甘草酸提取废液α-葡萄糖苷酶抑制剂的筛选与鉴定

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设计实验甘草酸的提取、测定与纯化

生化实验设计实验报告甘草酸的提取、测定与纯化中药甘草，属豆科植物，生长于草原向阳干燥钙质土地以及河岸沙质地土壤中，富含甘草皂苷，又称甘草酸，特点是高甜度、低热能、安全无毒，起泡性和溶血作用很低。

具有增溶、增加药物稳定性、提高生物利用度及降低毒副作用的功效。

甘草酸的许多金属盐，人体可适当吸收，不易造成元素的积蓄中毒。

因此常被用来配制成健脾开胃、止咳化痰、顺气止喘、治疗慢性肝炎、降低血脂的良药。

同时还具有抗癌防癌、干扰素诱生剂及细胞免疫调节剂等功能。

提取的甘草酸溶液中，还含有大量的蛋白质、果胶、鞣质等物质，在提取过程中，这些杂质也转移到了提取液中。

由于这些物质的大量存在，使得产物的含量降低，试验误差加大，同时甘草酸作为药物和保健品等使用时，杂质还会引起一些副作用，因此必须将这些杂质除去，对甘草酸进行纯化。

一、实验目的1.掌握甘草酸的提取原理和方法。

2.熟悉皂甙的性质和测定方法。

3.掌握甘草酸的分离纯化方法。

二、实验原理甘草酸在原料中以钾盐或钙盐形式存在，其盐易溶于水，因此可用极性溶剂提取，提取后滤液再加硫酸，因难溶于酸性溶液而析出游离甘草酸。

提取后滤液再加硫酸，因难溶于酸性溶液而析出游离甘草酸。

三、实验材料和试剂甘草，极性溶剂，硫酸，苯酚，甘草酸浓缩液四、实验内容与步骤甘草酸的提取（稀氨水提取法）1.1用粉碎机将甘草片粉碎，称取20g甘草粉，加0.6%的稀氨水300mL,在沸水浴中加热60min, 过滤，分别收集滤液和滤渣。

1.2将滤渣加300ml稀氨水重复浸提两次，合并滤液，记录滤液体积。

1.3测定提取液中的甘草酸含量：a.制作标准曲线精密称取甘草酸标准品10.00mg，置于10ml容量瓶中，加70%乙醇溶解并定容。

精密吸取0.50ml、0.75ml、1.00ml、1.25ml、1.50ml，分别置于25ml容量瓶中，加70%乙醇摇匀定容，静置20min，在波长254nm处测定吸光值。

