猪致病性大肠杆菌的分离鉴定及对24种中药的敏感性
仔猪致病性大肠杆菌的分离鉴定及药敏试验
仔猪致病性大肠杆菌的分离鉴定及药敏试验程子兵1 董春霞2石国界3沙里塔那4 马长丽1（1. 塔城地区动物疾控与诊断中心新疆塔城834700；2. 重庆市武隆县畜牧兽医局重庆市武隆县408500；3. 塔城市畜牧兽医工作站新疆塔城834700；4. 额敏县兽医工作站新疆额敏县834600）摘要:对塔城地区一农户饲养猪群中仔猪发生的临床症状以水肿病、白痢、黄痢为特征的病例进行了样品采集，后经麦康凯、伊红美蓝分离培养，糖发酵生化试验、动物试验等结果显示均为大肠杆菌，同时通过药敏试验筛选出敏感抗生素。
关键词：仔猪；大肠杆菌；分离鉴定；药敏试验Abstract：Specimens with dropsy and dysentery clinical symptoms were isolated from one household raises pig group in Tacheng area. By bacteria culture, biochemical test and animal test, the results indicate the bacterium is pathogenic Escherichia Coli. Meanwhile, we ascertain sensitive antibiotics to this E coli by medicine test.Key words:pig; Escherichia Coli; isolate indentify; medicine test仔猪大肠杆菌病是由大肠杆菌引起的肠道传染病，主要表现为仔猪白痢、黄痢和水肿病，其中黄痢多发生于1周内哺乳仔猪，病猪主要表现为排黄色糊状粪便；白痢多发于10～30日龄，病猪主要表现为排乳白色或灰白色腥臭糊状粪便；水肿病多发于断奶仔猪，主要有神经症状、胃壁、肠黏膜等组织水肿，四季均可发生，发病率和致死率高低不等，严重者同窝仔猪中发病率可达90％以上，致死率可达100％，幸存者则影响生长，甚至成为僵猪【l】。
猪源大肠杆菌的分离 鉴定及耐药性监测
大肠杆菌是一种常见的人类和动物肠道病原菌，其中一些菌株已经对多种抗 生素产生了耐药性。因此，对大肠杆菌进行分离鉴定和耐药性分析对于防控细菌 性感染和合理使用抗生素具有重要意义。本次演示以一株猪源大肠杆菌为例，介 绍了其分离鉴定和耐药性分析的过程。
实验材料包括采样猪的粪便、大肠杆菌标准菌株、药敏试纸、培养基等。实 验方法包括细菌分离、纯化、鉴定和药敏试验。结果发现，该菌株属于大肠杆菌 O157:H7血清型，具有较高的耐药性，对多种抗生素如青霉素、氨苄西林、头孢 曲松、氟苯尼考等产生了耐药性。肠杆菌菌株分别接种在含有不同浓度抗菌 药物的培养基上。通过测量抑菌圈的直径，评估菌株对抗菌药物的敏感性。参照 国际抗菌药物敏感性试验委员会（NCCLS）制定的标准，分析耐药性水平及变化 趋势。
三、结果
1、分离与鉴定结果
经过分离和鉴定，共获得50株猪源大肠杆菌。这些菌株在培养基上呈现出典 型的圆形、湿润、半透明菌落，革兰氏染色阴性，具有典型的大肠杆菌形态特征。 分子生物学鉴定结果表明，所有菌株均含有16S rRNA基因，与大肠杆菌属的亲缘 关系较近。
需要注意的是，本次演示的研究成果对于指导临床合理用药和控制羊源大肠 杆菌的传播具有一定的实践意义，但仍需进一步扩大样本量、增加实验代表性以 及加强多学科联合研究，以提供更全面、准确的研究结论。在未来的研究中，我 们应注重对新型检测技术和治疗方法的研究与开发，以便更好地应对耐药性和致 病性问题。
谢谢观看
研究羊源大肠杆菌的耐药性与致病性对于指导临床合理用药、控制病情具有 重要意义。目前，耐药性大肠杆菌已成为一个全球性的问题，给治疗带来了很大 的困难。因此，我们需要更加深入地研究羊源大肠杆菌的耐药机制和致病机理， 寻找有效的解决方法。
本研究采用细菌培养、分子生物学等技术手段对羊源大肠杆菌进行分离鉴定， 并对其耐药性和致病性进行分析。首先，对临床疑似感染大肠杆菌的羊只进行细 菌分离培养，获得纯菌落。接着，采用基因测序、PCR等方法对菌落进行分子生 物学鉴定，确定其为大肠杆菌。
猪源致病性大肠杆菌分离与鉴定方法研究
猪源致病性大肠杆菌分离与鉴定方法研究刘桂梅，王韦华（渭南职业技术学院，陕西渭南７１４０００）摘 要：简要介绍了猪源致病性大肠杆菌的鉴定与检测方法，并通过对小白鼠致病性实验的介绍更为直观地体现了猪源致病性大肠杆菌对于人类和动物的潜在威胁。
关键词：猪源致病性大肠杆菌；分离；鉴定；致病性实验ｄｏｉ：１０．１９５６７／ｊ．ｃｎｋｉ．１００８－０４１４．２０２１．０４．００２ 引言大肠杆菌是一种十分常见的动物肠道寄居群，它广泛存在并且时刻威胁着公共卫生安全［１－２］。
试验从陕西关中地区的猪养殖场采集猪源致病性大肠杆菌，对其分别进行分离和鉴定。
材料来源无菌采集陕西关中地区猪养殖场的具有感染症状的濒死猪的内脏４０份进行分离与鉴定。
