小鼠树突状细胞相关C型凝集素-1基因重组腺病毒载体的构建及鉴定

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小鼠IDO基因重组腺病毒载体的构建表达和鉴定

ｍｅｎｓＭｅｈｄＦｕｌｌｎｈｍｏｅｄｅｉｅＤＯＤＮＡｓｓｃｏｎｄｉｏｐＡｄｒｃ－ｔ．ｔｏｓｌ—ｅｇｔｕｓｒｖｄＩｅｗａｕｂｌｅｎｔｔａｋＣＭＶｈｕｔｅｐｌｓｉＴｈｅｐｏｄｕｔｗａｉｅｓｔｌａｍｄ．ｒｃｓｌｎ —
隆，切、酶测序鉴定正确后，质体法转染Ａ２３细胞进行包装，增，化铯密度梯度离心纯化病毒并检测其滴度。Ｒ —Ｃ脂Ｄ－９扩氯ＴＰＲ
和荧光显微镜鉴定和检测重组腺病毒转染ＡＤ２３细胞后ＩＯ的表达，时进行野生型腺病毒的检测。结果经酶切及测序证－９Ｄ同实ＩＯ基因重组腺病毒栽体构建成功，ＴＰＲ检测到转染后ＡＤ２３细胞内ＩＯ的表达，无野生型腺病毒的产生。结论ＤＲ —Ｃ－９Ｄ且功构建了含小鼠ＩＯ基因的重组腺病毒栽体，探讨ＩＯ的生物学功能奠定了基础。Ｄ为Ｄ
ｇｎｎｍｐｉｃｔｎｏＩｉｇａｄａｌｉａｉｆＡｄＤＯｉｕ．ＴｈｎｔｅｖｒｓｗａｕｉｅｙＣｓｅｓｔｒｄｅｔｃｎｒｕａｉｎｆｏｖｒｓｅｈｉｕｓｐｒｆｄｂＣ１ｎｉｙｇａｉｎｅｔｉｇｔ．ＴｈｘｒｓｉｎｏＤＯｉｄｆｏｅｅｐｅｓｏｆＩ
ａｉｅＯｈｍｏｎＢ５８ａｔｒａＴｈｏｉｉｅｃｏｅｗａｅｔｉｄｂｅｔｉｔｎｅｄ — ｒｄｔｏｌｇｕｅｏｉａｉｔＡｄｓ－ｅｔｒｉＪ３ｂｃｅｉ．ｅｐｓｔｌｎｓｉｎｉｅｙｒｓｒｃｉｎｏｚｏｈ１ｖｄｆｏ

小鼠神经生长因子基因重组腺病毒的构建及其在基底膜上的表达

ｈｅｔｇｅｎｅｉｎｔｈｅｂａｓｉｌａｒｍｅｍｂｒａｎｅ．ＭｅｔｈｏｄｓＭｕｓ一３１ＮＧＦｃＤＮＡｗａｓｃｌｏｎｅｄｆｒｏｍｍｉｃｅｇｌａｎｄｕｌａｅｍａｘｉｌｌａｒｉｅｓｗｈｏｌｅｍＲＮＡｂｙｒｅｙｅｍｅ－ｔｒｎｓａｃｒｉｐｔｉｏｎｐｏｌｙｍｅｒａｓｅ－ｃｈａｉｎ－ｒｅａｃｔｉｏｎｓ（ＲＴ－ＰＣＲ）．ＴｈｅＭｕｓ－３１ＮＧＦｃＤＮＡｗａｓｐｏｓｉｔｉｖｅｌｙｃｌｏｎｅｄｉｎｔｏｈｅｔａｄｅｉａｏｖｉｒｌａｓｈｕｔｔｌｅｖｅｃｔｏｒｐＡｄｒｔａｃｋｃａｒｒｙｉｎｇｃｙｔｏｍｅｇａｌｏｖｉｒｕｓｐｒｏｍｏｔｅｒ（ＣＭＶ）ａｎｄｔａｇ－ｐｒｏｔｅｉｎ（ｅＧＦＰ），ａｎｄｔｈｅｎ
ＣｏｎｓｔｒｕｃｔｉｏｎｏｆｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔａｄｅｎｏｖｉｒａｌｖｅｃｔｏｒｃａｒｒｙｉｎｇＭｕｓ－
１３ＮＧＦｇｅｎｅａｎｄｉｔｓｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｉｎｔｈｅｂａｓｉｌａｒｍｅｍｂｒａｎｅ
【摘要】目的
构建具有生物学活性的小鼠神经生长因子（ｎｅｒｖｅｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ，１３ＮＧＦ）基因重组腺病毒表达

小鼠SIGIRR基因重组腺病毒的构建及鉴定

态细胞，深圳百恩维生物科技有限公司产品。
１．２方法
并检测ＳＩＧＩＲＲｍＲＮＡ及蛋白在感染细胞中的表达。通过多次扩增后，大量制备高滴度腺病毒以备作研究ＳＩＧＩＲＲ在ＡＬＩ中的保护作用。
１ｒｅｃｅｐｔｏｒｒｅｌａｔｅｄｐｒｏｔｅｉｎ，ＳＩＧＩＲＲ）是新近发现的
司产品；小量质粒抽提试剂盒、Ｔｒａｎｓ２ＫＰｌｕｓⅡ
ＤＮＡＭａｒｋｅｒ，北京全时金生物公司产品；琼脂糖凝
样受体（ＴＬＲ）
中图分类号：Ｑ７８４文献标识码：Ａ文章编号：１００７ — ５０３８（２０１３）１０ — ０００１ — ０８
急性肺损伤（ａｃｕｔｅｌｕｎｇｉｎｊｕｒｙ，ＡＬＩ）是临床上
常见的急危重症之一，其危害主要由炎症失控而引
委员会的批准）。
１．１．２主要试剂兔抗鼠ＳＩＧＩＲＲ抗体、ＨＲＰ标
记羊抗兔二抗，美国Ａｂｃａｍ公司产品；苏木素伊红（ＨＥ）染色试剂盒、免疫组织化学试剂盒（ＳＰ法），为
（第四军医大学唐都医院胸腔外科，陕西西安７１００３８）
摘要：拟构建小鼠ＳＩＧＩＲＲ基因重组腺病毒并进行鉴定，为ＳＩＧＩＲＲ在小鼠急性肺损伤预防及治疗方

ANG-1基因重组腺病毒载体的构建及其转染骨髓问充质干细胞的实验研究

中国骨科临床与基础研究杂志２１年９第３第３０１月卷期ＣｉｈｓｃＯｔｏｃ，ｈｎＪＣｈＢａｉｒｐＲｓ却２１ｏ３Ｎｏｈ０１Ｖ／，．
・９・１９
基础研究
ＡＧ１因重组腺病毒载体的构建及其转染骨髓Ｎ一基
ＴｈｘｒｓｉｎｏｅｅｐｅｓｏｆＡＮＧ－ｒｔｉｎＢＭＳｒｎｔｒｄｂｓｅｎＢｌｔａｓｙａｄｔｅｅｅｔｆ１ｐｏｅｎｉＣｓｗｅｅｍｏｉｅｙＷｅｔｒｏｓａ，ｎｈｆｃｓｏＡＮＧ－ｎｏ１ｏｔｅｐｏｉｒｔｏｆＢＭＳｎｅｙｏｉｎｏｏｉｏｄｔｎｉｉｏｗｅｅｅａｕｔｄｂＴａｓｙｈｒｌｅａｉｎｏｆＣｓｕｄｒｈｐｘａａｄｎｒｘａｃｎｉｏｓｎｖｔｒｖｌａｅｙＭＴｓａ．ｍｉｒＲｅｕｔｈｅｏｉａｔｐａｍｉＡｄａｙ・— ｓｌｓＴｅｒｃｍｂｎｎｌｓｄｐＥｓ — －１ＡＮＧ－ｗａｄｎｉｅｏｂｏｆｍｅｙｄｕｌｉｅｔｎａｄ－１ｓｉｅｔｄｔｅｃｎｒｄｂｏｂｅｄｇｓｉｎｉｆｉｏ
ＤＯＩ１．９９ｉｓ．６４６６２１．１．０ｓ００基金项目：福建省青年人才基金（０７３７）２０Ｆ０９
作者单位：５０５福州，建医科大学福总临床医学院骨一科３０２福