b. 测定甘草酸含量将提取液摇匀，准确移取一定量的提取液转移到25ml容量瓶中，用70%乙醇定容，静置20min 后于254nm处测定吸光度。

甘草酸的提取分离及鉴定实验报告

甘草酸的提取分离及鉴定实验报告甘草酸是一种常见的草药成分，具有广泛的药理活性和医疗应用价值。

本实验旨在通过提取和分离的方法获取纯度较高的甘草酸，并通过一系列鉴定实验确定其结构和纯度。

我们采用乙醇作为提取剂，将甘草粉碎成细粉，然后与乙醇进行浸泡提取。

乙醇具有较好的溶剂性能，可以有效提取甘草中的甘草酸成分。

浸泡时间一般为24小时，可在室温下进行。

提取后，将混合溶液过滤，得到乙醇溶液。

接下来，我们使用分离漏斗将乙醇溶液与等体积的正己烷进行液液分离。

甘草酸在正己烷中的溶解度较低，因此可以通过这种分离方法将甘草酸从乙醇溶液中分离出来。

分离后，我们得到了正己烷层和乙醇层。

然后，我们对正己烷层进行蒸馏提纯。

将正己烷层进行蒸馏，得到的蒸馏液中富含甘草酸。

此时，我们可以使用旋转蒸发仪将蒸馏液浓缩，以便于后续的鉴定实验。

蒸发浓缩后，我们得到了甘草酸的样品。

接下来，我们进行甘草酸的鉴定实验。

首先，我们可以通过比色法确定甘草酸的纯度。

将甘草酸溶解于乙醇中，然后使用紫外可见光谱仪测定其吸收峰的强度和波长。

根据甘草酸的吸收特性，可以确定其纯度。

我们还可以使用红外光谱仪对甘草酸进行鉴定。

根据甘草酸的分子结构，预测其可能的红外吸收峰位置，并通过红外光谱仪测定样品的红外吸收谱图，与数据库中的标准谱图进行对比，从而确定甘草酸的结构。

我们可以使用质谱仪对甘草酸进行质谱分析。

将甘草酸样品溶解于适当的溶剂中，然后通过质谱仪进行质谱测定。

根据质谱图谱的分子离子峰和碎裂峰，可以确定甘草酸的分子量和结构。

通过以上一系列的实验步骤，我们成功提取分离并鉴定了甘草酸。

实验结果表明，我们得到的甘草酸样品具有较高的纯度，并且其结构与甘草酸的结构一致。

这为甘草酸的进一步研究和应用提供了基础。

同时，该实验方法也为其他草药成分的提取和分离鉴定提供了参考。

中药提取物中α－葡萄糖苷酶抑制活性因子的筛选

中药提取物中α－葡萄糖苷酶抑制活性因子的筛选蒲秀瑛;任菁;刘璐;马小龙;李海兵;李晓玥【摘要】目的：从中药提取物中筛选α－葡萄糖苷酶抑制活性因子。

方法：采用α－葡萄糖苷酶活性测定方法PNPG法，以阿卡波糖为阳性对照，对采取不同提取方法制备得到的多糖，生物碱，黄酮和皂苷类化合物进行α－葡萄糖苷酶抑制活性筛选。

结果：党参多糖和桑白皮黄酮对α－葡萄糖苷酶抑制效果较好，接近阿卡波糖，党参皂苷次之，其余组分活性微弱或无活性。

结论：本实验为今后进一步从党参和桑白皮中分离纯化出高活性的α－葡萄糖苷酶抑制活性因子提供了科学依据。

%Objective:To screen α-glucosidase inhibitors from natural products .Methods: In this experiment , PNPG was used to examine the activity of α-glucosidase, compared with the positive drug (Acarbose) reaction rate, screen-ingα-glucosidase inhibitors from polysaccharides , alkaloids, flavonoids and saponins .Results:The result indicated codonopsis pilosula polysaccharide and Cortex Mori flavonoid had a better inhibitory effect on α-glucosidase , close to the acarbose ,and the second was codonopsis pilosula saponin ,and other components were weak activity or inactive .Con-clusion:The paper provides a scientific basis for the further separation and purification of α-glucosidase inhibitors from codonopsis pilosula and Cortex Mori .【期刊名称】《中医药学报》【年(卷),期】2015(000)005【总页数】3页(P68-70)【关键词】党参;桑白皮;阿卡波糖;α-葡萄糖苷酶;α-葡萄糖苷酶抑制因子【作者】蒲秀瑛;任菁;刘璐;马小龙;李海兵;李晓玥【作者单位】兰州理工大学生命科学与工程学院甘肃省中藏药筛选评价及深加工重点实验室，甘肃兰州730050;兰州理工大学生命科学与工程学院甘肃省中藏药筛选评价及深加工重点实验室，甘肃兰州730050;兰州理工大学生命科学与工程学院甘肃省中藏药筛选评价及深加工重点实验室，甘肃兰州730050;兰州理工大学生命科学与工程学院甘肃省中藏药筛选评价及深加工重点实验室，甘肃兰州730050;兰州理工大学生命科学与工程学院甘肃省中藏药筛选评价及深加工重点实验室，甘肃兰州730050;兰州理工大学生命科学与工程学院甘肃省中藏药筛选评价及深加工重点实验室，甘肃兰州730050【正文语种】中文【中图分类】R285党参为桔梗科植物党参(Codonopsis pilosula(Franch)Nannf)及其同属多种植物的干燥根，主要分布于黑龙江、吉林、辽宁、陕西、甘肃、宁夏和四川等省，其性味甘平、无毒，有补中益气、生津止渴、活血化瘀等功效。

