快速瑞氏染液
瑞氏染色操作步骤
瑞氏染色操作步骤
瑞氏染色是一种常见的染色技术,用于细胞、组织和生物样本的
研究中。该技术可用于确定细胞形态、染色体数量和形态、染色体变
异等。以下是瑞氏染色的操作步骤:
1.样本处理:样本一般采用新鲜的、保存良好的细胞或组织样本。在处理之前,需要检查样本是否符合要求。例如,细胞样本应具有充
足的数量和活力,组织样本应达到一定的厚度和大小。此外,需要对
样本进行预处理,如固定处理、去除上皮细胞等。
2.制片:制作干片是瑞氏染色的重要步骤。首先,用无菌的玻片
将样本涂抹均匀。有时还需要使用刮片等工具辅助涂抹。然后,制片
需通过加热、干燥等过程。这使得细胞或组织与玻片表面相关联,以
便在后续染色过程中处理。
3.染色:将制片进行染色是瑞氏染色的核心步骤。瑞氏染色使用
吉姆萨染色(Giemsa stain)或艾因染色(Ehrlich stain)方法。在
吉姆萨染色中,可以使用不同的吉姆萨组合来改变细胞或染色体染色
的颜色。在艾因染色中,使用配制艾因染液进行染色。两种方法的染
色时间和温度也有所不同。在染色过程中,需要控制好样本的染色时
间和温度,以避免染色过度或过轻。
4.显微镜观察:经过染色后,制片需要用显微镜观察。观察时要
准确、认真、耐心、细致。需要注意的是,显微镜的放大倍数和焦距
要调整到合适的位置,以获得清晰的细胞或染色体图像。
5.结果分析:根据显微镜观察得到的图像,可以对样本进行分析
和判断。主要从细胞形态、染色体数量和形态、染色体变异等方面进
行评估,并与常模比较,以便对生物样本进行分类、鉴定和研究。
总的来说,瑞氏染色是一种简单、常用的染色技术,适用于细胞、组织和生物样本的研究。操作过程中需要注意样本处理、制片、染色、显微镜观察和结果分析等关键步骤。只有仔细、细致地操作,才能获
瑞氏染色的步骤
瑞氏染色的步骤
瑞氏染料是由碱性染料美蓝(Methvlemblue)和酸性染料黄色伊红(EostmY)合称伊红美蓝染料即瑞氏(美蓝-伊红Y)染料。瑞氏染色法的操作步骤有哪些?为了帮助各位考生了解,医学教育网搜集整理如下:
1、取病料涂片、自然干燥;
2、滴加瑞氏染液染3分钟,使标本被其中甲醛所固定;
3、加等量PH6.4的磷酸盐缓冲液(或等量超纯水)轻轻晃动玻片,均匀静置5分钟;
4、水洗、吸干、镜检;
5、细菌染成蓝色,组织细胞胞浆红色,细胞核蓝色或紫色。
瑞氏染色
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白细胞(leukocyte, white blood cell, WBC)
白细胞
中性粒细胞 嗜酸性粒细胞 嗜碱性粒细胞 淋巴细胞 单核细胞
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1、中性粒细胞(neutrophilic granulocyte,N)
形态:胞核呈蓝紫色,染色质呈块状,着色深; 成熟的N胞核多为分叶状,一般可分2~5叶,常见 3叶,幼稚的N胞核呈杆状。胞质中含许多散在细 小的颗粒,Wright染色中呈紫红色
结构: 每一血小板周围部分染成浅蓝色, 称透明区,中央部分有紫色颗粒,称颗粒区
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红细胞形态异常
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白细胞形态异常
主要是指N和L的异常改变。遗传性、感染、中毒、放射性或 造血系统恶性病变等因素是白细胞形态改变的常见原因。 (1)N 包括毒性变化、巨多分叶核、棒状小体以及其他 的异常形态。