贵州医科大学学报2020年第45卷1

贵州医科大学学报2020年第45卷1〜12期主题索引［按汉语拼音字母顺序排列，文章题名后为作者（期）：页］A癌EGF对三阴乳腺癌细胞迁移和侵袭的影响及CANP-YAP通路的介导作用......张莹，等（1）：23基于TCGA数据库及转录组数据分析HDAC1基因在胃癌中的表达和临床意义....................................................................李抄，等（2）232辛二酰苯胺异羟肟酸联合索拉菲尼对人肝癌细胞增殖和凋亡的影响.......蔡爽，等（2）221前列腺癌差异表达基因的分析及其miRNA和IncRNA的预测............宋咏刚，等（2）221人脑胶质瘤组织PI3K蛋白的表达及其与临床病理特征的关系............吴国敏，等（3）224Ph*急性B淋巴细胞白血病耐伊马替尼细胞模型的建立..................方宗宇，等（4）212直径小于22mm结直肠癌黏膜下浸润内镜特征分析....................李大欢，等（4）：461结直肠癌中HIFYa、CD147和MMPY表达与临床病理特征的关系.......朱长龙，等（4）：466Billroth-II与Roux-en-Y重建消化道对高龄胃癌患者术后中长期生存质量的影响..................................................................杨小进，等（4）266CalothriRnB衍生物对白血病K562细胞的抑制作用及机制..................龙群，等（5）：497Flavaglicns类化合物对人白血病HEL细胞的作用及机制..................龙群，等（5）255阿立塞替通过靶向Aurora激酶A提高人非小细胞肺癌细胞的放射敏感性……李舜，等（5）231PARP抑制剂对胰腺癌细胞的抗肿瘤机制及耐药性分析................王蒲雄志，等（5）256老年肺炎诱发多器官功能障碍患者感染指标、肿瘤坏死因子及血气指标的表达及意义..................................................................徐国宾，等（5）255MMP28在胰腺癌中的表达和对胰腺癌细胞增殖、侵袭及迁移的影响..........李琳，等（6）221MMP23在胰腺癌PFK-Ykt信号通路中的作用及机制......................李琳，等（6）：627沉默LRcO2122对胰腺癌细胞MIAPaCa-2侵袭及迁移的影响............何美玲，等（6）243BRCA2蛋白表达与乳腺浸润性导管癌临床病理特征的关系..............孙紫君，等（6）255miR-32a-5p对口腔鳞状细胞癌CAL-27细胞的影响及分子机制..............马明，等（6）：678CD147和EGFR及HIFY a在透明细胞肾细胞癌中的表达及意义..........黄淞崧，等（6）289ITGAM基因在急性髓细胞白血病中的表达及临床意义..................张太海，等（7）276乳腺浸润性导管癌临床病理特征与体质量指数的相关性................罗代琴，等（7）234循环肿瘤细胞联合癌胚抗原检测在非小细胞肺癌中的临床价值..........肖牍清，等（7）255SYT1对肝癌细胞侵袭、转移的影响及其分子机制........................许静，等（8）269敲低LEF1-YS1对胰腺癌细胞的影响...................................杨哲豪，等（8）:875乐伐替尼诱导肝癌耐药细胞株的构建及其生物学特性探析..............杨哲豪，等（8）：882沉默高表达CDX2胃癌细胞中HNF4a表达水平的变化..................沈和德，等（8）：899细胞培养密度对乳腺癌4T1细胞增殖、迁移、黏附及浸润能力的影响.....陈腾祥，等（8）：909miRYOa靶向BeORl蛋白在结肠癌中的作用及其机制....................刘林，等（8）：921BRAF69基因突变与甲状腺乳头状癌临床病理特征的相关性..............胡斌，等（8）：928血浆凝血与纤溶标志物对急性白血病合并DIF患者早期诊断及预后的评估价值....................................................................王猛，等（8）:938院外营养干预对胃癌术后患者营养状况的影响..........................唐毅，等（8）：944直径&22m m结直肠侧向发育型肿瘤内镜病理特征的分析..............李大欢，等（8）：954TNF-y在口腔鳞癌组织中的表达及临床意义..........................吴增波，等（9）：1447miRYOb对胃癌细胞增殖和凋亡的影响及机制........................张雪莲，等（9）:1256肠系膜下动脉结扎部位对直肠癌手术疗效的影响......................季恩敏，等（9）：1293血清人附睾蛋白4和共刺激分子B7-H3水平对宫颈癌术后患者预后的评估价值..................................................................徐晓芳，等（9）：1111顺钳处理的肺癌细胞NSUN2mRNA剪接异构体变化..................吴小海，等（12）:1124院外营养干预对胃癌术后患者生活质量的影响........................唐毅，等（（2）：1121KiY7对意外胆囊癌术后患者预后判断的价值..........................田雾，等（（2）：1228子宫颈鳞状细胞癌患者SFRP基因甲基化与临床病理特征及HPV感染的关系................................................................徐志红，等（（2）:1214贝伐珠单抗联合替莫唑胺对胶质瘤放疗患者脑水肿及神经功能的影响……黄英，等（（2）：1225NaCi对结肠癌CT26细胞迁移能力和生物力学特性的影响................邱炜，等（（1）:1241不同pH对结肠癌CT26细胞生物力学特性的影响......................邱炜，等（11）：1251乐伐替尼与瑞格菲尼对肝癌细胞PD-Y1的作用及机制..................许静，等（11）：1277microRNAY99a-5p对口腔鳞状细胞癌细胞上皮间质转化及侵袭转移的影响机制卢静，等（（1）：1289 I钙蛋白酶抑制剂对雌激素诱导人乳腺癌细胞上皮-间质转化的影响金爱，等（12）：1376基于生物信息学的宫颈癌枢纽基因筛选及其与预后的关系............许修颖，等（12）1382三氧化二砷对体外人小肠癌HIC细胞增殖和凋亡的影响..............杨云洪，等（12）1417NF-k B表达在胰腺癌的诊断和预后中的价值........................郭江福，等（12）：1459地西他滨联合CAG化疗方案对AML老年患者IGF-1和VEGF水平及免疫功能的影响................................................................雷丽华，等（12）:1469B病理生理学灵芝三萜类化合物对砷中毒大鼠脑组织氧化应激损伤的影响..............张癑，等（3）：277辅酶Q10对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用及机制..................李辉，等（7）：805miR-96调节结核分枝杆菌诱导的活动性肺结核的机制..................武丽，等（11）：1027C传染性疾病贵州医疗队赴鄂州救治重症新型冠状病毒肺炎患者的措施探讨............詹玮，等（4）：392腹腔镜下卵巢打孔数目对枸椽酸氯米芬抵抗多囊卵巢综合征疗效的影响…王厚梅，等（4）：482普通型COVIC-14患者肝功能损害与消化道症状的关系..................李永宁，等（9）：733传染性单核细胞增多症儿童外周血中TLR7mRNA及78-9CR型DNT细胞的表达..................................................................吴振奎，等（9）：1077不同免疫治疗方法治疗儿童重症手足口病的效果......................王凌，等（11）:1313CBP和IBP治疗腹腔感染合并腹腔高压的疗效比较..................韦卫琴，等（12）：1433E耳鼻咽喉科低温等离子射频消融术辅助鼻内镜对慢性鼻-鼻窦炎的治疗效果........毛志强，等（1）:114 miR-145-9p对变应性鼻炎小鼠Notch1表达和Treg/Thl7免疫平衡的影响…闫智永，等（6）:669维生素D联合枸地氯雷他定及糠酸莫米松鼻喷雾剂对慢性鼻窦炎鼻内镜术后患者的治疗效果..................................................................陈伟章，等（6）：717儿科学贵州省西部燃煤型地氟病区8~14岁农村小学生营养不良和氟斑牙调查……喻艳琴，等（1）:13 112例新生儿医院内感染临床分析.......................................李君，等（2）：244维生素A和E缺乏与儿童反复呼吸道感染发生的相关性....................李云鹏（3）：331198例小儿重症肺炎病原学分析.......................................孙永烽，等（3）：3452362例新生儿窒息及其器官功能损害分析林晴晴，等（3）：368不同BMI学龄期患儿行四肢手术插管全麻期间的血气参数及呼吸参数特点分析..................................................................李玲霞，等（4）：472机械通气联合PS对早产儿RDS的治疗效果............................方婉茹，等（4）：491未足月胎膜早破新生儿脐血MCP-1和pro-ADM水平与绒毛膜羊膜炎的相关性....................................................................李惠，等（6）：727饮食控制联合肠内营养粉剂对苯丙酮尿症患儿的治疗效果..............左雪梅，等（6）：737毛细支气管炎住院婴儿的临床和病原学特征分析....................蒙文娟，等（11）4366F分子生物学甩UVd基因09594738位点与贵州燃煤污染型地氟病的相关性.................田薇，等（1）4胶原诱导性关节炎大鼠血清TNF-a、IL«、IFN-y及IL-10水平变化............谭艳，等（3）：18PCSK4基因5'UTR区rs45448095基因多态性与血浆LDL-C水平的相关性……张营，等（3）：39幽门螺杆菌毒力蛋白叫剁基因敲除突变株构建及鉴定....................李抄，等（2）：125家蝇三龄幼虫Clip-Msp基因克隆及白假丝酵母菌刺激下的时空表达.....常振策，等（2）：137家蝇三龄幼虫Mdctl基因原核表达及生物信息学分析....................常振策，等（2）：127人参皂苷Rd对U253神经胶质瘤细胞凋亡的影响......................楚丽丽，等（2）：132大鼠Slfn7基因重组腺病毒载体的构建和包装.....Nganguem Nzalle Yranney Brice，等（3）:266柯萨奇病毒B组2型SYBRGreen I RT-PCR检测方法的建立............杨亚平，等（7）：313a硫辛酸对缺血再灌注诱导的PC12细胞应激性凋亡抑制作用的研究.......谢鹏，等（4）：773缺血再灌注诱导PC12细胞发生细胞损伤的分子研究......................谢鹏，等（4）：372SD乳鼠原代心脏成纤维细胞培养及鉴定.................................杨艳，等（4）：447心血管发育相关基因mpx在斑马鱼早期胚胎发育中的表达..............向文碧，等（5）：526Lele-5p对变应性鼻炎小鼠Treg/Thl7细胞失衡的影响....................闫智永等（5）:544hUMSCs向胰岛前体细胞诱导分化过程中Notchl和神经元素3的表达.....韩晶，等（7）:773海马神经元原代细胞培养方法的改良...................................