非细胞型微生物 病毒讲解

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非细胞型微生物--病毒的形态

非细胞型微生物--病毒的形态
微生物学基础
非细胞型微生物的形态和构造
二、病毒的形态
宿主差异
几乎所有的生物都可以被相应 形态的病毒感染;
根据宿主可以分类:
○ 动物病毒(球状) ○ 植物病毒(杆状或丝状)

○ 细菌病毒或称噬菌体(蝌蚪状)
二、病毒的形态
2 形态特点
球形颗粒状:多见于动物病 毒如脊髓灰质炎病毒;
杆状颗粒或丝状:多见植物 病毒如烟草花叶病毒;
复杂形状颗粒:砖状如痘病 毒;蝌蚪状如噬菌体(微生 物病毒);子弹状如狂犬病 毒。
二、病毒的 形态
3 形态结构 基本结构与非基本结构
二、病毒的形态

形态结构
各结构作用:
○ 核酸(核心)→基因组 :决定病毒遗 传、变异和复制;
○ 衣壳粒 → 衣壳 :保护、介导、抗原性; ○ 包膜、刺突 :保护、介导、抗原性;
受到破坏时丧失感染性;

非细胞微生物-病毒

非细胞微生物-病毒

牛海绵状脑病 (spongiformencephalopathy)
人的库鲁病(kuru)、 克雅氏病(Creutzfeldt Jakob disease, CJD)等
朊病毒的特点 呈淀粉样颗粒状 无免疫原性 无核酸成分 由宿主基因编码 抗逆性极强
朊病毒发病机制
PrP sc 的入侵,把 脑细胞中原来就有 的 PrP c “带坏”
计数噬菌斑
37℃ 10h
3.一步生长曲线
定量描述烈性噬菌 体生长规律的实验 曲线,以感染时间 为横坐标,噬菌体 效价为纵坐标。
4.温和噬菌体
烈性噬菌体:侵染宿主细胞后,能在细胞体内形成 大量的子噬菌体,从而引起菌体细胞裂解死亡的噬 菌体。
温和噬菌体:凡是吸附并入侵宿主细胞后,其 DNA只是整合在宿主的染色体上,并随宿主DNA 的复制而进行同步复制,一般不进行增殖和引起宿 主细胞裂解的噬菌体
第四章 非细胞微生物——病毒
病毒的发现和研究历史
最早记载:狂犬病 最早记载的植物病毒病:郁金香碎花色病 1884年,Chamberland发明了细菌过滤器 1886年,Mayer发现烟草花叶病
1892年,俄国伊凡诺夫斯基发现烟草花叶病原体的滤过性 1898年,荷兰贝杰林克证明烟草花叶病病原体是病毒
(二)病毒的形态
1.病毒的个体形态
病 球形颗粒(或称拟球形颗粒) 毒 的 杆状颗粒 形 状 复杂形状颗粒(如蝌蚪状,卵形)
2.病毒的群体形态
病毒粒大量聚集并使宿主细胞发生病变时,就形成了具 有一定形态、构造并能观察和识别的特殊“群体” 包涵体(inclusion body) 噬菌斑 (plaque) 枯斑(lesion) 空斑(plaque)
1915年和1917年,托特和德爱莱尔分别发现噬菌体 1935年,斯坦利成功地获得了烟草花叶病毒的结晶体

