重组抗人PD-1人源化单克隆抗体说明书

靶向PD-1

靶向PD-1/PD-L1的新策略：降解剂、双功能分子及共价抑制剂

王志杰1,2，廖晓彤2，郭　霞1*，陈建军2**

（1南方医科大学深圳医院, 深圳518100；2南方医科大学药学院, 广州510515）

摘　要　靶向细胞程序性死亡受体-1（programmed cell death protein-1, PD-1）/细胞程序性死亡配体-1（programmed cell death ligand-1, PD-L1）已成为最具前景的肿瘤免疫治疗靶点之一。目前，PD-1/PD-L1单克隆抗体药物及小分子抑制剂都面临着相应的发展瓶颈，许多研究者尝试探索不同的策略以阻断PD-L1/PD-L1通路，期望改善肿瘤治疗的效果。本文总结了靶向PD-L1的降解剂、双功能分子及共价抑制剂，旨在为PD-1/PD-L1药物的开发提供有益的思路。关键词　PD-1/PD-L1；肿瘤免疫；降解剂；双功能分子；共价抑制剂中图分类号 R914；R730.3 文献标志码　A

文章编号　1000−5048(2024)01−0005−10doi ：10.11665/j.issn.1000−5048.2023112702

引用本文王志杰，廖晓彤，郭霞，等. 靶向PD-1/PD-L1的新策略：降解剂、双功能分子及共价抑制剂[J]. 中国药科大学学报，2024，55（1）：5 − 14.

Cite this article as: WANG Zhijie, LIAO Xiaotong, GUO Xia, et al . New strategies for targeting PD-1/PD-L1: degraders, bifunctional molecules and covalent inhibitors[J]. J China Pharm Univ , 2024, 55(1): 5 − 14.

PD-1PD-L1抗体的制备与鉴定研究

PD-1/PD-L1抗体的制备与鉴定研究

免疫检查点是在人体内免疫调控过程中的可以下调免疫效应细胞激活反应

的关键因子,而PD-1正是T细胞上的重要免疫点之一。肿瘤细胞通过在其细胞膜表面高表达PD-L1与T细胞表面的PD-1结合,向吞噬细胞发出“Do not eat me”的信号,从而促进抗原特异性T细胞的凋亡,减少调节性T细胞的凋亡,最终实现免疫逃逸。阻断型抗体是通过阻断PD-1、PD-L1之间的信号传递,减少调节性T

细胞的凋亡,从而增强T细胞对肿瘤细胞的杀伤作用。

本研究以获取PD-1、PD-L1单克隆抗体为目的,通过病毒免疫技术、杂交瘤技术、全合成人源抗体库筛选技术等,获得了可以特异性识别PD-1蛋白的单克隆抗体4G9及PD-L1蛋白的单克隆抗体1A7。首先,通过病毒包装的方式,产生滴度为1×106TU/mL PD-1慢病毒颗粒。同时利用大肠杆菌表达系统制备浓度为0.54mg/mL,纯度>85%的PD-1ECD重组蛋白用于接下来的抗体检测实验。

利用病毒颗粒感染小鼠,已达到抗原免疫的效果,其效价大于1:2.6×

107。接着利用细胞融合技术获取7株可以产生特异性抗体的杂交瘤细胞,经过三次克隆化后得到与抗原结合能力最强且可以稳定分泌特异性识别

PD-1的单克隆抗体4G9,并对其进行体外检测。经鉴定4G9单抗属于IgG2a、κ

亚型。

通过小鼠腹水制备的方法大量制备抗体随后经Western-Blot检测其特异性,其纯化后腹水与抗原亲和力常数为5.15×108L/mol。利用间接ELISA的方法检测反复冻存后细胞结合能力,结果表明4G9细胞株可以稳定分泌