高超，等（8）：894胶原诱导性关节炎小鼠脾脏树突状细胞的检测及意义..................范友羊，等（9）：993GSKC B抑制剂对类风湿性关节炎小鼠脾脏树突状细胞亚群的影响.......范友羊，等（9）：997大鼠/3-arresPn2基因过表达慢病毒载体的构建与鉴定..................陈思思，等（9）：1925/TMK-M基因SNP位点01821777多态性与成人支气管哮喘的相关性.....何志伟，等（9）：1933CYP3A4和CYP1A2及CYP2E3快速免疫印迹检测方法的建立何俊奇，等（19）：1117CYP462蛋白在HepG2细胞与小鼠原代肝细胞中的表达差异李靖，等（12）：1123羊耳菊含药血清对大鼠肝细胞色素P450酶表达的影响..................杨畅，等（（2）：1128羊耳菊活性部位对PXR高表达HepG2细胞中CYP3A4蛋白表达的影响……杨畅，等（（2）：1137桔梗皂苷D对MH7A细胞增殖和凋亡的影响及机制....................王菊，等（（2）：1149肿瘤酸性微环境对未成熟树突状细胞迁移能力和F-actin表达的影响.....邱炜，等（（1）：1246亚砷酸钠诱导SH-2Y6Y细胞凋亡及硫化氢的干预作用................潘际刚，等（11）：1255外源性硫化氢对氟诱导损伤SH-2Y5Y细胞的作用及机制..............潘际刚，等（11）：1226MST过表达及亚砷酸钠对SH-2Y5Y细胞的影响......................潘际刚，等（11）:1225miR-212介导的BO-2下调促进动脉粥样硬化内皮细胞凋亡的机制.......任丽，等（11）：1322复方灯盏花滴丸对H2O2致PC12神经细胞氧化应激损伤的影响.......楚丽丽，等（（1）:1312钙结合蛋白S102A4调节小鼠骨髓源肥大细胞活化的作用..............吴通前，等（12）：1365钙结合蛋白S102A4对鸡卵清白蛋白诱导的免疫应答作用..............吴通前，等（（2）：1371PI3K信号通路的关键信号分子AKT和mTOR在胶质瘤中的表达及意义................................................................吴国敏，等（12）：1442妇产科外周血Hb及PLGF和PI联合检测对早发型子痫前期孕妇再妊娠的诊断价值......................................................................王茜，等（1）:67个体化医学营养疗法对妊娠期糖尿病初产妇剖宫产术后糖脂代谢的影响……王晓琴，等（1）:72产妇血清ACA和抗B2-GP1抗体与不良妊娠结局的相关分析................崔佳，等（1）:87醋酸亮丙瑞林对子宫内膜异位症患者VEGF和CEA及CA125水平的影响……孟侠，等（1）：97宫颈上皮内瘤变患者手术后疾病复发的主要危险因素分析................张艳，等（1）:113不同浓度地氟醚对妇科手术患者心电图QTc、QTd、QTcd、Tp-e和Tp-e与QT比值的影响..................................................................刘艳秋，等（2）:214血清维生素A及维生素E水平与孕期子痫前期的相关性..................邵炅，等（5）:534人绒毛膜促性激素B亚基和游离雌三醇水平对妊娠并发症和妊娠结局的预测作用..................................................................胡诗婉，等（5）:660围产期孕妇抑郁与血清雌激素和脱氢表雄酮水平的相关性..............郭洵溢，等（6）：770反向添加疗法启动时机对卵巢子宫内膜异位囊肿术后GnRHa治疗患者围绝经期症状及骨代谢的影响..............................................................杨雅琴，等（7）：827孕期母体补充益生菌及分娩方式对新生儿胆红素代谢的影响李文平，等（8）：967VOSAC患者血清和腹腔积液中IL9、IL-8、MMP-2和MMP-9水平与临床病理分期及预后的关系....................................................................高翠红，等（8）：983妊娠期糖尿病的危险因素及营养干预效果...............................杨蓓，等（9）：1042正常妊娠孕妇不同孕期白细胞参数区间的建立......................赵丹青，等（10）：1137子痫前期孕妇血清sFlt-1和PLGF及IGF-1的相关性..................周金年，等（（1）:1333呼吸系统疾病干细胞研究血清抗苗勒管激素和促卵泡激素水平在多囊卵巢综合征诊断中的价值……张静华，等（11）1337子痫前期患者胎盘组织中sFlt-1、PLGF及IGF-1的表达和临床意义.......文芳，等（（2）：1433H不同类型肺炎患儿血清hs-CRP和PCT及部分外周血T细胞免疫指标的变化....................................................................范芸，等（）：48外周血SAA、NLR及BNP对COPD合并肺部感染患者预后的评估价值……王月平，等（5）:579呼吸机相关性肺损伤小鼠血清EMPs和NGAL的变化及意义..............何丙寅，等（6）：638特发性肺纤维化患者病情程度与血清TGF-B1、STAT1水平的相关性.....冯银合，等（7）:864不同类型肺结核患者血浆miR-155和SOCS1表达及临床意义..............吕芳，等（8）：987贵州兴仁某镇燃煤型砷中毒病区呼吸系统疾病年门诊人次的现况.......阮璇，等（（0）：1176老年急性脑岀血并发相关性肺炎的危险因素分析及风险预测模型的建立…吴倩，等（（0）：⑵9反复呼吸道感染患儿维生素A、D、E水平及免疫功能指标的相关性.....贺媛媛，等（（1）：1347GSeipin敲低大鼠PC12细胞株的构建和对细胞凋亡的影响..................吕菊，等（3）:246 Seipin敲低对内质网应激通路诱导细胞凋亡的影响........................吕菊，等（3）:255骨科学大鼠骨髓源内皮祖细胞的分离与鉴定............Nganguem Nzalle Yranney Brice，等（3）:265自体脂肪基质细胞组织-脱细胞骨基质-壳聚糖支架对兔胫骨骨缺损修复作用......................................................................杨鹏，等（1）:29腹直肌外侧入路与骼腹股沟入路治疗髋臼骨折的临床疗效................徐静，等（2）:224混合现实技术在人工股骨头置换中的应用初探........................周玉虎，等（6）：694微创手术对脊柱创伤患者围术期指标、脊柱功能及术后并发症的影响.......何睿，等（7）：844 CBT螺钉椎间融合术治疗骨质疏松并滑脱患者的临床效果................王含，等（9）：1088煅烧骨与羧甲基壳聚糖复合材料修复家兔下颌骨缺损的成骨效果廖健，等（10）6156Ilizarov技术治疗骨软骨瘤继发前臂畸形患者的效果吕秉乐，等（1）：1232TESSYS术对腰椎间盘突岀症患者的疗效、腰椎结构参数及运动功能的影响..................................................................张钺，等（12）：1474J检验科液基薄层细胞制片技术联合细胞DNA定量分析对良恶性胸腹水患者的诊断价值....................................................................李楣，等（5）:612中性粒细胞和淋巴细胞比值对克罗恩病的预测价值..................姚芳兰，等（12）：1449教学法研究对分课堂教学法在妇产科临床技能教学中的应用效果...................杨涵琳，等（1）:122《精神病学》CBL改良教学模式的探讨.................................朱祥路，等（6）：746K口腔科贵州省西部燃煤型地氟病区成年人氟斑牙与BMI状况分析.................喻艳琴，等（（）2电动牙刷与手动牙刷对牙菌斑的控制效果...............................李蕙兰，等（1）:78口腔鳞状细胞癌组织CIRP和TLR4蛋白表达与患者临床病理特征及预后的关系....................................................................张琳梅，等（1）:91两种矫治技术对安氏I类错胎畸形患者口腔颌面部软硬组织的影响.....尹雪莲，等（6）：712瓷层厚度对全瓷修复体颜色稳定性及强度的影响........................张丹，等（7）：811昆虫生物学弓形虫SSG1-GRA1复合基因真核表达重组质粒的构建与表达............綦廷娜，等（3）：286M麻醉学硬膜外阻滞麻醉和全身麻醉对术后老年患者血清SY00B蛋白水平及认知功能的影响....................................................................蒋敢，等（6）:722舒芬太尼对关节镜下跟骨骨折复位固定术后镇痛和谵妄的影响.......张玉芬，等（（2）：1455免疫性疾病胸腺肽a1联合血必净对脓毒症患者免疫功能和炎症水平的影响..........詹燕春，等（1）:122 Notch信号途径对过敏性鼻炎小鼠Treg/Thl7细胞免疫失衡调节的机制……廖东，等（（0）：1176N脑夕卜科颅内压监测指导甘露醇应用对开颅术后患者临床效果的影响.............吴然，等（（0）：1231内分泌系统糖通饮对2型糖尿病大鼠胰腺组织PI3K-YKT通路的影响...................马欢，等（1）:50二甲双胍联合格列美脲或卡格列净对糖尿病患者胰岛功能的影响.......阮园，等（（3）:1363自体富血小板凝胶治疗难治性糖尿病足溃疡的疗效和机制..............胡丽，等（（2）：1294P皮肤科点阵双极射频联合透明质酸凝胶敷料治疗座疮凹陷性瘢痕的临床观察……汪凯凡，等（4）：479乳腺外科神经精神疾病526例丹毒患者复发的相关危险因素分析............................赵志国，等（（3）:1367R股深动脉穿支皮瓣与游离腹部皮瓣在乳房重建中的临床效果............房霜，等（（3）:1371S血液生化指标主成分回归模型用于脑梗死患者CISS分型................潘能毅，等（2）：237雷帕霉素改善血管性痴呆小鼠认知功能的机制..........................陈丽，等（3）：292核酸内切酶G在帕金森病大鼠脑组织中的表达及意义....................武林，等（4）：377前庭性偏头痛患者的前庭功能变化及特点分析........................祁晓媛，等（7）：854血压监测及降压干预对急性脑梗死静脉溶栓患者预后的影响............盘爱花，等（9）：1972百适可联合心理治疗对脑卒中患者心理健康和生活质量的影响.......李润霞，等（12）：1272丁苯酞联合阿替普酶静脉溶栓治疗对急性脑梗死患者神经功能和日常生活能力的影响肾内科..................................................................吕虎，等（（2）：1284 IgA型PIGN患者的肾组织病理学特点和治疗效果及预后................郭永力，等（3）:356血清Cys-C和NT-proBNP对维持性血液透析患者心血管事件发生的影响…牛世慧，等（3）:363血管性血友病因子在感染性关节炎发生发展中的作用..................胡智成，等（4）：336糖尿病小鼠肾组织中细胞焦亡发生的现象研究........................周兴艳，等（4）：492连续性肾脏替代治疗对脓毒症患者外周血部分T淋巴细胞、miRNAP55和miRNAP66表达的影响................................................................郑燕玲，等（4）451超声剪切波组织定量技术在IgA肾病牛津分型中的应用..................谢青，等（5）：539脯氨酰羧基肽酶和血管紧张素转化酶2在IgA肾病中的表达及其病理意义..................................................................