分光光度法测定Fenton体系中产生的羟自由基(精)

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罗丹明B显色检测Fenton反应产生的羟自由基

罗丹明B显色检测Fenton反应产生的羟自由基

化缓慢 ,可见本方法稳定性较好 。 2. 3 工作曲线 当保持其它条件不变 ,改变 RB 的浓度 ,测得它 与体系吸光度的关系。实验表明 RB 的浓度在 0~ 40 μ molΠ L 范围内与吸光度呈良好的线性关系。 工作曲线的线性回归方程为 A = 0. 2329 cRB
2 ( 105 molΠ L ) + 0. 0182 , 线性相关系数 R = 019988 。
(pH 2152) ,用二次蒸馏水稀释到 10 mL 并摇匀 , 放
molΠ L) :称
取 0. 0239 g 罗丹明 B ( 四乙基罗丹明 ) 用水定容 2+ - 3 250 mL容 量 瓶 ; Fe 溶 液 ( 5 ×10 molΠ L) : 称取
013421 g FeSO4 ・ 7H2 O , 加 0. 6 mL0. 5 molΠ L 的稀 H2 SO4 溶解 , 用水定容 250 mL 容量瓶 ; 苯甲酸溶液
LIU Jie and SONG Gong2wu ( The Analysis and Test
Center , Hubei University , Wuhan 430062 ) , Fenxi Shiyanshi ,2004 ,23 ( 10) :55~57 Abstract :A new method was proposed for the determi2 nation of hydroxyl radical produced by Fenton reaction. After being oxidized by hydroxyl radical , Rhodamine B showed a color change. The ΔA 550 was dependent on the dosage of Rhodamine B , Fe

Fenton反应产生的羟基自由基及其清除的分光光度法测定

Fenton反应产生的羟基自由基及其清除的分光光度法测定
15m in。
1.2.2羟基 自由基 的 测定 在 上 述 溶 液 中 加 入 0.5mL DNPH 于 6OcI=水 浴 反应 20min.取 出 后 流 水 冷 却 ,再 加 入 2mLKOH,溶 液 最 终 pH 为 l1.8。摇匀 。于 390nm测 定吸 光值 。
2 结果与讨论
1.2实验 方法 1.2.1羟 基 自由基 的产 生 在 10mL的反 应 溶液 中 ,含 pH 5,9 KH2P04一Na2HPO4(O.067moU L)2mL,DMSO (1.0mmoUL),Fe  ̄-EDTA(0.9mmo1] L),H202(2.0mmol/L),混 合 溶 液 于 37 ̄C水 浴 反 应
宋艳 卜 邹洪 董瑞 :
(1.首都师范大 学化 学系 北京 ,100037;2.广州冷机股份有限公 司,广州 ,510470)
摘 要 :Fenton反 应产 生 的羟 基 自由基 氧化 二 甲亚砜 (DMS0)生成 的 甲醛 与 2,4一二 硝 基 苯肼 (DNPH)反应在碱性条件下生成稳定的酒红 色腙类物质 ,其最大吸收波长为 390nm,光度法测 定其含量可间接测定·0H的生成量。拟定的方法测定 了数种清除剂的 Ic 。。该方法简便可靠 , 可用于羟基 自由基清除剂的筛选. 关键词 :羟基 自由基 ;清除剂 ;2,4一二硝基苯肼 ;分光光度法 中图分 类号 :0657.32 文 献标 识码 :A 文 章编 号 :CN1l一5340/N(2007)01—0001—02
近年 来 DMSO作 为 OH.的探 针试 剂逐 渐 引起 了人们 的关 注[51 本 文采 用 Fenton体 系产生 OH· 与二 甲亚砜 (DMSO)反 应产 生 甲醛 ,再 与 2。4一二 硝 基 苯 肼 (DNPH)反 应 生 成 相 应 的腙 (HCHO— DNPH).光 度 法 测 定 ,通 过 对 测 定条 件 的 研 究 , 得到 了最 佳 的 实验 方 案并 成 功 地 用 于羟 基 自 由 基 清 除剂 的筛选 。

分光光度法测定Fenton反应产生的羟基自由基

分光光度法测定Fenton反应产生的羟基自由基
除 剂 的一种 有效 方法 .
根据实验所确定的反应物物质的量的配比, 即:
F e S O 4 溶液 2 . 0 0 m L, 水 杨 酸 一乙醇 1 . 5 0 m L , H 2 O 2 ( 0 . 0 3 %) O . 1 0 m L, 蒸 馏水 1 . 0 0 m L , 考查在 3 7℃下 体 系 的稳 定性 , 结果 见 表 2 .
・9 3・
实验结果表 明, H 2 0 2 的浓度 为 0 . 3 %、 0 . 1 5 %、
( ・ O H ) 的清除能力均与抗 氧化剂用量成 量效 关系,
0 . o 3 % 时, 吸光 度 变 化 不 大 , 而 当 浓 度 低 于 O . 0 1 5 %时吸光度 A开始下降 . 为了实验 的准确性,
第2 8 卷 期 2 0 0 9 年 第2 6 月
成 都 大 学 学报 ( 自然 科 学 版)
J o u r n a l o f C h e n g d u U n i v e r s i t y ( N a t u r a l S c i e n c e E d i t i o n )
表1 的数 据表 明 , 体系 在 2 7℃ 、 3 2℃和 3 7℃情 况下 , 温度对 吸光 度 影 响 不 大 , 由于 3 7℃具 有 特 殊 意义 , 因此反 应 体系 的温 度确 定为 3 7℃ .
2 . 6 稳定 性 实验
基( ・ 0 H ) 的产生 . 同时 , 对影响 F e n t o n 反应 的因素进 行 了考 察 , 为F e n t o n反 应 在 实 际 中 的应 用 提 供 了参 数依据 . 实验表明, 该法简便实用 , 是筛选 自由基清
・9 2・
成都大学学报 ( 自然科学版)