菌落培养将所收集的内脏等器官组织每份取出适量加入稀释液进行研磨后过滤离心，再取其上清液接种在培养基上，维持３７℃恒温，菌落培养完成后置于４℃环境下保存以备后续实验使用。
革兰染色镜检无菌条件下取出之前培养完成的菌落，然后使用革兰染色进行镜检，染色步骤分为涂片、初染、媒染、脱水、复染、镜检，涂片过程要维持无菌状态，初染要注意将染液完全冲洗干净，复染要维持染液染色３０ｓ，镜检要等到标本片完全干燥后才可以进行，先使用低倍劲和高倍镜最后使用油镜。
再将菌落分别接种到麦康凯培养基、伊红美兰琼脂以及ＳＳ培养基上，经过３７℃恒温过夜培养，观察菌株的生长情况。
抗原血清型鉴定取上述菌落进行接种，培养基为普通琼脂，接种完成后将其置于３７℃恒温环境中培养２４ｈ，然后再使用石炭酸生理盐水冲洗培养基，冲洗下菌苔，将其收集于圆底试管中，制成浓稠的悬液，塞上试管的塞子后，对其进行２ｈ的１２１℃高压处理，破坏菌落的Ｋ抗原。
冷却后使用特定血清对其进行玻板凝集反应，再设置一组生理盐水的混合物作为实验组的对照，观察实验组和对照组是否会出现凝集颗粒，并根据这一现象判断菌落所属的血清型。
如果在３０ｓ内出现了明显的凝集者表示该反应为阳性。
仔猪大肠杆菌的分离鉴定及药物敏感性分析
仔猪大肠杆菌的分离鉴定及药物敏感性分析吴学敏;陈秋勇;陈如敬;王隆柏;车勇良;王晨燕;严山;刘玉涛;周伦江【摘要】为了研究福建省闽北地区某猪场猪大肠杆菌的耐药情况,通过采集32份发生仔猪黄、白痢的粪便,经麦康凯琼脂培养基分离培养,再经普通肉汤纯培养,用镜检方法、PCR扩增方法和生化试验进行鉴定,结果共分离到29株大肠杆菌.生化试验结果表明,分解甘露醇、葡萄糖、乳糖和麦芽糖产酸产气,V-P试验为阴性,M.R.试验呈阳性,硫化氢试验阴性,枸橼酸盐试验阴性,吲哚试验阳性,硝酸盐试验阳性.药敏试验结果显示,分离的大部分菌株对四环素、林可霉素、先锋霉素Ⅳ耐药;大多数菌株对多黏菌素B、复方新诺明和痢特灵高度敏感.该研究为当地猪场临床用药提供参考,为猪大肠杆菌病的预防控制提供理论依据.【期刊名称】《中国兽医杂志》【年(卷),期】2017(053)010【总页数】4页(P86-89)【关键词】大肠杆菌;分离;鉴定;敏感性【作者】吴学敏;陈秋勇;陈如敬;王隆柏;车勇良;王晨燕;严山;刘玉涛;周伦江【作者单位】福建省农业科学院畜牧兽医研究所福建省畜禽疫病防治工程技术研究中心,福建福州350013;福建省农业科学院畜牧兽医研究所福建省畜禽疫病防治工程技术研究中心,福建福州350013;福建省农业科学院畜牧兽医研究所福建省畜禽疫病防治工程技术研究中心,福建福州350013;福建省农业科学院畜牧兽医研究所福建省畜禽疫病防治工程技术研究中心,福建福州350013;福建省农业科学院畜牧兽医研究所福建省畜禽疫病防治工程技术研究中心,福建福州350013;福建省农业科学院畜牧兽医研究所福建省畜禽疫病防治工程技术研究中心,福建福州350013;福建省农业科学院畜牧兽医研究所福建省畜禽疫病防治工程技术研究中心,福建福州350013;福建省农业科学院畜牧兽医研究所福建省畜禽疫病防治工程技术研究中心,福建福州350013;福建省农业科学院畜牧兽医研究所福建省畜禽疫病防治工程技术研究中心,福建福州350013【正文语种】中文【中图分类】R378.2+1大肠杆菌是自然界中一种最常见的革兰阴性菌，普遍存在于环境中，在猪的肠道中与猪属于共生情况。
某猪场仔猪大肠杆菌的分离鉴定与药敏试验
某猪场仔猪大肠杆菌的分离鉴定与药敏试验鲁志平;庞璞;杨晓玲;孙霖;李云祝;吴显祥【摘要】采集大竹县某养猪合作社疑似发生黄、白痢的仔猪直肠拭子病料,通过病原分离、培养及生化鉴定,得出分离菌为致病性大肠杆菌,是引起该场仔猪腹泻的主要病原.采用E.coli标准抗O型血清凝集试验进行血清型鉴定,得出分离菌株的优势血清型分别为O20、O10l、O141；通过对30种抗生素类药物进行敏感性试验,得出分离的E.coli对复达欣(头孢他啶)、多粘霉素B高度敏感,对其余药物中度敏感或耐药.【期刊名称】《四川畜牧兽医》【年(卷),期】2013(040)006【总页数】3页(P24-26)【关键词】仔猪黄、白痢;大肠杆菌;分离鉴定;药物敏感性【作者】鲁志平;庞璞;杨晓玲;孙霖;李云祝;吴显祥【作者单位】四川省大竹县动物疫病预防控制中心,四川大竹635100;四川省大竹县动物疫病预防控制中心,四川大竹635100;四川省大竹县动物疫病预防控制中心,四川大竹635100;四川省大竹县动物疫病预防控制中心,四川大竹635100;四川省大竹县动物疫病预防控制中心,四川大竹635100;四川省大竹县动物疫病预防控制中心,四川大竹635100【正文语种】中文【中图分类】S858.285.12猪大肠杆菌病是由致病性大肠杆菌（Escherichia coli，简写E.coli）某些血清型引起的一种猪肠道传染性疾病，临床上分为仔猪黄痢、仔猪白痢和仔猪水肿病。
随着规模化、集约化养猪业的发展，仔猪细菌性腹泻的发病率越来越高，危害也越来越严重。
为了掌握四川大竹县仔猪大肠杆菌病的流行情况，笔者在辖区内某一养猪合作社的猪场采集了疑似仔猪黄、白痢的病料，并进行了病原分离鉴定及药敏试验等相关研究，为该猪场制定防控措施提供有益参考。