徐晋徉，等（5）：589高通量血液透析治疗维持血透终末期肾病患者的临床效果..............加妮娅，等（9）:1137 mTOR非依赖途径介导二甲双胍对类风湿关节炎大鼠心血管损伤的作用及机制李培霆，等（（9）:1123训生理学990MHz微波辐射不同时点暴露对雄性大鼠血浆激素水平昼夜节律的影响…赵华，等（2）：156生殖医学卫生统计学微生物学消化系统疾病大鼠头皮组织形态和生物力学参数的增龄性变化......................李明杰，等（4）：402辅助生殖技术中超促排卵对PCOS患者AMH水平及妊娠率的影响.......陈丽萍，等（7）：849饮酒对不育男性精液质量的影响...................................申雪慧子，等（9）4067W贵阳市高校贫困学生受网络欺凌现况调查.................................吴荣，等（1）:56 2213—2210年贵州省基层医疗卫生机构现状..........................季诚杰，等（2）：184贵阳市居民对环境建设的主观评价及与生命质量的关系................姜云芳，等（2）489贵州省41个公立非营利性健康管理（体检）机构资源与运营情况............操植，等（2）：205温泉泡浴对亚健康人群肥胖、血压及心率的改善作用....................杨成鹏，等（5）452 2034例大学生BMI与身体素质指标的相关性..........................林梦娴，等（5）:569贵阳市某社区中老年女性体质量指数和腰围与慢性肾脏病的相关性.....文小芳，等（6）:276认知-行为干预对颞下颌关节紊乱患者的干预效果..................刘知音，等（（0）4022 1056名孕妇新型冠状病毒肺炎的知识、态度及行为调查..............赵丹青，等（（1）4307贵阳市云岩区免疫接种儿童父母乙肝防治知识、态度及行为的现状调查……王雯，等（（2）4446住院患儿血标本中病原菌的分布特点及耐药性分析....................曹慧军，等（6）:565粪便菌群移植通过调节Thl7/Treg平衡发挥对帕金森小鼠的保护作用.......叶明，等（8）：914姜黄药渣真菌分离方法的改良及真菌多样性分析......................兰咏哲，等（9）4004贵州关岭余甘子内生真菌多样性及其抗菌抗氧化活性..................兰咏哲，等（9）4009头花蓼内生真菌Diaponhe SF-代谢产物中的抗菌活性成分研究..........徐国波，等（9）4022 233例新生儿脓毒血症患儿的病原菌分布及耐药性分析..................胡扬，等（9）4102 29种中药提取物对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的体外抑菌活性..........孙广，等（10）4132X双歧杆菌三联活菌胶囊联合四联疗法对Hp阳性慢性浅表性胃炎炎症-氧化应激水平的影响....................................................................翟琦，等（2）:229改良双孔腹腔镜阑尾切除术对急性阑尾炎患者血清疼痛应激指标及ICAM-1.MMP-9的影响................................................................陶新光，等（1）4375大蒜素通过TLR4/NF-CB途径对慢性腹泻大鼠肠黏膜修复和炎性因子的调节作用................................................................赖雁威，等（（2）4442K高通量测序分析六味地黄汤对肝肾阴虚型妊娠期便秘患者肠道菌群的影响心理学..................................................................周平，等((2)：1243 3383名中学生自我效能感及应对方式的关系..........................李梦然，等(2):134共情能力对医患双方医患关系评价的影响............................黄列玉，等(2)：220 297例二胎孕妇抑郁情绪及影响因素...................................杨红梅，等(2)：219颞下颌关节紊乱患者焦虑和心理压力与应对方式的相关性研究..........刘知音，等(3)：333焦虑抑郁对急性心肌梗死PCI术后患者hs-CRP、hs-cTnT、住院时间及近期预后的影响..................................................................杜书敏，等(7)：813多导睡眠图监测青少年抑郁症患者抑郁情绪及睡眠障碍的效果..........林冬梅，等(8)：973高龄孕产妇心理健康状况与社会支持和应对方式的相关性................姚瑞，等(9)：1951贵州部分中学生心理虐待和攻击性行为的相关分析....................秦倩，等(12)：1293心血管系统疾病血液系统疾病PCI术后非ST段抬高型急性冠脉综合征患者再发不良心血管事件的危险因素分析..................................................................李云鸿，等(5):573慢性心力衰竭合并肺部感染患者心肌酶谱4项及炎症因子水平变化.....徐立彦，等(5)：611多支病变稳定性冠心病患者的临床特点及PCI术后的远期预后............王欢，等(8)：973不同年龄急性心肌梗死患者经皮冠状动脉介入治疗后的临床特点及预后..................................................................戚德青，等(9)：1982 ADAMTS13在动脉粥样硬化中的作用.................................李华，等(12)：1866血液病患儿医院感染的临床特点和病原学特征及药敏结果分析..........张盼盼，等(3)：332凝血与纤溶标志物联合检测对早期诊断重症感染引发弥散性血管内凝血的价值....................................................................王猛，等(7):822 ET和PV患者的临床特征及血栓和岀血并发症分析......................肖捷，等(8):943血栓通注射液辅助治疗PILC置管并发上肢深静脉血栓的效果及对凝血纤溶系统的影响..................................................................杨西，等(13):1341药理学Y心脉通胶囊对高血脂大鼠的降脂作用...................................付凌云，等(3):35丹防胶囊对小鼠非酒精性脂肪性肝纤维化的干预效果及作用机制............李璨，等(3):61丹夏降压颗粒对自发性高血压大鼠收缩压及左心室肥厚的影响............王艳炜，等(3):83消痛灵喷雾剂的工艺优化及对小鼠的抗炎镇痛作用梁语嫣，等(2)：174X通痹方热敷对颈椎病家兔颈部痛阈和椎间盘退变的影响徐银琴，等(3)：298解毒愈溃汤联合曲安奈德对糜烂型口腔扁平苔藓的治疗效果..............王蕊，等(3)：332西格列汀与二甲双胍对新诊断2型糖尿病患者胰岛B细胞功能的影响……王艳燕，等(3):340莫西沙星对老年CAP患者肺功能及血清CRP、PCT、sTREMY水平的影响…陈晓红，等(4):477七氟烷与丙泊酚对老年大鼠认知功能的影响及机制....................郑仲磊，等(5):561螺内酯联合贝那普利对心力衰竭患者治疗效果及机制..................李璐娜，等(5)：665橙皮素对PDGFYB诱导的大鼠原代胸主动脉VSMCs表型转化的影响.....李晓杰，等(7)：745橙皮素对高脂血症仓鼠的降脂作用和肝脂肪变性的影响..................覃瑛，等(7)：752橙皮素对仓鼠颈动脉粥样硬化和脂质代谢的作用机制....................覃瑛，等(7)：766良附滴丸抗大鼠乙醇型胃溃疡预防作用及机制..........................潘洁，等(7)：727灵芝三萜类化合物对砷中毒大鼠海马组织形态学及脑组织中AChE和ChAT含量的影响....................................................................张癑，等(7)：781红花黄色素注射液对不稳定型心绞痛患者部分氧化应激和炎性因子水平的影响....................................................................刘俊，等(7)：792左烘诺孕酮宫内缓释系统联合米非司酮对子宫内膜异位症的治疗效果……罗国英，等(7)：839依诺肝素联合华法林对中低危急性肺栓塞的疗效及预后的危险因素分析…朱德才，等(8):933BS332与AR355两种吸附柱对高胆红素血症重症患者的治疗效果..........夏云松，等(8):952骨康胶囊及其组分酢浆草及芭蕉根对大鼠软组织损伤的治疗作用..........李靖，等(9)：1213泻肺利水合剂对慢性心衰大鼠心肌氧化应激和线粒体自噬的影响..........李超，等(9)：1232有柄石韦对小鼠皮肤伤口愈合及转化生长因子Y1水平的影响..........吴遵秋，等(11)：1270吉祥草水提物对小鼠慢性阻塞性肺疾病的作用和机制................陈剑波，等(12)：1412药学贵州产灯盏细辛组织培养快速繁殖体系的建立...........................张洁，等(3)：312玉叶金花质量控制研究...............................................秦兰，等(4)：408贵州省9批不同产地盾叶秋海棠药材中铅、镉、砷、汞及铜的测定..........李小双，等(6)：633川参通注射液中总酚酸、总黄酮及单糖大类成分的含量测定................何峰，等(6)：668凝胶色谱净化高效液相色谱法测定天然维生素E中苯并芘残留量..........田广，等(6)：684ICG磁性PLGA纳米粒的制备及其在小鼠体内的脑靶向作用................杨畅，等(8)：887梧桐子挥发油的气相色谱-质谱分析.................................李林珍，等(8):994三七花药材质量控制方法的建立...................................朱晓青，等(12)：1329眼科不同构型吉法酯对干眼症大鼠角膜的保护作用糜玲，等(1):45基于深度学习的视网膜病变眼底图视盘自动定位与分割研究杨帆，等（4）：236吉法酯保护干眼症大鼠的机制研究糜玲，等（6）:246ILL Master和Accan在白内障合并黄斑病变中的应用比较影像学唐丽，等（9）4061胃肠超声造影在功能性消化不良中的诊断价值喻萍一，等（2）：233左心室声学造影评估房颤患者左室收缩功能的临床价值张琳埜，等（8）：963经盆底超声测量膀胱颈活动度与绝经期妇女压力性尿失禁的相关性徐翠芳，等（9）4097医学遗传学中医中药心脏电影磁共振对慢性心肌梗死的诊断价值应晓燕，等（（0）4196 PROX1-AS1和PRICKLE2-AS1基因多态性与中国汉族人群2型糖尿病的相关性陶文玉，等（2）469 MTHFR基因rsl800133位点多态性与贵州苗族和布依族及汉族人群原发性高血压的关系喻艳琴，等（3）:276 Hey水平无明显差异的H型高血压患者MTHFR C677T基因多态性与脑卒中的相关性VPS13A基因突变致舞蹈病-棘红细胞增多症的诊断及家系研究云南省汉族人群LMP基因多态性与结核病易感性的关联性研究趋化因子受体5A33突变在中国22个民族群体中的分布卢宏艳，等（3）:231姚念廷，等（3）:876刘楠楠，等（5）：510陶玉芬，等（5）：522凝血因子口G20210A、V G1091A及吨R353Q基因多态性与上海汉族人群急性脑梗死的相关性岳孟孟，等（7）:797Z五段拔伸推拿法联合中药热敷治疗腰椎间盘突岀症史珊怡，等（2）:228通痹方热奄包外敷对家兔退变颈椎间盘细胞凋亡相关基因Cpppe-3和Bcl-A mRNA的影响徐银琴，等（4）:438自拟中药汤剂联合百令胶囊对慢性肾脏病大鼠肾脏炎症及P38MAPK信号通路的影响郭亚平，等（4）:444苗药“杆努尽烟”对慢性支气管炎大鼠TLR4-MyD88-NFcB信号通路的影响..................................................................吴宁，等（11）:1283。

