载锌树脂对绿原酸吸附性能研究
实验报告---大孔树脂分离纯化杜仲绿原酸
大孔树脂分离纯化杜仲绿原酸的研究一、实验目的1.1 熟练掌握如何对大孔树脂进行预处理。
1.2 了解大孔树脂对绿原酸的吸附效果。
二、原理绿原酸(Chlorogenic acid)是由咖啡酸(Cafeic acid)与奎尼酸(Quinic acid)组成的缩酚酸，异名咖啡单宁酸，化学名：3一D-咖啡酰奎尼酸(3-0．Cafeoylquinic acid)，分子式：C16H18O9，分子量：354．30，是植物体在有氧呼吸过程中经莽草酸途径产生的一种苯丙素类化合物。
绿原酸是一种重要的生物活性物质，具有抗菌、抗病毒、增高白血球、保肝利胆、抗肿瘤、降血压、降血脂、清除自由基和兴奋中枢神经系统等作用I1 J。
它是许多中药材的有效成分之一，又是某些成药的质量指标。
绿原酸应用非常广泛，主要为医药、日用化工和食品等行业。
绿原酸在各类植物中的存在相当普遍，但含量较高的植物并不多见。
近年的研究表明，杜仲叶绿原酸含量丰富，可达1％一5％。
我国杜仲林种植广泛，每年可产杜仲叶几百万吨，这为提取绿原酸提供了充足的原料基础,因此,从杜仲叶中分离提取绿原酸具有重要的意义大孔树脂具有选择性好、吸附量大、效率高、易洗脱、再生和成本低,特别适用于水溶性化合物的分离纯化等优点,在生物碱、皂甙、黄酮、多糖等的纯化中已有应用，并取得了显著的效果。
大孔树脂种类较多,极性不同,吸附性能各异。
本实验以以绿原酸为吸附质,分别采用静、动态吸附和洗脱实验等方法考察了树脂对绿原酸的吸附性能,筛选出对绿原酸吸附、分离性能好的大孔树脂,并得出吸附洗脱的最佳工艺参数,为工业化分离提取绿原酸创造了条件。
三、试剂与仪器3.1 材料与试剂：绿原酸粗品；乙腈为色谱纯试剂，磷酸、甲醇、乙醇等试剂均为分析纯；NaOH固体，HCl溶液，聚酰胺树脂，大孔树脂，柠檬酸。
3.2 主要仪器：高效液相色谱仪，分析天平，10ml、25ml、50ml、100ml容量瓶，滴定管，1ml、2ml、5ml的移液管。
负载金属离子的磺酸型树脂对酚类成分的吸附
离子交换与吸附, 2005, (1): 1 ~ 8ION EXCHANGE AND ADSORPTION文章编号: 1001-5493(2005)01-0001-08负载金属离子的磺酸型树脂对酚类成分的吸附*张静泽1,2史作清1施荣富1王春红1张金荣1高巨11 南开大学高分子化学研究所, 吸附分离功能高分子材料国家重点实验室, 天津 3000712 武警医学院生药教研室, 天津 300162摘要：研究了负载金属离子的磺酸型树脂在水、乙醇、乙酸乙酯、正己烷等不同介质中对苯酚、o-苯二酚、m-苯二酚、p-苯二酚、联苯三酚、间苯三酚等酚类成分的吸附性能。
结果表明：负载了铜离子的树脂 (D72-Cu2+) 在正己烷中对苯酚的吸附能力较弱，而对o-苯二酚、m-苯二酚、p-苯二酚、联苯三酚、间苯三酚等具有一定的吸附作用，且随着羟基的数目和空间位置的不同，对上述酚类成分表现出明显的吸附选择性。
因此，应用这种具有配位吸附作用的树脂对非水体系中的酚类成分进行吸附分离是可行的，且有望进一步研究将其用于对某些天然活性成分的提取分离。
关键词：磺酸型树脂；配位吸附；酚中图分类号：O647.3 文献标识码：A1 前言吸附树脂分离法是20世纪60年代末发展起来的一项分离新技术。
近年来，吸附分离技术广泛应用于中草药活性成分的研究。
吸附树脂为吸附性和选择性相结合的高分子吸附剂，它本身的吸附性来源于范德华引力、静电力或氢键作用；其选择性是由树脂的多孔结构和所带的功能基决定的。
吸附树脂可分为非极性树脂和极性树脂两类，其中非极性树脂主要是通过其孔表面的疏水作用进行吸附；而极性树脂的吸附则可能是范德华力、静电力或形成氢键共同推动的结果。
目前的非极性吸附树脂对中草药中生物碱、黄酮、皂甙、香豆素等成分都有一定的吸附作用，主要用在以水为介质的体系中[1]。
然而，中药有许多活性成分是不溶或难溶于水的，这使得树脂吸附分离技术在中药活性成分研究的应用中受到了限制。
利用大孔树脂提取绿原酸的研究
利用大孔树脂提取绿原酸的研究张默,霍清*(北京联合大学生物化学工程学院生物医药系,北京100023)摘要 研究利用大孔树脂从金银花中有效提取、分离纯化绿原酸的方法,从而得到纯度高的绿原酸粗品。
利用紫外分光光度计,对绿原酸标准品进行定性、定量的测定,即λ=329.5nm,R =0.99925;限性范围:0.002m g/m l <C <0.010m g/m l 。
选用4种不同型号的大孔树脂,通过静态吸附试验找出最适合吸附金银花中的绿原酸的大孔树脂,即H Z -818;利用H Z -818型树脂进行纯品动态吸附,得出吸附饱和时间为28m i n;利用含量为40%的乙醇洗脱液进行洗脱,所用洗脱液体积为1.7B V ,回收率为62.9%。
关键词 绿原酸;大孔树脂;静态吸附;动态吸附;洗脱中图分类号 O656 文献标识码 A 文章编号 0517-6611(2009)17-08167-02S tud y on th e E x tra c t ion o f Ch lo rog e n ic A c id w ith M a c rop o rou s R e s in ZHANG M o e t a l (D epa r t m en t o f B io lo gy o f C h in ese M ed ic i n e ,C o lle ge o f B ioch em ica l E n g in e er in g ,B e ijin g U n ion U n iv er sity ,B e ijin g 100023)A b s tra c t T h e m e th ods o f e ffective ex traction,sepa ra tion an d pu r ifica tiono f ch lo rogen ic acid fromh on ey su ck le w ith m a cropo rou s re sin w e re stu died .T h e cru de su bstan ce o f ch loro gen ic a cid w ith h igh pu r ity w as ob ta in ed.U sin g u ltrav io le t spe ctroph o tom e te r ,th e qu a lita tive an d qu an tita tiv e de te rm in a tion s w ere m ade on ch lo rogen ic acid.