毒理学动物实验设计
药理毒理学实验
药理毒理学实验
引言
药理毒理学实验是药物研究过程中的重要环节之一。药理毒理学实验主要通过实验手段，对药物的药理作用及有害效应进行评估，为药物的研发提供科学依据。本文将介绍药理毒理学实验的基本概念、实验设计和实验步骤等内容。
药理毒理学实验的基本概念
药理学
药理学是研究药物在机体内的作用机制、效应和代谢过程的学科。药理学实验通过对药物在体内及体外的作用机制进行研究，来评估药物的药理活性和安全性。
毒理学
毒理学是研究有害物质对机体产生有害效应的学科。毒理学实验通过对有害物质的毒性和危害性进行评估，来判断其对人体健康的影响程度。
药理毒理学实验的目的
药理毒理学实验的主要目的是评估药物的药理作用和毒性，以确定药物的有效剂量范围和安全性。通过药理毒理学实验的结果，可以为进一步的临床试验和药物注册提供科学依据。
药理毒理学实验的实验设计
实验动物的选择
在药理毒理学实验中，通常选择小鼠、大鼠、兔子、猪等
动物作为实验对象。实验动物的选择应根据药物的使用目的、药物在不同动物体内的代谢和反应差异等因素进行合理选择。
实验组和对照组的设置
药理毒理学实验中，通常将实验对象分为实验组和对照组
进行比较。实验组接受药物处理，而对照组则不接受药物处理，用来评估药物处理后的效应。
实验参数的评估
药理毒理学实验中，常用的评估参数包括药物的生物利用度、药物的作用机制、药物的药效和剂量效应关系、药物的副
作用等。通过对这些参数进行评估，可以全面了解药物的药理作用和安全性。
药理毒理学实验的实验步骤
实验前准备
实验前准备包括准备实验材料和设备、对实验动物进行适
药理毒理学实验
药理毒理学实验
药理毒理学实验是指研究药物对机体生理和病理过程的影响以及药物的毒性和安全性的实验研究。这些实验常用于药物的开发、评价和监管。
药理学实验常包括以下方面的研究：
1. 药物在体内的吸收、分布、代谢和排泄过程；
2. 药物对生理系统和器官的作用机制和效应；
3. 药物对生理参数（如血压、心率、血糖等）的影响；
4. 药物的药效学研究，如测定最小有效剂量、最大耐受剂量等。
毒理学实验主要研究药物对机体引起的毒性反应，包括急性毒性、慢性毒性和亚慢性毒性等。常用的毒理学实验包括：
1. 急性毒性实验：用于确定药物对动物的一次性剂量引起的毒性反应；
2. 慢性毒性实验：用于评估长期接触药物对动物的毒性效应；
3. 亚慢性毒性实验：用于评估中长期接触药物对动物的毒性效应；
4. 各种毒性指标的测定，如致死剂量、半数致死剂量、致畸性、致癌性等。
药理毒理学实验通常在动物模型中进行，常用的动物包括小鼠、大鼠、猴等。实验设计需要符合伦理规范，并进行必要的安全措施，以确保实验过程安全且可靠。
值得注意的是，药理毒理学实验虽然可以提供药物效果和毒性的初步评估信息，但实验结果在转化到人类临床应用方面仍需要进行更进一步的研究和验证。
毒理学动物实验基本操作
毒理学动物实验基本操作
一，实验目的
1.了解动物实验是毒理学研究的重要手段之一
2.掌握小鼠动物实验的基本操作
二，实验器材
电子称，小鼠固定器，注射器，灌胃针，棉签，镊子，生理盐水，苦味酸。
三，实验内容
1.实验动物（小鼠、大鼠）性别鉴定：
性别鉴定依据：性器官与肛门的距离
2.实验动物抓取和固定。
3.大鼠和小鼠的称重和编号标记方法
大鼠均为250g 编号方法如图所示：
实验动物基本信息如下表：
编号性别类别体重/g
13 雌小鼠22.63
27 雄小鼠23.92
56 雌小鼠22.78
7 雄大鼠250.00
18 雌大鼠250.00
124 雄大鼠250.00
179 雄大鼠250.00
4 .大鼠和小鼠的灌胃给药方法：
灌胃时灌胃针按在注射器上，吸入药液。左手抓住鼠背部及颈部皮肤将动物固定，右手持注射器，将灌胃针插入动物口中，沿咽喉壁徐徐插入食道。动物应固定成垂直体位，针插入时应无阻力。常用灌胃量：小鼠0.2ml，大鼠1ml。