非细胞型生物病毒优秀课件

非细胞型生物病毒优秀课件

一、病毒的形态结构和化学组成
(一)病毒的大小: 1、测定病毒大小的方法:
• 电镜法2.Βιβλιοθήκη 病毒的大小: 最大的病毒与最小的病毒
病毒的形体
微小,只能以 nm计量,一般 为 10 ~300 nm。
天花病毒 200×300nm
脊髓灰质炎病毒
口蹄疫病毒 10nm
二、病毒的形态结构:
病毒粒子(viron):指宿主细胞外,
2、无细胞结构,由蛋白质、 核酸构成,无细胞器。
蛋白质衣壳(Protein coat)
核酸(Nucleic acid)
3、一个病毒体内仅含一种核酸(or DNA,or RNA) ,核酸可以以单链或双链形 式存在。
4、生活方式为专性活细胞内寄生, 病毒酶系不全,离开活体后无生命特征。
5、 病毒以复制(replication)的方式增 殖,包括核酸复制、核酸蛋白质装配, 是在分子水平上进行的。
包膜的形成:
◆ 来源于宿主细胞 膜或 核膜: 如流感病 毒。
包膜的功能:
a.维系病毒体结构; b.保护病毒核酸; c.起始病毒感染所必需(识别)。
6. 刺 突(spikes)
概念:病毒包 膜或衣壳表面 的突起物。
virion
核酸(nucleic acid)
核衣壳(nucleocapsid)
DNA or RNA
2.噬 菌 斑(plaque)
概念:将少量噬菌体与 大量敏感菌混合培养在 营养琼脂中,由于噬菌 体不断裂解细菌,在平 板上形成一个个透明圆 斑,称为噬菌斑。
应用: 噬菌斑可用于检 出、分离、纯化噬菌体 和进行噬菌体的计数。
3.空斑或病斑
空斑或病斑:是动物病毒 感染了动物细胞而产生 的;在覆盖一薄层琼脂的一

非细胞型微生物名词解释

非细胞型微生物名词解释

非细胞型微生物名词解释
非细胞型微生物是指不具备细胞形态和生命活动的微生物,主要包括病毒、细菌、真菌和放线菌等。

它们不同于细胞型微生物,因为它们不具备细胞结构、无法进行分裂繁殖。

非细胞型微生物可以通过吸附、侵入和复制等方式进行繁殖。

其中,病毒是最小、最简化的微生物,只包含核酸和蛋白质两种组分,不具有细胞形态和生命活动。

其他非细胞型微生物则具有不同的结构和生命活动特征。

对于人类而言,非细胞型微生物在生态系统和医学领域中都扮演着重要的角色。

在科学研究和实际应用中,对非细胞型微生物的研究和应用都具有重要意义。

第四章非细胞型生物病毒讲解

第四章非细胞型生物病毒讲解

多数痘类病毒、狂犬病毒的包含体在细 胞质中, 称为质型病毒。 疱疹病毒、棉铃虫病毒等的包含体在细 胞核中, 称为核型病毒。 麻疹病毒的包含体在核中、质中都存在。
昆虫病毒的包含体大多数呈多角体形状,所以被称 为多角体病毒。
有些病毒的包含体还有一些特定的名称,如:天花 病毒称为顾氏小体、狂犬 病毒称为内基氏小体、 烟草花叶病 毒称为X体。
一步生长与一步生长曲线
• 寄主细胞内新合成的各种噬菌体的组成 部分,装配形成完整的噬菌体粒子,使 寄主细胞裂解,噬菌体粒子一次性释放 出来,烈性噬菌体的这种生长方式称为 一步生长。 • 在实验室条件下对噬菌体进行培养,以 培养时间为横坐标,以噬菌斑数为纵坐 标作图,绘制一条来反映噬菌体动态生 长规律的曲线,即为噬菌体的一步生长 曲线。
(3)卫星病毒
• 某种小分子RNA病毒的复制专门依赖另外 一种病毒,则称它为另外这种病毒的卫星 病毒。它所依赖的这种病毒称为辅助病毒。 • (4)缺陷干扰颗粒 • 也称DI颗粒,它们在病毒壳体中,只含有 本病毒核酸的部分基因,所以称它们为缺 陷干扰颗粒。这类病毒与同源病毒共同感 染时才能复制,但不能合成壳体蛋白。
病毒的囊膜
• 某些病毒的衣壳外还有一层组成比较复杂的包 被物,叫囊膜或包膜。通常由蛋白质、脂类和 多糖组成。它可以是由病毒基因编码的,也可 能来自于寄主细胞的细胞膜或核膜。 • 包膜外常有刺突,它们是多糖-蛋白质复合物, 刺突因病毒的种类而异,可以作为鉴定病毒的 依据。如流感病毒的刺突有两种:血凝素(HA) 和神经氨酸苷酶(NA)。
4.3 病毒的分类
• 根据病毒核酸的化学特征和病毒的个体结构及 寄主范围等的不同,国际病毒分类委员会通过 病毒分类的报告,把病毒分为七大类,共59科 (群或组)。 • 下面简单介绍这七大类: • (1)双链DNA,有包膜病毒:包括四个科。 • (2)双链DNA,无包膜病毒:包括八个科, 一个组。