“PD-1+CTLA-4”双免联合冲击肝癌一线，信迪利单抗联合IBI310加入战场

“PD-1+CTLA-4”双免联合冲击肝癌一线，信迪利单抗联合

IBI310加入战场

近年来，随着各种药物、治疗技术的进展，我们对于中晚期肝癌已经不再像20年前那样手中没有任何武器。免疫治疗、靶向治疗的出现，使得即使是无法手术的晚期肝癌，也能延长寿命，同时提高生活质量。免疫药物+靶向药物、双免疫药物的联合也已经被付诸实践。通过比较免疫治疗在晚期肝癌的研究结果可以发现，双免疫联合疗法显示出可接受的安全性和令人鼓舞的有效性。

2020年3月10日，FDA加速批准纳武利尤单抗联合伊匹木单抗用于既往接受索拉非尼治疗的肝细胞癌患者。这一方案打开了双免联合治疗晚期肝癌治疗的大门。至此之后，关于PD-1+CTLA-4联合治疗晚期肝癌的研究正式提上日程，包括一线治疗。

度伐利尤单抗联合Tremelimumab

一线治疗肝癌III期结果曝阳

2021年10月15日，肝癌一线治疗领域备受关注的III期HIMALAYA研究终于公布了高水平阳性结果，与索拉非尼单药治疗相比，度伐利尤单抗+Tremelimumab在一线治疗未接受全身治疗且无法切除的肝细胞癌(HCC)患者时，总生存期(OS)得到了显著统计学意义和临床意义的改善，达到了该研究的主要终点。此外，度伐利尤单抗单药治疗显示出了不劣于索拉非尼的OS获益，且在数值上优于后者，同时度伐利尤单抗单药也比索拉非尼具有更好的耐受性。

值得注意的是，该研究中采用了与众不同的独特的给药方案——STRIDE方案（T300+D），即患者首先接受一次Tremelimumab （300mg）和度伐利尤单抗（1500mg）的联合给药，然后每隔4周仅仅接受度伐利尤单抗（1500mg）单药治疗。这样的给药方案旨在刺激T细胞激活的同时，减少CTLA-4抗体的毒副作用。因此，这一创新的给药方案展示出良好的有效性、安全性和耐受性，且并没有增加肝脏毒性。

2018年8月中国1类新药临床动态

1类化药批准临床概况

2018年8月，共有6个申报临床的中国1类化药首次获得CDE 签发的临床试验批件，即将开始临床一期试验，其中1个是特殊审批品种。抗肿瘤药物3个，心血管系统药物2个以及抗感染药物1个，具体信息如下：

1D-0502

D-0502是一种雌激素受体（ERs）拮抗剂，由益方生物科技（上海）有限公司研发，目前正在美国进行临床一期试验，用于治疗晚期或转移性ER阳性、HER2阴性乳腺癌。2018年6月，CDE受理本品的临床试验申请（化药1类），2018年8月获得临床试验批件。

目前国内ERs拮抗剂的中国1类药物研发现状如下：

2FHND9041

FHND9041由江苏正大丰海制药有限公司研发，通过计算机模拟及分子设计，并经过药物化学的构效分析、结构优化及体内外生物活性以及DMPK筛选而发现的全新结构的第三代表皮生长因子受体（EGFR）小分子抑制剂。临床拟用于经EGFR抑制剂后耐药且产生T790M突变的非小细胞肺癌病人或一线用于EGFR敏感型突变呈阳性的非小细胞肺癌病人。2018年6月，CDE受理本品的临床试验申请（化药1类）。2018年8月，获得临床试验批件，批准进行I、II、III 期临床试验。

目前EGFR小分子抑制剂的中国1类化药有40个，具体情况如下：

3CBP-1008

CBP-1008是同宜医药（苏州）利用其自主研发技术平台BIT-C开发的双特异性靶向配体药物，拟用于注射治疗转移或复发性实体瘤，包括乳腺癌、结肠直肠癌、食道癌、胃癌和胰腺癌。2018年5月，CDE受理本品的临床试验申请（化药1类），2018年8月获得临床试验批件。

PD-1中和抗体-Qwbio

Anti-PD-1 Neutralizing Antibody

规格：100 µg

反应物种：人

寄主细胞：HEK 293细胞

分子量大小：重链50 kDa ，轻链25 kDa，蛋白总大小为150 kDa.