兰州大学科技成果——一种从甘草废渣中提取降血糖活性成分的方法

兰州大学科技成果——一种从甘草废渣中提取降血
糖活性成分的方法
成果简介：
提取完甘草酸的甘草药材废渣，一般都被遗弃，堆积如山，污染环境。

本发明涉及一种全新的从甘草废渣中提取降血糖活性成分的方法。

技术特点：
本发明从甘草废渣中提取分离降糖有效成分，制备工艺简单，适宜工业化生产。

主要指标：
通过透析、高效液相进行分析和纯化；通过核磁、质谱进行产物结构鉴定。

应用情况：
本新制剂主要药效成分是从中药甘草中提取分离的天然α-糖苷酶抑制剂，该有效部位可以从提取完甘草酸的甘草废渣中提取，来源广泛，变废为宝。

本发明属于废弃资源再利用研究，有利于环保和中药资源再利用。

我研究组经十余年的努力，从甘草药材及甘草药材废渣中提取分离出具有明确降糖作用的活性部位，并研制出甘草降糖分散片制剂。

甘草乙醇提取物的体外抑制α-葡萄糖苷酶、抗氧化活性及HPLC-MS分析

甘草乙醇提取物的体外抑制α-葡萄糖苷酶、抗氧化活性及HPLC-MS分析孙佳明;宗颖;雷岱虹;贾雪婷;张林林;杜延佳;张辉【期刊名称】《中成药》【年(卷),期】2013(035)009【摘要】目的对甘草乙醇提取物体外降血糖和抗氧化活性进行研究,并对其化学成分进行分析.方法甘草乙醇提取物经大孔树脂精制后进行抑制α-葡萄糖苷酶和清除DPPH自由基实验;采用高效液相色谱-质谱联用技术对甘草乙醇提取物化学成分进行分析.结果甘草乙醇提取物能够较好地抑制α-葡萄糖苷酶活性和清除DPPH自由基,并与提取物浓度存在明显的量效关系,经液质联用分析共鉴定出15个脂溶性黄酮类成分.结论甘草乙醇提取物具有体外抑制α-葡萄糖苷酶、抗氧化活性,其主要有效成分为脂溶性黄酮类化合物.【总页数】4页(P1943-1946)【作者】孙佳明;宗颖;雷岱虹;贾雪婷;张林林;杜延佳;张辉【作者单位】长春中医药大学中医药与生物工程研发中心,吉林长春130117;吉林农业大学中药材学院,吉林长春130118;吉林农业大学中药材学院,吉林长春130118;长春中医药大学中医药与生物工程研发中心,吉林长春130117;长春中医药大学中医药与生物工程研发中心,吉林长春130117;长春中医药大学中医药与生物工程研发中心,吉林长春130117;长春中医药大学中医药与生物工程研发中心,吉林长春130117【正文语种】中文【中图分类】R284.1【相关文献】1.海南山竹果实不同部位多酚提取物抗氧化活性、乙酰胆碱酯酶和α-葡萄糖苷酶抑制活性研究 [J], 谭琳;周兆禧;王甲水;马伏宁;康由发2.葡萄、芒果、草莓乙醇提取物抗氧化活性组分分析及其抗氧化相互作用 [J], 潘瑶;郑时莲;邹兴平;熊字伟;邓泽元;李红艳3.大果榕果实乙醇提取物抗氧化活性及对α-葡萄糖苷酶和乙酰胆碱酯酶抑制活性[J], 谭琳;郑晓燕;王甲水;马伏宁;康由发;臧小平;马蔚红4.富硒菊花提取物的抗氧化活性及其对α-淀粉酶和α-葡萄糖苷酶活力的影响 [J], 赵子华;张斐然;韩永旭;李巧;张华峰;王星宇5.茅莓根提取物的体外抗氧化活性和α-葡萄糖苷酶、乙酰胆碱酯酶抑制能力研究[J], 林紫兰;沙小梅;张志斌;夏其乐;孙蕊;王振兴因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

α-葡萄糖苷酶抑制剂产生菌的分离鉴定及其生物活性研究

一
葡萄糖苷酶抑制剂（—ｌｃｓａｅｉｈｂｔｒ是ｇｕｏｉｓｎｉｉ）ｄｏ
ｃ葡萄糖苷酶抑制剂主要来源于微生物代谢产ｃ一
一
种糖苷水解酶抑制剂，它能够抑制人体小肠上皮
物［ｌｚ、天然产物［］化学合成产物【。但由于其化－５６和．ｓ９】
中国抗生素杂志２１年１月第３卷第１期００１５１
８ｌ３
文章编号：１０ —６９２１）１８１００１８８（００１－３ —４０
．葡萄糖苷酶抑制剂产生菌的分离鉴定及其生物活性研究］Ｅ．
杨明琰１田稼２马瑜２黄继红２ａｍｂｅｆＳｔｅｏｒｏｒｐｔｍｙｃｓＣｏｎｌｉｎＴｈｓｓｒｅｎｇｍｅｈｏＳｓｍｐｌｎｅｉｂｌ，ｎｄｓａｎＤ００ｅ．ｅｕｓｏｉｃｅｎｉｔｄｉｉｅａｄｒｌａｅａｔｉ４６ｒｍａｈａｅｈｇｔｎｔａｈｒａｅｉａｌｐａｉｎｓＳｆｅｉｇｆｏｄａｔｓｙｖｉｈｐｏｅｉｌａｍｃｕｔｃｌｕｅｉｐｖａｎｔｅｔＵｒｎｍｉｂｅｅ．ｒＫｅｒｓ０ａｖｗｏｄ【ｍｙｌｓｈｉｉｏ；ｃｕｏｓｄｓｎｉｉｏ；ＳｒｅｎＩｎｉｃｔｏＳｒｐｔｍｙｃｓ一ａｅｉｂｔｒｃ．ｃｉａｅｉｂｔｒｃｅｎｉｇ；ｄｅｔｆａｉｎ；ｔｅｏｎｇｌｈｉｅ