食品微生物—非细胞型微生物病毒

食品微生物—非细胞型微生物病毒

噬菌体的繁殖
2.侵入
吸附后尾丝收缩,尾管推出并插 入细胞壁和膜中,尾管释放溶菌 酶水解细菌细胞壁的肽聚糖,使 细胞壁产生小孔,头部的核酸立 即通过尾管、小孔注入宿主细胞 中,并将蛋白质躯壳留在壁外, 从吸附到侵入仅几秒到几分钟。
噬菌体的侵入过程:
噬菌体的繁殖
3.增殖(生物合成)
噬菌体以其核酸中的遗传信息向 宿主细胞发出指令,使宿主细胞 的代谢系统按严密的程序合成噬 菌体特有的核酸和蛋白质。如T4 噬菌体的核酸为双链DNA,转录 和翻译分为三期。但与其他病毒 比较,除早期转录、晚期转录外, 还增加了次早期转录的阶段。
???
1
2
3
杆状或丝状 (大多为植物病毒)
多面体或球形 (大多为动物、真菌病毒)
蝌蚪状 (噬菌体)
病毒的大小 个体小,常用nm做单位 大多数病毒直径在100左右(20-300nm) 真菌、细菌和病毒直径比大致为100:10:1
1. 裸露病毒(基本结构)
病毒的核酸 病毒的蛋白质
2.包膜病毒
有包膜的病毒 包膜外的刺突
噬菌体的概念
噬菌体是感染细菌、真菌、藻类、放线菌、螺旋体等微生物病毒的总称。
电镜下的噬菌体形态
噬菌体形态结构模型图
噬菌体的概念:
T4噬菌体的结构
噬菌体的繁殖
噬菌体在敏感菌内以复制方式进行繁殖,繁殖过程包括吸附、侵入、增殖、成熟和裂解五个阶.吸附
噬菌体的吸附分为两个阶段 可逆阶段,由随机碰撞或 静电引力或氢键作用而相 互接触,无任何特异性。 不可逆特异性结合阶段, 不仅噬菌体与相应细胞表 面产生牢固结合,且病毒 粒子表面发生结构改变。
当宿主细胞内的大量子代噬菌体 成熟后,由于水解细胞膜的脂肪 酶和溶菌酶等的作用,促进了细 胞的裂解,从而完成了子代噬菌 体的释放。

非细胞形态的生物—病毒

非细胞形态的生物—病毒

遗传物质为染色质
遗传物质为裸露的 DNA分子
动、植物细胞、真菌 等
细菌、蓝藻等
HIV病毒、肝炎病毒 等
DNA病毒 RNA病毒
二、病毒与人类的关系 1、有利方面: ◆改变植物表型特征 ◆利用昆虫病毒防治害虫 ◆避免烧伤病人感染绿脓杆菌 ◆生产药物
2、有害方面: 致病、致瘤等
1)肝炎病毒与肝炎
乙型肝炎病毒(HBV) 母婴垂直传播、血液传播 研究表明,HBV与肝癌发生有一定关联性
在法定传染病中,其发病率仅次于感染性腹泻与 流行性感冒而居第三位。 03年数据:我国至少有8亿人感染过乙型肝炎,约 有1.3亿人为乙肝病毒携带者,几乎占全世界总患者 数的一半。 有40%携带乙肝表面抗原的母亲,将通过母婴垂直 传播,使80%—90%的新生儿(每年约80万—90万人) 成为慢性乙肝病毒携带者。
噬菌体 复合对称
细菌病毒——噬菌体
一、病毒的一般特点 3、成分:核酸(DNA或RNA)、蛋白质
一种病毒只含有一种核酸
囊膜(部分病毒有)
蛋白质

(衣壳)

核酸(RNA) 壳
(核心)
一、病毒的一般特点
4、生活方式: 寄生
◆只能寄生在某种特定的活细胞内 ◆利用宿主细胞的物质进行增殖 ◆非寄生时呈结晶状态
狂犬病病毒
狂犬病
5)SARS
冠状病毒 模式图
患者肺 部X光片 示弥漫 性阴影
6)禽流感
恐怖分子
禽流感病毒正在攻击 健康的人类粉色细胞
感冒病毒
H1N1病毒
7)脊髓灰质炎, 又名小儿麻痹症
患儿被固定在 架子进行治疗
脊髓灰质炎病毒
正在服糖丸(脊髓灰 质炎疫苗)的儿童