分光光度法测定fenton反应产生的羟基自由基

分光光度法测定fenton反应产生的羟基自由基

分光光度法测定fenton反应产生的羟基自由基
实验目的:通过分光光度法测定Fenton反应产生的羟基自由基的浓度。

实验原理:Fenton反应是一种产生羟基自由基的化学反应,其化学方程式为Fe2++H2O2→Fe3++OH-+•OH。

羟基自由基是一种高反应性的自由基,可以与某些有机分子发生反应,因此具有一定的毒性和活性。

分光光度法是一种测定物质浓度的方法,通过吸收光谱来测定物质的浓度。

实验步骤:
1.将一定量的FeSO4和H2O2混合在一起,形成Fenton试剂。

2.取一定量的Fenton试剂加入不同浓度的羟基自由基标准溶液中,形成反应液。

3.使用分光光度计测定反应液的吸光度,并绘制标准曲线。

4.取Fenton试剂加入产生羟基自由基的样品中,形成反应液。

5.使用分光光度计测定反应液的吸光度,并通过标准曲线计算样品中羟基自由基的浓度。

实验结果:通过分光光度法测定,得到不同浓度的羟基自由基标准曲线,计算出样品中羟基自由基的浓度为X mol/L。

实验结论:分光光度法可以用于测定Fenton反应产生的羟基自由基的浓度,为进一步研究羟基自由基在生物体内的作用提供了方法和依据。

敬请批阅。

试卷题目:使用分光光度法测定Fenton反应产生的羟基自由基的浓度,实验步骤有哪些?并简要说明实验原理和结论。

不同类型的捕捉剂在分光光度法测定羟自由基中的应用

不同类型的捕捉剂在分光光度法测定羟自由基中的应用

不同类型的捕捉剂在分光光度法测定羟自由基中的应用管荷兰;孔祥鲲;王嘉宇【摘要】对1987~2009年间国内外一些常用的捕捉剂,包括染料、羧酸、络合物、二甲亚砜在分光光度法检测Fenton反应产生的羟自由基(·OH)中的应用进行了综述,引用文献41篇.【期刊名称】《理化检验-化学分册》【年(卷),期】2010(046)005【总页数】4页(P589-592)【关键词】Fenton反应;分光光度法;羟自由基;捕捉剂【作者】管荷兰;孔祥鲲;王嘉宇【作者单位】镇江船艇学院,镇江,212003;镇江船艇学院,镇江,212003;镇江船艇学院,镇江,212003【正文语种】中文【中图分类】O657.3Fenton反应产生羟自由基是一种成熟的方法,由于其具有高效、廉价、选择性好等特点,成为环境水处理的重要工艺方法之一[1],其总反应式可用下式表示:羟自由基(·OH)是一种氧化能力很强的自由基,将其应用于环境污染物的处理,可降解环境中的大多数有机物,生成二氧化碳和水,无二次污染物产生,且操作条件较容易控制,这些都是许多传统污染治理方法所无法比拟的优点。

但由于羟自由基的反应活性大,寿命短,存在浓度低,直接检测存在一定的难度。

通常采用如下几种间接方式:电子自旋共振法(ESR)[2]、高效液相色谱法(HPLC)[3]、化学发光法[4]、荧光法[5]、分光光度法[67]。

其中分光光度法因其具有仪器简单、操作方便、灵敏度高等特点,而得到了广泛应用。

由于羟基自由基有很强的氧化性,可以使一些物质产生结构、性质和颜色的改变,从而可以改变待测液体的光谱吸收。

用捕捉剂捕获羟基,通过捕捉剂颜色的变化,测定吸光度的变化值而间接测得羟基含量,这是光度法的基本原理。

本文对一些常用捕捉剂在分光光度法测定Fenton反应中产生的羟自由基中的应用作出了综述。

分光光度法利用Fenton反应产生的羟自由基氧化染料试剂褪色而建立测定羟基自由基的方法,仪器简单,操作简便,具有广泛的应用前景。

分光光度法测定Fenton体系中产生的羟自由基

分光光度法测定Fenton体系中产生的羟自由基
维普资讯
大理学院学报
J 0URNg . 年 4 叠 07 月
Vo. № . AD .0 1 6 4 r2O7
分光光度法测定Fno体系中产生的羟 自由基 et n
杨 明惠 , 何丽仙 , 李珍贵
er . eo t l x e i n a o d t n Wa td e n b an d Un e e s lc e o d t n ,g o lt n h p Wa b a n d b — t T pi p r yh ma e me tlc n i o s su id a d o ti e . d rt e e td c n i o s o d r ai s i s o ti e i h i e o e
( e od] yr yr i ; etle;et atn s c po m t K yw rs hd xl d a nua r f o r co;p t ht e y o c a l r d n ne i er o r o
随着 自由基生物学与 自由基医学研究 的迅速 发展 , 现已证明多种疾病的发生和发展与 自由基对 组织细胞的损伤关系密切 , 自由基是生物体内危 羟 害最大 , 活性最强的氧 自由基 … 。人体在正常的生 命活动中通过新陈代谢 即可产生羟 自由基 , 它可以 通过电子转移 、 加成以及夺取氢原子和羟基化等反 应, 造成糖类 、 氨基酸 、 白质 、 蛋 核酸和脂类等物质 的氧化性损伤 。因此 , 对羟 自由基的研究在生命科 学及环境科学等领域 中引起 了人们的广泛兴趣 , 而
T ec] t syo n u a d ( R) a hne e r n frt x a o atn T ea u t hdoy rdcl rd cd h o i e i f et l e N W c agdbf adat eoi tnr co . mon o yrxl ia po ue o rn n t r r s o e e h di e i h f a i tess m W drcydt mi dtruhasrac h gda a ae nt f 2 m ( A b en f p c p o m n l t a i i t ee n o g bob eca e t vl g o 0a △ 瑚) ym aso set h t — l y e s n e l r e h n n w e h 5 o r o

Fenton法中羟基自由基的测定技术进展

Fenton法中羟基自由基的测定技术进展

级 氧化 技 术 , 于 湿 式 氧 化 , 有 广 阔 的前 景 。 属 具
Fn n法可 有 效 处理 酚类 、 胺 类 、 烃 类 、 药 et o 芳 芳 农
O 使苹 果 酸及 其 他 有 机物 最 终 氧化 为 C 2 H, O 和
HO , 。在反 应体 系 内 ・ H首 先 与 有 机 污 染物 R O H
着 重 介 绍 了测 定羟 基 自 由基 的方 法 及 其 发 展 趋 势 。
关键 词
Fno et n法
羟基 自由 基
测 定 技术
废 水 处 理
F n n 是 目前 废水处 理研 究 较 多 的一 种高 et 法 o
二价铁 离( e 和 H O 间 的链 式反 应 催化 生 成 F2 )
( P ) 14 E R 是 9 5年 发展 起 来 的 , 主要 研 究对 象 为 其 具 有未成 对 电子 的 自由基和过 渡金属 离子及 其化 合 物 。 自旋 捕 捉技 术为化 学反应 中 自由基 中间体 和 生命 过 程 中 的短 寿 命 自由基 的 E R检测 技 术 S
开辟 了新 的途径 【 。此方 法是 利用捕 捉剂 与短寿 8 J
( . 连 市 环 境科 学 设 计 研 究 院 , 连 162 ; . 阳 师范 大学 实 验 中心 , 阳 10 3) 1大 大 103 2 沈 沈 104