一种新型的α-葡萄糖苷酶抑制剂的提取及活性测定[发明专利]

(10)申请公布号 CN 101757176 A(43)申请公布日 2010.06.30C N 101757176 A*CN101757176A*(21)申请号 200810162970.6(22)申请日 2008.12.11A61K 36/739(2006.01)A61P 3/10(2006.01)(71)申请人湖州来色生物基因工程有限公司地址313100 浙江省德清县武康镇长虹街333号申请人吴菁(72)发明人陈群吴菁(54)发明名称一种新型的α-葡萄糖苷酶抑制剂的提取及活性测定(57)摘要本发明公开了一种新型的α-葡萄糖苷酶抑制剂的提取及活性测定。

用微波法从蔷薇科植物地榆中提取得到的有效成分，通过对酵母α-葡萄糖苷酶活性抑制测定，该有效成分能显著的抑制α-葡萄糖苷酶的活性，抑制率达100％。

地榆提取物将作为一种新型的a-葡萄糖苷酶抑制剂用于糖尿病的治疗，具有广阔的应用前景。

(51)Int.Cl.(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请权利要求书 1 页说明书 2 页权利要求书CN 101757176 A1/1页1.一种新型的α-葡萄糖苷酶抑制剂的提取方法，其特征在于包括以下步骤：取地榆块根，切成薄片，按照比例加入水，用微波加热提取，重复提取几次，减压浓缩得到地榆粗提物。

加入氯仿-正丁醇(v∶v＝4∶1)脱蛋白，而后离心，除去沉淀，取上清液在紫外下测定无蛋白吸收峰为止。

上清液再用蒸馏水透析48h，除去溶剂，浓缩透析液，真空干燥，即得到本发明所说的地榆提取物。

2.根据权利要求1所说的提取物的制备方法，其特征在于：原料按照1∶15-20的比例加水，反应温度为86℃-90℃，提取时间0.5-1h，提取次数为3次。

3.根据权利要求1所说的提取物的制备方法，其特征在于：得到的粗提物，加入10倍体积的氯仿-正丁醇脱蛋白，3000r/min离心20min，在260nm-280nm测定有无吸收峰；蒸馏水透析时间为48h。

知母中α-葡萄糖苷酶抑制剂的提取分离及鉴定

知母中α-葡萄糖苷酶抑制剂的提取分离及鉴定
蓝萍;叶小利;李学刚;王亮;黄文文;柳明
【期刊名称】《中成药》
【年(卷),期】2010(032)011
【摘要】目的:筛选知母中降血糖的活性成分.方法:以α-葡萄糖苷酶为靶标,采用大孔吸附树脂色谱法和苇结晶等操作对知母的醇提物进行分离纯化.筛选知母中α-葡萄糖苷酶抑制剂.结果:知母30%醇洗脱物对α-葡萄糖苷酶抑制活性最强,对其进一步分离纯化,分离出知母中降血糖活性单体,经1H-NMR等结构鉴定为芒果苷.结论:芒果苷为知母中抑制α-葡萄糖苷酶的主要活性成分.
【总页数】4页(P1945-1948)
【作者】蓝萍;叶小利;李学刚;王亮;黄文文;柳明
【作者单位】西南大学药学院药用资源研究所,重庆400716
【正文语种】中文
【中图分类】R284.2
【相关文献】
1.桑叶中α-葡萄糖苷酶抑制剂产生菌的分离鉴定及诱变选育 [J], 朱孟峰;许伟;邵荣;韦萍
2.产α-葡萄糖苷酶抑制剂的桑树内生细菌分离及鉴定 [J], 武婷婷;刘万振;生吉萍;王正荣;申琳
3.纸色谱法筛选知母中α-葡萄糖苷酶抑制剂 [J], 陈丽华;潘自红;曹云丽;马庆一
4.知母中α-葡萄糖苷酶抑制剂的提取及性质研究 [J], 杨秀芳;陈梅;闫倩茹
5.藏药材诃子中3种α-葡萄糖苷酶抑制剂的分离与鉴定 [J], 马家麟;陈涛;谭亮;王环;李玉林
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α-葡萄糖苷酶抑制剂体外筛选方法的研究