非细胞微生物-病毒

非细胞微生物-病毒

1、噬菌体的繁殖
病毒的增殖又称为病毒的复制,是病毒在活细胞中 的繁殖过程。病毒粒子并无个体的生长过程,而只 有其两种基本成分的合成和装配,即: 核酸复制+蛋白质合成核蛋白(病毒
粒子)
各类病毒的增殖过程基本相似,现以大肠杆菌T系 噬菌体为例(图2-26)介绍其繁殖过程
噬菌体的繁殖一般可分五个阶段,即 1) 吸附 2) 侵入 3) 增殖(复制与生物合成) 4) 成熟(装配) 5) 裂解(释放)
图2-26 T4 噬菌体形态结构
(1)吸附
吸附是指在病毒表面蛋白质与宿主细胞的 特异接受位点上发生特异性结合。大肠杆菌T系 列噬菌体是通过尾丝末端蛋白质吸附在大肠杆 菌的细胞壁上的。不同噬菌体吸附的接受位点 不同。如T3、T4、T7吸附于脂多糖,枯草杆菌 噬菌体吸附于磷壁酸,沙门氏菌X噬菌体吸附在 鞭毛上,还有的吸附在荚膜上。 吸附过程受环境因素的影响。二价和一价阳 离子可以促进噬菌体的吸附,三价阳离子可以 引起失活;pH为7时呈现出最大吸附速度,pH 小于5或大于10时则很少吸附;温度对吸附也有 影响。
3、溶源性 温和噬菌体或称溶源性噬菌体:
有一些噬菌体侵染宿主细胞后,并不立即在侵染的细胞内 增殖,而是将侵入的核酸整合到宿主细胞的基因组中,与 其一起同步复制,这种不导致宿主细胞裂解。并使之能正 常分裂的噬菌体。
这一现象称做溶源性(lysogeny)现象 前噬菌体
附着或融合在溶源性细菌染色体上的温和噬菌 体的核酸称为原噬菌体或前噬菌体。
噬菌体的核酸和合成所需的蛋白质。
(4)成熟(装配) 将分别合成的核酸 和蛋白质组装成完 整的有感染性的病 毒粒子。
T4噬菌体的装配是一个极为复杂的指导装配的过程
(5)裂解(释放)
噬菌体粒子完成装配后,宿主细胞裂解,释放出子代噬 菌体粒子。1个宿主细胞可释放10-10000个(平均300个)噬 菌体粒子。T40噬菌体从吸附到释放全过程,在37℃时只需 22min。这种使宿主细胞裂解的噬菌体称为烈性噬菌体。在 平板培养基的菌苔表面若大量的宿主细胞裂解后会产生许多 透明圈,这些透明圈称为噬菌斑(图2-27)。