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观察内容
• 红细胞 • 白细胞 • 血小板
对其形态、数量、分布情况进行观察
白细胞分类:一般情况计数100个白细胞,并计算出各种白细胞所 占 的比例。同时观察各种细胞的形态(大小、外形、胞质、胞核) 有无变化。
1
• 血涂片:将血液在载玻片上推制成较薄的 一层血膜。
• 待干燥后用染色液进行染色,染色液通常 选用瑞氏或瑞-姬氏。
直接流水冲洗3-5分钟 (切勿先到掉染液)
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瑞氏染液使用说明
瑞氏染液使用说明
货号:G1040
规格:50ml/100ml
保存:室温避光保存,有效期至少2年。
产品说明:
瑞氏染料是由碱性染料美蓝(Methvlem blue)和酸性染料伊红(Eostm Y)组成的复合染料,溶于甲醇。伊红通常为钠盐,有色部分为阴离子。美蓝通常为氯盐,有色部分为阳离子。甲醇的作用:一是溶解美蓝和伊红,使其解离为有色美蓝正离子的和伊红负离子。后两者可以选择性地吸附于血细胞内的不同成分而使其着色;二是固定细胞形态,加速染色反应,增强染色效果。
使用方法:
本产品可作为多种组织或细胞的染色使用,不同组织、细胞,不同的用途可以有不同的使用方法。具体方法请根据自己需求参考既有文献,本产品以涂片为例,举例说明,仅供参考。
1、取涂片、自然干燥。
2、滴加瑞氏染液染3分钟,使标本被其中甲醇所固定。
3、加等量PH6.4的磷酸盐缓冲液(或等量超纯水)轻轻晃动玻片,与瑞氏染色液混匀,静置5分钟。
4、水洗、吸干、镜检。
5、细菌染成蓝色,组织细胞胞浆红色,细胞核蓝色。
注意事项:
1、涂片厚薄适宜,涂片干透后固定,否则细胞在染色过程中容易脱落。
2、所加染液不能过少,以免蒸发而使染料沉淀。冲洗时间不能过久,以防脱色。
3、染色对pH十分敏感,稀释染液必须用缓冲液,冲洗用水应接近中性,否则可能会导致细胞染色异常,形态难以识别,甚至错误。
4、染色过淡可以复染,复染时应先加缓冲液,然后加染液。染色过深可用流水冲洗或浸泡,也可用甲醇脱色。
相关试剂:
P210010×多聚赖氨酸
G1010姬姆萨染色液
G1100伊红染色液
瑞氏吉姆萨染色步骤
瑞氏吉姆萨染色步骤
瑞氏吉姆萨染色是一种常用的细胞染色技术,它能使细胞的形态、结构和功能等方面的信息得到更加清晰的展现。下面将介绍瑞氏吉姆萨染色的步骤。
一、制备细胞涂片
首先需要制备细胞涂片,即取一定数量的细胞,将其分布均匀地涂在载玻片上。制备细胞涂片时需要注意,要使细胞分布均匀,不要有过多的交叉和重叠现象。
二、固定细胞
细胞涂片制备好后,需要进行固定。固定的目的是防止细胞在染色过程中失去其原有形态和结构。固定液可以用4%的乙醛或乙醇,也可以用甲醛进行固定。
三、染色
在固定液起作用后,需要进行染色,这是瑞氏吉姆萨染色的核心步骤。染色液的配方为:甲基绿、甲基红和亚甲蓝各1克,乙酸1毫升,蒸馏水100毫升。将染色液滴在细胞涂片上,静置10-15分钟。
四、洗涤
染色液静置后,需要用蒸馏水进行洗涤。洗涤的目的是去除多余的染料和固定液。
五、脱水
洗涤完成后,需要将细胞涂片进行脱水。脱水的目的是使细胞涂片逐渐失去水分,加强细胞涂片的硬度和稳定性。脱水可以用70%、80%、95%和绝对酒精进行,每种酒精浸泡时间为2-3分钟。
六、透明化
脱水后,需要进行透明化处理。透明化的目的是使细胞涂片变得透明,方便观察和保存。透明化液可以用苯酚、苯酚-氯酸-甘油溶液等。