5. 小鼠腹腔注射给药：
左手抓住动物，使腹部向上，右手将注射针头于左下腹部刺入皮下，使针头向前推0.5~1.0cm，再以45度角穿过腹肌，固定针头，缓缓注入药液。
6. 小鼠尾静脉注射给药：
操作时，应将小鼠头部用棉手套盖住，用酒精棉球反复擦拭尾部使血管扩张，以左手拇指和食指捏住鼠尾两侧，使静脉充盈，注射时针头与尾部平行的角度进针，开始注射时少量缓注，如无阻力，表示针头已进入静脉，便可进行注射。
7. 处死方法（股动脉放血）：各组留取全血5 ml备用（15 ml离心管，加抗凝剂）
方法是：将老鼠固定于固定架上，剪开腹股沟处皮肤，即可看到股静脉，剪开此静脉用15ml离心管采血即可。大鼠可采8ml血。
环境毒理学实验教案
青海大学生态环境工
程学院
环境毒理学实验报告
科目：环境毒理学
姓名：田成龙
学号：1200602036
实验一动物试验的一般操作技术
一、目的与要求
毒理学的许多试验研究，主要通过动物实验来进行。而实验过程中技术及生物材料的收集是否恰当，直接影响实验结果的质量。因此，毒理学实验工作者必须正确地掌握动物实验中的一般操作技术，这是保证试验工作成功的基本条件之一。本实验要求掌握动物的捉拿、固定、麻醉、编号、采血、处死方法和解剖检查。
二、实验内容和方法
（一）实验动物的捉拿和固定方法
1、小鼠：捉拿时先用右手将鼠尾抓住提起，放在较粗糙的台面或鼠笼上，在其向前爬行时，右手向后拉尾，用左手拇指和食指抓住小鼠的两耳和头颈部皮肤，将其固定于左手手心中，拉直四肢并用左手无名指压紧尾和后肢，右手即可作注射或其他实验操作。取尾血及尾静脉注射时，可将小鼠固定在金属或木制的固定器上。
2、大鼠：大鼠抓取方法基本同小鼠，抓大鼠时若操作者不熟练，或者大鼠特别凶猛，操作者最好戴上防护手套(帆布或硬皮质均可)。如若是灌胃、腹腔注射、肌肉和皮下注射时，可采用与小鼠相同的手法，即拇、食指捏住鼠的耳朵及头颈皮肤，余下三指紧捏住背部皮肤，置于掌心中，调整大鼠在手中的姿势后即可操作。
3、豚鼠：豚鼠性情温和，胆小易惊，一般不易伤人，抓取时，先用手掌扣住豚鼠背部，抓住其肩胛上方，拇、食指环握颈部，另一
只手托住臀部。如果在实验时豚鼠频繁挣扎，不宜采用此方法，因为操作者的拇、食指会随动物的挣扎越抓越紧而引起豚鼠窒息。另外，有时可用纱布将豚鼠头部轻轻盖住，操作人员轻扶住其背部或者让其头部钻到实验人员的臂下，然后进行实验操作。
毒理学动物实验设计
毒理学动物实验设计
一,毒理学毒性评价试验的原则
毒理学实验通常是毒性评价或安全性评价试验,通常由权威机构规定评价程序.
在描述毒理学的试验中,有三个基本的原则:
1.外来化学物在实验动物产生的作用,可以外推于人
基本假设为:
①人是最敏感的动物物种;
②人和实验动物的生物学过程包括化学物的代谢,与体重(或体表面积)相关.
2.实验动物必须暴露于高剂量
是发现对人潜在危害的必需的和可靠的方法.
一般要设3个或3个以上剂量组,以观察剂量-反应(效应)关系,确定受试化学物引起毒效应及其毒性参数.
(1)毒性试验的设计并不是为了证明化学品的安全性,而是为了表征化学品可能产生的毒作用.
(2)毒理学试验中实验模型所需的动物总是远少于处于危险中的人群.为了在少量动物得到有统计学意义的可靠的结果,需要应用相对较高的剂量,以使效应发生的频率足以被检测.
3.成年的健康实验动物和人可能的暴露途径是基本的选择
(1)成年的健康(雄性和雌性未孕)实验动物作为一般人群的代表性实验模型.
幼年和老年动物,妊娠的雌性动物,疾病状态作为特殊情况另作研究.
(2)毒理学试验中染毒途径的选择,应尽可能模拟人接触该受试物的方式.
1.对照原则
在动物实验中,要求相比较的各组间动物的种类,性别,年龄,体重等尽可能地一致.对照组与实验组同等重要,两组的动物数应相等.