Ｄａｉｎ１１０３ＬｉｏｉｇＣｈｎ；．ｔｔｙＬｂｒｔｒｆｗ—ｔｃｒＣｈｎｓｅｉｉｅＰａｍａｅｔｃｌｏｅｓｌａ６４，ａｎｎｉａ３ＳａｅＫｅａｏａｏｏｙＮｅｅｈｆｉｅｅＭｄｃｎｈｒｃｕｉａｃｓ．ｏＰｒ
食品研究与开发
生物工程
ＦｏｄＲｅｅｒｈＡｎｖｌｏｎｏｓａｃｄＤｅｅｏｍｅｔ
２１０２年８月
第３卷第８ｌ３期７１
一
葡萄糖苷酶抑制剂体外筛选方法的研究
朱文佳１寇自农２曦付绍平朱靖博ｌ，萧伟，，张，，Ｉ，ｌ４
Ａｂｔａｔｓｒｃ：Ａｏｅｃｅｎｎｔｏｒｅ－ｇｕｏｉａｅｉｈｂｔｒａｅｎｅｔｂｉｈｄｂｎｖｌｓｒｅｉｇｍｅｈｄｆ￣ｌｃｓｄｓｎｉｉｏｓｈｓｂｅｓａｌｓｅｙＨＰＬｎｖｔｏＴｈｏＣｉｉ．ｅｒｅｚｍａｉｃｉｉｉｓｏ－ｌｃｓｄｓｒｅｅｍｉｅｙｍｏｉｒｎｈｅｅｓｆＰＮＰｆｏｔｅｓｂｔａｅｎｙｔａｔｖｔｅｆｃｇｕｏｉａｅｗｅｅｄｔｒｎｄｂｎｔｉｇｔｅｒｌａｅｏｏｒｍｈｕｓｒｔＰＮＰＧ．Ｉｏｄｒｏｍｐｏｅｔｅｅｅｔｏｓｎｉｖｔ，ｔｅｏｄｔｎｏｎｙｅ— ａａｙｅｒａｔｎ．ｎｒｅｔｉｒｖｈｄｔｃｉｎｅｓｔｉｙｈｃｎｉｉｓｆｅｚｍｉｏｃｔｌｚｄｅｃｉｗｅｅｏｒｏｔｚｄｐｉｅ．ＡｃｒｏｅｗａｓｄｔａｉａｅｔｅｅｔｂｉｈｄｍｅｈｄＴｅｒｓｌｓｓｏｄｔａｈＣ５ｖｌｅｆ — ｍｉａｂｓｓｕｅｏｖｌｄｔｈｓａｌｓｅｔｏ．ｈｅｕｔｈｗｅｈｔｔｅＩ０ａｕｓｏｇｕｏｉａｅｉｈｂｔｒｃｉｉｅｆＡｃｒｏｅｗａ．７ｍｇｍＬ．Ｗｈｃｓｃｏｅｏｔｅｅｐｒｍｅｔｌｄｔｌｃｓｄｓｎｉｉｏｓａｔｔｓｏａｂｓｓ２０／ｖｉｉｈｗａｌｓｄｔｈｘｅｉｎａａｅｒｐｒｅｎｌｔｒｔｒｓＳｈｓｍｅｈｄｃｕｄｂｓｄａｎａｔｒａｉｅｏａｉｏａｔｏｆｒｍｂｙ，ｎｔｅｏｔｄｉｉａｕｅ．ｏｔｉｔｏｏｌｅｕｅｓａｌｅｎｔｆｔｄｔｎｌｅｖｒｉｍｅｈｄｏＴｅｌａｄｉｃｕｄｂｓｄｉｅｈｇ —ｔｒｕｈｐｔｓｒｅｉｇｏ一ｌｃｓｄｓｎｉｉｒ．ｏｌｅｕｅｔｉｈｈｏｇｕｃｅｎｎｆｇｕｏｉａｅｉｈｂｔｓｎｈｏＫｅｒ：０一ｌｃｓｄｓｎｉｉｏｓＨＰＬｓｒｅｉｇｍｏｅ；ｉｂｔｓｍｅｌｔｓｅｚｍｅｋｎｔｃｙｗｏｄｓ【ｇｕｏｉａｅｉｈｂｔｒ；Ｃ；ｃｅｎｎｄｌｄａｅｅｌｉ；ｎｙｉｅｉｓｕ