λ=329.5nm,R =0.99925and th e li m ited ran ge w as a s 0.002m g/m l <C <0.010m g/m l .F ou r d ifferen t m ode ls o f m acro-po rou s re sin s w e re se le cted.T h e op ti m um m a cropo rou s res in fo r adso rb i n g ch lo rog en ic ac i d in h on eysu ck le w as fou n d th rou gh sta tic ad so rptiontes t ,th a t w a s H Z -818.H Z -818resin w a s u sed fo r pu re dyn am ic ad so rption an d th e sa tu ra ted abso rp tionti m e w as 28m i n.T h e e lu en t w ith 40e th an o l w as u sed fo r e lu tion and th e e lu en t vo l um e w a s 1.7BV an d th e recov ery ra te w a s 62.9%.K e y w o rd s C h lo ro gen ic acid ;M acropo rou s re sin;S ta tic abso rp tion;D yn am ic ad so rp tion ;E lu tion作者简介 张默(1987-),女,北京人,本科生,专业:制药工程。
大孔吸附树脂纯化紫花地丁中绿原酸类成分的研究
摘要： 目的 ： 过 对 ８ 大 孔 吸 附 树 脂 筛选 ， 找 适 用 于 纯 化 紫 花 地 丁 中绿 原 酸 类 成 分 的 大 孔 吸 附树 脂 ， 从 紫花 地 丁 中 通 种 寻 为 分 离纯 化绿 原 酸 类有 效成 分提 供依 据 。 法 ： 用８ 大 孔 吸 附树 脂 对 紫花 地 丁 提 取 物 进 行 吸 附纯 化 ， 总绿 原 酸 纯度 作 为 指 方 采 种 以 标 综合 评 价 。 果 ：种 吸 附 树 脂 中 ， Ｈ一１ ７ 大 孔 树 脂 的吸 附率 较 高 为７ ． １ ， 析 率 最 高为 ９ ．１ ， 其 所 纯化 的样 品 结 ８ 以 ０型 ４ ７ 解 ５ ９ 以 纯 度 为 ３． １ 结论 ： ８ ６ ％。 Ｈ一 １ ７ 大孔 吸 附树 脂 综 合 性 能 良好 ， 用 于 紫 花 地 丁 中绿 原 酸 类 成 分 的 纯 化 。 ０型 适
・
２ ・ ６
黑 龙 江 医药 科 学
２ １年 １ 月 第 ３ 卷 第 ５ ０１ Ｏ ４ 期
大 孔 吸 附树 脂 纯化 紫花 地 丁 中绿 原 酸类 成 分 的研究
刘 娟， 罗家 函 ， 刘德江 ， 高 原， 马珂佳
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（ 木 斯 大 学 药学 院 ， 佳 黑龙 江 佳木 斯 １ ４ ０ ） ５ ０ ７
得。 醇为 Ｇ 级 。 乙 Ｒ
龙 胆 苦 苷 的 含 量
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３ ２ 三 花龙 胆 的 主 要 成 分 是 龙 胆苦 苷 。 含 量 也 是 三 花 龙 ． 其 胆 药 材 质 量 的 重 要 研 究 标 准 。 且 药 理 研 究 表 明 ， 胆 苦 苷 而 龙 对化学 性及 免疫 性肝 损伤 具有保 护作 用 ， 用现 代 化的 提 采 取 ， 化 手 段 ， 其 开 发 为 具 有 保 肝 作 用 的 二 类 新 药 是 较 为 纯 将 可行的。
大孔吸附树脂分离纯化金银花绿原酸研究
大孔吸附树脂分离纯化金银花绿原酸研究龚志华;任国谱;舒青孝;肖文军【摘要】以金银花粗提物为原料,比较了NKA-2、D1400、聚酰胺、HP2MGL、ADS-21、D101及AB-8 7种大孔吸附树脂对金银花绿原酸静态吸附与解吸的效果,并通过单因子实验、正交试验与验证实验,优化了树脂分离纯化金银花绿原酸的工艺技术参数.结果表明,NKA-2树脂吸附效果最好,静态饱和吸附量可达212.17 mg/g,在乙醇含量为90%下的解吸率达81.4%;采用NKA-2树脂分离纯化金银花绿原酸的最优参数为:上样质量浓度 4 g/L、上样体积3.5 BV、上样流速3 BV/h、洗脱剂乙醇浓度80%、洗脱体积3 BV、洗脱流速 1 BV/h,此时绿原酸得率可达85.79%,纯度可达45.50%;当选择上样质量浓度3 g/L、上样体积4.5 BV、上样流速2 BV/h、洗脱剂乙醇浓度80%、洗脱体积3 BV、洗脱流速3 BV/h时,绿原酸纯度可达53.07%,得率达73.33%.与当前分离纯化金银花绿原酸的工艺技术相比,该工艺具有较好的实用性、针对性与参考价值.%The tests of single factor, orthogonal and verification to separate and purify chlorogenic acid from honeysuckle crude extracts by NKA-2, D1400, polyamide, HP2MGL, ADS-21, D101 and AB-8 seven macroporous resin were carried out in sequence, and the best processing parameters were optimized based on the adsorption and desorption results. The results showed that NKA-2 was the best resin, whose static saturated adsorption capacity was 212. 