现将有关结果报道如下：1 材料与方法1.1 试验材料1.1.1 病料选取大竹县某养猪合作社规模猪场疑似黄、白痢感染的腹泻仔猪，采用灭菌棉拭子从发病、濒死或死亡仔猪的直肠取样，共采集疑似病料20份，由大竹县动物疫病预防控制中心诊断室保存。
仔猪致病性大肠杆菌分离鉴定及药敏试验
仔猪致病性大肠杆菌分离鉴定及药敏试验彭贵青吴斌刘梦元(华中农业大学畜牧兽医学院武汉430070)摘要本试验从20多个猪场中采集腹泻仔猪粪便，进行大肠杆菌的分离培养，经生化鉴定和致病性检测，共获得276株致病性大肠杆菌；并从水肿病猪的水肿液中分离鉴定出4株水肿病致病性大肠杆菌。
对其中112株进行了药敏实验，发现对先锋V、呋喃妥因、痢特灵敏感性较高，对其他抗生素都有不同程度的耐药性；随机抽取10株分别进行了5种微量发酵管实验，发现全部都能发酵乳糖、甘露醇，不发酵肌醇和纤维二糖，部分利用半乳糖苷、酶；此外对广西某猪场分离出的致病性大肠杆菌进行了黏附素抗原鉴定，发现不含有K88、K99、987P黏附素抗原。
关键词：猪；致病性大肠杆菌；分离鉴定；药敏实验仔猪大肠杆菌病是由致病性大肠杆菌引起的不同类型的疾病的总称，在我国各地猪场均有发生。
按发病日龄可分为：仔猪黄痢，仔猪白痢，仔猪水肿病[1]。
仔猪黄痢，主要1~3日仔猪发病以排出黄色粪便和迅速死亡为特征，窝发病率高达90~95%，头发病率在30~60%之间，死亡率一般30%左右，有的高达80%以上乃至全窝死亡；仔猪白痢，10~30日龄发病，发病率可达80%，死亡率较低，影响仔猪场几乎无处不在，且有明显上升趋势；仔猪水肿病，断奶后发病，死亡率可达100%。
据统计，我国1997年1~6月猪大肠杆菌病发病数104511头，直接经济损失达5千万元。
[2] 仔猪黄、白痢是目前规模化猪场影响仔猪存活率的严重制约因素[3]。
大肠杆菌（Ecoli）在分类上属于肠杆菌科埃希氏属，通常认为该属只含大肠杆菌一个种，种以下一律为血清型[4]。
其抗原构造及血清型极为复杂，抗原主要有O、K、H抗原。
据最新报道O抗原有171种，引起仔猪发病的常见血清型为O101、O64、O138、O141、O147、O149、O157、O8、O9、O20；K抗原103种；H抗原53种[5]。
此外与仔猪水肿病有关的纤毛F抗原有K88、K99、987p、F107及F41[3]。
猪禽致病性大肠杆菌的分离鉴定与药敏分析
2020年第08期致病性大肠杆菌是医学和兽医学临床感染中最常见的病原菌之一。
由于养殖户持续和不规范的使用抗菌素，使大肠杆菌耐药谱不断扩大和耐药水平不断提高。
当然，这也与大肠杆菌对药物敏感却又容易产生耐药性的特性有密不可分的关系。
因此，了解致病性大肠杆菌的耐药情况，分析致病性大肠杆菌的耐药趋势，研究致病性大肠杆菌的耐药机理，对预防和治疗大肠杆菌病有着十分重要意义。
1材料与方法2017年11月～2018年1月从佛山市三水区乐平镇的养殖场收集患病动物脏器样品中分离大肠杆菌50株，其中来源于猪的大肠杆菌有22株，鸡有7株，鸭有14株以及鹅有7株。
阿莫西林克拉维酸钾、阿米卡星、头孢曲松、头孢吡肟、赛头孢、新头孢、林可霉素、大观霉素、氟苯尼考、新霉素、多西环素、复方间甲氧嘧啶、恩诺沙星、环丙沙星、泰乐菌素、丁胺：TMP=7:3、双头孢、阿奇霉素、替米考星、氨苄西林钠、头孢挫定、头孢噻呋钠、头孢唑林钠、青霉素钠、泰妙菌素、庆大霉素、卡那霉素。
（以上药物均来售自市面药店）1.3.1细菌分离纯化将50块疑似大肠杆菌感染的猪禽的肝脏、十二指肠、淋巴结、心脏、脾脏分别剪成一小块。
用灼烧好的接种环分别蘸取病料，接种于血琼脂平板培养基，37℃培养24h 观察生长情况。
用划线分离的方法分别接种于营养琼脂培养基，37℃培养24h 观察生长情况。
分别在营养琼脂培养基挑取单个菌落划线于沙门氏菌显色培养基上，37℃培养24h 观察结果，其中大肠杆菌显蓝色。
取沙门氏菌显色培养基上的大肠杆菌菌落，用革兰氏染色法进行染色，镜检，根据染色情况和细菌形状判断是否有除大肠杆菌以外的杂菌，若没有，即视为纯种细菌。
分别将提纯成功的菌落挑到装有2mL 营养肉汤的EP 管增殖12～18h ，加等量的甘油进EP 管，-80℃冷冻保存。
1.3.2动物致死性实验分别从EP 管蘸取少量的纯种菌液接入装有2mL 营养肉汤的EP 管中增殖12～18h 以3只小鼠为一组，分别取0.1mL 上述培养物对小鼠进行腹腔注射，观察有没有发病死亡，记录小鼠死亡的时间和死亡的数量。
猪致病性大肠杆菌的分离鉴定及其药敏试验的研究
猪致病性大肠杆菌的分离鉴定及其药敏试验的研究
魏小兰;杜明芳;冯友容
【期刊名称】《兽医导刊》
【年(卷),期】2011()S1
【摘要】从重庆武隆某种猪场分离得到8株疑似大肠杆菌,经染色镜检、糖发酵试验、生化试验、溶血性试验、小白鼠试验,证明分离株为致病性大肠杆菌,通过药敏实验,筛选得出菌必治、先锋噻肟、头孢唑啉、阿米卡星对该猪场所分离出的致病性大肠杆菌敏感。
【总页数】3页(P244-246)
【关键词】致病性大肠杆菌;药敏试验;猪大肠杆菌;分离鉴定;阿米卡星;小白鼠;头孢唑啉;先锋噻肟;大肠杆菌病;发酵试验