(1)空白对照:又称正常对照
(2)标准对照:又称有效对照或阳性对照
(3)组间对照:
(4)自身对照:
科研设计遵循的三原则
2.重复原则
(1)足够的实验样本数:
(2)实验结果的可重复性:
3.随机原则
毒理学实验
毒理学实验
毒理学实验是一项重要的科学研究方法，用于评估化学物质对生物体的毒性。通过实验可以了解化学物质对人体的潜在危害以及其对环境的影响，从而制定相应的防护措施和规定。本文将介绍毒理学实验的基本原理、常见的实验设计和评估方法，并探讨其在毒理学研究中的应用。
毒理学实验的基本原理：
毒理学实验是通过将动物或细胞系统暴露于不同剂量的化学物质中，观察其对生物体造成的伤害和影响来评估其毒性。实验中通常包括急性毒性、亚慢性毒性和慢性毒性等不同类型的实验。
常见的实验设计：
1.急性毒性实验：该实验通过口服、注射或吸入等途径将化学物质暴露给动物，观察其可能导致的突发反应和致死效应。实验通常在短时间内完成，并根据动物的反应判断化学物质的急性毒性。
2.亚慢性毒性实验：该实验通过连续或间歇地将化学物质暴露给动物一段较长时间，观察其对生物体各个器官和系统的影响。实验通常持续几周或几个月，并通过检测血液生化指标、器官病变和行为变化等来评估化学物质的亚慢性毒性。
3.慢性毒性实验：该实验通过长期暴露动物或细胞系统于化学物质，观察其对生物体的长期影响。实验通常持续数月至数年，并通过观察癌症发生率、器官功能变化等来评估化学物质的慢性毒性。
评估方法：
1. LD50（半致死量）：通过给动物不同剂量的化学物质，观察其在一定时间内造成50%动物死亡的剂量，从而评估其急性毒性。
2.组织病理学：通过组织切片和显微镜观察，评估化学物质对动物器官和组织结构的病变情况。
3.血液生化指标：通过检测动物体内的生物标志物，如肝功能指标、肾功能指标等，评估化学物质对生物体各个系统的影响。
毒理学实验
表 1 皮肤刺激反应评分 皮肤反应
红斑和焦痂形成 无红斑 轻微红斑（仅仅可觉察到） 明显红斑 中等程度到重度程度红斑 严重红斑（轻微的结痂）至轻度焦痂（深度损伤）
水肿形成 无水肿 很轻微水肿（仅仅可觉察到） 轻微水肿（肿起部位边界清楚） 中度水肿（隆起约 lmm） 严重水肿（隆起约 lmm，超出染毒部位）
急性毒性、急性毒性分级标准
• 急性毒性：一次或多次接触，短时间产生 的毒性效应，包括一般行为和外观改变， 大体形态改变以及死亡效应等。
• 农药的急性毒性分级：低、中、高、剧毒
LD50计算方法
• 改良寇氏法：计算简便，准确率高，常用 • 霍恩法 • 序贯法 • Bliss法
改良寇氏法要求
• 每组动物数相等 • 各剂量组组距呈等比级数 • 死亡呈正态分布 • 最低剂量组死亡<20% • 最高剂量组死亡>80%
2、实验动物和饲养环境
• 首选健康成年白色家兔，其次为白色豚鼠。 • 至少需要4只健康成年动物（雄性和/或雌性均可）。 • 每只动物相邻的未处理的皮肤可作为对照。 • 每只单笼饲养，试验前动物要在实验室中适应3d。 • 常规饲料喂养，自由饮水
3、剂量设计
• 受试样品0.5ml(g)，均匀涂布于受试部 位。如受试样品难以获得，或易产生全身 毒性等原因，用量可适当减少。但为了试 验的一致性，测试面积应力求相等。
毒理学实验
实习一实验动物的一般操作技术
一、目的和意义
毒理学研究需要用实验动物来进行各种实验，通过对动物的实验观察和分析来研究毒作用，获得毒物的毒性、剂量-反应关系、毒作用机制等方面的资料，因此动物实验是毒理学研究中重要的手段之一。
通过本次实习学习毒理学实验中有关动物实验的基本操作技术，掌握实验动物的选择、动物抓取、染毒方法和生物材料的采集等技术。
二、内容
（一）健康动物的选择
无论选择哪种种属品系的动物进行实验，均要求选择健康的实验动物。健康动物检查时要求达到：外观体型丰满，被毛浓密有光泽、紧贴体表，眼睛明亮，行动迅速，反应灵活，食欲及营养状况良好。选择时重点检查以下项目：
1.眼睛明亮，瞳孔双侧等圆，无分泌物。
2.耳耳道无分泌物溢出，耳壳无脓疮。
3.鼻无喷嚏，无浆性粘液分泌物。
4.皮肤无创伤、无脓疮、疥癣、湿疹。
5.颈部要求颈项端正，如有歪斜提示可能存在内耳疾患，不应选作实验动物。
6.消化道无呕吐、腹泻，粪便成形，肛门附近被毛洁净。