标签：无

克隆类型：单克隆抗体

同型对照：IgG1

产品描述：

中和重组小鼠/人嵌合抗体，识别人PD-1的PD-L1 / PD-L2结合域。这种抗体能与小鼠PD-1交叉反应，但尚未与其他物种测试过。

UniProt：Q15116

别名：Anti-PD1

比活度：

IC50 = 1.2 nM，采用了PD-1[生物素标记]：PD-L1抑制剂筛选分析试剂盒（货号：#72005）IC50 = 4.7 nM，采用了PD-1[生物素标记]：PD-L2抑制剂筛选分析试剂盒（货号：#72006）分析条件：

抗体在各种浓度下被加入到启维益成代理的PD-1[生物素标记]：PD-L1或PD-1[生物素标记] ：PD-L2进行试验分析。试验分析所采用的说明书货号分别为#72005或#72006。

成分：40 mM Tris-HCl，pH 8.0，110 mM NaCl，2.2 mM KCl，和20% 甘油

纯化：来源于HEK293细胞上清液Protein A亲和层析纯化。

免疫原：人PD-1的结合域PD-L1/L2

形式：水溶性缓冲溶液

储存/运输：-80°C保存12个月，含有载体蛋白（BSA 0.1 – 0.5%）的稀释抗体4°C可储存2周。

应用：在PD-1：PD-L1[生物素标记]抑制剂筛选分析试剂盒使用（#72003）中，作为有用的PD-1结合抑制剂的对照使用。

重组单抗药物的肽图分析方法开发

small peptide fragments. Reversed phase HPLC was used to separate e the peptide fragments. The method for peptide mapping method was effective in proteins such as recombinant antibodies with complex structure. It can used in identify test for monoclonal antibody.

Key words: Recombinant monoclonal antibody, Peptide mapping, Trypsin Reversed phase HPLC

Written by Yinyin Huang

Supervised by Yan An

1引言 (1)

1.1研究背景 (1)

1.1.1单克隆抗体定义及国际发展 (1)

1.1.2单克隆抗体国内发展 (3)

1.2研究目的 (5)

1.2.1肽图分析方法的意义 (5)

1.2.2肽图分析方法开发的目标 (6)

2研究方法和概述 (7)

2.1研究来源 (7)

2.2技术路线 (8)

2.3研究供试品基本情况 (10)

2.4原有肽图分析方法情况 (10)

2.5研究方法及步骤 (11)

2.5.1研究内容实验设计和背景 (11)

2.5.2研究内容缩略词 (11)

2.5.3供试品 (12)

2.5.4其他关键材料 (12)

PD_1_L1国内外研发全景扫描_陈丽

医药经济报/2016年/3月/23日/第004版

研发

PD-1/L1国内外研发全景扫描

本报特约撰稿陈丽

在肿瘤免疫治疗领域，PD-1抑制剂自首次露面以来就一直带着光环，临床试验、审批阶段都受到相关机构的加速批准待遇。自2014年全球首个该类药物获得批准以来，国外各企业高度聚焦，临床试验也是加紧进行。让人欣慰的是，国内企业也毫不示弱，截至2016年2月底，已经有4家本土企业积极投入到这场激烈战斗中。

随着精准医疗概念的提出，有关免疫治疗与肿瘤基因突变关系的研究得到越来越多的关注。在卫计委重大新药创制2015年重点研究方向中，提出研发重点要针对恶性肿瘤等重大疾病，并进一步聚焦为靶向及免疫抗肿瘤药物，还提出了推荐的药物靶点，包括PD1、PD-L1靶点，明确范围无疑将使国内制药企业研发目标更准确。

目前国外已上市的抗PD-1/PD-L1药物是百时美施贵宝（BMS）的Opdivo（Nivolumab）和默沙东的Keytruda（Pembrolizumab），其他处于在研阶段的药物有Pidilizumab（CT-011，CureTech）、Avelumab（默克）、BMS-936559（MDX-1105，BMS）、Atezolizumab（MPDL3280A，罗氏）和MED14736（阿斯利康）。