CRTl80基因重组腺病毒载体的构建与鉴定

ｅｐｅｓｎｖｃｒ（ＡｄＣ／一Ｓ）ａｄｔｅｅｔｒ・Ｒ１０ｏｐｅｓｎｖｃｒｐａｍｉ．ｆｒｘｒｓｉｅｔｐ－ＭＶＶ５ＤＥＴｎｇｎｒｅＡｄＣＴ８ｆｘｒｓｉｅｔｌｓｄＡｅｏｏｏａｅｏｏｔ
中图分类号：Ｒ３３７．４文献标识码：Ａ
ＣｏｓｒｔｏｏｎｔｕｃｉｎｆＣＲＴ１０ｇｎｅｒｃｍｂｉｎｄｅｖｉｕｓｖｅｏｎｉｓｅｐｒｓｉｎｉｉｒ８ｅｅｏｎａｔａｎｏｒｔｒａｄｔｘｅｓｏｎｖｔｏ
ＭＡＣｕ－ｎ，ＵＹｎａｇＡＯ％ｔＭＡＹｎ－ｅ，ｙＬ—ｎａｏａｙＤＩｈｎｌｇＳＮｕ－ｎ，Ｙｉｆｏｇｚｎｉｉｈｌｇｂｔｒ厂ｍｍｕｏｏｙＳａｄｎｎｌ，ｈｎｏｇｇ
Ｍｅｉａｌｇ，ｉｙ，７０２ｈｎｄｃｌＣｏｌｅＬｎｉ２６０，Ｃｉｅ
ｇｎｈｒｐ，ｅｈｄＴｅａｅｏｉｌｅｐｅｓｏｙｔｍ，ＶｉａｗｅＴｅｏｉｌＥｘｒｓｉｎＳｓｅｅｅｔｅａｙ．ＭｔｏｓｈｄｎｖｒｘｒｓｉｎｓｓｅａｒＰｏｒＭＡｄｎｖｒｐｅｓｏｙｔｍａ
马春玲，孙运芳，姚伟，马永臻，于立玲
摘要：目的构建表达ＣＴ１０基因重组的腺病毒载体，为肿瘤的基因治疗奠定实验基础。方法Ｒ８
采用
腺病毒表达系统（ｉＰｗｅＭＡｄｎｖｒｌＥｐｅｓｎＳｓｍ）构建重组腺病毒表达载体。首先利用ＶｒｏｒｅｏｉｘｒｓｉｙｔａａｏｅＲ－Ｃ的方法在人肺腺癌细胞系Ａ４ＴＰＲ５９细胞中扩增ＣＴ１０基因，以连接、转化等方法克隆入载体Ｒ８ｐＮＴ／ＴＰ以获得重组的入门克隆，ＥＲＤ．ＯＯ经测序及ＰＲ鉴定正确后，Ｃ用重组酶（ＲＣｏａｅＩＥｚｍｅＬｌｎｓ… ＩｎｙＭｉｘ）进行入门克隆与腺病毒表达载体（Ａ．ＭＶ／一ＳｐｄＣＶ５ＤＥＴ）问的重组反应，以获得表达克隆（ＡｄＣＴ８）质粒。重组表达克隆鉴定后，用限制性内切酶Ｐｃ是使之线性化后转染ＨＫ２３ｒ．Ｒ１０ａＩＥ９Ａ包装细胞得到重组腺病毒。用极限稀释法检测病毒滴度用ＷｅｔｒＢｌ法检测ｒ．Ｒ８ｓｎｏｅｔＡｄＣＴ１０载体是否能正

小鼠牙本质涎磷蛋白基因重组腺病毒载体的构建

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吴凌 ( 田卫东
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综合征的研究进展
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Ge n e t ic
C o u n s e l in g
Me t ho ds
摘要： X X X 综合征属于性染色体非整倍体的主要形式之一 X X X 综合征系患者体细胞核中有一额外的X
染色体
(染色体核型
：4
7
X
．
X
X
)
由于大部分患者缺乏明显的表现型特征．造成本综合征有相当大的鉴别难度．本文
对X X X 综合征的病因．可能的表现型特征及相关的遗传咨询手段作一综述．
作者简介：潘思塑 ( 1 9 8 4 - ) 男北京人学士
．
，
，
[通讯作者]李伟
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28
-
8 55034 94
作者单位：潘思塑 (伦敦帝国理工学院生物系伦敦 S W 7 2 A Z )
．
．
．
李伟 ( 口腔生物医学工程教育部重点实验室四川大学四川成都 6 10 0 4 1 )
．
．
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．
10