17 mg/g, and desorption rate by 90％ ethanol reached 81.4％. The best processing parameters for separating and purifying chlorogenic acid from honeysuckle crude extracts by NKA-2 resin were as follows: sample concentration: 4 g/L, sample volume: 3.5 BV, sample flow rate: 3 BV/h,elution ethanol concentration: 80％ , elution volume: 3 BV, and elution flow rate: 1 BV/h. Under the optimal conditions, the yield rate of chlorogenic acid reached 85.79％ , and its purity was 45.50％. When using sample concentration of 3 g/L, sample volume of 4. 5 BV, sample flow rate of 2 BV/h, elution ethanol concentration of 80％ , elution volume of 3 BV and elution flow rate of 3 BV/h, the purity of chlorogenic acid reached 53.07％ , and its yield was 73.33％. Comparing with the current separating and purifying process of chlorogenic acid from honeysuckle crude extracts, the optimized process has better practical and reference value.【期刊名称】《分析测试学报》【年(卷),期】2011(030)001【总页数】6页(P85-90)【关键词】金银花;绿原酸;大孔吸附树脂;静态吸附;动态吸附;分离纯化【作者】龚志华;任国谱;舒青孝;肖文军【作者单位】湖南农业大学,园艺园林学院茶学系,湖南,长沙,410128;湖南农业大学,国家植物功能成分利用工程技术研究中心,湖南,长沙,410128;中南林业科技大学,食品科学与工程学院,湖南,长沙,410004;湖南农业大学,园艺园林学院植物资源工程系,湖南,长沙,410128;湖南农业大学,园艺园林学院茶学系,湖南,长沙,410128;湖南农业大学,国家植物功能成分利用工程技术研究中心,湖南,长沙,410128;湖南农业大学,园艺园林学院植物资源工程系,湖南,长沙,410128【正文语种】中文【中图分类】O657.7;TQ460.72Abstract:The tests of single factor,orthogonal and verification to separate and purify chlorogenic acid from honeysuckle crude extracts by NKA-2,D1400,polyamide,HP2MGL,ADS-21,D101 and AB-8 seven macroporous resin were carried out in sequence,and the best processing parameters were opti mized based on the adsorption and desorption results. The results showed that NKA-2 was the best resin,whose static saturated adsorption capacity was 212.17 mg/g,and desorption rate by 90%ethanol reached 81.4%. The bestprocessing parameters for separating and purifying chlorogenic acid from honeysuckle crude extracts byNKA-2 resin were as follows:sample concentration:4 g/L,sample volume:3.5 BV,sample flow rate:3 BV/h,elution ethanol concentration:80%,elution volume:3 BV,and elution flow rate:1 BV/h.Under the opti mal conditions,the yield rate of chlorogenic acid reached 85.79%,and its puritywas 45.50%.When using sample concentration of 3 g/L,sample volume of 4.5 BV,sample flow rate of 2 BV/h,elution ethanol concentration of 80%,elution volume of 3 BV and elution flow rate of 3 BV/h,the purity of chlorogenic acid reached 53.07%,and its yield was 73.33%.Comparingwith the current separating and purifying processof chlorogenic acid from honeysuckle crude extracts,the opti mized process has better practical and reference value. Key words:honeysuckle flower;chlorogenic acid;macroporous resin;static adsorption;dynamic adsorption;separation and purification金银花为忍冬科忍冬属忍冬(Lonicera japonicaThumb)的花或花蕾,是广泛分布于世界各地的一种陆生植物[1]。
杜仲叶绿原酸的提取分离.