查询CDE数据发现，近两年，在国内PD-1/PD-L1市场中也出现一批领先“玩家”，包括君实生物、恒瑞医药、百济神州、嘉和生物等，泰州君实和江苏恒瑞先后获得了临床试验批件，目前没有在中国上市者。

A 全球专利技术情况

重组抗人PD-1人源化单克隆抗体说明书

K E X I N科昕生物

北京科昕生物科技有限公司

重组抗PD-1全人单克隆抗体(细胞培养级别)

Recombinant anti-Human PD-1

Functional Monoclonal Antibody

（Cell Culture Grade）

产品说明：

PD1 全人单抗可以有效地封闭PDL1 和PD1 的结合，并且不会引起 HAMA 反应（人抗鼠抗体反应）。PD1 的抗体已作为广谱性抗肿瘤药物被接受，也可能成为最有效地平衡细胞治疗的工具。PD1 是激活的T细胞、B 细胞以及髓样细胞膜表面重要的免疫调控受体。与配体PDL1和PDL2 结合，抑制T 细胞增殖和细胞因子分泌，影响细胞治疗的效果。近来研究发现，DC 细胞含有PDL1，DC‐CIK 联合治疗时，PDL1 可能是潜在的细胞治疗的负调节因素。PD‐1 主要在活化的T、B 和NK 等细胞上呈诱导性表达,PD‐1 有PD‐L1(B7‐H1,CD274)和PD‐L2(B7‐DC,CD273)两个配体。PD‐L1 广泛组成性表达于多种实质器官组织、免疫细胞以及多种类型的肿瘤细胞上,而PD‐L2 仅表达于活化的巨噬细胞、树突状细胞、骨髓来源的基质细胞和个别肿瘤细胞株。PD‐1 随T 细胞活化程度逐步上调表达,与PD‐L 结合后引发抑制信号的产生，致使效应性T 细胞失能并及时进入凋亡。

本产品系由单克隆细胞株表达并高度纯化后的抗体经超滤换液分装制成。

本产品为无菌澄明液体，由含有 10mM PBS pH为 7.2的蛋白溶液经0.2um过滤后分装。

肾癌PD_1_PD_L1的作用及抗体治疗的研究现状_张冰

实用医学杂志 2016 年第 32 卷第 11 期
1885
肾癌 PD-1 ／ PD-L1 的作用及抗体治疗的研究现状
张冰张建军瞿海龙
肾细胞癌虽具有肿瘤免疫原性，但其可诱导树突状细胞分化，并诱导 T 细胞产生耐受肿瘤的相关基因，从而使得免疫细胞的抗肿瘤功能受损［1］。新型的免疫调节剂，如 PD-1 抗体，能显著增强抗肿瘤免疫功能。 PD-1（程序性死亡受体-1）是 ISHIDA 等［2－3］在 1992 年发现的一种免疫抑制性受体，属于 CD28 ／ CTLA-4 家族，可调节抑制性信号，在肿瘤微环境中 T 细胞活化的效应阶段发挥其抑制活性［4］。 PD-1 有 PD-L1 和 PD-L2 两种配体。 PD-L1 表达于静息 T 细胞、 B 细胞、巨噬细胞、树突状细胞、血管内皮细胞和胰岛细胞，可调节外周组织中 T 细胞的功能。 PD-L1 通过与 PD-1 结合起到抑制 T 细胞的作用［5］。
1 肾癌 PD-1 及其配体 PD-L1 的表达和作用
一些研究观察到了肾癌 PD-1 及其配体 PD-L1 的生物学作用。一般来说，激活的 T 细胞、B 细胞、NK 细胞和单核细胞可表达 PD-1，从而限制处于炎症状态的自身免疫。然而肿瘤利用这一机制，通过表达 PD-L1 来下调 T 细胞应答。 PD-L1 不在正常肾组织中表达，但在原发性和转移性肾癌标本中有相当比例的表达。［6－8］ FRIGOLA［9］等研究了 172 例肾癌患者，研究发现 PD-1 表达与肿瘤分期、坏死率和 5 年生存率相关，且肿瘤分期晚、预后差的患者 PD-L1 水平较高。