编码小鼠PGC1α基因的重组腺病毒载体构建及鉴定

【关键词】Ｇ１；Ｐｃ腺病毒载体；同源重组【中国图书分类法分类号】５９Ｒ８．２【文献标识码】Ａ【收稿日】０８０—Ｏ期２０— １１
ＣＯｓｒｃｉｎａｄｌｅｔｉａｉｎＯｄｎＶｒｓＶｃＯｎＯｉｇｍＯｓｎｔｕｔｎｄｎｉｃｔｆｅＯｉｅｔｒｃｄｎｕｅＰＧＣ１ｏＯｆＯａｕｅ（
ｄｇｓｄｂｉｔｙｅｅ
ＩａｄｔｎｃｄｉｔＨＥ２３ｃＵｒｄｎｉａｉｅ．ｖ】ｔｅａｅｒｎｄｂＣＤ０ｅｈｄＴｅｎａｓｔ０Ｋ９ｅｓ０ｆｍａｅｖｒｅｎｔｎｍｓｎｃｓＴｐ１ｉｓｉｒｓｔｍｉｙＴＩ５ｍｔｏ．ｈ兀ｔｗｄｅｅ
ＲｃｍｂｎｎｈｔｅｐａｍｉＡｄｒｃ — ｅｏｉａｔｕｔｌｓｄｐＴ爿ｋＣＭＶ— ＧｓｌＰＣ１ｗｓｌｅｒｅｙａｉａｉｄｂｎｚ
ｅＩｎａｄｔｓｒｄｉｔｓｈｃｉ０ｉＪ８ａＴｉｇｍｎｆｍｅｎｏＥｃｅｈａｃｌＢ５３ｃＩｎｂ１ｙ
Ｐｃ线性化后与骨架质粒ｐｄａｙ１Ｂ５８中完成同源重组，Ｇ１Ａｅｓ一在Ｊ１３菌筛选并提取重组正确的腺病毒质粒，Ｉ线性化，脂质
体转染２３细胞包装出成熟的具有感染活力的腺病毒颗粒，ｃＤｏ９ＴＩ５法测定病毒滴度，ｓｍｌｉｇｗｅｔｂｏｎ检测Ｐｃ蛋白在２３ｅｔＧ１ｄ９

小鼠编码c型凝集素的基因 -回复

小鼠编码c型凝集素的基因-回复小鼠编码C型凝集素的基因凝集素（lectins）是一类具有特殊糖结合能力的蛋白质，能够与糖分子结合形成特定的糖蛋白复合物。

它们在生物体内起着重要的生理功能，例如参与细胞黏附、信号传导、免疫应答等。

而C型凝集素则是一类特殊的凝集素，它们中的某些成员在免疫系统中起着重要的作用。

本文将重点介绍小鼠编码C型凝集素的基因，并逐步回答相关问题。

1. 什么是C型凝集素？C型凝集素（C-type lectins）是一类由细胞或分泌的蛋白质所组成的家族，具有特殊的糖结合能力。

它们通过与特定的糖分子结合来实现生物体内多种重要生理过程。

C型凝集素功能多样，包括调节免疫应答、促进炎症反应、参与病毒识别等。

2. 什么是小鼠编码C型凝集素的基因？小鼠（Mus musculus）是常用的实验模型动物之一，其基因组信息已被广泛研究。

其中，包含编码C型凝集素的基因家族，其成员可通过小鼠基因组数据库等工具进行鉴定。

这些基因是小鼠细胞表面或分泌的蛋白质编码基因，通过研究它们的结构和功能，我们可以更加深入地了解小鼠的免疫系统和生理功能。

3. 小鼠编码C型凝集素基因的结构如何？小鼠编码C型凝集素的基因具有相似的结构特征。

一般而言，这些基因由数个外显子（exon）和内含子（intron）组成，其中外显子编码蛋白质的功能性结构域。

这些结构域通常包括糖结合结构域、信号序列、跨膜结构域等。

同时，这些基因的启动子、转录因子结合位点等调控序列也会对基因的表达产生影响。

4. 小鼠编码C型凝集素基因的功能是什么？小鼠编码的C型凝集素基因在免疫系统中发挥重要的功能。

例如，它们可以与病原体表面的特定糖分子结合，促进病原体的识别和清除，从而参与免疫应答。

此外，它们还可以促进免疫细胞之间的相互作用，参与细胞黏附和信号传导等过程。

5. 如何研究小鼠编码C型凝集素基因？研究小鼠编码C型凝集素基因的方法有多种。

首先，通过在小鼠基因组数据库中搜索相关基因，可以获得它们的序列信息。

小鼠树突状细胞相关C型凝集素-1基因重组腺病毒载体的构建及鉴定

小鼠树突状细胞相关C型凝集素-1基因重组腺病毒载体的构建及鉴定夏迪;钱倩;刘志成;谭鸣鸣;丁媛;苏欣;孙文逵;施毅【摘要】Objective Dendritic cell-associatedC-type lectin-1 ( Dectin-1) is one of the most important receptors in antifungal innate immune response.This study was to construct a recombinant adenovirus vector expressing themurine Dectin-1gene and acquire a high-concentration adenovirus by amplification and purification. Methods The PCR amplification product CLEC7A-pIRES2-EGFP was cloned into the intermediate vector pDONR221, and then recom-bined with the backbone vector pAD/CMV/V5-DEST to produce a re-combinant plasmid pAD-CLEC7A-pIRE2S -EGFP.The recombinant plasmid was linearized with Pac I and transfected into human embryon-ic kidney ( HEK293) cells to produce recombinant adenovirus pAD-CLEC7Ap-IRES 2-EGFP. The adenovirus was propagated in the HEK293 cells and purified by filtering through the cellulose acetate membrane and concentrating column.Fluorescence microscopy and re-al-time PCR were used to determine the expression of the Dectin-1 gene. Results PCR identification, enzyme digestion, and sequen-cing results manifested theDectin-1 gene in the vector, with the final adenovirus titer of 5×1011 IU/mL.Fluorescence microscopy revealed green fluorescence and real-time PCR assay confirmed that the expression of Dectin-1 was improved by 8677.25 times. Conclusion A relatively high-titer adenovirus expressing Dectin-1 was acquired,which may help tofurther study the high expression of Dectin-1 in anti-fungal innate immunity in vitro and in vivo.%目的：树突状细胞相关C型凝集素-1（ dendritic cell-associated C-type lectin-1， Dectin-1）是介导抗真菌天然免疫的重要受体之一。

小鼠骨髓源树突状细胞体外诱导培养及初步鉴定

小鼠骨髓源树突状细胞体外诱导培养及初步鉴定刘铮;代继宏;符州;冯琳琳【摘要】To establish a method of cultivation and purification of dendritic cells ( DC) from mouse bone marrow in vitro and observe their morphology, recombinant mouse granulocyte and macrophage colony stimulus factor( GM-CSF) and interleukin-4( IL4) induction were used to induce mouse bone marrow cells to form dendritic cells in vitro. After 9 days , the percentage of the cultured DCs was more than 80％ with typical morphology of DCs under light microscope. The mature cells had clear marker on their surface. This meant that these used substances could stimulate allogenic mixed lymphocyte proliferation.%用重组小鼠粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(rmGM-CSF)和重组小鼠白细胞介素4(rmIL-4)体外诱导小鼠骨髓细胞分化为树突状细胞,进行形态学变化观察,分析细胞表面分子,刺激T细胞增殖,探讨小鼠骨髓源树突状细胞(BMDC)体外诱导培养并进行初步鉴定.体外培养9d后BMDC可达80%以上m,光镜下可见典型的树突状细胞形态.清楚表达成熟期主要表面标志物,可显著刺激同种异体混合淋巴细胞增殖.获得了较高纯度的BMDC,避免了使用传统磁珠分离方法所带来的成本高,操作复杂,产出率低的弊端,为研究BMDC功能以及运用开展下游实验提供材料.【期刊名称】《生物学杂志》【年(卷),期】2011(028)002【总页数】4页(P25-27,31)【关键词】树突状细胞;体外诱导培养;初步鉴定【作者】刘铮;代继宏;符州;冯琳琳【作者单位】儿童发育疾病研究省部共建教育部重点实验室儿科学重庆市重点实验室重庆市(儿童发育重大疾病诊治与预防)国防科技合作基地;重庆医科大学附属儿童医院呼吸中心,重庆,400014;重庆医科大学附属儿童医院呼吸中心,重庆,400014;儿童发育疾病研究省部共建教育部重点实验室儿科学重庆市重点实验室重庆市(儿童发育重大疾病诊治与预防)国防科技合作基地【正文语种】中文【中图分类】Q813.5Abstract:To establish a method of cultivation and purification of dendritic cells(DC)from mouse bone marrow in vitro and observe theirmorphology,recombinantmouse granulocyte and macrophage colony stimulus factor(G M-CSF)and interleukin-4(I L4)induction were used to inducemouse bonemarrow cells to for m dendritic cells in vitro.After9 days,the percentage of the culturedDCswasmore than 80%with typicalmorphology ofDCs under lightmicroscope.The mature cells had clearmarker on their surface.Thismeant that these used substances could stimulate allogenic mixed lymphocyte proliferation.Keywords:dendritic cells;culture in vitro;initial appraisal树突状细胞(dendritic cell,DC)是一种专职性抗原提呈细胞,在肿瘤、抗感染免疫、移植排斥等方面起着关键的引导和调节作用,并能显著激活初始型 T淋巴细胞并诱导其增殖,处于免疫应答过程的中心环节。