7.神经系统无震颤、麻痹。若动物（大鼠、小鼠）出现圆圈动作或体位倒置呈圆圈摆动，应该放弃动物。
8.四肢及尾四肢、趾及尾无红肿及溃疡。
（二）实验动物的性别鉴定
动物性别不同对毒物的敏感性也不同，这可能与性激素、肝微粒体羟基化反应有关，也随受试物而异。因此，要根据实验要求选择性别，一般实验如对性别无特殊要求者，宜选用雌雄动物各半。
1.大鼠、小鼠主要依肛门与生殖孔间的距离区分，间距大者为雄性，小者为雌性。成年雄鼠卧位可见到睾丸，雌性在腹部可见乳头。
2.豚鼠用在一只手抓住豚鼠颈部，另一只手把开靠近生殖器孔的皮肤，雄性动物在圆孔中露出性器官的突起，雌性动物则显出三角形间隙，成年雌性豚鼠胸部有两个乳头。
毒理学实验设计
毒理学实验设计
毒理学实验设计通常包括以下几个步骤：
1. 问题提出：确定研究目的和问题，例如研究某种化学物质对生物体的毒性作用。
2. 实验设计：确定实验组和对照组。实验组接触或暴露于化学物质，对照组不接触化学物质，用来比较两组的差异。
3. 动物选择：选择适合的动物模型，例如小鼠、大鼠或其他动物，根据研究目的确定选择的动物品系和数量。
4. 实验操作：根据实验设计制定操作方案，包括化学物质给药途径和剂量、实验动物的饲养和管理条件等。
5. 数据采集：记录实验过程中动物的行为、生理指标和组织样本，以便后续分析。
6. 数据分析：通过对实验结果的统计分析，比较实验组和对照组之间的差异，确定化学物质的毒性效应。
7. 结果解释和讨论：根据实验结果，解释化学物质对生物体的毒性作用，并讨论研究结果的意义和可能的机制。
8. 结论和建议：总结实验结果，得出结论，并提出相应的安全建议或预防措施，以避免可能的毒性风险。
需要注意的是，毒理学实验设计应符合伦理要求，确保实验过程中动物的福利和尊严，尽量减少动物使用和研究过程中的痛苦与苦难。
毒理学实验
七、毒理学实验
（一）、急性毒性试验的定义、目的和意义
急性毒性试验，又称单次给药急性毒性实验，是指在24h内一次或多次给予动物受试物后，所产生的毒性反应。
（二）、基本内容和技术要求
1、实验动物
可根据不同情况选用不同的实验动物，例如大鼠、小鼠、犬。本实验随机选用健康成年的12只大鼠和12只小鼠，要求雌雄分别对半，动物初始体重不超过或低于平均体重的20%。
2、给药途径
由于本品为浓缩丸，因此选用口服进行实验。给药前将实验动物禁食24h。
3、给药剂量
将大鼠和小鼠分别两只一组，分大鼠6组，小鼠6组。然后编号。分剂量0g/kg，1g/kg，2g/kg，3g/kg，4g/kg，5g/kg对小鼠和大鼠进行灌胃口服，20ml/kg。然后观察小鼠反应。一般认为口服5g/kg时未见急性毒性或死亡，可不必提高剂量进行实验。
4、观察时间及指标
给药后几小时内应严密观察动物反应，之后每天上下午各观察一次，至少连续观察14d。
5、在口服给药24h后，如果没有实验动物死亡，则每组各选一只动物进行病理组织学检查；如果有动物死亡，则将死亡动物和未死亡的
动物小组中选一只动物进行病理学检查。
6、实验动物临床表现与器官系统的关系
急性毒性试验一般指征观察参考表
（三）、长期毒性实验
实验要求和内容
1、实验药品
要求选用符合相关制剂要求的同一批药品。
2、实验动物
选用正常、健康、雌雄各半和动物体重应在平均体重的20%之内的成
年各20只大鼠和小鼠。将每种动物平均分四组，分别为高、中、低、和对照组。
3、实验动物饲养
按照动物室正常标准进行饲养。
毒理学动物实验的基本要求
毒理学动物实验的基本要求
毒理学动物实验的基本要求包括以下几个方面：
1. 伦理要求：实验设计必须符合伦理要求，即保护动物福利和权益，尽量减少对动物的痛苦和苦难。实验过程中必须遵循当地和国际上的动物保护法律法规，进行必要的伦理审查。
2. 选择实验动物：选择合适的实验动物是进行毒理学实验的首要条件。通常会选择具有相似生理、代谢和病理特征的实验动物，如小鼠、大鼠、猴等。根据研究的目的和毒性评估的需求，选择适当的物种和品系。
3. 实验条件：提供适当的实验条件是保证实验结果可靠性的关键。实验动物应该在恒定的温度、湿度和光照条件下饲养，且要提供适宜的空间和舒适的生活环境。饲养过程中还需要监测和维持动物的健康状态，包括提供适当的饮食和水源。