举例说明单克隆抗体在临床上的主要应用

单克隆抗体在临床上的主要应用

引言

单克隆抗体（Monoclonal Antibodies）是由单一克隆的抗体分子组成的一种抗体

药物。它具有高度特异性和亲和力，能够针对特定靶向分子进行结合并诱导免疫反应。因此，单克隆抗体在临床上具有广泛的应用。本文将探讨单克隆抗体在临床上的主要应用，并分析其在各种疾病治疗中的疗效。

一级标题1：单克隆抗体治疗恶性肿瘤

二级标题1.1：抗肿瘤单克隆抗体的作用机制

抗肿瘤单克隆抗体可以通过以下机制抑制肿瘤的生长和扩散： - 阻断细胞信号转

导路径：单克隆抗体可以结合细胞膜的受体或配体，阻断细胞内外信号的传递，抑制肿瘤细胞的生长和分裂。 - 诱导凋亡：单克隆抗体可以通过诱导肿瘤细胞的凋亡，促使肿瘤细胞死亡，并防止肿瘤的复发和转移。 - 免疫介导的细胞毒性作用：单克隆抗体结合到肿瘤细胞表面的抗原上，激活免疫细胞（如自然杀伤细胞和T细胞）的攻击，进而杀灭肿瘤细胞。

二级标题1.2：单克隆抗体的临床应用

抗肿瘤单克隆抗体已经在许多恶性肿瘤的治疗中得到广泛应用，包括： 1. 曲妥珠单抗（Trastuzumab）：对HER2阳性乳腺癌具有疗效，可用于一线和续行治疗。 2. 利妥昔单抗（Rituximab）：用于非霍奇金淋巴瘤的治疗，可靶向CD20抗原。 3. 厄洛替尼单抗（Cetuximab）：对表皮生长因子受体（EGFR）过表达的结直肠癌和

头颈部癌疗效明显。 4. PD-1/PD-L1抗体：如帕博利珠单抗（Pembrolizumab）和

尤伯利珠单抗（Nivolumab），对多种肿瘤具有抗肿瘤活性。

参芪扶正注射剂预防由抗PD-1抗体致免疫性心肌炎损伤的保护作用

网络出版时间：２０２３－０９－２７１６：０６：０１　网络出版地址：ｈｔｔｐｓ：／／ｌｉｎｋ．ｃｎｋｉ．ｎｅｔ／ｕｒｌｉｄ／３４．１０８６．Ｒ．２０２３０９２６．１４４２．０５６

参芪扶正注射剂预防由抗ＰＤ１抗体致免疫性

心肌炎损伤的保护作用

刘　倩１，杨嘉明２，高文聪１，黄海彬２，马　昕１，胡振湘２，郑昌博１

（１．昆明医科大学药学院暨云南省天然药物药理重点实验室，云南昆明　６５０５００；

２．丽珠单抗生物技术有限公司，广东珠海　５１９０００）

收稿日期：２０２３－０５－２０，修回日期：２０２３－０９－０１

项目基金：国家自然科学基金资助项目（Ｎｏ８２２００５５０，８１９６０６６２）作者简介：刘　倩（

１９９９－），女，硕士生，研究方向：分子心血管药理学，

Ｅｍａｉｌ：１５７４５１６３１９＠ｑｑ．ｃｏｍ；郑昌博（１９９０－），男，博士，副教授，硕士生导师，研究方向：分子心血管药理学，通信作者，Ｅｍａｉｌ：ｚｈｅｎｇｃｈａｎｇｂｏ＠ｋｍｍｕ．ｅｄｕ．ｃｎ