七、封片
透明化完成后,需要进行封片,即用封片胶封住细胞涂片。封片胶可以用环氧树脂或丙烯酰胶进行。
总结
瑞氏吉姆萨染色是一种常用的细胞染色技术,能够使细胞形态、结构和功能等信息得到更加清晰的展现。其步骤包括制备细胞涂片、固定细胞、染色、洗涤、脱水、透明化和封片。不同的步骤需要注意不同的细节,只有每个步骤都严格按照要求操作,才能得到满意
瑞氏-姬姆萨染液使用说明书
2)将瑞氏-吉姆萨染液倒入染缸内,使染液覆盖载片上的细胞。具体染色时间视细胞而定,
一般 3~30min,染色时最好在镜下观察;
3)染色后水洗,先用 PBS 溶液漂洗载片,再用小股水流冲洗,防止将大量的细胞从载片上
冲落下来而影响后续观察。冲片结束后将载片放到阴凉处风干。
3、封片:中性树胶封片,制作成永久涂片。
瑞氏染料是由酸性染料伊红和碱性染料亚甲蓝组成的复合染料,血红蛋白,嗜酸性颗粒
为碱性蛋白质,与酸性染料伊红结合,染粉红色。细胞核蛋白为酸性蛋白,与碱性染料美蓝
或天青结合,染紫蓝色。中性颗粒呈等电状态与伊红和美蓝均可结合,染淡紫色。
吉姆萨染液由天青,伊红组成。染色原理和结果与瑞氏染色法基本相同。吉姆萨染液
均需试染,以便掌握染色时间。
2. 冲洗时不能先倒掉染液,应以流水冲洗,否则会使染料沉着在载片上。
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3. 冲洗完的载片应立放于支架上,防止剩余水分浸泡而导致脱色。
温馨提示
为了您的自身安全,使用试剂前,请做好防护,如穿实验服,带手套等。
储存温度
避光储存于室温。
包装清单
货号
品名
包装
HCY115
瑞氏-姬姆萨染液
100mL
/
说明书
1份
1
wwwhzhxbiocom瑞氏姬姆萨染液wright?sgiemsastainingsolution瑞氏染料是由酸性染料伊红和碱性染料亚甲蓝组成的复合染料血红蛋白嗜酸性颗粒为碱性蛋白质与酸性染料伊红结合染粉红色
瑞氏染色
瑞氏染色
瑞氏染色是目前最常用而又最简单的染色方法。
1原理:
瑞氏试剂中之酸性伊红和碱性美篮混合经化学作用后,变成中性之伊红化美蓝,久置后,经氧化而含有天青。此三种染料分别和细胞核及浆中的NH3+和COO-等结合,使细胞核及胞浆着色。由于系中性染料,又有缓冲液调节酸碱度,所以细胞受染后,蓝红等颜色都较适中,核染质、胞浆及其中之颗粒显色较为清楚。
2 试剂配制:
1、瑞氏试剂瑞氏染料〔粉〕1克,加不含醋酮之甲醇600毫升溶解过滤后即成。混合方式可将瑞氏染料置于研钵内,加适量甲醇混合研磨,使染料溶解,将已溶解的液体倒入清洁玻瓶,再放入甲醇继续溶解剩下染料,直至染料及甲醇均用完为止,然后过滤,以深色中性之玻璃瓶储藏待用。亦可将1克染料一次参加600毫升甲醇中,盛深色玻璃瓶内,塞好瓶口,置于温暖而黑暗之处或37度温箱内,每日振荡5min,连续7天以上,然后过滤储藏用。染液宜久置后使用,通常存放愈久,染色效果愈好。
2、缓冲液由1%的磷酸氢二钠和1%的磷酸二氢钾各30毫升加蒸馏水1000毫升配成,或以上两药各1克加2500毫升左右蒸馏水制成。以石蕊试纸检验、调整酸碱度,使PH在6.5-7
之间即可。
缓冲液亦可永新鲜蒸馏水或煮沸后密闭保存的蒸馏水。如蒸馏水与空气过多接触,那么可因吸收空气中之二氧化碳而使PH值变低,影响染色,故不宜使用。
3、染色步骤
1 将已编号之涂片水平置于染色板或者染色架上,涂片两端各划一道蜡笔线,主要防止染液外溢。
2 滴加瑞氏染色液。其多少依标本所占面积大小而定,一般为4-8滴,至染液将标本完全盖住为止。染液不宜过少,否那么,甲醛挥发后,易产生沉淀;不可过多,以免因过盛而流失,影响染色。
