞
洗涤、稀释、分离 原代培养 原代细胞 传代培养 细胞株（遗传物质养应用
1. 生产有价值的蛋白质制品，（如病毒疫 苗、干扰素、单克隆抗体、动物激素）