Fno et n法是 一 种 高 级 氧化 技 术 , 要 介 绍 了 羟 基 自由 基 (O 的 形 成 及 反应 机 理 , 简 ・ H) 并
核酸 断裂 、 白质 和 多糖 分解 , 伤 膜 结 构 及 功 蛋 损
能 ] 因此 , 。 在环 境科学 、 生命科 学 等领 域 , 已对 ・

亮绿褪色光度法检测Fenton反应产生的羟自由基[1]

亮绿褪色光度法检测Fenton反应产生的羟自由基[1]
2. 2. 6 反应时间的影响 按 1. 2. 2 方法配制好溶
液后 , 立即测其 ΔA 632 值 , 以后每隔 5 min 检测一 次。 结果表明起始时反应速度较快 , 但随着反应 时间的增加 , 体系 ΔA 632 值增长变慢 。 当反应时间 达 35 min 后 , ΔA 632 值在室温下基本不变 , 可视为 反应完全 。 本实验选用 35 min 为反应时间 。
1. 1 仪器与试剂 TU - 1901 双光束型紫外可见分光光度计 ( 北 京普析通用仪器有限公司) ; SK250HP 型超声波萃
[5 ]
EDTA - Fe 溶液 : 称取 EDTA 0. 7445 g , 硫酸亚铁
2+
铵 0. 7843 g , 溶于水中 , 转入 100 mL 容量瓶 , 定 容 ; 体积分数 2 % H2 O2 溶液 : 移取 30 % H2 O2 溶液
- 2
Ξ 收稿日期 : 2006203213 ;修订日期 : 2006205229 作者简介 : 马 茜 (1948 - ) , 女 , 副教授
— 87

第 25 卷第 12 ห้องสมุดไป่ตู้ 分析试验室 Vol. 25. No. 12 2006 年 12 月 Chinese Journal of Analysis Laboratory 2006 - 12
2. 2. 4 EDTA - Fe
- H2 O2 溶液
的吸收光谱 , 发现 4 个体系的最大吸收波长均在 632 nm 附近 , 前 3 个体系的吸光度基本不变 ,而缓 冲溶液 - BG - Fe
2+
- H2 O2 溶液的吸光度较其它体
系下降很多 , 最后几乎褪色完全 。 即非氧化体系 不褪色 ; 而氧化体系中 , 只含过氧化氢的体系也 不褪色 , 只有含有 Fe 和 H2 O2 溶液 , 可产生羟自 由基的氧化体系才褪色 。 说明体系吸光度的下降 是 Fenton 反应产生的羟自由基与亮绿作用的结果 。 其吸收光谱图见图 1 。 由此可见 , 羟自由基使亮绿褪色的作用比较 彻底 。 4 号比色管中的溶液颜色在刚配制好时就已 明显比其它三个比色管浅 。 到体系稳定时 , 4 号比 色管已近乎无色 。

fenton试剂法的氧化机理

fenton试剂法的氧化机理

fenton试剂法的氧化机理
Fenton试剂法是一种常用的氧化方法,其氧化机理主要包括以下几个步骤:1. 铁离子与过氧化氢反应生成羟基自由基(·OH):在酸性条件下,Fe2+与H2O2反应生成Fe3+和·OH.这个反应是Fenton试剂法的核心,因为羟基自由基是一种强氧化剂,能够将有机物氧化成无机物。

2. 羟基自由基与有机物反应:羟基自由基具有很高的氧化能力,能够将有机物氧化成无机物。

这个过程是Fenton试剂法的主要氧化过程。

3. 铁离子再生:在氧化过程中,Fe3+会被还原成Fe2+,从而实现了铁离子的再生。

这个过程可以持续进行,直到有机物被完全氧化。

综上所述,Fenton试剂法的氧化机理主要基于羟基自由基的强氧化能力,将有机物氧化成无机物。

同时,铁离子的再生也使得这个过程可以持续进行。

因此,Fenton试剂法在污水处理、有机废水处理等领域得到了广泛应用。

法对天然抗氧化物质抗羟自由基性能的测定

法对天然抗氧化物质抗羟自由基性能的测定

法对天然抗氧化物质抗羟自由基性能的测定闫有禄(云南省红河学院理学院化学系2001级化学教育化教AB班蒙自661100)摘要:为了检测Fenton试剂(H2O2/Fe2+体系)产生的羟自由基(.OH),本文采用了亚甲基蓝和邻二氮菲―Fe2+两种分光光度法对六种天然的野生植物抗氧化剂对羟自由基的作用进行了分析和检测。

两种分光光度法对羟自由基的分析检测及抗氧化剂的抗羟自由基性能检测方法,对研究工作都具有很好的实用性。

从茶叶、黄草、甘草、葛根、姜、枇杷籽中提取的抗氧化物质与羟自由基清除率具有明显的量效关系,具有很好的抗氧化能力及羟自由基清除作用,方法稳定性好,操作简便,测定快速,能简便的筛选抗羟自由基的清除率和有效抗氧化剂药物的方法。

关键词:羟自由基、羟自由基检测、分光光度法、自由基清除率、抗氧化作用、抗氧化剂。

引言:羟自由基是体内最活泼的活性氧,是一种氧化能力很强的自由基,是目前所知活性氧中对生物体毒性最强、危害最大的一种自由基,可导致许多病理变化,它可以通过电子转移、夺取氢原子(加成)和羟基化(脱氢)等反应方式与生物体内的多种分子作用,在生物体内,需氧代谢的氧化还原反应所产生的羟自由基,可以引发不饱和脂肪酸发生脂质过氧化反应,并损伤膜结构及功能,使糖类、氨基酸、蛋白质、核酸和脂类等都发生氧化,使物质的氧化性遭受损伤和破坏,造成细胞坏死或突变。

同时羟自由基还与衰老、肿瘤、辐射损伤和细胞吞噬等有关,羟自由基的检测对于自由基的生物作用研究有重要意义。

羟自由基清除率是反映药物抗氧化作用的重要指标,因此,加强对羟自由基作用的研究是很有必要的。

产生羟自由基的方法除经典Fenton反应外,还有Cu+―H2O2、Co2+―H2O2体系也能产生羟自由基,只是它们的最大吸收波长不同。

目前分析检测羟自由基的方法有电子自旋共振法、化学发光法、脉冲辐解法、细胞色素C氧化法、无机荧光法、高效液相色谱法、薄层扫描法等。

采用这些方法时所需仪器特殊,试剂昂贵,因而使其应用受到限制。

Fenton 法中羟基自由基测定方法介绍

Fenton 法中羟基自由基测定方法介绍

enton 法中羟基自由基测定方法介绍王静阿2014-07-29 14:52:081.引言反应通过H2O2 和Fe2+作用产生羟基自由基(?OH),羟基自由基(?OH)具有极强的氧化能力,能够有效的将有毒有害有机物彻底降解成二氧化碳、水和无机离子。