小鼠SLC基因真核表达载体的构建及表达

小鼠SLC基因真核表达载体的构建及表达侯丽;赵跃然;王来城;焦玉莲;张捷;马春燕;崔彬【期刊名称】《中国肿瘤生物治疗杂志》【年(卷),期】2005(12)1【摘要】次级淋巴组织趋化因子(secondary lymphoid tissue chemokine,SLC)是重要的CC趋化因子,对多种免疫细胞特别是T淋巴细胞、树突状细胞(dendritic cell,DC)及NK细胞具有趋化作用.研究证实,SLC通过募集T淋巴细胞、DC和NK 等免疫效应细胞到肿瘤组织、促进细胞因子的释放以增强肿瘤局部非特异性免疫以及抑制肿瘤血管生成等作用,达到其显著的抗肿瘤效果,是目前肿瘤免疫治疗的理想效应分子.为了进一步探索SLC在肿瘤基因治疗中的应用,我们构建了小鼠SLC基因的真核表达载体pVAX1-mSLC,为今后开展体内基因治疗肿瘤奠定基础.【总页数】1页(P79-79)【关键词】基因真核表达载体;SLC;次级淋巴组织趋化因子;抑制肿瘤血管生成;T淋巴细胞;小鼠;CC趋化因子;免疫效应细胞;非特异性免疫;肿瘤免疫治疗;树突状细胞;抗肿瘤效果;免疫细胞;cell;趋化作用;NK细胞;肿瘤组织;细胞因子;效应分子【作者】侯丽;赵跃然;王来城;焦玉莲;张捷;马春燕;崔彬【作者单位】山东大学山东省立医院科研中心【正文语种】中文【中图分类】R382.31;R392.11【相关文献】1.SLC-Her-2/neu-p53-Fc融合基因重组腺病毒真核表达载体对荷黑色素瘤小鼠的免疫治疗效果 [J], 王慰敏;孙文欣;钱海利;王海娟;张叔人;林晨2.大鼠SLC7a8基因的克隆及真核表达载体的构建 [J], 王本极;黄晓燕;林素;周希;戴晓春;方俊旭;杨德业3.大鼠NeuroD2基因的克隆、真核表达载体的构建及其在小鼠MSCs细胞中的表达 [J], 姬菩忠;赵兴绪;秦文;宋学文;张勇;赵红斌4.SLC25A5基因真核表达载体的构建及其功能验证 [J], 亢小峰;徐小洁;张萍;霍楠;丛瑞;马路园;初众;唐枝;孙志佳;贾松浩;刘含笑5.SLC25A5基因真核表达载体的构建及其功能验证 [J], 亢小峰;霍楠;丛瑞;马路园;初众;唐枝;孙志佳;贾松浩;刘含笑;徐小洁;张萍因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

小鼠CD200基因重组腺病毒载体的构建及鉴定

小鼠CD200基因重组腺病毒载体的构建及鉴定王琼;陈冬梅;王立斌;魏军;李玉奎【期刊名称】《重庆医科大学学报》【年(卷),期】2013(38)6【摘要】目的：构建携带小鼠CD200基因的重组腺病毒载体,并鉴定其在小鼠胰腺内皮细胞（mile sven 1,MS1）中mCD200基因的表达情况。

方法：mCD200基因亚克隆至腺病毒穿梭质粒pYr-adshuttle-4,获得重组质粒pYr-ads-4-mCD200。

从该重组质粒上利用LR（attL×attR）特异性同源重组的方法,将mCD200表达框构建至腺病毒骨架质粒pAd/PL-DEST上,获得的重组腺病毒质粒经PacⅠ酶切,转染HEK293细胞,包装成重组腺病毒rAd-4-mCD200,并用酶切和PCR等鉴定。

采用TCID 50（tissue cell infectious dosage 50,TCID50）法测定重组腺病毒滴度。

同时在HEK293细胞中进行病毒扩增,并感染小鼠内皮细胞MS1,通过荧光显微镜、real-time PCR检测MS1中小鼠CD200基因的表达。

结果：PCR鉴定重组腺病毒证实重组腺病毒rAd-4-mCD200构建成功;扩增后检测病毒滴度约为109~1010pfu/ml;荧光显微镜及real-time PCR检测发现该重组腺病毒能在MS1细胞中高效的表达。

结论：构建的重组腺病毒rAd-4-mCD200在MS1细胞中成功表达mCD200基因,为下一步开展关于CD200基因免疫抑制调节等相关研究奠定了基础。

【总页数】5页(P645-649)【关键词】腺病毒载体;CD200;免疫调节【作者】王琼;陈冬梅;王立斌;魏军;李玉奎【作者单位】宁夏医科大学检验学院;宁夏医科大学总医院宁夏人类干细胞研究所【正文语种】中文【中图分类】R318.06【相关文献】1.小鼠Calb2基因重组腺病毒载体的构建与鉴定 [J], 王菁;罗建;刘珊;代晓南;高莉;高超;刘嘉茵;崔毓桂2.小鼠白细胞介素-15基因重组腺病毒载体的构建及鉴定 [J], 田子农;温端改;侯建全;樊彩斌;何小舟;徐仁芳;许贤林3.小鼠雌激素受体α基因重组腺病毒载体的构建及鉴定 [J], 胡晓;万兴;娄磊;王建怡4.小鼠树突状细胞相关C型凝集素-1基因重组腺病毒载体的构建及鉴定 [J], 夏迪;钱倩;刘志成;谭鸣鸣;丁媛;苏欣;孙文逵;施毅5.小鼠Calb_2基因重组腺病毒载体的构建与鉴定 [J], 王菁;罗建;刘珊;代晓南;高莉;高超;刘嘉茵;崔毓桂因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

小鼠NT5E基因重组腺病毒载体的构建及其在肿瘤治疗中的应用

小鼠NT5E基因重组腺病毒载体的构建及其在肿瘤治疗中的应用近年来，肿瘤治疗领域的研究不断发展，其中基因治疗是一种新兴的治疗方法。

而基因治疗的核心在于载体，它能将有效的基因导入肿瘤细胞中并发挥作用。

本文将介绍小鼠NT5E基因重组腺病毒载体的构建及其在肿瘤治疗中的应用。

一、腺病毒载体的构建腺病毒能将重组质粒导入目标细胞中，是一种常用的基因治疗载体。

在本研究中，研究者利用重组DNA技术构建了一种小鼠NT5E基因重组腺病毒载体。

首先，研究者通过PCR扩增小鼠NT5E基因，并将其连接到腺病毒载体的多克隆位点上，形成新的重组质粒。

然后，将重组质粒转染到293A细胞中，利用慢病毒系统将质粒导入病毒颗粒中，最终得到了小鼠NT5E基因重组腺病毒载体。

二、小鼠NT5E基因重组腺病毒载体在肿瘤治疗中的应用小鼠NT5E基因是一种抗肿瘤基因，其编码的蛋白酶能够水解DNA、RNA和ADP等核酸分子，从而防止肿瘤细胞的生长和增殖。

因此，在肿瘤治疗中，小鼠NT5E基因重组腺病毒载体被广泛应用。

一些前期的实验研究表明，该载体可以有效抑制人类白血病细胞的生长和扩增。

此外，该载体还可以促进肿瘤细胞的凋亡和细胞周期的停滞，从而达到治疗作用。

除此之外，还有一些基于细胞因子的基因治疗方案，例如将小鼠NT5E基因与人干扰素合并构建出载体，能够大幅提高其抗肿瘤的效果。

此外，也有一些研究人员将该载体与其他抗肿瘤药物合并使用，能够进一步提高治疗效果。

总之，小鼠NT5E基因重组腺病毒载体是一种有效的肿瘤治疗工具，其特点是安全性高、没有副作用、能够精准地攻击肿瘤细胞，并有望成为未来肿瘤治疗的重要手段之一。

三、总结本文介绍了小鼠NT5E基因重组腺病毒载体的构建及其在肿瘤治疗中的应用。

通过介绍这一研究成果，不仅可以进一步认识基因治疗的前沿研究，同时也有助于我们了解肿瘤治疗领域的最新进展。

相信，在未来的日子里，这种基因治疗策略会不断得到完善和提高，为人类健康事业做出新的贡献。

重组腺病毒载体pAd-CD的构建和鉴定的开题报告

重组腺病毒载体pAd-CD的构建和鉴定的开题报告一、研究背景和意义腺病毒是一种广泛存在于哺乳动物中的DNA病毒，能够感染多种类型的细胞，具有高效的基因转导能力和良好的安全性。