α-葡萄糖苷酶在凝胶珠和纸基上的固定化及其酶抑制剂筛选

α-葡萄糖苷酶在凝胶珠和纸基上的固定化及其酶抑制剂筛选α-葡萄糖苷酶是一种重要的酶类，参与了糖代谢和消化系统中的一系列生化反应。

酶的固定化（enzymes immobilization）是一种将酶固定在某种载体上的方法，以提高酶的稳定性和重复使用性。

本文将介绍α-葡萄糖苷酶在凝胶珠和纸基上的固定化方法，并探究了其在酶抑制剂筛选中的应用。

α-葡萄糖苷酶的固定化是一种常用的生物技术手段，通过限制酶的运动，提高其在特定条件下的稳定性和催化活性。

凝胶珠是一种常用的酶固定化载体，其具有较大的表面积和很强的化学稳定性。

凝胶珠表面的活性基团可以与酶分子上的氨基酸残基或羧基发生共价键结合，从而实现酶的固定化。

同时，凝胶珠还可以在酶固定化后充当保护层，避免酶在极端环境条件下发生变性。

另外，凝胶珠在反应体系中起到了“支架”的作用，增加了底物与酶结合的机会，进一步提高了酶催化的效率。

与凝胶珠不同，纸基是一种较为简单和廉价的酶固定化载体。

纸基表面往往带有一定的孔隙结构，这为酶的固定化提供了空间。

一种常见的纸基酶固定化方法是将酶溶液滴在纸基上，然后通过干燥将酶固定在纸基的孔隙中。

与凝胶珠不同，纸基的固定化方式更为简单，但纸基的载体能力较弱，因此固定化后的酶活性可能会受到限制。

在酶抑制剂筛选方面，固定化的α-葡萄糖苷酶在底物中添加潜在的酶抑制剂，观察酶催化反应的变化，从而筛选出具有酶抑制活性的化合物。

通过固定化的酶，我们可以有效地筛选出具有高抑制活性和选择性的化合物。

这种方法在药物开发和生物医学领域具有重要应用，可以发现新的疾病治疗药物或药物作用机制。

综上所述，α-葡萄糖苷酶在凝胶珠和纸基上的固定化可以提高酶的稳定性和活性，为酶的重复使用和底物转化提供了新的途径。

同时，在酶抑制剂筛选中，固定化的酶可以有效地筛选出具有潜在药物活性的化合物。

这些方法在生物医学研究和药物开发中具有重要的意义，对于探索新的治疗方法和药物作用机制具有重要的帮助综合来看，通过凝胶珠和纸基的固定化，α-葡萄糖苷酶的稳定性和活性得到了提高，为酶的重复使用和底物转化提供了新的途径。

天然产物α-葡萄糖苷酶抑制剂筛选研究进展

ｐｒｌｆｓｅｗｅｔｏａｏ，ｐｍｏａｂｔｔｓ［．ｏｒａｆｕｐｅｌｈｄｓｅｔｔｉｏｅａａａＪＪｕｎｌ — ｅｐＬ］ｏ
Ｂｉｍｅｉｎｎｉｔｃｌｇ２０，５）７ — ２６ｏｄｃｅｄＢｏｅｌｏｙ，０４（：２９ｉａｍｏ８．
李等甘薯花青素的提取及其抑菌效果分
析［．Ｊ中国农业科学，０５３（１：２２ — ２２．］２０，８１）３１３６
［韩永斌，１３４朱洪梅，顾振新，．等紫甘薯花色苷色素的抑菌作用研究［．生物学通报，０８３（）９３１．Ｊ微］２０，５６：１ —９７［５李春红，１３李泱，李新芳，．等南沙参多糖抗衰老作用的实验研究［．Ｊ中国药理学通报，０２１：５ —４５］２０，８４２５．［６王杉，１３邓泽元，曹树稳，．等紫薯色素对老龄小鼠抗氧化功能的改善研究［．Ｊ营养学报，０５２（）２５４．］２０，７３：４ —２８
［０王关林，１３岳静，苏冬霞，．等甘薯花青苷色素的抗氧化活性及抑
肿瘤作用研究［．Ｊ营养学报，０６２（）：１４］２０，８１７ —７．
［１刘叶玲，１］朱莉，韩志武，．等青紫薯色素保护小鼠抗ｃ射。ｏＹ
ｉｈｂｔｒｃｉｎ［．ｒ．ｏｄＣｈｍｉｔ，０２５２：ｎｉｉｙａｔｏｏＪＡｇｉＦｏｅｓｙ２０，０（５）］ｃｒ