因此反应在废水处理及难降解废水的预处理中具有重要的意义。

但是羟基自由基(?OH)的反应活性大、寿命短(小于10-4s)、存在浓度低,因此在有关羟基自由基(?OH)的研究中,其测定方法便显得非常重要。

羟基自由基(?OH)存在时间短的特性决定了其检测非常困难,常用的方法是将羟基自由基转化为易于检测的物质,进行间接测定,本文简要介绍几种常用的羟基自由基测定方法:电子自旋共振、化学发光法、荧光法、分光光度法、电化学法、高效液相色谱法[1]。

2.羟基自由基的形成及反应机理2.1 羟基自由基的形成机理Fenton反应的实质是二价铁(Fe2+离子)和H2O2 间的链式催化反应生成?OH。

中国科学院的谢银德等[3]引用美国尤他州立大学研究人员使用顺磁共振的方法捕获到羟基自由基碎片而推导出的结论,得到一个对于Fenton 反应的机理较为综合全面的解释。

在第一个反应中, Fe2+ 与H2O2 之间的反应很快,生成的羟基自由基具有很高的电极电位氧化能力仅次于氟[4]。

2.2 羟基自由基降解有机污染物的反应机理作为高级氧化技术的原理,就是利用其超强氧化性能实现对难以降解物质的深度氧化。

Fenton 法是一种均相催化氧化法,在含有亚铁离子的酸性溶液中投加过氧化氢时,在催化剂作用下,H2O2 能产生两种活泼的氢氧自由基,从而引发和传播自由基链反应,加快有机物和还原性物质的氧化。

反应体系内羟基自由基(?OH)首先与有机污染物RH 反应生成游离基R?, R?进一步氧化生成CO2 和H2O,从而使有机污染物最终得以降解。

羟基自由基比其他常用的氧化剂(如MnO4-,ClO2)具有更高的电极电势,且电子亲和能较高。

Fenton法中的羟基自由基的测定技术简介

Fenton法中的羟基自由基的测定技术简介

3辽宁石油化工大学环境 与生物工程学 院 辽宁 抚顺 13 0 4东京大学工学系 10 1
研究科 日本 国 138 5 ) 1-6 6
摘 要 : e tn法是一种高级氧化技术 ( d a cd iain eh oo i ,OT) 是由过氧化氢 与催化剂 F 所构成 F no A vn e dt c n l e A s它 Ox o T gs , e
F no etn试剂 是 19 8 4年 由 H. . e tn 现 , J F no 发 并应
药及核废料等难 降解有机废水, 与其他 高级氧化工 艺 ( vne Ad a cd O iai xdt n o P oes OP )相 rcs, A s 比.etn Fno 法具有反应快速、操作简单、可 自 动产生 絮 凝等 优 点. 羟 基 自由基 ( H)是氧 化性 最强 的活性 氧 自 ・ O 由基. 由于・ 的反应 活性 大 、寿命 短 ( OH 小于 14 ) 0 s、 存 在 浓度 低 , 因此 在有 关 ・ OH 的研 究 中, 分 析 测试 其 法 就显 得特 别重 要 . 因此, 些探 针试 剂如 :2 脱 一 一 氧—D 一核 糖 ( ) DR 、苯 甲酸 、芳 基水扬 酸 、DMS O 以及 自旋 捕捉 剂 等被 用 于羟 基 自由基 转化 为 易于测 定的物质后测 定. 本文简要介绍 了几种常用的测定 羟 基 自由基 的方 法及 其发 展趋 势l2 1】 -.
科研报告 ( ~5 1 )
环 境研 究 与监 测
20 年 l月 07 2
F no e tn法 中的羟 基 自由基 的测 定技术 简介
刘凤喜 李志 东 , , 李
( 大连市环境科学设计研究院 1 辽宁
娜 张洪林 刘 丹 酒井裕 司 , , ,

fenton氧化体系和羟自由基氧化

fenton氧化体系和羟自由基氧化

fenton氧化体系和羟自由基氧化Fenton氧化体系和羟自由基氧化引言Fenton氧化体系和羟自由基氧化是一种常见的化学反应体系,被广泛应用于环境修复、废水处理和有机物降解等领域。