第三节 非细胞型微生物——病毒讲解

第三节 非细胞型微生物——病毒讲解

病毒核酸有正链(+)和负链(—)的区分:将碱基序列与 mRNA一致的核酸单链定为正链,将碱基序列与mRNA互补的 核酸单链定为负链。 1、结构功能 病毒蛋白质作用: 2、吸附
3、破坏宿主细胞壁与细胞膜 4、增殖
五、病毒的繁殖方式
1 . 病毒繁殖方式: —— 复制 2 .病毒繁殖过程: 吸附——侵入——生物合成——装配——释放。 烈性噬菌体——感染细胞后,能在寄主细胞内增殖,产生大量 子代噬菌体并引起细菌裂解的噬菌体。 温和噬菌体——噬菌体感染细胞后,将其核酸整合(插入)到宿 主的核DNA上,并且可以随宿主DNA的复制而进行同步复制,在一 般情况下,不引起寄主细胞裂解的噬菌体。
垣病毒:只含蛋白质一种组分 根据宿主可以分三类: 动物病毒 植物病毒 细菌病毒(或称噬菌体)
七、病毒的防治和利用 1.温度—— 病毒的保存温度是-75℃。在宿主体外55℃~65℃ 时存活时间不超过1h。 防 治
2. 光及其他辐射—— 紫外线、X射线、r射线等具有灭活病毒作 用; 此外可见光对病毒有一定的灭活作用。 3.干燥——环境中水分低于10%时,病毒会迅速灭活。 4.化学物质——体内灭活可用抗体和干扰素;体外灭活可用 各种氧化剂、强酸强碱,加氯消毒等措施。 生物农药—— 动物病毒寄生于有害昆虫体内,以减少农作 物所受 的伤害。 噬藻体—— 用于水体富营养化治理。 免疫制剂生产—— 制成疫苗
①螺旋对称的病毒粒子
烟草花叶病毒
②二十面体对称病毒粒子
腮腺炎病毒
③复合对称的病毒粒子
噬菌体
四、化学组成
病毒的主要成分为核酸(DNA或RNA)和蛋白质。 有的病毒还含有脂质、糖类等其他组分。 一种病毒至含有一种核酸(DNA或RNA)。 病毒的DNA与RNA均有单链(ds)和双链(ss)之分。 病毒DNA分子有线状和型、杆状、多面体型、蝌蚪状(噬菌体)、海胆 状(艾滋病病毒)、子弹头型(狂犬病病毒)。大小较悬殊 。
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病毒研究与诺贝尔奖1954
美国艾德尔脊髓灰质炎病毒究噬菌体发病毒的复制1969
美国人德尔布鲁克、赫利希和卢里亚研究噬菌体,发现病毒的复制机制和遗传结构1976
美国人盖达塞克发现库鲁病病毒-朊病毒1993
美国人夏普和英国人罗伯茨研究引发感冒的腺病毒,发现断裂基因1997
美国普鲁西内尔发现朊病毒的生物学传播原理2008德国人哈拉尔德·楚尔·豪森
而闻名,是1983年发现艾滋病病毒的论文作者之一。巴尔-西诺西已弗朗索瓦丝·巴尔-西诺西(Françoise Barré-Sinoussi
与其他一些科学家合作发表了200多篇论文。
非细胞型微生物
病毒和亚病毒
非细胞型(病毒等蓝藻
细菌:G+、G-
微生物
(真细菌
原核微生物
放线菌
衣原体
支原体
古生菌
细胞型立克次氏体真核微生物(Eukarya
有些病毒的核酸能整合到宿主的基因组中,可以诱发潜伏性感染;
凡有细胞生物生存之处,皆可能有与之对应的病毒存在———病毒多样性的的原因。
1病毒的形态构造和化学成分
病毒大小
1.1病毒的大小
个体极小,约100 nm左右,必需在电镜下观察;
不同病毒颗粒(病毒粒、毒粒的大小差别很大,一般在20-200nm;
毒粒的形状大致可分球形颗粒(或称拟球形颗粒、杆状
细菌病毒(噬菌体病毒植物病毒
人类和动物病毒
1.2.2病毒的群体形态
噬菌体(即细菌病毒感
染细菌后,使细菌细胞破
裂死亡,连续重复感染使
大量的细菌死亡,在培养
细菌的平板上可以看到
细菌的平板上,可以看到
一个个透明不长细菌的小
圆斑,称为噬菌斑。
单层动物细胞受到肿瘤病毒的感染后,会使动物细胞恶性增生,形成类似细菌菌落的病灶,称为病斑。
般特点:
个体极其微小,又称“超显微生物”,能通过细菌滤器;无细胞结构,专性活细胞内寄生,以感染态和非感染态两种状态交替存在,又称“分子生物”;
没有酶或酶系统极不完全,不能独立进行代谢活动,只能利用活寄主内现成的代谢系统以核酸和蛋白的装配实现利用活寄主内现成的代谢系统。以核酸和蛋白的装配实现繁殖;
对抗生素不敏感,但对干扰素敏感;