；胡振湘（１９７１－），女，硕士，高级工程师，研究方向：生物医药研发，通信作者，

Ｅｍａｉｌ：ｈｕｚｈｅｎｘｉａｎｇ＠ｌｉｖｚｏｎ．ｃｎｄｏｉ：１０．１２３６０／ＣＰＢ２０２２１２０７１

文献标志码：Ａ文章编号：１００１－１９７８（２０２３）１０－１９８０－０８中国图书分类号：Ｒ３３２；Ｒ２８２７１；Ｒ３９２１１；Ｒ３６４５；Ｒ５４２２１

摘要：目的　探讨参芪扶正注射剂通过减少炎症因子的产生以及降低心肌损伤标志物的表达，预防由抗ＰＤ１抗体药物诱导的免疫性心肌炎。方法　将３

单克隆抗体药研究进展

抗体是一种由效应B细胞分泌的免疫球蛋白，协助免疫系统鉴别、中和抗原或其他外来物质。抗体由对称的2条重链及2条轻链组成，其中重链类型决定抗体亚型，抗原结合结构域（Fab）是重链和轻链的可变区组合形成的抗原结合位点[1]。在过去的四十多年，单克隆抗体逐渐从单纯的科研工具转变为强大的生物药用于肿瘤、自身免疫病等多种疾病治疗[2]。迄今已有近50多种治疗性单克隆抗体经美国FDA 获准上市[3,4]（表1）。本文通过抗体研究技术以及靶向肿瘤和免疫等相关分子进展，综述单克隆抗体在临床疾病的诊断和治疗中的重要作用。

1 单克隆抗体的技术进展

自然界中有机体通过多克隆免疫应答对抗抗原。抗原由多个抗原决定簇组成，这些抗原决定簇刺激机体产生多样混合的单克隆抗体即为多克隆抗体。此外，同一种抗原决定簇也可刺激机体产生IgG、IgM、IgA、IgE和IgD等5类抗体。1975年，Kohler和Milstein首先建立了杂交瘤技术。这种技术通过体外持续培养骨髓瘤细胞，融合可分泌抗体的B淋巴细胞，再经次黄嘌呤氨基蝶呤胸苷筛选及克隆化得到大量单克隆细胞株。这一技术为治疗性单克隆抗体的发展奠定基础[5]。根据单克隆抗体来源可分为鼠源化单克隆抗体（-omab,-莫单抗）、人鼠嵌合体单克隆抗体（-ximab,-昔单抗）、人源化单克隆抗体（-zumab,-组单抗）和全人源化单克隆抗体（-umab,-人单抗）。80年代末期，鼠源单克隆抗体开始进入临床。然而，在应用的过程中发现鼠源抗体存在明显不足，包括过敏反应、诱导形成抗抗体、半衰期短及与人Fc受体弱结合[6]。更为重要的是，鼠源抗体的直接作用、抗体依赖性细胞毒性（antibody-dependentcell-mediatedcytotoxicity,ADCC）和补体依赖性细胞毒性（complementdependentcytotoxicity,CDC）相对较弱，限制临床尤其是肿瘤治疗的应用[7]。为克服固有的免疫原性，同时增强单克隆抗体效用，基因工程技术发展出新的嵌合鼠-人单克隆抗体。通过基因

信迪利单抗注射液Sintilimab-详细说明书、医保适应症与重点

信迪利单抗注射液Sintilimab 【商品名称】达伯舒

【英文名称】Sintilimab Injection

药品成份

信迪利单抗（重组全人源抗程序性死亡受体1 单克隆抗体）。本品中的辅料组成如下：甘露醇、组氨酸、枸橼酸钠（二水）、氯化钠、依地酸二钠、聚山梨酯80、枸橼酸（一水）、注射用水。性状：本品为澄明至微乳光，无色至淡黄色液体，无异物。

作用类别：PD-1 抑制剂

适应症

本品适用于至少经过二线系统化疗的复发或难治性经典型霍奇金淋巴瘤的治疗。

本适应症是基于一项单臂临床试验的客观缓解率和缓解持续时间结果给予的有条件批准。本适应症的完全批准将取决于正在计划开展中的确证性随机对照临床试验能否证实信迪利单抗治疗相对于标准治疗的显著临床获益。