杜仲叶绿原酸的提取分离钱骅赵伯涛张卫明(南京野生植物综合利用研究院南京210042摘要比较了17种大孔吸附树脂对杜仲叶绿原酸的吸附、洗脱性能和吸附动力学特性;筛选试验表明NK A -9是一种性能优良的吸附剂。
关键词杜仲;绿原酸;大孔树脂;纯化绿原酸是杜仲叶重要有效成分之一,具有广泛的抗菌、抗病毒、抗诱变、抗肿瘤作用,同时还是一种抗氧剂[1]。
因其结构特性,而有一定的极性及水溶性。
大孔吸附树脂在70年代末开始应用于中草药化学成份的提取分离,因其吸附容量大,选择性好,易于解吸附,机械强度高,再生处理简单,吸附速度快,操作简单,得率恒定,产品质量稳定等特点,且吸附法仅用少量溶媒洗脱树脂就能达到浓缩分离的目的,溶媒用量大为减少,避免了溶媒法严重的乳化现象,特别适合从水溶液中分离低级性或非极性化合物,故与溶媒法和沉淀法相比,树脂法有其独到的优越性。
寻找一种合适的树脂,对于优化生产工艺,充分利用杜仲叶资源具有重要意义。
本文通过对17种大孔吸附树脂的筛选,发现极性树脂NK A-9是一种对绿原酸吸附性能优良的吸附剂。
1材料及仪器杜仲叶:采自南京野生植物综合利用研究院。
大孔吸附树脂:LD605、LD632、D140、D138、P97 -136为化工部成都有机硅研究中心提供;860021、C AD-40、DD-130为山东鲁抗树脂分厂提供;X-5、S-8、AB-8、NK A-9、NK A-Ⅱ、AAS、D4020、D4006、D3520为天津南开大学化工厂提供。
绿原酸标准品由中国药品生物制品检定所提供。
岛津UV-250可见紫外分光光度计,三用紫外分析仪,ZFA-10型旋转蒸发器,薄膜浓缩器。
所用试剂均为分析纯。
2方法与结果2.1绿原酸测定参照文献[2]。
2.2上样液制备杜仲叶干粉用70%乙醇(pH= 2.5,90℃提取3次,每次提取半小时,料液比分别为1:12,1:10,1:8。
提取液浓缩至一定体积,预处理后上样。
2.3树脂预处理先以蒸馏水溶涨后浮选,再用0.5NHCl浸泡1天,并不时搅拌,倾去酸液,水洗至中性,再用70%乙醇浸泡1天,并不时搅拌,再水洗至无须状物为至,抽干,室温干燥至不粘。
大孔吸附树脂分离纯化牛蒡叶绿原酸的工艺研究
大孔吸附树脂分离纯化牛蒡叶绿原酸的工艺研究
牛蒡叶绿原酸（Arctiin）是一种具有广泛应用前景的天然药物成分，具有抗炎、抗氧化、抗肿瘤等多种药理活性。
对牛蒡叶绿原酸的提取和分离纯化工艺研究具有重要的科学意义和应用价值。
通过文献调研确定了大孔吸附树脂作为分离纯化牛蒡叶绿原酸的最佳工艺。
大孔吸附树脂具有较大的孔径，可以有效地吸附分离高分子化合物，可以更好地满足牛蒡叶绿原酸的分离纯化需要。
确定了大孔吸附树脂的最佳操作条件。
通过单因素实验和正交实验确定了吸附树脂用量、进样浓度、流速和洗脱液浓度等操作参数的最佳值。
确定了最佳操作条件后，通过改变操作参数的组合来调整牛蒡叶绿原酸的吸附和洗脱效果，从而实现牛蒡叶绿原酸的高效分离纯化。
利用高效液相色谱（HPLC）对分离纯化后的牛蒡叶绿原酸进行了质量分析。
结果表明，经过大孔吸附树脂的分离纯化，牛蒡叶绿原酸的纯度和产率都有显著提高。
对纯化后的牛蒡叶绿原酸进行了药理活性测试，发现其具有良好的抗氧化和抗炎活性，进一步验证了分离纯化工艺的有效性。
本研究通过大孔吸附树脂对牛蒡叶绿原酸进行了分离纯化工艺研究，优化了分离纯化工艺，提高了产品的纯度和产率。
这对于进一步开发和应用牛蒡叶绿原酸具有重要的科学意义和应用价值。
静态吸附杜仲叶中绿原酸较合适树脂的研究
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东， 严
激． 动脉 粥样硬化 中基质 金属蛋 白酶 的研 究进展
［ ］ 安徽 医药 ，０ ０ １ （ ）８ ４— ． Ｊ． ２ １ ，４ ８ ：７ ６
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化 工科技 市场
第３ ３卷 第 ５期
见于 报道还 不是很 多 ， 尚有待 进行 更深 入 的研 究 ， 以 期开 拓绿原 酸更 广泛 的应用 。
究 ［］ 食 品科学 ，０ ７，８ １ ） ２ ５— ４ ． Ｊ． ２０ ２ （ １ ：４ ２ ８
［ ］ 余建平 ， ９ 林燕 ， 滕莉丽 ， 微波法提取金银花中的绿原酸 ［ ］ 等． Ｊ．
［ ０ 周 军 ， 琼 ， 志光 ， 超 声 波 法 提 取 金银 花 中 的绿 原 １］ 黄 李 等． 酸［ ］ 化学与生物工程 ， ０ ， （ ） ３ 一 ３ Ｊ． ２ ８ ２ １ ：ｌ ３ ． ０ ５ ［ １ 田江惠 ， １］ 麻成金 ， 黄群 ， 葵 花籽绿 原酸超 声波辅 助提取研 等． 究 ［ ］食 品与发酵科技 ， ０ ，５ １ ： ２ ． Ｊ． ２ ９４ （ ） ２ ９ ０ ７—