1935:美国科学家从烟草花叶病病叶中提取出了病毒结晶,又证实了结晶中含核酸和蛋白质两种成分,而只有核酸具感染和复制能力,并因此获得诺贝尔奖。&
1952:Hershey和Chase证实噬菌体的遗传物质仅仅是DNA ,开创了病毒分子生物学。&——1971后:陆续发现了各种亚病毒类病毒、朊病毒和拟病毒。
z发酵工业中噬菌体污染会造成严重损失;
z侵染有害生物的病毒可制成生物防治剂(微生物农药;
z许多病毒是分子生物学基础研究和基因工程研究和应用中的重要工具。
z。。。。。
&
1892发现历史
:俄国伊万诺夫斯基Ivanowski首次发现烟草花叶病的感染因子能通过细菌过滤器。&
1898Beijerinck :荷兰贝哲林克j证实该致病因子可以被乙醇从悬液中沉淀下来而不失去其感染性,但用培养细菌的方法培养不出来;给这样的病原体起名叫virus。&
法国人弗朗蒙塔尼
楚尔·豪森
人乳突淋瘤病毒引发子宫宫颈癌
德国人,出生于1936年,36
岁担任德国埃朗根-纽伦堡大学
病毒学教授并开始研究
病毒学教授,并开始研究人乳
头状瘤病毒(HPV等病毒
与宫颈癌之间的关系
与宫颈癌之间的关系。
他用了十多年时间终于发现某
病毒核酸
双链DNA (ds DNA如动物病毒、噬菌体ss RNA如动植物病毒单链RNA (ss RNA如动、植物病毒
双链RNA (ds RNA
2
病毒繁殖方式
2.1原核生物的病毒——噬菌体的繁殖1吸附
他决定投身医学。蒙塔尼现任职于世界艾滋病研法国科学家究与防治基金会,主要致力于寻找艾滋病疫苗和疗法。
吕克·蒙塔尼(Luc Montagnier
人类免疫缺陷病毒发现者之二
法国人,出生于1947年,自上世纪70年代初以来一直在法国巴斯德研究中心工作。巴尔-西诺西是近年来少有的诺贝尔科学奖女性获得者之一,以研究艾滋病病毒法国科学家
真菌(酵母霉菌蕈菌等单细胞藻类原生动物等真菌(酵母、霉菌、蕈菌等、单细胞藻类、原生动物等
(真病毒:至少含核酸和蛋白质二种组分非细胞生物
亚病毒:含核酸或蛋白质一种组分
类病毒:只含具有侵染性的RNA组分
卫星RNA:只含有不具侵染性的RNA组分
朊病毒:只含蛋白质组分
什么是病毒(Virus
病毒是超显微的、没有细胞结构的、专性活细胞内寄生的实体。它们在活细胞外具有一般化学大分子特征,一般特点:一旦进入宿主细胞又具有生命特征。
微生物种类-之三?微物种类之
病毒
z病毒是什么?有细胞结构吗?有生命吗?
z病毒的主要成分是什么?
z含有一种成分的病毒叫什么病毒?
z病毒大概何时发现的?在细菌前还是后?如何发现的?
z病毒分类?有哪些类群?
z你知道哪些病毒?
病毒与人类的关系密切——
z人类和许多有益动物的疑难疾病和传染病几乎都是病毒病;
是病毒病
烟草花叶病毒感染烟草后,在叶片上出现的一个个坏死的病灶,烟草花叶病毒感染烟草后,在叶片上出现的个个坏死的病灶,称为枯斑。
病毒的群体形态有助于对病毒进行分离、纯化、鉴别和计数等实际工作。
1.3病毒的核酸
核酸是病毒的遗传物质
控制着病毒的增殖及对宿主的感染性;
一种病毒的毒粒只含有一种核酸:DNA或是RNA ;单链DNA (ss DNA
颗粒和复杂形状颗粒(如蝌蚪状,卵形等几类。
病毒大小
各种病毒形状(模式图
1.2病毒的形态
1211.2.1
典型病毒粒的构造基本成分核酸——位于中心,称为核心
本成分蛋白质——包围在核心周围,形成衣壳
衣壳
核心
核心和衣壳合称核衣壳,为病毒的基本结构。有些复杂的病毒在衣壳的外面包裹着一层由脂类和多糖组成的包膜。有的包膜上还长有刺突。
些类型的HPV就是宫颈癌的
病原体,这一发现为开发出宫
颈癌疫苗打下了基础豪森现德国科学家
哈拉尔德·楚尔·豪森
颈癌疫苗打下了基础。豪森现
任职于德国癌症研究中心。(Harald zur Hausen
人类免疫缺陷病毒发现者之一
法国人出生于年是法国人,出生于1932年,是艾滋病病毒发现者之一。蒙塔尼的父亲是会计师,闲暇时喜欢在家里地下室做科学实验。受父亲影响,蒙塔尼从小便对科学感兴趣,由于他祖父长期受结肠癌困扰,所以后来他决定投身医学
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