【作者】魏小兰;杜明芳;冯友容
【作者单位】武隆县畜牧兽医局
【正文语种】中文
【中图分类】S8
【相关文献】
1.猪致病性大肠杆菌的分离鉴定及药敏试验 [J], 向智龙;程振涛;卓建华;欧德渊;周碧君;尹传宝;刘芳;黄璐;禾彩红
2.猪肠外致病性大肠杆菌的分离鉴定和药敏试验 [J], 徐引弟;王治方;朱文豪;梁跃;郭成留
3.猪致病性大肠杆菌的分离鉴定及药敏试验 [J], 赵晓黎
4.猪致病性大肠杆菌的分离鉴定及药敏试验 [J], 朱丽娜;韩克光
5.猪源肠外致病性大肠杆菌的分离鉴定与药敏试验 [J], 丁建华; 吕李明; 周磊; 李泽伟; 孙起荣; 刘雪兰; 李郁
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仔猪致病性大肠杆菌的分离与鉴定
一
仔 猪 黄痢 ，临 床表 现 为排 出黄 白色水 样 稀 便且 腹 泻厉 害 ，机 Ａ ｍ ｒ ｅ ｓ ｃ ｏ 公 司 ；脑 心 汤培 养 基 ，购 自美 国Ｂ Ｄ 公 司 产 品 ，一 ４ ℃冷 藏 体脱 水全 身 衰 竭死 亡 快 。该病 潜 伏期 短 ，出生 时 的仔 猪 身体 情 况 保 存 ；Ｔ ｓ ｉ 培养 基 ，购 自Ａ ｍ ｒ ｅ ｓ ｃ ｏ 公 司 ，一 ４ ℃保存 ；药 敏纸 片 ，英 般无 恙 ，在 出生 １ ２ ｈ 后 有一 两头 仔猪 突发 排粪 异 常为 黄色浆 状 稀 国Ｏ Ｘ Ｏ Ｉ Ｄ 公司。
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仔猪致病性大肠杆 菌的分离与鉴定
马 洪梅
（ 西藏 大学农 牧学院 ，西藏林芝 ８ ６ ０ ０ ０ ０ ）
摘 要 ：在猪 场采 取 典 型 临床 症状 为 仔猪 黄 痢 、 白痢 、仔 猪发 生 病 料采 自湖北 武汉 某动 物 医院 。取５ 头发 生黄 白痢 及水 肿病 的 水肿 病 的 病料 ，进 行 伊 红美 蓝 培养 基分 离 培 养 ，药 敏试 验 ，结 果 仔 猪 ，临 床表 现如 下 的病料 分别 编号 ，见 表 １ 。 都为 大 肠杆 菌 ；采 集 的大 肠 杆 菌对 多粘 菌 素 、庆 大 霉素 敏 感 。此 次试 验结 果对 大肠 杆 菌病 的控制 和预 防有 重 要意 义 。
传染病之一。因为猪的年龄和大肠杆菌种类的差异 ，仔猪患病的 临诊 表 现 也不 一样 ，该病 临 床表 现 三种 类 型分 为仔 猪 白痢 、仔 猪 黄痢 和仔猪水 肿病＿ ｌ ＿ 。该病的发生与 自身条件 和外界环境等许多
பைடு நூலகம்
保育猪，眼帘、咽喉水肿，肠系膜有胶冻渗出物 ，小肠粘膜 变厚、有出血点，为大弯变厚，有胶冻渗 出物，腹水分离 Ｎ ０ ４ 肠 系膜 淋 巴 结 分 离
豪猪致病性大肠杆菌的分离鉴定与药敏试验
豪猪致病性大肠杆菌的分离鉴定与药敏试验作者：张保平来源：《江苏农业科学》2014年第09期摘要：从腹泻病死仔豪猪的心血、肝脏、脾脏和腹泻粪便中分离到2株细菌，染色镜检革兰氏阴性，细菌在麦康凯培养基上呈红色菌落。
生化试验结果显示分离到的2株细菌对葡萄糖、乳糖、麦芽糖产酸产气，不分解尿素，无硫化氢产生。
药敏试验结果表明，分离到的2株细菌对头孢噻吩、头孢曲松、先锋霉素、庆大霉素、卡那霉素、链霉素、万古霉素、复方新诺明等高度敏感。
动物致病性试验结果表明，分离到的2株细菌对小鼠有强致病性。
关键词：豪猪；大肠埃希菌；分离；鉴定中图分类号： S855.1+2文献标志码： A文章编号：1002-1302（2014）09-0189-021材料和方法1.1材料1.1.1药品麦康凯培养基，购于北京奥博星生物技术责任有限公司；普通营养肉汤培养基，自制；营养琼脂培养基，购于北京奥博星生物技术责任有限公司；细菌微量发酵管，杭州天和微生物试剂有限公司生产；药敏纸片，北京天坛药物生物技术开发公司生产。
1.1.2试验动物20～22 g小白鼠：购自湖南农业大学小动物房。
1.1.3病料来源湖南常德市桃源县堆金豪猪养殖基地发生仔豪猪黄痢的病死豪猪的心血、肝脏、脾脏和腹泻粪便。
1.2方法1.2.1细菌分离取病死仔豪猪的心血、肝、脾和粪便，分别接种于普通营养肉汤中，37 ℃培养24 h，取有细菌生长的普通营养肉汤接种于麦康凯琼脂平板，37 ℃培养24 h，观察并记录。
1.2.2细菌纯培养将以上麦康凯培养基中的红色菌落接种于普通营养肉汤中37 ℃培养24 h，再将肉汤接种于麦康凯琼脂37 ℃培养24 h，进行细菌纯化。
1.2.3油镜镜检取普通营养肉汤及麦康凯培养基中的细菌，涂片，革兰氏染色镜检。
1.2.4生化试验按文献[9]的方法进行，取分离菌接种于细菌微量发酵管中，37 ℃培养，每隔24 h观察1次，连续7 d，并做好记录。
1.2.5动物试验用20只20～22 g健康正常的小白鼠，进行致病性测定，将小鼠分为2组，实验组14只，对照组6只，实验组每只小白鼠腹腔注射分离菌肉汤培养物0.2 mL，对照组每只小白鼠腹腔注射灭菌肉汤培养物0.2 mL。
猪致病性大肠杆菌的分离鉴定及药敏试验
四川农业大学本科生毕业论文（设计）开题报告