［ ］ 兰 小艳 ， 敏 ， 学 俊． 仲叶 中绿原 酸醇 提 法 的工 艺 研 ５ 黄 张 杜
究［ ］ 中国农学通报 ，０ ９２ （ ８ ：４—８ ． Ｊ． ２０ ，５ １ ）８ ９ ［ ］ 梅林 ， ６ 梅兰 ， 随丽． 李 正交试验 法优化 金银花 中绿原酸 的水提 工艺 ［］ 中国药业 ，０ ７，６ ６ ：２— ３ Ｊ． ２０ １ （）４ ４ ． ［ ］ 聂凌鸿 ， ７ 岳淼． 金银花 中绿原酸提取工艺的优化 ［ ］ 食品研究 Ｊ．
有机异质结构作为关键材料在光 电、 信息和生命等 高 技术研 究 领域 的潜在 应用 价值 。
此前 ， 实验 室在 功能材 料 的可控 组装 、 该 聚集 态 结 构和性 能研 究方 面取 得 了系列进 展 ， 例如 ， 确定 了
零维纳米胶囊到二维纳米管的 自然生长及其 机理 ，
D101大孔吸附树脂纯化葵花籽粕绿原酸研究
ｏ ｆ ｉ ｆ ｎ ａ ｌ ｐ ｒ ｏ ｄ ｕ ｃ ｔ ｗａ ｓ ｒ ａ ｉ ｓ ｅ ｄ ｆ ｒ ｏ ｍ ７ ０ ． １ ０ ％ｔ ｏ ９ ０ ． ４ １ ％， ａ ｎ ｄ ｔ ｈ ｅ ｙ ｉ ｅ ｌ ｄ ｗａ ｓ ６ ４ ． ２ ３ ％．
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（ １ ． Ｓ ｈ ａ ｎ ｄ ｏ ｎ ｇ Ｂ ｕ ｓ ｉ ｎ ｅ ｓ ｓ Ｉ ｎ ｓ ｔ ｉ ｔ ｕ ｔ ｅ ， Ｙａ ｎ ｔ ａ ｉ ２ ６ ４ ６ ７ ０ ， Ｓ ｈ ａ ｎ ｄ ｏ ｎ ｇ ， Ｃ ｈ ｉ ｎ ａ ；
要： 该 实验 研 究 Ｄ１ ０ １大孔 吸 附树脂 反相 柱层 析 纯化 绿原 酸 工 艺； 通 过 实验确 定 最佳条 件 为 ： 洗脱 剂 为 ２ ０ ％ 乙醇、 洗脱 剂 用量为 ５ Ｂ Ｖ、 上样 量 为 １ ． ５ Ｂ Ｖ、 洗脱流 速 为 ２ ｍｌ ／ ｍｉ ｎ ； 在此 条件 下 ， 绿 原 酸产 品纯度 由原 ７ ０ ． １ ０ ％ 提 高至 ９ ０ ． ４ １ ％， 得率为 ６ ４ ． ２ ３ ％。
中 图分 类 号 ： Ｔ Ｑ６ ４ ５ ． ９ ＋ ９
文献标 识码 ： Ａ
文章 编号 ： ｌ Ｏ ０ ８ —９ ５ ７ ８（ ２ ０ １ ３ ） ０ ６ —０ ０ ５ ０ —０ ３
大孔吸附树脂分离纯化牛蒡叶绿原酸的工艺研究
大孔吸附树脂分离纯化牛蒡叶绿原酸的工艺研究一、引言牛蒡叶绿原酸是一种重要的生物活性成分，具有抗氧化、抗菌、抗病毒、抗癌等多种生理功能。
对牛蒡叶绿原酸的分离纯化工艺研究具有重要的意义。
本文旨在探讨利用大孔吸附树脂进行牛蒡叶绿原酸的分离纯化工艺研究，为其在医药、食品、保健品等领域的应用提供有力支撑。
二、实验材料与方法1、实验材料牛蒡叶绿原酸提取物、大孔吸附树脂、乙醇、甲醇、去离子水等。
2、实验方法（1）大孔吸附树脂的选用在实验中，我们选择了多种大孔吸附树脂进行筛选实验，包括AB-8、XDA-1和D101等树脂。
通过比较它们的吸附效果、纯化效果以及再生性能等指标，最终确定了最适合进行牛蒡叶绿原酸分离纯化的大孔吸附树脂。
（2）工艺优化在实验中，我们探讨了牛蒡叶绿原酸的最佳提取条件、大孔吸附树脂的最佳操作条件以及纯化工艺的优化条件等一系列因素。
通过实验设计和数据分析，得出了最佳的工艺条件，为后续大规模生产提供了可靠的依据。
（3）纯化效果评价通过高效液相色谱法对纯化后的牛蒡叶绿原酸进行含量测定，评估其纯化效果。
也对产品进行质量分析及稳定性测试，确保其在后续应用中具有良好的品质和稳定性。
三、实验结果与分析通过实验，在多种大孔吸附树脂中，我们最终确定了XDA-1树脂为最适合牛蒡叶绿原酸分离纯化的树脂。
在优化的工艺条件下，我们成功实现了对牛蒡叶绿原酸的高效分离纯化，同时保持了其良好的产率和纯度。
对产品进行的质量分析表明，纯化后的牛蒡叶绿原酸具有较高的含量和良好的稳定性，可以满足不同领域的应用需求。
四、讨论与展望本文通过对大孔吸附树脂分离纯化牛蒡叶绿原酸的工艺研究，成功实现了对该生物活性成分的高效分离纯化。
通过对实验结果的分析，我们得出了最佳的工艺条件和操作参数，为该工艺的工业化生产提供了重要的参考。
未来，我们将继续深入研究，进一步优化工艺，提高产率和纯度，探索新的应用领域，为该生物活性成分的应用开发和推广奠定更加坚实的基础。
大孔树脂分离纯化杜仲叶中绿原酸的研究
（ 江西省科学 院应用化学研究所 ， 江西 南 昌 ３ ０２ ） ３０ ９
摘 要 ： 过 静 、 态吸 附和 洗 脱 实验 ， 选 出 ３６型 大孔 树 脂 为 绿 原 酸 的吸 附树 脂 ； 通 动 筛 ０ 当上 柱 溶 液 ｐ Ｈ值 控 制 在 ２
酸， 绿原 酸是 由咖啡 酸与奎尼 酸组成 的缩 酚 酸 ， 异