瑞氏染液
由酸性染料伊红和碱性染料美蓝组成的复合染料。
目录
简介 使用方法 染液配制 缓冲液配制 染色步骤 染液鉴定 混合染色
简介 英文拼写 Wright's stain 是由酸性染料伊红和碱性染料美蓝组成的复合染料,溶于甲醇 。后解离为带正电的美蓝和带
负电的伊红离子。 使用方法
瑞氏(Wright's staim;美蓝-伊红Y)染色: 1.瑞氏染料是由碱性染料美蓝(Methvlem blue)和酸性染料黄色伊红(Eostm Y)合称伊红美 蓝染料即瑞氏(美蓝-伊红Y)染料。 2.用甲醇作瑞氏染料溶剂,即成瑞氏染液。甲醇是瑞氏染料良好溶剂,有两种作用: (1)甲醇使瑞氏染料中美蓝(M)与伊红(E)在溶液中离解,可使细胞成分选择性吸附其中 的有色物质而着色。 甲醇 ME(瑞氏染料)----→M+ + E在配制的瑞氏染液中美蓝如放置过久即可氧化而含有天青,美蓝天青与伊红化合物能使核染成 紫红色,但不能使胞浆染为蓝色,多余美蓝就可以使胞浆染成蓝色,染色主要是化学作用,是离子 彼此结合的反应。 (2)甲醇具有强大的脱水力,可将细胞固定在一定形态及增加细胞结构的表面积,提高细胞 对染料吸收作用,同时由于甲醇吸附染色液中的水,使染色液升温,加速染色反应。 编辑本段染液配制 (1) 瑞氏染液配制: 瑞氏染料 830gm 或 1g 甲醇(AR) 500ml 或 600ml ○先称干燥(事先放入温箱干燥过夜)瑞氏染料放置乳钵内,用乳棒轻轻敲碎染料成粉末,再 行研磨至听不到研芝麻声即呈细粉末,加少许甘油或甲醇溶解研磨,使染料在乳缸内显“一面镜” 光泽,而无染料粉粒沉着。 ○再加较多量甲醇研磨呈一面镜光亮,静置片刻,将上层液体倒入一清洁储存瓶内(最好用甲 醇空瓶),再加甲醇研磨,重复数次,至乳钵内染料及甲醇用完为止,摇匀,密封瓶口。 ○存室温暗处,储存愈久,则染料溶解、分解就越好,一般储存 3 个月以上为佳。 (2) 缓冲液: ●缓冲液作用: ○染色对氢离子浓度是十分敏感的,据观察 pH 值的改变,可使蛋白质与染料形成的化合物重
检验中常用染色镜检方式方法的总结
检验中常用染色镜检方式方法的总结
1.革兰染色
●鉴别革兰氏阴性菌和革兰氏阳性菌,指导临床用药等。
●革兰染色一般步骤:
1)初染:滴加结晶紫染色液于涂片上1min,水洗。
2)媒染:滴加碘液媒染1min,水洗。
3)脱色:将涂片浸入95%酒精,轻摇玻片,脱去染液后,水洗。
4)复染:滴加番红于涂片上复染1min,水洗,吸水纸吸干,油镜观察。
●革兰染色结果判读:革兰阳性菌为紫色,革兰阴性菌为红色。
2.瑞氏染色
●瑞氏染液配制:
1)瑞氏染液配制:
瑞氏染料830mg 或1g
甲醇(AR )500ml 或600ml
先称干燥(事先放入温箱干燥过夜)瑞氏染料放置乳钵内,用乳棒轻轻敲碎染料成粉末,再行研磨至听不到研芝麻声即呈细粉末,加少许甘油或甲醇溶解研磨,使染料在乳缸内显“一面镜”光泽,而无染料粉粒沉着,再加较多量甲醇研磨呈一面镜光亮,静置片刻,将上层液体倒入一清洁储存瓶内(最好用甲醇空瓶),再加甲醇研磨,重复数次,直至乳钵内染料及甲醇用完为止,摇匀,密封瓶口,存室温暗处,储存愈久,则染料溶解、分解就越好,一般储存3 个月以上为佳。
2)缓冲液:
缓冲液作用:染色对氢离子浓度是十分敏感的,据观察pH 值的改变,可使蛋白质与染料形成的化合物重新离解。缓冲液须保持一定的pH 使染色稳定,PBS 的pH 一般在 6.4~6.8 ,偏碱性染料可与缓冲液中酸基起中和作用,偏酸性染料则与缓冲液中的碱基起中和作用,使pH 恒定。