4. 实验设计：实验设计的合理性和科学性对于实验结果的可信度至关重要。必须明确实验的目的、假设、实验组和对照组的设置、样本量大小和分组设计等，并进行随机分组和盲法操作，以减少实验操作员对结果的干扰。
5. 监测和数据收集：在毒理学实验中，需要定期监测实验动物的生理指标、行为反应以及可能的副作用和病理变化。监测数据的收集需要使用合适的实验方法和技术，并保证数据的准确性和可靠性。
6. 结果评估和统计分析：针对实验得到的数据，进行结果评估和统计分析是必要的。可以应用统计学方法对数据进行分析，以确定实验组和对照组之间的差异是否具有显著性，并评估毒性效应的大小和剂量-反应关系。
7. 毒性评估报告：毒理学动物实验的结果和评估需要进行详细的报告，包括实验设计、方法、结果和结论等方面的内容。报告要清晰、准确地记录实验过程和结果，以便于科学界和监管机构对实验结果进行审阅和评估。
药物毒理学实验动物
目录
实验动物种类选择 实验动物饲养管理 药物毒理学实验方法 实验结果分析与解读 药物毒理学实验安全与防护
01
CHAPTER
实验动物种类选择
如小鼠、大鼠、豚鼠、家兔等，适用于药物代谢、药效学和毒理学研究。
哺乳动物
如昆虫、蚯蚓、水螅等，适用于药物筛选和毒理学研究。
无脊椎动物
如斑马鱼、蝾螈等，适用于药物代谢和毒理学研究。
伦理
实验动物的饲养和使用应遵循伦理原则，确保动物的权益得到尊重和保护，避免不必要的伤害和痛苦。同时，实验结果的应用应符合科学、合理和安全的要求。
实验动物福利与伦理
03
CHAPTER
药物毒理学实验方法
急性毒性实验是评估药物对实验动物短期内的毒性作用。
总结词
急性毒性实验通常在短时间内（如单次或几次给药后）观察药物对实验动物的毒性作用，包括死亡、中毒症状、生理生化指标变化等。该实验有助于了解药物的毒性强度、性质和可能的致死剂量，为后续的毒理学研究提供基础数据。
总结词
详细描述
发育毒性实验
04
CHAPTER
实验结果分析与解读
03
数据核对
对实验数据进行核对，确保数据无误，避免误差和异常值对结果的影响。
01
实验数据
确保实验数据的准确性和完整性，包括动物体重、给药剂量、观察指标等。
毒理学实验设计模板
毒理学实验设计模板
一、引言
毒理学实验是研究化学物质或其他物质对生物体的毒性作用的一种方法，其目的是评估化学物质或其他物质对人类和环境的潜在危害性。本文将介绍毒理学实验设计模板，以帮助研究者更好地设计毒理学实验。
二、实验设计
1. 实验目的
明确实验目的是设计一个成功的毒理学实验的关键。在确定实验目的时，需要考虑以下几个方面：
（1）所要评估的化学物质或其他物质；
（2）所要评估的生物体；
（3）所要评估的毒性效应；
（4）所要达到的结果。
2. 实验类型
根据实验目的和需要评估的化学物质或其他物质，可以选择以下几种类型的毒理学实验：
（1）急性毒性试验：评估单次暴露下化学物质或其他物质对生物体产生致死或致残效应。
（2）亚急性毒性试验：评估连续暴露下化学物质或其他物质对生物体产生致死、致残或亚致死效应。
（3）慢性毒性试验：评估长期暴露下化学物质或其他物质对生物体产生致癌、致畸或其他慢性毒性效应。
3. 实验方法
根据实验类型和实验目的，选择合适的实验方法。常用的实验方法包括：
（1）口服试验：将化学物质或其他物质加入动物饮水或食物中，评估其对生物体的毒性效应。
（2）皮肤接触试验：将化学物质或其他物质涂抹在动物皮肤上，评估其对生物体的毒性效应。
（3）吸入试验：将化学物质或其他物质喷雾至动物呼吸道中，评估其对生物体的毒性效应。
4. 动物模型
选择合适的动物模型是评估化学物质或其他物质对生物体毒性效应的关键。常用的动物模型包括：
（1）小鼠；
（2）大鼠；
（3）兔子；
（4）犬。
5. 实验设计要点
在设计毒理学实验时需要考虑以下几个要点：
毒理学实验方案
毒理学实验方案
一、实验目的
本实验的目的是通过现代毒理学常用的实验方法和技术，了解化学物质对生物体的毒性作用，探究毒物的剂量-效应关系，为毒物的风险评估和毒理学研究提供实验基础。
二、实验原理
1. 毒理学基本概念
毒理学是研究外源性物质对生物体的有害作用及其机理的学科。毒性是指有害物质与生物体接触后引起的生物学、生化学或药理
学的异常反应。毒力则是指毒物对生物体的损害能力。
2. 毒物的剂量-效应关系