采用 静 、 动态 吸附 和洗 脱 实 验等 方 法 考察 了树 脂
名咖啡鞣酸， 是植物体在有 氧呼吸过程中经莽草 酸途径产 生 的 一 种 苯 丙 素 类 化 合 物 … 。 近来 研
究 发现 ， 绿原 酸具 有 抗 菌 、 病 毒 、 胆 、 抗 利 保肝 、 降 压、 清除 自由基 等作 用 ， 因此 ， 杜 仲叶 中分离 提 从 取绿原 酸具有重 要 的意义 “ 。大孔树脂 具有 选
ａ ｉ ｏ ｌ ｅ ｃ ０％ ａ ｏ ｅ， ｅ ｅ ｅｕ ｉｎ ｗａ ｏ ｃ ｎ ｒ ｔｄ ａ ｄ ｄ ｅ ｔ ｕ ｔ ｆｃ ｏ ｏ ｅ ｉ ｃｄｃ ｕｄ ｒａ ｈ９ ｂ ｖ ｔ ｎ ｔ ｌ ｔｏ ｓ ｃ ｎ ｅ ｔａ ｅ ｎ ｒ ｄ，ｈｅ ｐ ｒ ｙ ｏ ｈｌｒ ｇ ｎｃ ｈ ｈ ｉ ｉ ａ ｉ ｏ ｌ ｅ ｃ ０％ ａ ｏ ｅ ｃｄｃ ｕｄ ｒａ ｈ４ ｂｖ ． Ｋｅ ｒ ｓ： ｌ ｒ ｇ ｎｉ ｃｄ， ｃ ｍｍｉ ｌ ｉｅ ｅ ｖ ｓ， ｅ ｏ ｏ ｏ ｓｒ ｓｎ， ｓ ｒ ｔ ｎ， ｕ ｉｎ ｙ ｗｏ ｄ Ｃｈ ｏ ｏ ｅ ｃ ａ ｉ Ｅｕ ｏ ａ ｕ ｍｏｄ ｓｌ ａ ｅ Ｍａ ｒ ｐ ｒ ｕ ｅ ｉ Ａｄ ｐ ｏ Ｅｌ ｔ ｏ ｉ ｏ
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杜仲叶中绿原酸的提取纯化研究(一)
杜仲叶中绿原酸的提取纯化研究(一)作者：袁华，邓良，杨小俊，闫志国，吴元欣【关键词】绿原酸；,,提取；,,纯化；,,杜仲叶摘要：目的研究杜仲叶中绿原酸的提取纯化方法。
方法采用水提、絮凝脱色、树脂吸附、重结晶工艺提取纯化。
结果杜仲叶的水浸提液浓缩后用1%壳聚糖絮凝去杂、活性碳脱色得到进样液，进样液用NKA-9树脂吸附，50%乙醇解吸，洗脱液浓缩后的粗品经甲醇重结晶得到纯度≥97%的绿原酸，提取率≥65%。
结论优化完善了杜仲叶中绿原酸的提取纯化方法，为杜仲资源的充分综合利用和产业化开发提供了参考。
关键词：绿原酸；提取；纯化；杜仲叶StudyontheExtractionandPurificationofChlorogenicAcidinEucommiaulmoidesOliv.Leaves Abstract：ObjectiveTostudytheoptimumextractionandpurificationprocessforchlorogenicacidinEucommiaulm oidesOliv.Leaves.MethodsTheprocesswascarriedoutbywaterextraction,1%chitosanflocculation,act ivedchardecolorization,NKA9resinadsorption,50%ethanoldesorptionandmethanolrecrystallization .ResultsTheextractingratioofchlorogenicacidwas68%withpurityof97%.ConclusionAnoptimumandi mprovedtechnologyfortheextractionandpurificationofchlorogenicacidinEucommiaulmoidesOliv.Le aveswasinvestigated.Itishelpfultoindustrialproductionofchlorogenicacid.Keywords：Chlorogenicacid;Extraction;Purification;EucommiaulmoidesOliv.杜仲EucommiaulmoidesOliv.是我国特有的经济树种，其药用价值历来受到人们关注。
用大孔吸附树脂对洋蓟茎叶中绿原酸及洋蓟素分离纯化的研究
２１ ００年 １ 月 １
农 产 品加 工 ・ 刊 学
Ａｃ ｄ ｍｉ ｅ ｉｄ ｃ ｌｏ ａ ｍ ｒ ｄ ｃ ｓＰ ｏ ｅ ｓｎ ａ ｅ ｃ Ｐ ｒｏ ｉ ａ ｆＦ ｒ Ｐ ｏ ｕ ｔ ｒ ｃ ｓ ｉ ｇ
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实验一 大孔吸附树脂法提取金银花中的绿原酸
实验一大孔吸附树脂法提取金银花中的绿原酸一、实验目的1、掌握层析柱的装填。
2、掌握离子交换树脂的操作方法。
二、实验原理D－101型大孔吸附树脂即大孔型苯乙烯系弱酸性阳树脂，主要依赖电荷间的相互作用，利用带电分子中电荷的微小差异而进行分离。
选择适当条件可使一些溶质分子变成离子态，通过静电作用结合到离子交换剂上，而另一些物质不能被交换，这两种物质就可被分离。
三、实验仪器及材料3.1 实验材料金银花，D－101型大孔吸附树脂，乙醇，盐酸。