大孔吸附树脂分离纯化甘草中α-葡萄糖苷酶抑制剂的

Separation and purification of α-glucosidase inhibitor in Glycyrrhizins by macroporous adsorption resin
ZENG Lan, WU Hui, LI Xiao-feng*
(College of Light Industry and Food Sciences, South China University of Technology, Guangzhou 510640)
提取物与应用
速攀升，已造成严重经济负担和社会压力。当前传统口服降糖药物对血糖的控制不理想，难以达到血糖控制目标 [1] 。α-葡萄糖苷酶抑制剂是一类新型的口服降糖药 [2]，阿卡波糖(Acarbose，拜糖平)、伏格列波糖(Voglibose，倍欣)、米格列醇(Miglitol)是20世纪90年代开发的降糖药，现已作为治疗2型糖尿病的首选药和1型糖尿病的辅助药物普遍应用于临床 [3]。甘草为豆科植物甘草 (Glycyrrhiza uralensis Fisch)的干燥根及根茎。有研究报道，甘草总水提物亦具有一定的α-葡萄糖苷酶抑制作用[4-5]。经初步实验筛选结果表明，甘草水提液的乙酸乙酯萃取部分相对于其他部分在体外具有最强的α-葡萄糖苷酶抑制活性。对其进行进一步酶抑制作用研究结果显示，其酶抑制作用呈剂量依赖关系，且作用迅速[6]。大孔吸附树脂具有多孔性和较大的比表面积，主要通过物理作用从溶液中有选择性地吸附有机物质，从而达到分离纯化的目的[7]，目前已经在中草药化学成分的分离、富集中得到了越来越广泛的研究和应用。迄今为止，尚未见利用大孔树脂分离纯化甘草水提液中α-葡萄糖苷酶抑制物质的相关研究。本研究针对上述研究现状，首次探讨了不同类型大孔树脂分离纯化α-葡萄糖苷酶抑制物质的工艺条件，旨在为甘草水提液中α-葡萄糖苷酶抑制物质的制备和应用提供新思路。 1 材料与方法 1.1 材料与仪器 PHS225数显pH计：上海精密科学仪器有限公司；UV-1700紫外分光光度计；树脂 AB-8、NKA-9：南开大学树脂厂；树脂HPD400、HPD-722、HPD-750：沧州宝恩吸附材料科技有限公司；树脂AL-1、AL-2、0U-2：天津欧瑞生物科技有限公司；α-葡萄糖苷酶 (α-glucosidase，EC31211120，Type Ⅰ：From Bakers Yeast)、4-硝基苯-α-D-吡喃葡萄糖苷 (4-Ni-tropheny-α-D-glucopyranoside，PNPG， EC223218923)：Sigma公司；药材：广州市中药材市场，经鉴定为豆科植物甘草(Glycyrrhiza uraleniss Fisch)；其余试剂：分析纯。 1.2 实验方法 1.2.1 大孔吸附树脂的预处理将大孔吸附树脂用 95%的乙醇浸渍24 h，从树脂的微孔中赶出气泡，然后用95%乙醇淋洗，洗至流出液在试管中用水

甘草黄酮的提取分离及其葡萄糖苷酶抑制活性研究

亿与生物Ｚ程２０１７，Ｖｏ１．３４Ｎｏ．１１ＷＷＷ．ｈｘｙｓｗｇｃ．ｃｏｍ
Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ＆Ｂｉｏｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ
田
ｄｏｉ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１６７２ —５４２５．２０１７．１１．００４
ＹＡＮＧＪｉａｎｐｉｎｇ，ＳＵＴｉｎｇ — ｔｉｎｇ，ＺＨＡＮＧＨａｎ－ｊｉｅ，
ＬＩＮＸｉａｏ — ｃｈｕｎ，ＬＩＵＸｉａｏ — ｙｉ，ＨＵＡＮＧＨａｏ，ＷＡＮＧＹａ一１ｉ
（广东第二师范学院化学系，广东广州５１０３０３）
摘要：采用超声提取和碱溶酸沉法提取甘草的活性成分甘草黄酮；通过化学显色法进行定性鉴定，采用分光光度
法测定甘草黄酮含量；并建立了一种基于电化学法的葡萄糖苷酶抑制活性筛选新方法，以临床降糖药阿卡波糖验证了电化学筛选法的可靠性。结果表明，甘草黄酮具有较好的葡萄糖苷酶抑制活性，其Ｉｃｓｏ为６７．６ｍｇ・Ｌ一。葡萄糖苷酶抑制活性电化学筛选法具有良好的准确性和抗干扰能力，为中药葡萄糖苷酶抑制剂的研发提供了有价值的参考。