本文将对Fenton氧化体系和羟自由基氧化的原理、应用和机制进行介绍和分析。

一、Fenton氧化体系的原理和应用Fenton氧化体系是一种基于过渡金属离子催化剂的氧化反应体系,常用的催化剂为铁离子。

Fenton氧化体系的反应原理是通过过渡金属离子(如Fe2+)与过氧化氢(H2O2)反应生成羟基自由基(·OH),从而实现有机物的氧化降解。

Fenton氧化体系具有广泛的应用领域。

在环境修复方面,Fenton 氧化体系可以用于土壤和地下水中有机物的去除,尤其是对难降解的污染物具有较好的去除效果。

在废水处理方面,Fenton氧化体系可以高效地去除废水中的有机物和重金属离子。

此外,Fenton氧化体系还可以用于有机合成反应中的氧化剂和催化剂。

二、羟自由基氧化的机制和特点羟自由基(·OH)是一种极强的氧化剂,其氧化能力比氧气还要强。

羟自由基氧化的机制主要包括氢原子转移、氧原子转移和电子转移等过程。

羟自由基氧化反应具有快速、高效和选择性好等特点,因此在有机合成和环境修复领域得到了广泛的应用。

羟自由基氧化反应在有机合成中常用于研究反应机理、提高反应效率和选择性,尤其是对于难以氧化的有机物具有独特的优势。

在环境修复方面,羟自由基氧化被广泛应用于土壤和水体中有机污染物的去除,可以有效地将有机物降解为无毒的无机产物。

三、Fenton氧化体系和羟自由基氧化的关系Fenton氧化体系和羟自由基氧化是密切相关的。

在Fenton氧化体系中,铁离子(Fe2+)与过氧化氢(H2O2)反应生成羟自由基(·OH),从而实现有机物的氧化降解。

因此,羟自由基是Fenton 氧化体系中的关键中间体。

Fenton氧化体系中的羟自由基氧化反应具有高效、快速和选择性好的特点,可以高效地降解有机物。

亚甲基蓝光度法检测Fenton试剂所生成的羟自由基

亚甲基蓝光度法检测Fenton试剂所生成的羟自由基

亚甲基蓝光度法检测Fenton试剂所生成的羟自由基
李铭芳;王慧琴;李淑芳
【期刊名称】《江西农业大学学报》
【年(卷),期】2003(025)005
【摘要】提出检测Fenton反应产生羟自由基的新方法.羟自由基与亚甲基蓝发生反应后, 亚甲基蓝的颜色发生变化,用紫外-分光光度计测定其ΔA617值的变化,可间接测定羟自由基的产生量.本方法稳定性好、操作简便、测定快速,可作为一种简便的筛选抗氧化剂的方法.
【总页数】3页(P794-796)
【作者】李铭芳;王慧琴;李淑芳
【作者单位】江西农业大学理学院,江西,南昌,330045;江西师范大学化学学院,江西,南昌,330027;江西东乡一中,江西东乡,331800
【正文语种】中文
【中图分类】O621.25+5.7
【相关文献】
1.NR光度法测定Fenton试剂所生成的羟基自由基 [J], 朱琳娜;何争光;吴超
2.超声波-Fenton试剂协同降解亚甲基蓝废水研究∗ [J], 张锋
3.一种新的羟自由基生成方法及其在亚甲基蓝降解中的应用 [J], 田甜;朱晶晶;何瑜;葛伊利;宋功武
4.甲基紫光度法测定Fenton体系中产生的羟自由基 [J], 朱兴松
5.Fenton试剂氧化降解亚甲基蓝模拟废水的条件研究 [J], 周美珍
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分光光度法测定Fenton体系中产生的羟自由基(精)

分光光度法测定Fenton体系中产生的羟自由基(精)

Determination of hydroxyl radical in Fenton reaction by spectrophotometryYANG Ming-hui,HE Li-xian,LI Zhen-gui(College of Life Science and Chemistry,Dali University,Dali,Yunnan 671000,China〔Abstract 〕A new photometric method was proposed for the determination of the hydroxyl free radical produced by Fenton reaction.The color intensity of neutral red (NR was changed before and after the oxidation reaction.The amount of hydroxyl radical produced in the system was indirectly determined through absorbance c hanged at a wavelength of 520nm (ΔA 520by means of spectrophotom-etry.The optimal experimental condition was studied and obtained.Under the selected conditions,good relationship was obtained be-tween the scavenging effects of the hydroxyl free radical and the concentration of mannitol and thiourea.The resistance to hydroxyl radical oxidation of six antioxidants such as ferulic,rutin was evaluated.The method can be applied for the selection of antioxidants and study of mechanism of hydroxyl radical.〔Key words 〕hydroxyl radical;neutral red;fenton reaction;spectrophotometry随着自由基生物学与自由基医学研究的迅速发展,现已证明多种疾病的发生和发展与自由基对组织细胞的损伤关系密切,羟自由基是生物体内危害最大,活性最强的氧自由基〔1〕。

NR光度法测定Fenton试剂所生成的羟基自由基

NR光度法测定Fenton试剂所生成的羟基自由基

福建分析测试 Fujian Analysis &Testing 2006,15(3)收稿日期:2006-2-22作者简介:朱琳娜(1981~),女,在读硕士研究生,主要研究方向为水污染控制理论与技术。

E -mail:lina .a manda@NR 光度法测定Fent on 试剂所生成的羟基自由基朱琳娜 何争光 吴超(1、郑州大学环境与水利学院,郑州 450002;2、河南神火集团,永城 476613)摘 要:要提高Fent on 试剂在废水处理中的效率,关键就是要提高羟自由基的生成率和利用率。

本文提出了检测Fent on 试剂反应产生羟自由基的新方法,羟自由基氧化中性红使其褪色,用分光光度法测定其△A 值的变化,可间接测定羟自由基的产生量。

并考查了FeS O 4投加量、H 2O 2投加量、酸度、反应时间等影响羟自由基生成量的主要因素,为Fent on 试剂在废水处理中的应用提供了参数依据。

另外,该法稳定性好,操作简单,测定快速。

关键词:光度法;中性红(NR );羟自由基;Fent on 试剂;废水处理中图分类号:O657.32 文献标识码:A 文章编号:1009-8143(2006)03-0010-03Photom etr i c D eterm i n a ti on of Hydroxyl Free Rad i ca l Produced i n Fen ton ’s Reagen t Reacti on System by Toluylene Red D ecoloura ti onZhu L i n na He Zhengguang W u Chao(1.School of Envir on ment and W ater Conservancy,Zhengzhou University,Zhengzhou,450002,China;2.Shenhuo Gr oup,Henan,Yongcheng,476613,China )Abstract:The key t o enhance the efficiency of Fent on’s reagent in waste water treat m ent is t o enhance the p r oductivity and utilizati on rati o of hydr oxyl radicals in the syste m.I n this paper,for the deter m inati on of the hydr oxyl free radical p r oduced by Fent on reacti on,a ne w phot ometric method based on its oxidati on reacti on with t oluylene red is put f or ward .The col or intensity of t oluylene red will be changed after the oxidati on reacti on,the change of △A is measured phot ometrically,and the a mount of the hydr oxyl free radical can be deter m ined indirectly .The leading fact ors influencing the p r oductivity of the hydr oxyl free radical in the system such as the a mounts of FeS O 4and H 2O 2,reacti on ti m e and reacti on temperature were tested .The useful para meters for Fent on’s reagent in waste water treat m ent were offered .I n additi on,the stability of thismethod is good,its operati on is convenient,and its deter m inati on is fast .Key words:phot ometry;t oluylene red;hydr oxyl free radical;Fent on’s reagent;waste water treat m ent Fent on 试剂在废水处理中的应用主要是利用H 2O 2在Fe 2+的催化作用下所生成的具有强氧化性的・OH 的作用,通过其强氧化性对废水进行预处理以提高废水可生化性,利于其后续处理。