取典型菌落均匀涂布于普通琼脂平板上进行药敏试验，药敏试剂氯霉素、丁胺卡那、环丙沙星、磺胺嘧啶、土霉素、青霉素、氨苄青霉素、链霉素。
3。
2。
3.3小鼠致病性实验
选取大小适宜,体重15g无病原感染的健康小白鼠（健康状况相同）雌雄各两只平均分成A 和B两组每组雌雄各一只，对接种于肉汤培养基的大肠杆菌取0.2ml经腹部皮下注射A组小鼠腹腔，对照试验B组注射同剂量生理盐水，观察并记录小鼠有无致死。
具体技术路线如下:
4。
论文进度安排：
2014年3—5月查找相关文献资料，构思试验方案，完成开题报告
2014年6-7月完善试验方案并在实验室完成前期准备
大肠杆菌分离鉴定及药敏的试验
2015年1月分析记录实验结果撰写论文
2. 课题来源：国家级项目、省部级项目、横向合作项目、校级项目、自选项目；。
猪致病性大肠杆菌的分离及中药药敏试验
猪致病性大肠杆菌的分离及中药药敏试验
徐东方;韩露
【期刊名称】《河南畜牧兽医（市场版）》
【年(卷),期】2017(038)011
【摘要】大肠杆菌病是由致病性大肠杆菌引起的多种动物和人的一组肠道性共患
传染病，是目前养猪业最常见和危害性最大的细菌性疾病之一。
它结构比较简单，容易培养，繁殖能力强，被公认为生物学上重要的实验材料。
由于该病对仔猪危害较大，因此找出最有效的防治方法特别重要，猪大肠杆菌病的传统治疗多用抗生素，但是由于用药的不规范从而导致部分大肠杆菌对抗生素产生耐药性。
中药治疗该疾病愈来愈受到重视，所以该文对猪致病性大肠杆菌的分离及中药药敏进行了试验，试验结果表明，中药治疗及预防仔猪大肠杆菌病具有重要作用。
【总页数】2页(P34-35)
【作者】徐东方;韩露
【作者单位】河南省获嘉县乡镇动物防疫检疫中心站,河南获嘉453800;河南省畜
牧总站
【正文语种】中文
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郭成留
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延边部分地区猪致病性大肠杆菌的分离与鉴定
2018年第9期牛分为3组，每组20头，对照组饲喂基础饲粮（不含杜仲叶），低水平和高水平组分别在基础饲粮中添加5.0%和10.0%含量的杜仲叶，于试验前和试验后50d 每日分别测定奶牛的泌乳量和采食量，试验前后测定乳汁中体细胞含量。
结果表明：与试验前相比，对照组、低含量组（5%含量杜仲叶）和高含量组（10.0%含量杜仲叶）奶牛干物质采食量变化为+0.03kg/d、+0.25kg/d 和-0.28kg/d，增加比则分别为+0.14%、+1.18%和-1.52%，说明低含量杜仲叶可以提高奶牛的采食量，其适口性较好，但高含量杜仲叶较大提高了饲粮的纤维素含量，从而降低了奶牛的采食量；通过分析饲粮中添加不同含量杜仲叶对奶牛泌乳性能影响，结果表明，低含量组和高含量组均可有效提高奶牛的日产奶量，且低含量组提高效果更加明显；此外，在日粮中添加杜仲叶也可以较大程度降低奶牛乳汁中体细胞数量，从而降低乳房炎发生的可能性。
根据试验结果，笔者初步判定在饲粮中添加一定含量杜仲叶可有效提高奶牛的生产性能，且推荐使用含量为5.0%。
参考文献[1]孙玉丽,等.杜仲素对奶牛生产性能和免疫机能的影响[J].中国奶牛,2012(9):13-16.[2]陈玉敏,等.饲粮中添加杜仲叶提取物对爱拔益加肉鸡生长性能及免疫功能的影响[J].动物营养学报,2015,27(7):2224-2230.[3]杨改青,等.杜仲叶对绵羊营养物质消化利用、生长性能及屠宰性能的影响[J].动物营养学报,2017,29(4):1383-1391.[4]石海仁,等.杜仲叶对育肥猪生长性能、胴体性状、抗氧化能力及肠道菌群的影响[J].动物营养学报,2018，1:350-359.大肠杆菌是引起猪腹泻的主要致病菌之一，可引起不同年龄段的猪发生仔猪黄痢、仔猪白痢及猪大肠杆菌病，猪大肠杆菌病是影响养猪企业的重要肠道传染病之一，常常造成养猪企业的重大损失，对养猪生产危害很大。
仔猪大肠杆菌的分离鉴定及市售药物比较
仔猪大肠杆菌的分离鉴定及市售药物比较仔猪大肠杆菌是一种常见的猪肠道细菌，可引起仔猪腹泻等严重疾病。
对仔猪大肠杆菌进行分离鉴定和药物对比是预防和治疗这一疾病的重要工作。
本文将介绍仔猪大肠杆菌的分离鉴定方法以及市售药物的比较。
（1）样品采集：从仔猪粪便或肠道中采集样品，注意无污染，避免其他细菌的污染。
（2）分离：将样品加入选择性富集培养基中，如MacConkey琼脂培养基，培养在37℃下孵育18-24小时。
（3）鉴定：通过鉴定生化特性、形态学特征和分子生物学方法来确定菌株。
常用方法包括革兰染色、氧化-发酵试验、亮氏甲基红-Voges-Proskauer试验、尿素酶试验等。
2. 市售药物的比较：（1）抗生素类药物：- 铜磺胺：抑制细菌蛋白质合成，广谱抗菌作用。
但长期使用可能导致耐药性产生。
- 强力霉素：通过抑制细菌蛋白质合成和胞内结构的破坏来抑制细菌生长。
对大肠杆菌的抗菌活性较强。
- 林可霉素：通过抑制细菌蛋白质合成来抑制细菌生长。
对大肠杆菌的抗菌活性较强。