毒物的剂量-效应关系是指毒物剂量与生物体效应之间的关系。根据剂量-效应曲线，可以推断毒物的最低有效剂量（LDD）和最大耐受剂量（MTD），以及剂量引起半最大效应（ED50）等参数。
3. 毒理学实验方法
（1）急性毒性试验：通过给小鼠、大鼠等动物一次性或短期高剂量的毒物暴露，观
察其致死率和临床毒理学表现，确定毒物的急性毒性。
（2）亚急性和慢性毒性试验：通过长期低剂量的毒物暴露，观察其对生物体的慢性毒性。常用的方法包括亚急性口服试验、亚急性皮肤接触试验和慢性吸入试验。
（3）遗传毒性试验：通过检测毒物对遗传物质（DNA和染色体）的损害来评估毒物的遗传毒性。常用的方法包括热休克试验、微核试验和染色体畸变试验。
三、实验步骤
1. 实验前准备
（1）选择合适的实验动物，如小鼠、大鼠等。
（2）准备毒物溶液，确定不同浓度的毒物。
（3）配制实验动物的饲料和饮水，保证其营养和水分的摄入。
2. 实验操作
（1）急性毒性试验：
①将实验动物按随机分组的原则分成不同剂量组和对照组。
②给实验动物灌胃或注射不同剂量的毒物。
③观察实验动物的致死率和临床表现，如体重变化、食欲、精神状态等。
毒理学实验设计的基本原则
毒理学实验设计的基本原则
所有毒理学实验设计都必须符合随机、对照、重复三个基本原则。
(一)随机的原则
随机化( randomization)是指在抽样时,使总体中每一个体都有同等的机会被抽取;在分配样本时,确保样本中的每一个体都有同等的机会被分入任何一个组中。随机化的目的是使样本具有极好的代表性,使一切干扰因素分配到各组时只受纯机遇抽样误差的影响,而不受实验者主观因素或其他偏性误差的影响。在进行毒理学动物实验时,动物必须随机分组,最常用的方法是完全随机或随机区组的方法。完全随机即将研究对象随机地分配到各个处理组中,可通过随机数字表或抽签的方式进行。随机区组即将可能影响实验结果的非处理因素均衡地分配到各组,如动物体重、性别等,具体做法是将条件相近的实验对象配成一组(配伍组) ,再将每个配伍组中的实验对象随机分配到各个处理组中。随机不等于随便、随意,在动物分组时若不采用适当的随机方法,而是抓取动物随意放在各组,不能排除动物机敏性等因素对选择动物的影响,不能满足随机化的要求。
(二)对照的原则
对照( contro1)是指在实验时针对实验组设立的可以对比的组。对照的意义在于通过对照鉴别处理因素与非处理因素的差异及处理因素的效应大小,消除和减少随机化原则所不能控制的抽样误差及实验者操作熟练程度等所造成的差异。毒理学实验中常用
的对照形式有以下几种。
1. 未处理对照(空白对照) :即不施加任何处理措施,用于确定实验对象生物学特征的本底值,进行质量控制。
2. 阴性对照:不给要研究的处理因素,但给以其他的实验因素,以排除这些实验因素的影响。常用的阴性对照是溶剂/赋形剂对照,以此作为与染毒组比较的基础。阴性对照除了要研究的因素外,其他处理应和实验组完全相同。对照组与实验组必须在同时、同地、同条件下进行处理,否则就失去了对照的意义。
动物毒理学实验
公司名称/LOGO
11
实验动物分组
• 试验中为减少动物个体差异对试验结果的影 响，应将动物按统计学原则 随机分组 ，使非 处理因素最大限度地保持一致，提高每组实 验动物的均衡性。 • 随机数字表
公司名称/LOGO
6
实验内容
完全随机分组 将实验动物编号，从随机数字表上任意横行或纵行或斜行的任意数字开始，顺序取下数字，标于每个 动物号下，然后用计划组数去除随机数字，所得余数即为所属组别。
3
2
公司名称/LOGO
实验内容
4
实验内容
健康动物的选择
实验动物性别鉴定
动物的ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ取
• 外观体形丰满，被毛浓密有 光泽、紧贴体表，眼睛明亮，
•
大鼠、小鼠：主要依肛门与生殖孔间 的距离区分，间距大者为雄性，小者 为雌性。成年雄鼠卧位可见到辜丸，
• 小鼠：先用右手抓取鼠尾提 起，置于鼠笼或实验台上向
行动迅速、反应灵活，食欲
及营养状况良好。
•
后拉，在其向前爬行时，用
左手拇指和食指抓住小鼠的 两耳和颈部皮肤，将鼠体置 于左手心中，把后肢拉直， 以无名指按住鼠尾，小指按 住后腿即可
雌性在腹部可见乳头。