分光光度法测定Fenton反应产生的羟自由基

分光光度法测定Fenton反应产生的羟自由基

文章编号:1000-2375(2002)04-0326-03分光光度法测定Fenton 反应产生的羟自由基刘立明,刘丽虹,宋功武,方光荣(湖北大学化学与材料科学学院,湖北武汉430062)摘 要:建立一种甲基紫作显色剂分光光度法测定Fenton 反应产生的・OH 的方法,所产生的羟自由基与甲基紫作用后使其吸光度降低,利用吸光度值的变化可间接测定所产生的羟自由基,确定了体系最佳实验条件.同时测定抗氧化剂清除羟自由基的实验,证明该体系可作为筛选抗氧化剂的方法之一.关键词:分光光度法;甲基紫;羟自由基中图分类号:O656.9 文献标识码:A收稿日期:2002-04-18基金项目:中国分析测试基金资助作者简介:刘立明(1969- ),男,硕士生1 引 言羟自由基(・OH )是一种氧化能力很强的自由基,它能够很容易地氧化各种有机物和无机物,氧化效率高,反应速率快,是造成组织脂质过氧化、核酸断裂、蛋白质和多糖分解的活性氧,与机体的衰老、肿瘤、辐射损伤和细胞吞噬有关.由于・OH 的反应活性大、寿命短、存在浓度低,所以关于・OH 的检测方法就显得特别重要.近年来,国内外文献报道了检测羟自由基的主要方法有:电子自旋共振法[1]、高效液相色谱法[2]、化学发光法[3]、比色法[4]、光度法[5]等.电子自旋共振法和高效液相色谱法操作复杂,仪器昂贵,化学发光法虽然操作简便,测定快速,但其仪器普及不广.我们采用甲基紫作显色剂分光光度法测定Fenton 反应产生的・OH ,该法仪器简单,操作简便,测定快速,适于广泛使用.2 实验部分2.1 仪器与试剂 λ-17紫外-可见分光光度计(美国P -E 公司);PH B -4型酸度计(上海雷磁仪器厂);过氧化氢溶液(1%):取30%的过氧化氢溶液1.0m L ,用水定容100m L 容量瓶;甲基紫溶液(2.06×10-3m ol ・L -1):称取0.2032g 甲基紫用水定容100m L 容量瓶,使用时稀释成不同浓度溶液;Fe 2+溶液:5×10-4m ol ・L -1,称取0.03475g FeS O 4・7H 2O 用水定容100m L 容量瓶;缓冲溶液Tris -HCl :pH 5.0~8.5;抗坏血酸(1.0×10-3m ol ・L -1),硫脲(1.0×10-3m ol ・L -1).所用试剂均为分析纯,实验用水为二次蒸馏水.2.2 实验方法2.2.1 羟自由基的测定 在一系列10m L 带盖比色管中分别加入1.0m L 甲基紫溶液(2.06×10-5m ol ・L -1)、1.0m L Fe 2+溶液(5×10-4m ol ・L -1)、1.0m L H 2O 2(1%)溶液,用Tris -HCl 溶液调节pH =4.7,稀释到10m L 并摇匀,放置5min 后,在波长578nm 处测定吸光度,计算其与空白参比ΔA .2.2.2 羟自由基清除率的测定 在2.2.1体系中,加入一定量的羟自由基清除剂,测定其吸光度为A s ;未加清除剂的空白体系其吸光度为A 0;未加Fenton 试剂及清除剂的体系其吸光度为A ,则清除率D 按以下公式计算:D =[(A s -A 0)Π(A -A 0)]×100%.第24卷第4期2002年12月湖北大学学报(自然科学版)Journal of Hubei University (Natural Science Edition ) V ol.24 N o.4 Dec.,20023 结果与讨论3.1 测定原理 Fenton 试剂是以过氧化氢为氧化剂,以Fe 2+为催化体系的氧化法,其反应机理如下:Fe 2++H 2O 2———Fe 3++OH -+・OH.图1 甲基紫(M V )及M V -Fe 2+-H 2O 2体系吸收光谱(pH 4.7)①M V 2.06×10-6m ol ・L -1;②M V 2.06×10-6m ol ・L -1,Fe 2+5×10-4m ol ・L -1,H 2O 21%,pH 4.7所产生的羟自由基与甲基紫作用后使其吸光度降低,利用吸光度值的变化间接测定所产生的羟自由基.3.2 吸光光谱 我们分别测定了甲基紫溶液(M V )、M V -Fe 2+溶液、M V -H 2O 2溶液和M V -Fe 2+-H 2O 2溶液的吸收光谱,发现甲基紫溶液(M V )、M V -Fe 2+溶液、M V -H 2O 2溶液的最大吸收波长均在582nm 附近且吸光度值不变,而M V -Fe 2+-H 2O 2溶液的最大吸收波长紫移到578nm 附近,并且吸光度值较其它溶液体系下降,说明Fenton 试剂产生的羟自由基与甲基紫作用使其吸光度降低(图1).3.3 甲基紫浓度的影响 加入不同体积的甲基紫溶液(2.06×10-6m ol ・L -1),发现随着甲基紫量的增加,ΔA 值也增大.当甲基紫溶液体积为1.0m L 时,ΔA 最大.故本实验甲基紫用量为1.0m L.3.4 Fe 2+浓度的影响 其它条件不变加入不同浓度的图2 Fe 2+浓度对体系ΔA 的影响M V 2.06×10-6m ol ・L -1,Fe 2+5×10-4m ol ・L -1,H 2O 21%,pH 4.7Fe 2+溶液(5×10-4m ol ・L -1),发现随着Fe 2+浓度的增加,ΔA 值也增大(图2),但其浓度为5×10-4m ol ・L -1时,ΔA 值趋于稳定.故本实验Fe 2+溶液浓度为5×10-4m ol ・L -1.3.5 H 2O 2用量的影响 在甲基紫溶液浓度为2.06×10-6m ol ・L -1,Fe 2+5×10-4m ol ・L -1,pH 控制为4.7时,H 2O 2用量对吸光度的影响见图3.从图3可以看出,随着H 2O 2用量的增加,体系的吸光度变化不大,故本实验1%H 2O 2溶液用量为1.0mL.3.6 酸度的影响 我们测定了体系pH 在4.5~8.0范围内不同酸度溶液的ΔA (图4),发现随着体系酸度的降低,ΔA 降低,在p H 4.7时体系ΔA 最大,故选择体系的酸度为pH 4.7.图3 H 2O 2用量对吸光度的影响M V 2.06×10-6m ol ・L -1,Fe 2+5×10-4m ol ・L -1,H 2O 21%,pH 4.7图4 酸度对ΔA 的影响M V 2.06×10-6m ol ・L -1,Fe 2+5×10-4m ol ・L -1,H 2O 21%723第4期刘立明等:分光光度法测定Fenton 反应产生的羟自由基3.7 稳定性实验 反应5min 后,室温下ΔA 变化缓慢(表1),可见本方法稳定性较好.表1 显色稳定性实验结果放置时间Πmin0510********ΔA 0.1640.1930.1980.2060.2090.2140.214图5 抗氧化剂清除羟自由基效果实验①抗坏血酸(1.0×10-3m ol ・L -1)②硫脲(1.0×10-3m ol ・L -1)〗3.8 试剂加入顺序实验 我们分别测定了甲基紫、羟自由基和Fe 2+不同加入顺序的ΔA ,发现甲基紫-Fe2+-H 2O 2加入顺序体系的ΔA 最大.3.9 抗氧化剂清除羟自由基效果的研究 抗坏血酸和硫脲是典型的・OH 清除剂,使用本方法对这两种物质消除・OH 进行测定(图5).图5表明,用本方法检测抗坏血酸清除羟自由基的作用,具有良好的量效关系,证明该方法在筛选抗氧化药物及清除羟自由基的机理研究方面具有应用价值.参考文献:[1]S tokes N J ,T abner B J ,Hewitt C N.Determination of hydroxyl radical concentration in environmental using electron spin res onance[J ].Chem osphere ,1994,28(5):999~1008.[2]K aur H ,Hallinell B.Aromatic hydroxylation of phenylanine as an assay for hydroxyl radical[J ].Anal Biochem ,1994,220(1):11~15.[3]徐向容,王文华,李华斌,等.化学发光法测定Fenton 反应产生的羟自由基[J ].环境科学,1998,19(2):51~54.[4]贾之慎,邬建敏,唐孟成.比色法测定Fenton 反应产生的羟自由基[J ].生物化学与生物物理,1996,23(2):184~186.[5]徐向容,王文华,李华斌.荧光法测定Fenton 反应产生的羟自由基[J ].分析化学,1998,26(12):1460~1463.Determination of hydroxyl radical in Fenton reactionby spectrophotometryLiu Liming ,Liu Lihong ,S ong G ong wu ,Fang G uangrong(School of Chemistry and Material Science ,Hubei University ,Wuhan 430062,China )Abstract :A new method was developed for determination of the hydroxyl radical in Fenton reaction by spectro 2photometry.A fter methyl violet react Fenton regent ,the abs olution was declined.With the change of abs olution ,it can be used to determine the hydroxyl radical indirectly and found out the optimal determination conditions.The re 2sults of clearing experiment showed the method was applied to sieve the antioxidants.K ey w ords :photometric ;methyl violet ;hydroxyl radical(责任编辑 严家利)823湖北大学学报(自然科学版)第24卷。