（2）消化道保护剂类药物：- 胃蛋白酶：能够分解食物中的蛋白质，改善消化道环境。
- 益生菌：帮助维持肠道菌群的平衡，抑制有害菌的繁殖。
（3）中药类药物：- 五味子：具有抗菌、抗炎、促进肠道蠕动的作用，对治疗仔猪大肠杆菌感染具有一定效果。
- 青黛：具有抗菌、抗炎、调节肠道菌群的作用，对治疗仔猪大肠杆菌感染具有一定效果。
以上药物只是其中的一部分，具体选择药物时应根据药物的剂型、给药途径、适应症和禁忌症等因素进行综合考虑。
建议在兽医的指导下使用药物，避免滥用或不合理使用药物，从而防止细菌耐药性的产生。
仔猪大肠杆菌的分离鉴定及市售药物比较
仔猪大肠杆菌的分离鉴定及市售药物比较仔猪大肠杆菌是引起仔猪肠道疾病的主要病原微生物之一，会导致仔猪腹泻、消化不良等问题，严重影响仔猪的生长和发育。
对仔猪大肠杆菌进行分离鉴定及市售药物比较，对于防控该疾病具有重要意义。
一、分离鉴定方法1. 样品采集：从患病仔猪的粪便、肠道内容物等样品中采集。
2. 分离培养：将样品接种于大肠杆菌选择培养基上，进行革兰氏染色、培养、生化试验等方法，分离纯培养的大肠杆菌菌株。
3. 血清鉴定：通过进行血清凝集试验，使用奥鲁氏O抗原血清以及H抗原血清进行鉴定，对大肠杆菌进行血清分型和鉴定。
4. 分子生物学鉴定：使用PCR技术，基于大肠杆菌特异基因（如16S rRNA基因），进行分子生物学鉴定和分型。
二、市售药物比较仔猪大肠杆菌感染的治疗通常使用抗生素药物进行控制，以下是几种常用的市售药物进行比较：1. 链霉素：链霉素是一种广谱抗生素，可有效抑制大肠杆菌的生长。
但长期使用链霉素容易导致抗药性的产生，并且对于某些耐药性强的大肠杆菌株无效。
2. 氧氟沙星：氧氟沙星是一种喹诺酮类抗生素，具有广谱的抗菌活性。
它能够通过抑制DNA旋转酶的活性，阻止细菌DNA的复制和转录过程。
氧氟沙星对大肠杆菌有很强的杀菌作用，但由于长期使用会出现耐药性的问题，因此需要谨慎使用。
3. 环丙沙星：环丙沙星是一种喹诺酮类抗生素，与氧氟沙星有类似的作用机制。
不同的是环丙沙星对大肠杆菌的抗菌活性较强，且在耐药性问题上相对较低，对大肠杆菌引起的仔猪肠道疾病治疗效果较好。
4. 卡那霉素：卡那霉素是一种广谱抗生素，属于多肽类抗生素。
它能有效抑制细菌的蛋白质合成过程，对大肠杆菌的抗菌作用较强。
卡那霉素在治疗仔猪肠道疾病方面表现良好，但存在耐药性问题。
虽然目前市售的抗生素药物可以对仔猪大肠杆菌感染进行治疗，但在使用过程中需要注意，应根据具体情况选择合适的药物，并在控制感染的同时减少抗药性的产生。
应注意合理使用抗生素，避免过量使用和滥用抗生素，以保障仔猪健康和人类食品安全。
引起仔猪腹泻的致病性大肠杆菌分离及鉴定-毕业论文
---文档均为word文档，下载后可直接编辑使用亦可打印--- 摘要：烟台海阳地区某猪场新生仔猪发生了大规模的腹泻，为了判断其发病原因及病原体种类，从该养猪场采集腹泻仔猪粪便及肛门拭子48份，对粪样进行了细菌的分离纯化、革兰氏染色镜检，生化试验，PCR鉴定，血清型鉴定以及药物敏感性检测。
结果表明，致病性大肠杆菌感染导致了该猪场发生仔猪腹泻疫情。
分离到的菌株血清型为987P型，该菌株对头孢噻肟、恩诺沙星、环丙沙星、左氧氟沙星敏感。
通过检测为该猪场仔猪腹泻的治疗与防控提供了依据。
关键词：仔猪腹泻；大肠杆菌；分离；鉴定Isolation and identification of E. coli from piglets with diarrhea Abstract：Yantai haiyang area mass happened a pig newborn piglets diarrhea，in order to determine the causes and kinds of pathogens，collected from the pig diarrhea piglets 48，feces and anal swabs of fecal samples for the separation and purification of bacteria，gram's staining microscopy，biochemical test，PCR identification，serotype identification and drug sensitivity test.The results showed that the pathogenic escherichia coli infection caused diarrhea in piglets in the farm.The serotype of the isolated strain was 987p，which was sensitive to cefotaxime，enoxacin，ciprofloxacin and levofloxacin.The results provided a basis for the treatment，prevention and control of diarrhea in piglets.Key words:Piglets diarrhea;E. coli;Separation;Identification引言大肠杆菌（Escherichia coli），又叫大肠埃希氏菌，属于肠杆菌科埃希氏菌属，是短杆菌，它的两端呈钝圆形，大小一致，革兰氏染色下呈现红色，为革兰氏阴性菌，一般情况下多是单一或两个存在，但不会排列成长链。