缓冲液配制(pH6.4~6.8 ,弱酸性):
配方1 :1% KH2PO4 30ml M/15 KH2PO4 73.5 ml
瑞氏染液的主要成分及染色原理
瑞氏染液的主要成分及染色原理
瑞氏染液是一种常用的染料,主要用于织物的染色。其主要成分包括色素、助剂和溶剂。其中,色素是染液的主要成分,能够使织物呈现出不同的颜色。助剂则能够提高染色的效果,例如增强色素的附着力和穿透力,以及调节染色的色深和亮度。溶剂则是色素和助剂的载体,能够将它们溶解在一起,并且使它们更容易附着在织物上。
瑞氏染液的染色原理是通过色素分子与织物纤维之间的相互作
用来实现的。当染液中的色素分子与织物纤维表面的化学键结合时,它们就能够稳定地附着在织物上,从而实现染色效果。具体来说,染液中的色素分子能够与织物表面的氢键、范德华力和离子键等相互作用力产生作用,从而完成染色过程。同时,助剂的存在可以增强色素分子与织物纤维之间的相互作用力,从而提高染色效果。
总之,瑞氏染液的主要成分和染色原理是基于色素分子与织物纤维之间的相互作用。它们能够共同作用,使得染色效果更加鲜艳、均匀和持久。
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瑞氏染液的主要成分及染色原理
瑞氏染液的主要成分及染色原理
瑞氏染液是一种常用的染发产品,它的主要成分包括氧化剂、碱性成分、染料等。这些成分共同作用,实现头发颜色的变化。
1. 氧化剂
在瑞氏染液中,氧化剂是一个必不可少的成分。它的主要作用是使染
料的分子中断,将其氧化为一个更易于结合的形式。氧化剂在染色过
程中也起到氧化头发的角色,打开头发的鳞片,促进染料的渗透。通
常瑞氏染液中的氧化剂为氢氧化物或双氧水。
2. 碱性成分
碱性成分也是一种重要的成分,它通过增加头发表面的pH值,使头发
表面的鳞片变得松散,增加瑞氏染液和头发之间的结合力,确保染料
分子渗透得更深入。瑞氏染液中的碱性成分通常为氨水、碳酸氢钠等。
3. 染料
染料是瑞氏染液的主要成分之一。通常情况下,它们是由芳香族化合物、非芳香族化合物和金属盐等材料制成的。这些染料分子按啤酒-兰
布特定律吸收特定的波长,实现了染发的效果。染料的浓度和染发时
间也是影响染色效果的两个重要因素。
染色原理
瑞氏染液实现染发的原理非常简单,就是将染料分子渗透到头发纤维中,然后和头发中的天然色素分子进行化合反应。通过这种反应,天
然色素分子被氧化,瑞氏染液中的染料分子便被结合到了头发纤维上,
从而实现了颜色的变化。
总结
瑞氏染液是一种富有活力的染发产品,其主要成分包括氧化剂、碱性成分和染料等。在染色过程中,这些成分共同发挥着作用,实现了头发颜色的变化。了解瑞氏染液的成分和染色原理有助于我们更好地理解染发的过程,同时也能够提高我们选择染发产品的标准。
瑞氏-姬姆萨染液说明书
瑞氏-姬姆萨染液说明书
货号:G1020
规格:100ml/500ml
保存:室温避光保存,有效期至少2年。
产品说明:
瑞氏-姬姆萨染液是一种复合染液,兼有瑞氏和姬姆萨染液二者优点,主要应用于血液和骨髓涂片染色。各种细胞及细胞的各种成分由于其化学性质不同,对瑞氏-姬姆萨染色液中的酸性染料和碱性染料的亲和力也不同,因此,标本涂片经瑞氏-姬姆萨染色液染色后,相应各类细胞呈现不同的着色,从而达到辨别其形态特征的目的。瑞氏染色液对胞浆着色力较强,能较好的显示胞浆的嗜碱性程度,着色清晰,色泽纯正,但是对胞核着色偏深,核结构显示较差。姬姆萨染色对细胞核着色程度适中,细胞核结构和色泽清晰艳丽,对核结构的识别较佳,但对胞浆着色较差,故采用瑞氏姬姆萨混合染色,具有染色效果好,对比清晰,操作简便等特点。