考马斯亮蓝G250褪色光度法测定Fenton反应产生的羟基自由基

考马斯亮蓝G250褪色光度法测定Fenton反应产生的羟基自由基

考马斯亮蓝G250褪色光度法测定Fenton反应产生的羟基自由基刘瑛;陈新;薛翠华【摘要】在约0.008 mol·L-1硫酸介质中,Fenton反应产生的羟基自由基可使考马斯亮蓝G250(CBB G250)显著褪色.在CCB G250的吸收峰582 nm波长处测得的吸光度降低值(△A)与羟自由基(·OH)浓度在25 mg·L-1以下的范围内呈线性关系.根据Fenton反应及与方程式所示的化学计量关系,可用过氧化氢的浓度代表羟自由基浓度.用过氧化氢标准溶液对此反应体系作精密度试验,测得相对标准偏差(n=6)为0.6%.应用此方法对抗坏血酸等9种抗氧化剂的清除羟基自由基性能进行了测定.结果表明此方法可方便地应用于抗氧化剂的筛选.【期刊名称】《理化检验-化学分册》【年(卷),期】2010(046)005【总页数】4页(P475-477,481)【关键词】褪色光度法;Fenton反应;羟基自由基;考马斯亮蓝G250【作者】刘瑛;陈新;薛翠华【作者单位】江南大学,化学与材料工程学院,无锡214122;江南大学,化学与材料工程学院,无锡214122;江南大学,化学与材料工程学院,无锡214122【正文语种】中文【中图分类】O657.32羟基自由基(·OH)是目前所知活性氧中对生物体毒性最强、危害最大的一种自由基[1]。

羟基自由基参与的各种反应已成为生物学、生物化学和生物医学等领域中的重要研究课题。

由于羟基自由基寿命短、浓度低,因此其测定方法的研究也倍受关注。

离体检测羟基自由基方法有电子共振自旋捕集法[2]、化学发光法[3]、高效液相色谱法[4]、气相色谱法[5]、荧光法[6]等。

电子共振自旋捕集法和色谱法操作复杂,需要先采用特殊的捕捉试剂对产生的羟基自由基进行捕捉,且这两种方法仪器昂贵;化学发光法虽然操作简便,测定快速,但其仪器尚未普及。

褪色分光光度法因具有仪器简单廉价、操作方便、分析速度快、灵敏度较高的特点,在自由基的测定中发挥了极大的作用。

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Determination of hydroxyl radical in Fenton reaction by spectrophotometryYANG Ming-hui,HE Li-xian,LI Zhen-gui(College of Life Science and Chemistry,Dali University,Dali,Yunnan 671000,China〔Abstract 〕A new photometric method was proposed for the determination of the hydroxyl free radical produced by Fenton reaction.The color intensity of neutral red (NR was changed before and after the oxidation reaction.The amount of hydroxyl radical produced in the system was indirectly determined through absorbance c hanged at a wavelength of 520nm (ΔA 520by means of spectrophotom-etry.The optimal experimental condition was studied and obtained.Under the selected conditions,good relationship was obtained be-tween the scavenging effects of the hydroxyl free radical and the concentration of mannitol and thiourea.The resistance to hydroxyl radical oxidation of six antioxidants such as ferulic,rutin was evaluated.The method can be applied for the selection of antioxidants and study of mechanism of hydroxyl radical.〔Key words 〕hydroxyl radical;neutral red;fenton reaction;spectrophotometry随着自由基生物学与自由基医学研究的迅速发展,现已证明多种疾病的发生和发展与自由基对组织细胞的损伤关系密切,羟自由基是生物体内危害最大,活性最强的氧自由基〔1〕。

人体在正常的生命活动中通过新陈代谢即可产生羟自由基,它可以通过电子转移、加成以及夺取氢原子和羟基化等反应,造成糖类、氨基酸、蛋白质、核酸和脂类等物质的氧化性损伤。

因此,对羟自由基的研究在生命科学及环境科学等领域中引起了人们的广泛兴趣,而测定及筛选抗羟自由基物质是重要内容。

目前,离体检测羟自由基的方法已有一些报道,其中利用DMPO 捕获羟自由基的电子顺磁共振(ESR 法〔2〕以及高效液相色谱法灵敏度较高,但所用仪器昂贵,一般实验室难以应用。

光度测定法因具有仪器简单、操作方便、灵敏度高的特点,而得到广泛的应用〔4~6〕。

Fenton 反应是经典的产生羟自由基的体系〔3〕,可认为能模拟人体内产生羟自由基的过程。

而中性分光光度法测定Fenton 体系中产生的羟自由基杨明惠,何丽仙,李珍贵(大理学院生命科学与化学学院,云南大理671003[摘要]Fenton 反应产生的羟自由基与中性红反应,颜色发生变化,用分光光度计测定其△A 520值的变化,可间接测定羟自由基的生成量,通过对测定条件的研究,得到最佳实验条件。