医保适应症

1.本品适用于至少经过二线系统化疗的复发或难治性经典型霍奇金淋巴瘤的治疗。本适应症是基于一项单臂临床试验的客观缓解率和缓解持续时间结果给予的有条件批准。本适应症的完全批准将取决于正在开展中的确证性随机对照临床试验能否证实信迪利单抗治疗相对于标准治疗的显著临床获益。

2.信迪利单抗联合培美曲塞和铂类化疗，用于未经系统治疗的表皮生长因子受体（EGFR）

基因突变阴性和间变性淋巴瘤激酶（ALK）阴性的晚期或复发性非鳞状细胞非小细胞肺癌的治疗。

3.信迪利单抗联合吉西他滨和铂类化疗，用于不可手术切除的晚期或复发性鳞状细胞非小细胞肺癌的一线治疗。

4.信迪利单抗联合贝伐珠单抗，用于既往未接受过系统治疗的不可切除或转移性肝细胞癌的一线治疗。

药品规格

10ml:100mg

PD-1(L1)抗体作用机制与替雷利珠单抗独特作用机制

FcgRIIa FcgRIIb/c FcgRIII C1q
35-52
1
11-20 强
ADCP
ADCP None/we ek
ADCC CD T细胞
C
340
2
2
2.5
弱
ADCP
None/ None/we None/w No
week
ek
eek
ne
巨噬细胞
亲和力(Ka): 650 =6.5X107 (mol/L)1.
Cancer Immunol Res; 3(7) July 2015
机制3. CDC(补体作用介导细胞溶解)
仅作为内部培训材料
PD-1/PD-L1通路：免疫反应的刹车系统
➢T细胞杀伤肿瘤细胞的过程受精密调控（像汽车行驶）
– 只有TCR和MHC-抗原的结合不够（启动），
– 还需要刺激性免疫检查点通路激活（油门），
仅作为内部培训材料
抗体药物与IgG亚型的选择
➢科学家们破解了体外制备抗体的技术，利用抗体的天然属性，研发出针对不同靶点的抗体，用于治疗多种疾病。
➢天然IgG抗体分为4类IgG1-4，主要的区别在Fc段，导致它们有不一样的特性。 ➢科学家们在研发中也充分考虑到不同亚型的特性来选择抗体药物的亚型，IgG1
肿瘤细胞
T细胞
Cancer Immunol Res; 3(7) July 2015, Clin Cancer Res; 19(5) March 1, 2013, Front. Immunol. 10:292. 2019. Sanjeev Deva, et. al. ESMO IO, 2018

重组抗CD25人源化单克隆抗体结合活性测定法的建立及方法验证

作者：翟志慧梅彩英王晓闻

来源：《上海医药》2019年第15期

摘要目的：建立重组抗CD25人源化单克隆抗体结合活性测定法并对其进行方法验证。方法：采用间接ELISA法建立抗原-抗体-二抗结合反应体系，用四参数计算法拟合其结合曲线，计算供试品的结合活性。结果：方法具有良好的专属性、精密度、相对准确度、线性和耐用性。在64%～156%水平范围内，精密度验证各水平的GCV值均在15%以内；相对准确度验证各水平的相对偏倚置信区间均在±12%范围内，平均回收率均在80%～120%范围内；以五个水平实测值对数值对每个理论值对数值进行线性回归，线性关系良好。结论：该方法专属性好，精密度好，准确度高，可用于重组抗CD25人源化单克隆抗体结合活性的测定。

关键词抗CD25人源化单克隆抗体结合活性验证

中图分类号：R967 文献标志码：A 文章编号：1006-1533（2019）15-0097-06

Establishment and validation of a method for the determination of the binding activity of recombinant anti-CD25 humanized monoclonal antibody

ZHAI Zhihui*， MEI Caiying， WANG Xiaowen

（Sansheng Guojian Pharmaceutical （Shanghai） Co.， Ltd.， Shanghai 201203， China）