使用方法:
本产品可作为多种组织或细胞的染色使用,不同组织、细胞,不同的用途可以有不同的使用方法。具体方法请根据自己需求参考既有文献,本产品以涂片为例,举例说明,仅供参考。
1、取涂片、自然干燥。
2、滴加瑞氏-姬姆萨染液2-3滴覆盖整个标本涂片,染1-2分钟。
3、滴加等量的0.01M磷酸盐缓冲液(PH6.4-6.8),轻轻晃动玻片,与瑞氏-姬姆萨染色液充分混匀,染色3-5分钟。
4、水洗、吸干、镜检。
5、染色后胞浆和胞核的染色清晰分明,细胞核着色呈深浅不同的紫红色,胞浆呈浅红色,胞浆中颗粒区分明显。
注意事项:
1、涂片厚薄适宜,涂片干透后固定,否则细胞在染色过程中容易脱落。
2、所加染液不能过少,以免蒸发而使染料沉淀。冲洗时间不能过久,以防脱色。
快速瑞氏染液用于疟原虫染色镜检的评价
【 关键 词】 疟原虫 ; 快速瑞氏染液 ; 镜检
疟 原 虫是 导 致人 类 疟 疾 的病 原 体 ,严 重 威 胁 人 类 生命
图 1厚 血 膜快 速瑞 氏染 色效 果 :
健康 。 云南省是我国疟疾流行最严重的省份之一 , 也是疫情 波动最频繁的地 区, 疟疾发病数 占全 国病例总数 的 3 %以 0 上【 。在外周血中的红细胞 内发现疟原虫是确诊疟疾和鉴 1 ] 别虫种 的重要依据[]因此快速 、 2, 简便地涂片染 色镜检在基 层疟疾诊断中有非常积极 的实用价值 ,笔者对我院发热门 诊 疑为疟疾感染患者 6 2例 , 8 取外周血制成厚 、 薄血膜各 2 张, 自然晾干 , 用快速瑞 氏染液和姬氏染液分别对厚 、 薄血
中 国 中 医 药 咨 讯
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21 年 9 00 月上 第 2 第 l 期 卷 7
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混 合 感 染 2例 , 44 占 .%。 4 讨 论 疟 原 虫 染 色 显 微 镜 镜 检 法 乃 是 疟疾 诊 断 的 主 要 方 法 ,
瑞氏-吉姆萨染液配法
瑞⽒-吉姆萨染液配法
英⽂拼写 Wright's stain
是由酸性染料伊红和碱性染料美蓝组成的复合染料,溶于甲醇。后解离为带正电的美蓝和带负电的伊红离⼦。
使⽤⽅法
瑞⽒(Wright's staim;美蓝-伊红Y)染⾊:
1.瑞⽒染料是由碱性染料美蓝(Methvlem blue)和酸性染料黄⾊伊红(Eostm Y)合称伊红美蓝染料即瑞⽒(美蓝-伊红Y)染料。
2.⽤甲醇作瑞⽒染料溶剂,即成瑞⽒染液。甲醇是瑞⽒染料良好溶剂,有两种作⽤:
(1)甲醇使瑞⽒染料中美蓝(M)与伊红(E)在溶液中离解,可使细胞成分选择性吸附其中的有⾊物质⽽着⾊。
甲醇
ME(瑞⽒染料)----→M+ + E-
在配制的瑞⽒染液中美蓝如放置过久即可氧化⽽含有天青,美蓝天青与伊红化合物能使核染成紫红⾊,但不能使胞浆染为蓝⾊,多余美蓝就可以使胞浆染成蓝⾊,染⾊主要是化学作⽤,是离⼦彼此结合的反应。
(2)甲醇具有强⼤的脱⽔⼒,可将细胞固定在⼀定形态及增加细胞结构的表⾯积,提⾼细胞对染料吸收作⽤,同时由于甲醇吸附染⾊液中的⽔,使染⾊液升温,加速染⾊反应。
染液配制
(1) 瑞⽒染液配制:
瑞⽒染料 830gm或1g
甲醇(AR)500ml或600ml
○先称⼲燥(事先放⼊温箱⼲燥过夜)瑞⽒染料放置乳钵内,⽤乳棒轻轻敲碎染料成粉末,再⾏研磨⾄听不到研芝⿇声即呈细粉末,加少许⽢油或甲醇溶解研磨,使染料在乳缸内显“⼀⾯镜”光泽,⽽⽆染料粉粒沉着。