抗氧化药物甘露醇、硫脲与羟自由基清除率具有明显的量效关系。

测定了阿魏酸、芦丁等几种中药活性成分清除羟自由基的功能,此法可用于羟自由基清除剂的筛选及抗羟自由基机理研究。

[关键词]羟自由基;Fenton 反应;中性红;光度法[中图分类号]O657.3[文献标识码]A [文章编号]1672-2345(200704-0038-03[收稿日期]2007-02-28[作者简介]杨明惠(1964-,女(白族,云南大理人,副教授,主要从事分析化学及植物化学研究.大理学院学报JO U R N A L O F D A LIU N I V ER S I TY第6卷第4期2007年4月V ol .6N o.4A pr .200738红(NR 与羟自由基发生反应后,其吸光度A 520发生变化,当抗氧化剂加入到含・OH 的溶液中时,可以和・OH 结合,从而将其清除,这样吸光度A 520的变化减少。

根据上述原理,本文建立了中性红与羟自由基反应的光度测定法,并成功用于测定中药活性成分对・OH 的清除率。

1实验部分1.1主要仪器与试剂722型光栅可见分光光度计(山东高密分析仪器总厂;pH S-2C 型精密酸度计(上海精科雷磁;CS501型超级恒温器(上海浦东跃欣科学仪器厂。

FeSO 4溶液:4.0mmol /L ,称取FeSO 4・7H 2O 晶体111.2mg ,用水溶解,定容于100ml 容量瓶中;0.02%(体积分数过氧化氢(当天配制;0.04mol /L B-R 缓冲溶液:称取硼酸(H 3BO 30.6233g ,冰乙酸(HAc1.2ml ,磷酸(H 3PO 41.2ml ,用水稀释至250ml ;0.50mmol /L 中性红溶液(NR ;1.0mmol /L 甘露醇;1.0mmol /L 硫脲;2.0×10-3mmol /L 阿魏酸;2.0×10-3mmol /L 芦丁;2.0×10-3mmol /L 槲皮素;2.0×10-3mmol /L 厚扑酚。

所用试剂均为分析纯,水为二次蒸馏水。

1.2实验方法1.2.1测定原理Fenton 试剂是产生羟自由基的经典方法,其反应机理如下:Fe 2++H 2O 2→Fe 3++・OH+OH-所产生的羟自由基与中性红作用后,使其褪色,利用仪器所测到的吸光度变化间接测定所产生的羟自由基。

加入H 2O 2前加入羟自由基清除剂,则Fenton 反应产生的羟自由基被清除或部分清除,体系在520nm 的吸光度降低程度相应减小。

1.2.2羟自由基HO・的测定在10ml 具塞比色管中,加入pH4.5缓冲溶液2.0ml ,0.50mmol /L 中性红1.6ml ,4.0mmol /L FeSO 4溶液1.0ml ,0.02%过氧化氢1.4ml ,用水稀释至刻度,混匀,于室温反应10min ,以蒸馏水作参比,用1.0cm 比色皿在520nm 波长处,测定其吸光度A 1,另一份不加Fenton 试剂,测吸光度值A 0,计算△A=A 0-A 1,羟自由基的生成量用△A 值表示。

1.2.3羟自由基清除率的测定按以上方法,加入抗氧化药后测其吸光度A 2,按下式计算羟自由基清除率s 为:s=(A 2-A 1/A 0-A 1×100%2结果与讨论2.1实验条件的选择2.1.1吸收光谱按实验方法,在722型光栅可见分光光度计上扫描,获得吸收光谱曲线,如图1,曲线表明,最大吸收波长均在520nm 附近,此处△A=A 0-A 1达最大值,故选择520nm 为测定波长。

1:1.6mlNR+2.0ml B-R ;2:1.6mlNR+2.0ml B-R+1.0ml FeSO 4+1.4mlH 2O 2;图1吸收光谱Fig.1.Absorption spectra2.1.2酸度的影响按试剂手册配制不同系列pH值为4~11的缓冲溶液,并按本实验方法测量各个pH 点的吸光度A 520。

实验结果表明,在pH4.5B-R 缓冲溶液下,△A 520达最大值,故本实验选用pH4.5的B-R 缓冲溶液。

同时考察了缓冲体系用量对褪色反应的影响。

实验表明,加入1.0ml~10.0ml 的pH4.5的B-R 缓冲溶液,吸光度先逐渐上升,在缓冲溶液用量为2.0ml 以上时,吸光度基本保持不变。

本实验选用缓冲溶液用量为2.0ml 。

2.1.3中性红用量的影响结果表明,随着0.50mmol /L中性红溶液(NR 用量的增大,△A 520值增大,中性红用量为1.6ml 时,△A 520值为最大。

实验选用中性红用量为1.6ml 。

2.1.4过氧化氢用量的影响其他条件不变,加入不同体积的0.02%过氧化氢溶液,随过氧化氢浓度的增加,△A 520逐渐增加(图2,0.02%过氧化氢用量在1.4~1.8ml 之间,△A 520值变化缓慢,故实验选用0.02%过氧化氢的用量为1.4ml。

杨明惠,何丽仙,李珍贵分光光度法测定Fenton 体系中产生的羟自由基第6卷总第40期39图2△A与H2O2,FeSO4的用量关系(体积 Fig.2.Effect of Dosage ofH2O2,FeSO4on the Absorp-tion2.1.5FeSO4浓度的影响其他条件不变,加入不同体积的4.0mmol/L FeSO4溶液,随FeSO4浓度的增加,△A520逐渐增加(图2,其体积达1.0ml后,△A520值增加缓慢,故实验选用4.0mmol/L FeSO4的用量为1.0ml。

2.1.6反应温度的影响按实验方法,分别在25℃、30℃、35℃、40℃、45℃、50℃、55℃下测定体系的△A520。

结果表明,随着反应温度的增加,体系△A520增加较慢,考虑到实验操作的方便性以及测量误差,实验选用室温作为反应温度。

2.1.7反应时间的影响在上述选定的反应条件下,在60min以内,室温下反应10min后,△A变化缓慢,可见本方法稳定性较好。

实验选用反应10min作为反应时间。

2.2抗氧化剂对羟自由基的清除作用依照实验方法,对甘露醇、硫脲等几种抗氧化剂对羟自由基的清除能力进行了分析,实验结果见图3。

由图3可知,各抗氧化剂的羟自由基清除能力均与抗氧化剂用量成量效关系,当抗氧化剂用量增大时,羟自由基清除率也增加,但当其用量增大到一定程度后,表现抗羟自由基清除率(S增长平缓,即该抗氧化剂的药效渐趋饱和。

结果表明,本体系的建立对筛选清除・OH的天然抗氧化剂,研究清除自由基的机理有一定的应用价值。

注:1.2.0×10-3mmol/L芦丁;2.1.0mmol/L硫脲;3.2.0×10-3mmol/L阿魏酸;4.2.0×10-3mmol/L槲皮素;5.2.0×10-3mmol/L 厚扑酚;6.1.0mmol/L甘露醇。

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