因此，腺病毒已经成为了重要的基因转导载体，被广泛应用于基因治疗、基因工程和生物学研究等领域。

其中，重组腺病毒作为基因转导载体具有如下的优点：（1）能够稳定地表达外源基因：腺病毒具有较高的基因转导率，可以长时间稳定地表达外源基因，从而实现目标蛋白的大量表达。

（2）病毒颗粒结构复杂：腺病毒颗粒结构复杂，能够有效地包装外源基因，从而保证表达的效率和精度。

（3）有良好的生物安全性：腺病毒基因组不会整合到宿主细胞基因组中，从而减少对宿主基因组的影响，有良好的生物安全性。

本研究主要针对重组腺病毒载体pAd-CD的构建和鉴定展开，主要研究内容包括以下几个方面：1. 进一步优化pAd-CD载体的构建，提高其基因转导效率。

2. 针对pAd-CD载体的具体应用领域，开展针对性的效果评价和分析。

3. 探索pAd-CD载体在基因治疗、基因工程和生物学研究等方面的应用潜力。

本研究的开展能够拓展腺病毒在基因转导载体方面的应用范围，对基因治疗、生物学研究等领域具有一定的应用前景。

二、主要研究内容和研究方案1. 重组腺病毒载体pAd-CD的构建（1）提取并纯化腺病毒：采用经典的离心法等分离技术，从已知类型的腺病毒细胞株中提取并纯化腺病毒。

（2）选择并设计适合的pAd-CD载体：根据研究方向选择并设计适合的重组腺病毒载体。

（3）克隆外源基因：将目标基因与pAd-CD载体进行克隆，形成包含外源基因的载体。

（4）包装重组腺病毒：使用适当的技术和装置，将载体转化为重组腺病毒并包装成病毒颗粒。

2. 重组腺病毒载体pAd-CD的鉴定（1）DNA测序鉴定：使用合适的方法对构建出的pAd-CD载体进行测序鉴定。

（2）病毒包装率检测：测定包装率，评估重组腺病毒的制备质量。

（2）病毒的基因转导效率检测：采用不同的检测方法检测病毒的基因转导效率，分析重组腺病毒的基因转导效率及其影响因素。

小鼠降钙素基因相关肽基因重组腺病毒载体的构建及其在心肌细胞的表达

小鼠降钙素基因相关肽基因重组腺病毒载体的构建及其在心肌细胞的表达孙智慧;韩杰;邵蕾;王利宏;宋俊贤;魏钟海;郑良荣【期刊名称】《浙江大学学报（医学版）》【年(卷),期】2010(039)003【摘要】目的:利用AdEasy腺病毒载体系统,构建小鼠降钙素基因相关肽(calcitonin gene-related peptide,CGRP)基因重组腺病毒载体,并验证其在心肌细胞中的表达.方法:采用RT-PCR方法扩增出含有小鼠CGRP全长cDNA的基因片段,并将其插入PUC57载体,经EcoRⅤ和SalⅠ双酶切,将小鼠CGRP基因亚克隆至穿梭质粒pShuttle-CMV,形成重组质粒pShuttle-CMV-CGRP.经PmeⅠ酶切线性化后,在大肠杆菌BJ5183中与腺病毒骨架质粒pAdEasy-1同源重组产生重组腺病毒质粒AdEasy-pShuttle-CGRP.重组腺病毒质粒在XL-Gold 细胞中扩增,经PacⅠ酶切线性化后,转染人胚肾293细胞进行重组腺病毒的包装,并经氯化铯纯化得到重组腺病毒AdEasy-pShuttle-CGRP.用纯化后的重组腺病毒转染原代培养的乳鼠心肌细胞,荧光显微镜下观察转染效果.通过尾静脉导入重组腺病毒7 d后,放免法测定心肌中CGRP的表达量.结果:测序证实PUC57 -CGRP重组质粒中含有小鼠CGRP基因的cDNA;重组穿梭质粒pShuttle-CMV-CGRP经双酶切鉴定后可见约7.5 kb和423 bp片段;重组腺病毒质粒AdEasy-pShuttle-CGRP经Pac Ⅰ酶切可见长约3 kb与30 kb DNA片断.转染293细胞进行包装,7 d后细胞出现病变效应,回收病毒重复感染293细胞,在荧光显微镜下可见绿色荧光蛋白表达.提取病变293细胞中重组腺病毒进行目的基因的PCR鉴定为阳性.构建好的重组腺病毒经纯化后具有很高的滴度,并且成功转染了原代培养的乳鼠心肌细胞.通过放免法证实,该载体可以显著增加小鼠心脏中CGRP的表达.结论:成功构建携带CGRP基因的重组腺病毒载体,该重组腺病毒载体AV-CGRP可以显著增加心脏中CGRP的表达量,为进一步研究CGRP基因治疗奠定了基础.【总页数】7页(P311-317)【作者】孙智慧;韩杰;邵蕾;王利宏;宋俊贤;魏钟海;郑良荣【作者单位】浙江大学医学院附属第一医院心血管内科,浙江,杭州,310003;浙江大学医学院附属第一医院心血管内科,浙江,杭州,310003;浙江大学医学院附属第一医院心血管内科,浙江,杭州,310003;浙江大学医学院附属第一医院心血管内科,浙江,杭州,310003;浙江大学医学院附属第一医院心血管内科,浙江,杭州,310003;浙江大学医学院附属第一医院心血管内科,浙江,杭州,310003;浙江大学医学院附属第一医院心血管内科,浙江,杭州,310003【正文语种】中文【中图分类】Q78【相关文献】1.小鼠FAM3C基因重组腺病毒载体的构建及其在肾系膜细胞中的表达 [J], 樊守艳;王杨;张晓燕;韦祎;王继浩;2.小鼠SOCS1基因重组腺病毒载体的构建及其在树突状细胞中的表达 [J], 陈晓波;秦杰;焦洋;钟翠平;谭建明3.大鼠SOCS3基因重组腺病毒载体的构建及转染血管平滑肌细胞后的表达 [J], 向水;董念国;刘金平;史嘉玮;肖雅琼;王玉4.小鼠SPINK5基因重组过表达腺病毒载体构建及其对特应性皮炎小鼠模型皮损疗效的研究 [J], 狄正鸿;许静;侯殿东;纪莲;刘晓梅;孙鲁宁5.小鼠 LRRC 10腺病毒载体构建及其在心肌细胞中的表达 [J], 周作琼;彭夕洋;肖丽娜;李佑锋;彭浩;吴秀山;范雄伟;李永青因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

携带c-myc基因重组腺病毒的构建和鉴定及其在豚鼠耳蜗中的表达与分布

携带c-myc基因重组腺病毒的构建和鉴定及其在豚鼠耳蜗中的表达与分布韩宇;钟翠萍;陈阳;邱建华【期刊名称】《中国听力语言康复科学杂志》【年(卷),期】2011(000)002【摘要】目的构建携带c-myc基因的重组腺病毒表达载体,并观察其在豚鼠耳蜗内的表达分布,为探讨该基因的功能奠定实验基础.方法利用细菌内同源重组的方法.构建携带c-myc基因的重组腺病毒表达载体(Ad.c-myc-EGFP).并分别应用酶切、逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和测序方法鉴定腺病毒的构建情况.利用豚鼠耳蜗内显微注射术、Western blot及荧光显微镜观察注射后该蛋白在耳蜗中的表达及分布特性.结果经酶切、RT-PCR和测序鉴定,质粒构建正确,重组腺病毒Ad.c-myc-EGFP构建成功.Ad.c-myc-EGFP腺病毒豚鼠耳蜗内注射后第三天便可通过荧光显微镜观察到绿色荧光蛋白的广泛分布,且WesternBlot方法证实它可以上调耳蜗内c-Myc蛋白的表达.结论本实验成功构建了携带c-myc基因的重组腺病毒表达载体.它可以有效地感染豚鼠耳蜗内各种细胞.为深入研究C-MYC基因在耳蜗中的作用奠定了实验基础.【总页数】5页(P12-16)【作者】韩宇;钟翠萍;陈阳;邱建华【作者单位】第四军医大学西京医院耳鼻咽喉头颈外科,西安,710032;第四军医大学西京医院耳鼻咽喉头颈外科,西安,710032;第四军医大学西京医院耳鼻咽喉头颈外科,西安,710032;第四军医大学西京医院耳鼻咽喉头颈外科,西安,710032【正文语种】中文【相关文献】1.携带鸡贫血病毒凋亡素基因重组腺病毒质粒的构建及鉴定 [J], 邓守明;蔡召忠2.腺病毒携带的LacZ基因在豚鼠耳蜗中的表达 [J], 时利;翟所强;郭维;胡吟燕3.携带Mathl基因的重组腺病毒构建和鉴定及在豚鼠耳蜗中的表达 [J], 李泽文;刘英鹏;龚树生;王国鹏4.携带人血红素氧合酶 - 1基因重组腺病毒的构建及鉴定 [J], 姜大春;何国祥;刘建平;张倩;唐兵;李德5.携带KGF基因重组腺病毒载体的构建与鉴定 [J], 贾庆华;哈小琴;吕同德;刘春杰因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。