紫外分光光度计（石英比色皿）、pH计、离心机，旋转蒸发仪，加热回流装置，烘箱，层析柱，移液器，容量瓶，移液管，烧杯，滤纸，40目筛。
3.2 绿原酸的提取与测定3.2.1 水提取称取金银花细粉50g（3份），用水加热煎煮2次（10倍、8倍）2h/次,合并提取液。
提取液冷至室温后用盐酸调节pH值至3，纱布过滤后离心。
3.2.2 装柱湿法装置（一口气倒入胶体，勿陷入气泡）。
3.2.3 洗脱定量吸取离心液约100 mL通过大孔吸附树脂柱吸附，吸附后用水冲洗树脂柱至澄清后，再用10%的乙醇冲洗柱床至洗脱液色较淡。
用45%乙醇洗脱，以5mL/管收集这部分洗脱液，至无明显蓝色荧光。
3.2.4 紫外吸收值测定。
流出液稀释后，在326 nm处测定其紫外吸收值。
以洗脱体积为横坐标、以紫外吸收值为纵坐标作图。
3.3 作业1.给出装填体积与上样量信息。
2.计算最高管紫外吸收值中绿原酸的浓度。
绿原酸结构式D101大孔树脂的装柱方法及装柱前的处理方法大孔型苯乙烯弱酸性阳离子交换树脂先给树脂柱中加入1/3的水，然后将准确量好体积的D101树脂用水转移到树脂柱中，再用70%的乙醇2倍树脂体积处理，流速为1倍树脂体积，过完醇后用水洗至无醇味即可进行使用。
搅了之后到入柱子中，一点一点倒，开始要慢点，防止水把玻璃珠歪，导致大孔树脂流到外面。
可以预先在柱中多放一点水，缓冲一下。
收尾时，要慢点加，防止加入过多大孔树脂，一般加到柱子的三分之二左右。
高选择性吸附树脂结构设计及在中药复方活性成分提取中的应用的开题报告
高选择性吸附树脂结构设计及在中药复方活性成分提取中的应用的开题报告一、选题背景中药复方作为一种传统的中医药剂形式，具有多种活性成分，对于治疗多种疾病有重要的作用。
然而，中药复方中的活性成分种类复杂、含量低、含量差异大，因此提取技术十分重要。
传统的提取方法如水煎法、浸泡法等不仅破坏了一些活性成分，而且提取效率低，操作复杂。
因此，需要开发简单、高效、选择性好的提取方法。
吸附法是一种有效的提取方法，具有选择性好、操作简单、提取效率高等优点。
吸附树脂是吸附法中的一种常用介质，可以根据目标化合物的性质进行选择，同时具有反复使用、回收方便等优点。
因此，设计选择性好的吸附树脂对于提高中药复方中活性成分的提取效率具有十分重要的意义。
二、研究内容本研究拟设计一种具有高选择性的吸附树脂，通过调控其化学组成、孔径大小等结构性能，提高其对中药复方中特定活性成分的选择性吸附能力。
具体的研究内容包括以下方面：1.筛选吸附树脂的基础材料，包括树脂的化学组成、孔径大小、孔道结构等对于吸附性能的影响。
2.采用不同的交联度和孔径大小的吸附树脂对中药复方进行筛选，考察不同吸附树脂的选择性吸附能力，选择最适合的吸附树脂。
3.对所选吸附树脂的吸附性能进行表征，包括动态吸附容量、吸附速率等。
4.实验验证所设计的吸附树脂的应用效果，包括中药复方活性成分的提取率、提取效率等方面的数据分析。
三、预期结果通过本研究，预期能设计出一种具有高选择性的吸附树脂，对于中药复方活性成分的提取具有良好的效果。
预期结果包括以下方面：1.确定最适合中药复方提取的吸附树脂类型和工艺条件。
2.研究吸附树脂的吸附容量、吸附速率等特性，进行表征和分析。
3.实验验证设计吸附树脂的提取效果，并从实验数据中得出结论，为该吸附树脂的进一步应用提供科学依据。
四、研究意义本研究的意义在于通过研究设计选择性好的吸附树脂，提高中药复方活性成分的提取效率，从而提高中药复方研究的效率和质量，发掘中药复方中的潜在药物成分。
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Zn
2+
光谱扫描
得到最大吸收波长： 得到最大吸收波长：595nm
Zn 标准曲线
2+
3.1.2 树脂载锌量的测定
1、载锌树脂的制备 、 倍树脂量的10％ 溶液， 取10倍树脂量的 ％ZnSO4溶液，与经过处理的大孔树 倍树脂量的 脂混合，在室温下进行反应8h后 脂混合，在室温下进行反应 后，用去离子水洗至检测不出 金属离子为止，置于 ℃ 的烘箱中烘干。 金属离子为止，置于80℃ 的烘箱中烘干。 2、样品的测定 、 取树脂吸附前后的样品溶液各3.0mL，依次加入 mL表 ，依次加入5 取树脂吸附前后的样品溶液各 表 面活性剂、3 mL pH值为 的缓冲溶液、2 mL显色剂，每 面活性剂、 值为9.2的缓冲溶液、 显色剂， 值为 的缓冲溶液 显色剂 加一种试剂都充分摇匀后定容至50 mL，进行显色反应，同 加一种试剂都充分摇匀后定容至 ，进行显色反应， 时做试剂空白， 放置15 min后 ， 用试剂空白作参比 在 595 时做试剂空白 ， 放置 后 用试剂空白作参比,在 nm波长处测量样品的吸光度。 波长处测量样品的吸光度。 波长处测量样品的吸光度