纸色谱法筛选知母中α-葡萄糖苷酶抑制剂

Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｔｈｅｅｎｚｙｍａｔｉｃｒｅａｃｉｔｏｎｍｅｔｈｏｄ，ｐａｐｅｒｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙｎｄａｓｐｅｃｔｒｏｐｈｏｔｏｍｅｔｒｉｃｍｅｔｈｏｄｗｅｒｅｃｏｍｂｉｎｅｄｔｏ
陈丽华，潘自红，曹云丽，马庆一
（平顶山学院化学化工学院，河南平顶山４６７０００）
摘要：采用酶反应、纸色谱和比色相结合法筛选知母中Ｏｔ一葡萄糖苷酶抑制剂。实验条件：Ｉ）酶反应：底物浓度１０ｍｇ／ｍＬ、酶用量为１００Ｌ、反应时间８ｈ；２）纸色谱测定微量葡萄糖：点样量７ＯＬ、展开体系正丁醇一丙酮一水（２：７：Ｉ）、展开方向为径向；３）比色：色谱后苯胺一邻苯二甲酸盐显色，蒸馏水洗脱，
中图分类号：Ｏ６５７
Ｓｃｒｅｅｎｉｎｇｏｆａ－ＧｌｕｃｏｓｉｄａｓｅＩｎｈｉｂｉｔｏｒｓＦｒｏｍＲｈｉｚｏｍａ
ＡｎｅｍａｒｒｈｅｎａｅｓｂｙＰａｐｅｒＣｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ
ｓｃｒｅｅｎａ－ｇｌｕｃｏｓｉｄｓｅａｉｎｈｉｂｉｔｏｓｒｆｒｏｍＲｈｉｚｏｍａｎｅａｍａｒｒｈｅｎａｅｓｉｎｈｉｔｓｅｘｐｅｉｒｍｅｎｔ．ｈｅＴｅｘｐｅｉｍｅｒｎｔａｌｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓｗｅｒｅａｓｆｏｌｌｏｗｓ：ｈｅｔｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｏｆｓｕｂｓｔｒａｔｅｗａｓ１０ｍｇ／ｍＬ，ａｍｏｕｎｔｏｆｈｅｔｅｎｚｙｍｅｗａｓ１００，ｎｄａｈｅｔｒｅａｃｔｉｏｎｔｉｍｅｗａｓ８ｈｉｎｅｎｚｙｍａｉｔｃｅａｒｃｉｔｏｎ；ｈｅｔｏｐｉｔｍｕｍｃｏｎｄｉｔｉｏｎｏｆｐａｐｅｒｃｒｏｈｍａｔｏｇｒａｐｈｙ：ｖｏｌｍｅｕｏｆｓａｍｐＩｅｗａｓ７０，ｏｐｅｎｓｙｓｔｅｍｗａｓ

葡萄糖苷酶抑制剂筛选方法

葡萄糖苷酶抑制剂筛选方法α-葡萄糖苷酶抑制剂是一类以延缓肠道碳水化合物吸收而达到治疗糖尿病的口服降糖药物。

其作用机制为：竞争性抑制位于小肠的各种α-葡萄糖苷酶，使淀粉类分解为葡萄糖的速度减慢，从而减缓肠道内葡萄糖的吸收，降低餐后高血糖。

α-葡萄糖苷酶抑制活性筛选的原理是：对-硝基苯酚-α-D-葡萄糖苷(pNPG)作反应底物；该底物是无色的。

经α-葡萄糖苷酶水解后可以释放出对-硝基苯酚(pNP)，pNP在碱性条件下是黄色的，因此可以通过测定410nm处的吸光度反应出pNP的浓度(吸光度与pNP浓度成正比关系)。

吸光度越小，说明pNP的浓度越小，即酶被抑制的程度越大。

设不加样品时，测得的吸光度为c0, 加样品后测的吸光度为c1. 那么酶的抑制率可通过1-c1/c0计算出来。

一实验试剂：α-Glucosidase(α-葡萄糖苷酶)、4Nitrphtnylα-D-glucopyranoside(4-硝基苯-α-D-吡喃葡萄糖苷)（PNPG）、Acarbose(阿卡波糖) 均购自Sigma公司，无水Na2CO3、Na2HPO4、KH2PO4等, 均为分析纯。

水为超纯水。

苦瓜提取物。

二实验器材：Bio Tek酶标仪、电子天平、Eppendorf的移液器、pH计、酶标板、恒温水浴器三实验方法：（一）试剂配制（1）pH值6.8的0.1 mol/L磷酸缓冲液分别配制0.1 mol/L Na2HPO4和KH2PO4(13.6 g配成1L)，用这两种溶液混匀互调pH 值至6.8即得0.1 mol/L磷酸缓冲液（2）用pH值6.8的0.1 mol/L磷酸缓冲液配制0.26 U/mlα-Glucosidase（3）底物(PNPG)用pH值6.8的0.1 mol/L磷酸缓冲液配制成浓度为5 mmol/L (1.505mg/ml) （4）反应终止液：0.2 mol/L Na2CO3。

（5）阳性药的配制：精密称取阿波卡糖样品，以磷酸缓冲液为溶剂溶解，配成10 mg/ml 的浓度。