仔猪大肠杆菌的分离鉴定及市售药物比较
仔猪大肠杆菌的分离鉴定及市售药物比较仔猪大肠杆菌是一种常见的猪只肠道中的细菌，它对仔猪的健康产生了一定的影响。
对于仔猪大肠杆菌的分离鉴定及市售药物的比较显得尤为重要。
本文将针对这一问题展开讨论。
一、仔猪大肠杆菌的分离鉴定1. 样品采集首先需要对猪只的粪便样本进行采集。
在采集过程中，需要选择健康的仔猪，并且避免受到外界的污染。
采集后的粪便样本需要尽快送至实验室进行分离鉴定的操作。
2. 菌种分离实验室中，将采集到的粪便样本进行稀释处理，然后通过平板法、滤膜法等方法进行大肠杆菌菌种的分离。
在培养基上形成的典型菌落，会被进一步鉴定。
3. 生化鉴定通过进行生化试剂的反应，可以初步确定菌落中的菌种类型。
比如通过酶反应、糖反应等方式，可以确定分离出的菌株是否为大肠杆菌。
4. 分子生物学鉴定为了更加准确地鉴定出大肠杆菌的菌株，可以通过进行PCR反应、测序分析等方法进行分子生物学鉴定。
这样能够确保所分离出的大肠杆菌菌株的准确性。
通过以上的分离鉴定方法，就可以准确地确定出仔猪大肠杆菌的菌株，进一步为药物的对比研究提供了实验基础。
二、市售药物比较在仔猪大肠杆菌感染的治疗过程中，通常会使用利福平、氧氟沙星、诺氟沙星等抗生素药物来进行治疗。
而这些市售的药物之间在使用效果、副作用等方面存在一定的差异，因此有必要进行这些药物的比较研究。
1. 使用效果比较在治疗仔猪大肠杆菌感染过程中，不同的抗生素药物可能会表现出不同的使用效果。
通过在实验室中构建仔猪大肠杆菌感染模型，分别使用不同的抗生素药物来进行治疗，然后对比它们的治疗效果，可以得出不同药物的使用效果。
2. 副作用比较除了治疗效果外，市售的药物在使用过程中可能会产生一定的副作用。
通过实验研究，可以对不同抗生素药物的副作用进行评估。
比如对肝肾功能的影响、对免疫系统的影响等方面进行综合评估，从而对不同药物的副作用进行比较。
3. 用药成本比较在养猪生产中，用药成本也是养殖户需要考虑的重要因素。
猪源性大肠杆菌的分离鉴定及菌株耐药性分析
应该创建群众服务平台、意访信箱等方式，积极听取人民群众的意 见与建议，了解个体畜牧养殖户的实际需求，从而全方面、多层次 的确保乡镇畜牧兽医技术推广工作能够顺利的进行，并且具有一 定的民主性与先进性。
3 结语
综上所述，要想使我国畜牧兽医技术能够在我国各地乡镇顺 利开展推广工作，相关工作者就必须要了解所在乡镇地区的实际 经济发展状况与工作需求，然后进行详细的分析研究并有针对性 的制定推广实施方案，使国家和当地政府对畜牧产业的发展政策 落到实处，满足乡镇当地的养殖户与人民群众的合理需求，从而使 乡镇畜牧产业的经济效益得到最大程度的提升，促进我国农业经 济全面迅速的发展。█ 参考文献： [1] 王世雄.浅析加强乡镇畜牧兽医新技术推广体系的建设[J].农业与技术, 2018,38(2):81-82. [2] 康卓吉.乡镇畜牧兽医技术推广体系中存在的问题及措施[J].今日畜牧兽 医,2020,36(2):66. [3] 明冠勇.我国乡镇畜牧兽医技术推广中体系存在的问题及应对方案[J].吉 林畜牧兽医,2019,40(6):53+55.
的大肠杆菌耐药性具有一定的差异。P1 菌株对环 丙沙星抑菌圈直径为 19mm，提示对该药物高度敏感；而对氧氟沙 星、头孢噻吩中度敏感，抑菌圈直径显示分别为 15mm 和 11mm； 对四环素、磺胺嘧啶、庆大霉素具有耐药性，所测得的抑菌圈直径 均在 10mm 以下。P2 菌株对抗菌药物的敏感度则有很大差异，表 现出对萘啶酸和氧氟沙星中度敏感，抑菌圈直径分别为 15mm 和 13mm；而对四环素、环丙沙星和和氧氟沙星抑菌圈直径均在 8～ 9mm 之间，具有耐药性。
针对抗菌药物在铜仁市规模化养殖场耐药情况的相关研究报 道较为少见。因此，为了初步了解铜仁市养殖场大肠杆菌耐药情 况，本研究选取笔者服务的某猪场，分别采集成年猪和仔猪肛门拭 子，从中分离大肠杆菌，并选取常见治疗用药物，进行耐药性分析， 旨在为科学用药提供一定的指导。
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绿 色养猪业 的一个 重 要课 题 ， 试 验 旨在 筛 选 出对 本
剂 ， Ｒ试剂 ， —Ｐ试 剂 ， 肉膏 蛋 白胨 培 养 基 ， Ｍ Ｖ 牛 普 通 肉汤培 养基 ， 麦康 凯琼 脂培 养基 ， 伊红 一美 蓝琼脂 培 养基 ， 敏感 试 验 琼 脂 培养 基 （ 自北 京 奥博 星 生 购
作用 。
关键词 ： ； 猪 致病性大肠杆菌 ；分离鉴定 ；中药 ； 抑菌试验
中 图 分 类 号 ： ８ ８ ２ ￥５ ．８ 文献标志码 ： Ａ 文章 编 号 ：０ ２—１０ （０ ８ ０ ０ ７ ０ １０ ３２ ２０ ）４～ １ ６— ４