○再加较多量甲醇研磨呈⼀⾯镜光亮,静置⽚刻,将上层液体倒⼊⼀清洁储存瓶内(最好⽤甲醇空瓶),再加甲醇研磨,重复数次,⾄乳钵内染料及甲醇⽤完为⽌,摇匀,密封瓶⼝。
瑞氏-吉姆萨染液配法
英文拼写 Wright's stain
是由酸性染料伊红和碱性染料美蓝组成的复合染料,溶于甲醇。后解离为带正电的美蓝和带负电的伊红离子。
使用方法
瑞氏(Wright's staim;美蓝-伊红Y)染色:
1.瑞氏染料是由碱性染料美蓝(Methvlem blue)和酸性染料黄色伊红(Eostm Y)合称伊红美蓝染料即瑞氏(美蓝-伊红Y)染料。
2.用甲醇作瑞氏染料溶剂,即成瑞氏染液。甲醇是瑞氏染料良好溶剂,有两种作用:
(1)甲醇使瑞氏染料中美蓝(M)与伊红(E)在溶液中离解,可使细胞成分选择性吸附其中的有色物质而着色。
甲醇
ME(瑞氏染料)----→M+ + E-
在配制的瑞氏染液中美蓝如放置过久即可氧化而含有天青,美蓝天青与伊红化合物能使核染成紫红色,但不能使胞浆染为蓝色,多余美蓝就可以使胞浆染成蓝色,染色主要是化学作用,是离子彼此结合的反应。
(2)甲醇具有强大的脱水力,可将细胞固定在一定形态及增加细胞结构的表面积,提高细胞对染料吸收作用,同时由于甲醇吸附染色液中的水,使染色液升温,加速染色反应。
染液配制
(1) 瑞氏染液配制:
瑞氏染料 830gm或1g
甲醇(AR)500ml或600ml
○先称干燥(事先放入温箱干燥过夜)瑞氏染料放置乳钵内,用乳棒轻轻敲碎染料成粉末,再行研磨至听不到研芝麻声即呈细粉末,加少许甘油或甲醇溶解研磨,使染料在乳缸内显“一面镜”光泽,而无染料粉粒沉着。
○再加较多量甲醇研磨呈一面镜光亮,静置片刻,将上层液体倒入一清洁储存瓶内(最好用甲醇空瓶),再加甲醇研磨,重复数次,至乳钵内染料及甲醇用完为止,摇匀,密封瓶口。
%8d快速瑞氏姬姆萨染色液的配制和应用
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晦学理沧与实践2(302年第15巷第7期JMed'131cor&PracVol15,No7-July2002———一————一———一———————————一—————
正确,耗时j3~151。,一F均鉴定值为878%.比常规鉴定法快些,但细菌鉴定的符音率相对低些。刈链球菌鉴定的符台率为7l4%,耗州3。15h.其中,化脓性链球菌、B群链球菌在3h即可鉴定出米,鉴定值均在92%以上。从对肺炎链球荫的鉴定情况束看,卫生部一北发了3次((9704、9810、2006),H有第3次鉴定出来.=分析原因有:链球菌不易乳化,而且很难混匀.存实际操作叫,可将菌液浓度词到1##”麦氏单位;另一方面,所发质控菌株来自呼吸道感染,多为混台菌,婀不能丹纯,会影响鉴定结果。
3.3革兰氏阳}生杆蔺一一共发了5株,Vitek一32对c+b的鉴定不如G+c.在做c+c的鉴定时需注意:①正确观察细菌溶血情况和操作触酶试验;②注意镜下细菌的形态和排列方式;
③将Viiek一32的生化档定结果采用双歧检索表进行鉴定。在所发的5株荫巾.笔者根据Vitek一32的生化反应结果.结台荫落颜色、形态、溶血情况,触酶试验,完成r9701、9805、9807、9901、2002这5株菌的鉴定.且完全正确。34时真菌的鉴定,除9702鉴定与质控菌株不符外,其余5株垒部鉴定正确.j:l鉴定值均在99%以上,耗肘24~48h,较传统方法提前24—48h,总结4年中Vltek一32对真菌的鉴定情毗,应注意:①在用Vilek一32测试时,应适当结合形态学观察;
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瑞氏染色液说明书