豚鼠；用一只于抓住豚鼠颈部，另一 只手扒开靠生殖器孔的皮肤，雄性动 物在圆孔中露出性器官的突起，雌性 动物则显示三角形间隙，成年雌性豚 鼠胸部有两个乳头。
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Mann Whitney u检验 Kruskal—Wallis单向方差检验 非参数趋势检验 Wilcoxon配对符号秩和检验 Friedman双向方差分析 Page检验 Spearman等级相关系数
t检验 单向方差分析 线性回归分析 配对t检验 双向方差分析
与剂量相关的趋势
变量间的相关性 各组变量间相关性的变化 变量随时间而变化
2.剂量-反应(效应)研究
Biological Response
FEL: Frank Effect Level
LOAEL: Lowest Observable Adverse Effect Level NOAEL:No Observable Adverse Effect Level LOEL: Lowest Observable Effect Level NOEL: No Observable Effect Level Log[Dose]
（1）随机分组方法： ①随机数字表法； ②计算机软件（如SPSS、SAS、Excel等）方法 。
（2）例子：将32只动物按体重每4只组成一个区组， 随机分配到4种处理中，共组成8个区组。
表1 SPSS程序随机化区组分配设计方案
行号 程序
01
02 03 04 05 06 07 08 09 10 11
3.确定毒作用的靶器官 4.确定损害的可逆性
5.其它
毒作用的敏感检测指标和生物学标志
毒作用机制研究
受试物的毒物动力学和代谢研究
中毒的解救措施
三、毒理学动物实验设计内容
1. 实验动物选择： 2. 实验动物分组与剂量选择、实验期限：
Biological Response
高剂量组
中剂量组：LOAEL
毒理学动物实验设计
外推
一、毒理学毒性评价试验的原则 毒理学实验通常是毒性评价或安全性评价试验， 通常由权威机构规定评价程序。
在描述毒理学的试验中，有三个基本的原则:
1.外来化学物在实验动物产生的作用，可以 外推于人 基本假设为： ①人是最敏感的动物物种； ②人和实验动物的生物学过程包括化学物的 代谢，与体重（或体表面积）相关。
请您根据上述的背景资料，设计“镉
对机体肝脏损害作用及机制的实验研究”。
设计内容包括：
（1）目的意义
（2）研究依据
（3）实验内容和方法 （4）预期实验结果 （5）数据分析统计方法等。
变量问的相关性
2．分级数据： 动物间的比较 个别组的比较 非均匀性 与剂量相关的趋势 动物内部的比较 个别组的比较 非均匀性 与剂量相关的趋势 变量间的相关性 3．连续数据： 动物间的比较 个别组的比较 非均匀性 与剂量相关的趋势 动物内部比较 个别组的比较 非均匀性
Fisher精确分布检验2X2校正的卡方检验
规格等；
（5）实验条件：实验时间、室温、动物饲养
环境（种名、合格证号）、恒温条件等；
（6）实验方法及步骤：动物麻醉、固定、分
组、染毒剂量和途径、测量方法等； （7）实验指标：名称、单位、数值及不同时 间的变化、实验方法或主要仪器等； （8）数据处理： 实验结果的整理、统计方
法与结果等。
五、环境化学物对机体损害作用的评价 镉是环境中广泛存在的有毒重金属元素 之一，镉污染及其危害己是一个全球性的环 境医学问题，急性镉暴露可损害机体多种靶 器官组织，包括肾脏和肝脏等。 肝脏是急性镉暴露的主要靶器官，肝实 质细胞的肿胀、嗜酸性变、淋巴细胞浸泣及 核固缩等镜下肝细胞损伤改变；AST、ALT及 碱性磷酸酶（AP）的活性显著升高的血生化 改变。 目前对镉致急性肝损伤的作用机制还不 明确，自由基损伤是造成急性肝损伤的一条 重要途径。
表2
IPCS专家组推荐的统计学分析方法
统计学方法
数据类别和统计学要求
1．“有或无”数据： 动物间的比较 个别组的比较 非均匀性 与剂量相关的趋势 动物内部比较 个别组的比较 非均匀性
Fisher精确分布检验(不分层的数据) 2×2校正的卡方检验(分层或不分层的数据) 2×K卡方检验(分层或不分层的数据) Armitage检验(分层或不分层的数据) McWemar检验或符号检验 Cochran检验
Input program.