猪 大肠杆 菌病 是 由致病性 大 肠杆菌 引起 的一 类 仔 猪肠 道传 染性疾 病 的 总称 ， 仔 猪 的一 种 常 见 病 是
四川 绵 阳本 地 菌株 活 性 高 的 中药 ， 临 床 防 治 猪大 为 肠杆 菌病 提供 理论 依据 。
１ 材料 与方 法
１ １ 材料 ．
翁、 大黄 、 皮 、 石 脂 、 秦 赤 白扁 豆 、 厚 老 鹳 草 （ 自 草 购
成 都 中医药 大学 ） 。 １１４ ２ 复 方 中药 ．． ． 根 据 中药复 方 的组 方原 则 Ｊ ， 结 合单 味 中药 的抑 菌试 验结 果 ， 选择 具有 清热解 毒 、 活血 祛瘀 、 表 利湿 等功效 的药 物 ， 解 同时辅 以补 益理 气等 药物 ， 以成 方加减 和 自主组 方 为基础 ， 配制 了 共 １ 复 方 中药 （ １ 。 ２个 表 ） １ １５ 主 要 仪 器 全 自动 高 压 灭 菌 锅 （Ａ Ｙ ． ． ＳＮ Ｏ Ｌ ６ ｕｏｌ ｅ ， 转 蒸 发 仪 （ ｏ ｖｐｒ 一 ０ ） Ａ ０Ａ ｔｃ ｖ ）旋 ａ Ｒ ｔ ａｏ ２ ０ ， ａ Ｒ 无 菌操作 台 （ Ｐ—Ｄ Ｓ Ｊ系 列 垂 直 净 化工 作 台 ） 恒 温 ， 培 养摇 床 （ Ｚ一 ３ １ ， 水 式 电 热 恒 温 培 养 箱 Ｈ ９ １Ｋ） 隔
（ Ｙ — Ｄ Ｓ ０ 一 Ｂ — Ｉ ，光 学 显 微 镜 ＰＸ Ｈ ．４ ０ Ｓ Ｉ）
３ 动物疫病与人类健康 ｌ ． ｍＪ 省重点实验室 ， Ｊ 雅安 ６ ５ １ ） ｌ ｔ ｌ ｍ ｌ ２ ０４
摘要 ： 四ＪＩ 阳市 近郊患病 仔猪 病料中分离到 ４株革兰氏阴性 （ ） 从 ｌ 省绵 Ｇ一 短杆菌 ， 经生化鉴定 和动物试验 确
定 ４株均为致病 性大肠杆 菌。采用 纸片扩散法分别测定 了石榴皮 、 黄柏 、 连翘等 ２ ４种单 味中药 以及 １ 复方 中 ２个
物技 术有 限 责任公 司 ） 微量 生 化 发 酵管 （ 自青 岛 ； 购
高科 园海 博 生物技 术有 限公 司 ） 。
１ １ ３ 实验 动 物 ． ． １ １４ 中药 ．． 健 康 昆 明 小 白 鼠， 重 １ 体 ８～２ ２
ｇ 购 自四川 大学实 验动 物 中心 。 ， １１４ １ 单 味 中药 ．． ． 根据 中药 药性 ， 取 具有 清热 选
和多 发病 。随着 养 猪业 的迅 速 发 展 ， 该病 已逐 渐 成
痢病仔猪的新鲜粪便 ， 病死猪的肝脏 、 脾脏 、 心血等 ， ３ｈ内送 回实验 室待检 。
１ １２ 主 要试剂 及 培养基 ．． 革 兰 氏染液 ， ｏａｓ Ｋ ｖｃ 试
为影 响 养 猪 业 健 康 快 速 发 展 的 重 要 因 素 之 一 。 长期 以来 ， 病 的 防治 主要 依靠 化学 药物 。然 而 ， 该 使 用 化学药 物 防治该 病 ， 不但 会 使 动 物抗 病 力 减 弱 ， 而且 会在 动物体 内残 留蓄积 ， 生毒 副作 用 ， 及 动 产 危 物 和人类 的健 康 。中草药 是我 国特 有 的中 医药 理论 与实践结 合 的产物 ， 因其 具有 药用 、 保健 、 养 、 生 营 促 长 等作 用 ， 以其 低 毒 、 药 物残 留 、 且 无 耐药 性 发 生 率 低 等独 特优势 ， 已愈来 愈 被 国 内外 畜 牧兽 医工 作 者 所重 视 Ｊ 。因 此 ， 用 中 草 药 防 治 猪 大 肠 杆 菌病 ， 使 既是 饲养 动 物 的 需 要 ， 是 人 们 健 康 生 活 的 需 求 。 也 筛选 对病原 微生 物 活 性 高 、 菌强 度 大 、 异 性 高 、 抑 特
维普资讯
一
１６一 ７
江苏农业科学
２０ ０ ８年第 ４期
猪致病 性大肠 杆菌 的分离 鉴定及 对 ２ ４种 中药 的敏感 性
陈希 文 ， 雄 清 ，郭晓 萍 代 王 ， 敏 ，李永 红 ，赵 慧灵
．
（ ． 阳师范学院动物应用技术研究所 ， １绵 四川绵 阳 ６ １０ ； ． ２ ０ ０ ２ 绵阳师范学院分 子生物学与生物制药重点实验室 ， 四川绵阳 ６ １０ ２００
解 毒 、 表利 湿 、 气 温 里 作 用 且 抗 菌 能 力 较 强 的 解 理
２ 单 味 中草药 ： ４种 马齿 苋 、 黄连 、 心 莲 、 香 、 穿 木 石榴 皮、 诃子 、 蒲公 英 、 柏 、 黄 连翘 、 金银 花 、 芩 、 荞麦 、 黄 金
苦参 、 枯 草 、 陈 、 夏 茵 鱼腥 草 、 蓝 根 、 余 粮 、 板 禹 白头
药对 ４株大肠杆 菌的体外抑制效果 ， 并检测 了抑 菌效果较 强中药的最低 抑菌浓度（ Ｃ 。结果表 明， ＭＩ ） 中药 的抑 菌 效果与最低抑菌浓度值随着 中药成分与 菌株 的不 同而呈现 差异 ， 黄连 、 金银花 、 诃子等 １ 种单味 中药对分 离菌株 １
有 显 著 的抑 制 作 用 ， 中 金 银 花 抑 菌 效 果 最 好 ， 低 抑 菌 浓 度 为 ６ ． ／ ｌ在 １ 复 方 中 ， 具 有 较 好 抑 菌 其 最 ２ ５ｍｇｍ ； ２个 ７个