【产品名称】
瑞氏染色液
【包装规格】
货号:DM0005
单瓶包装规格分别为:100ml、250ml、500ml、5000ml;
每套/盒包装规格分别为:2×20ml/盒、2×100ml/盒、2×250ml/盒、2×500ml/盒、2×5000ml/盒。
【预期用途】
主要用于对血细胞进行染色。
【检验原理】
瑞氏色素是酸性染料伊红(Eosin)和碱性染料亚甲蓝(Methylene Blue)组成的复合染料,各种细胞成分化学性质不同对各种染料的亲和力也不一样,如血红蛋白、嗜酸性颗粒为碱性蛋白质,与酸性染料伊红结合,染粉红色,称为嗜酸性物质;细胞核蛋白、淋巴细胞、嗜碱性粒细胞胞质为酸性,与碱性染料结合后,染紫蓝色或蓝色,称为嗜碱性物质;中性颗粒呈等电状态与伊红和亚甲蓝均可结合,染淡紫红色,称为嗜中性物质;原始红细胞、早幼红细胞胞质、核仁含较多酸性物质,染成较浓厚的蓝色;中幼红细胞既含酸性物质,又含碱性物质,染成红蓝色或灰红色;完全成熟红细胞,酸性物质彻底消失后,染成粉红色。本染色液经常用于血液和细胞涂片、骨髓细胞涂片、细菌染色,细胞质呈红色,细胞核及细菌呈蓝色,嗜酸性颗粒呈橘红色。
【主要组成成分】
试剂组成主要成分
1、瑞氏染液瑞氏染料、甲醇
2、磷酸盐缓冲液磷酸盐
【储存条件及有效期】
5℃~35℃环境保存,原包装未开封染色液的有效期为24个月,在有效期内的已开封染色液应在开封后6个月内使用完,每次用后应及时拧紧瓶盖,以免挥发或变质。
【样本要求】
1、血细胞涂片染色:要求新鲜全血或EDTA.2K抗凝血。
2、阴道分泌物(妇科白带)涂片染色:新鲜标本离开人体涂片后,需尽快以火焰或酒精固定,以避免细胞变形。
3、骨髓涂片染色:涂片制成后,应在空气中快速摇动或扇干,防止细胞皱缩变形或固空气潮湿而溶血,不能用高温或火烤干燥。
4、脱落细胞涂片:取样本并涂片,待检涂片固定可采用自然干燥法或湿片固定法(具体操作可根据不同检体及所采用的固定液所对应的规范操作要求进行);若采用湿片固定法,标本浸泡时间稍长些,效果会更佳;若采用湿片固定液固定标本,固定液用后需经常过滤,更换,防止细胞交叉污染。
【检验方法】
1、滴加瑞氏染液于涂片上,并让染液覆盖整个标本涂片,染色;
2、将等量的磷酸盐缓冲液滴加于瑞氏染液上面,以嘴或洗耳球使两液充分混合,染色;
3、水洗,冲洗时不能先倒掉染色液,可缓慢从玻片一端冲洗,以防有沉渣沉淀在标本上;
4、干燥、镜检。
【检验方法的局限性】
仅供形态学初检观察染色使用。
【注意事项】
1、血液涂片或骨髓涂片应厚薄均匀,必须充分干燥,否则在染色过程中容易脱落,以免影响染色效果。
2、染色时间须视何种标本、涂片厚薄、有核细胞多少及温度等而定。
3、pH值对染色有一定影响,载玻片应清洁、无酸碱污染,以免影响染色效果。
4、涂片染色中请勿先去除染色液或直接对涂片用力冲洗,不能先倒掉染液,以免染料沉着于涂片上。
5、染色液可重复使用,但不能多次重复,若有沉淀物应过滤后使用。
6、染色过深可用甲醇或酒精适当脱色,最好不复染。
7、如果染色过深或过浅,应调整染色时间或工作液浓度。
8、瑞氏染液用前应充分摇匀,保证染色的均一性;染色液用量应充足,勿使染色液蒸发干。
9、本产品仅用于体外诊断,应由专业人士使用及进行结果的判读。
10、使用前应详细阅读说明书,并做好个人卫生防护,在有效期内使用,生产日期、生产批号和失效日期见包装。
11、用后应按医院或环保部门要求处置废弃物。
【基本信息】
备案人/生产企业名称:安徽雷根生物技术有限公司
住所:淮北凤凰山经济开发区凤冠路三期标准化厂房三号厂房