Loop I=1 to 32. Compute X=RND(I/4 + 0.25). End case. End loop. End file. End input program. Execute. Compute II=Uniform(1). Rank Variables=II BY X. Execute.
说明：第01－07行是产生8个区组，第09－10行是产生随机数，对随机数按区组再进 行排秩分组。
二、毒理学毒性评价试验的基本目的 1.受试物毒作用的表现和性质
在急性和慢性毒性试验中，观察受试物对
机体的有害作用，对有害作用的观察应该 是对每个实验动物进行全面的、逐项的观 察和记录。 发现有害作用是进行剂量-反应(效应)研究 的前提。
低剂量组：NOAEL
Log[Dose]
3. 实验观察指标选择： 实验指标（观测指标）是指在实验观察中用于 反映研究对象中某些可被检测仪器或研究者感 知的特征或现象标志。 实验指标选择的基本条件： （1）特异性 （2）客观性 （3）灵敏度 （4）精确度 （5）可行性 （6）认可性
实验指标选择依据通常有： （1）根据实验的目的、任务和内容选择指标。 （2）根据化学物的种类和用途来选择国家标准、 部委和各级政府发布的法规、规定和行业规范 中相应的程序中的实验方法要求来选择指标。 4. 统计学处理方法：
通常实验记录的项目和内容为： （1）实验名称、实验日期、实验者；
（2）受试对象：动物种类、品系、编号、体重、
性别、健康状况、饲料、离体器官名称等； （3）实验药物或试剂：名称、来源（生产厂）、 剂型、批号、规格、含量、浓度、给药体积、给 药剂量、给药时间、给药间隔、疗程等；
（4）实验仪器：主要仪器名称、生产厂、型号、
3.成年的健康实验动物和人可能的暴露途径是
基本的选择
(1)成年的健康（雄性和雌性未孕）实验动物作 为一般人群的代表性实验模型。 幼年和老年动物、妊娠的雌性动物、疾病状态作 为特殊情况另作研究 。
(2)毒理学试验中染毒途径的选择，应尽可能模 拟人接触该受试物的方式。
科研设计遵循的三原则 1.对照原则 在动物实验中，要求相比较的各组间动物的种类、 性别、年龄、体重等尽可能地一致。对照组与实
验组同等重要，两组的动物数应相等。
(1)空白对照：又称正常对照 (2)标准对照：又称有效对照或阳性对照 (3)组间对照：
(4)自身对照：
2.重复原则 (1)足够的实验样本数： (2)实验结果的可重复性：
3.随机原则
为了减少个体差异这种非处理因素的干拢， 应于实验前将实验动物依统计学原则进行 随机分组，以此达到尽可能降低非处理因 素的混杂效应，从而提高每组动物间均衡 性的目的。
线性回归分析
Pearson相关系数协方差的分析 用方差分析评估第二个时间与第一个时间的差别
四、实验和观察 1.实验准备和预备实验 2.实验及其结果的观察记录 (1)按照预备实验确定的步骤进行实验； (2)熟练掌握实验方法，用量准确，严肃认 真地操作； (3)经分析属于错误操作或不合理的结果应 重做实验 (4)仔细、耐心地观察实验过程中出现的现 象（结果），并进行思考。
2.实验动物必须暴露于高剂量 是发现对人潜在危害的必需的和可靠的方法。
一般要设3个或3个以上剂量组，以观察剂量 -反应（效应）关系，确定受试化学物引起毒效 应及其毒性参数。
(1)毒性试验的设计并不是为了证明化学品的安 全性，而是为了表征化学品可能产生的毒作用。 (2)毒理学试验中实验模型所需的动物总是远少 于处于危险中的人群。为了在少量动物得到有 统计学意义的可靠的结果，需要应用相对wk.baidu.com高 的剂量，以使效应发生的频率足以被检测。