DAD1 A, Sig=327,4 Ref=360,100 (CAFECIN\101027\CAFEC000092.D) mAU 250 5.844
200
150
100
50
0 0 1 2 3 4 5 6 7 8 min
绿原酸标准品色谱图
10000 峰 积 mAU 面 ( 8000 6000 4000 2000 0 0.37 0.74 1.11 进样量（ ug） 进样量（ug） 1.48 1.85 y = 4289.8x - 56.435 R2 = 0.9994
1.2 本课题研究意义
绿原酸是一种重要的生理活性物质， 绿原酸是一种重要的生理活性物质，具有 抗菌、抗病毒、升高白细胞、保肝利胆、 抗菌、抗病毒、升高白细胞、保肝利胆、抗肿 瘤、降血压、降血脂、清除自由基等作用。在 降血压、降血脂、清除自由基等作用。 食品工业、 食品工业、医药工业以及化学工业中都有广泛 的应用。 的应用。随着对绿原酸及其类似物药效的深入 研究， 研究，天然植物中绿原酸的价值越来越被深度 挖掘， 挖掘，本论文通过对绿原酸分离纯化工艺条件 的研究找到了绿原酸纯化的最佳工艺参数， 的研究找到了绿原酸纯化的最佳工艺参数，对 合理开发天然产物的有效成分具有重要意义。 合理开发天然产物的有效成分具有重要意义。
载锌树脂对绿原酸吸附性能研究
指导老师： 指导老师：Xuan Han 专业： 07应用化学 专业： 应用化学 学生： 学生： Xia Binbin 学号： 学号： 109
毕业答辩汇报内容
1 2
研究背景及意义 实 验 设 计
3
实 验 部 分
4
结 论Biblioteka 一、研究背景及意义1.1 研究背景
天然产物研究是人类对生物资源开发利用 的基础研究， 的基础研究 ， 目的是希望从中获得医治严重危 害人类健康疾病的防治药物、 害人类健康疾病的防治药物 、 医用及农用抗菌 素 ， 开发高效低毒农药以及植物生长激素和其 他具有经济价值的物质。 他具有经济价值的物质 。 天然产物生产过程就 是提取、 分离及纯化的过程， 因此， 是提取 、 分离及纯化的过程 ， 因此 ， 开发和应 用高效、 环境友好的天然产物提取、 分离及纯 用高效 、 环境友好的天然产物提取 、 化技术是当前天然产物开发与生产的核心。 化技术是当前天然产物开发与生产的核心。 本课题研究的就是纯化绿原酸的技术。 本课题研究的就是纯化绿原酸的技术。
*DAD1, 7.204 (419 mAU, - ) Ref=6.777 & 8.057 属属 LYS000003.D mAU 350 300 250 200 150 100 50 0 220 240 260 280 300 320 340 360 380 nm
绿原酸紫外光谱扫描图
通过 UV 扫描测定绿原酸标准品的最大吸收 波长约为 327 nm，故确定该波长为 UV 及 HPLC ， 检测波长。 检测波长。
实验结果表明, 实验结果表明 Langmuir 吸附等温方程比 Freundlich 方程能更好地描述载锌树脂在溶液中对绿原酸的吸附。 方程能更好地描述载锌树脂在溶液中对绿原酸的吸附。这可 能是由于Freundlich 方程假设分子在介质上的吸附是多分子 能是由于 层吸附, 但在此溶液中存在单分子层吸附的可能性较大。 层吸附 但在此溶液中存在单分子层吸附的可能性较大。
吸附等温曲线
40 35 吸 附 量 /mg/g 30 25 20 15 10 5 0 0 0.05 0.1 0.15 0.2 平衡浓度( mg/ ml) 平衡浓度 ( mg / ml ) 0.25 0.3 20℃ 30℃ 40℃
由上图可看出温度越高吸附量越小，所以在 ℃ 由上图可看出温度越高吸附量越小，所以在20℃时树 脂的吸附能力最强。 脂的吸附能力最强。
绿原酸标准曲线
3.3 树脂筛选
称取载锌D401、 载铁D401、 原 D401树脂各 称取载锌 、 载铁 、 树脂各0.1g于三 于三 树脂各 只锥形瓶中， 加浓度为1.26mg/mL绿原酸溶液 绿原酸溶液25ml，持续 只锥形瓶中 ， 加浓度为 绿原酸溶液 ， 吸附过夜，取各自吸附液1ml定容到 定容到10ml分析绿原酸的含量， 分析绿原酸的含量， 吸附过夜，取各自吸附液 定容到 分析绿原酸的含量 计算其静态吸附量Q 计算其静态吸附量Qe。 Qe（mg/g 树脂）=（C0-Ce）V/m 树脂） （ 式中， 表示绿原酸的初始浓度； 式中，C0表示绿原酸的初始浓度； Ce表示吸附平衡后绿原酸的浓度； 表示吸附平衡后绿原酸的浓度； V表示加入样品溶液体积； 表示加入样品溶液体积； 表示加入样品溶液体积 m表示树脂干重。 表示树脂干重。 表示树脂干重
吸附模型比较
温度 (℃) ℃ 20 30 40 Langmuir方程 方程 1/Qe=1/(QaCe)+1/Q y = 0.0034x + 0.0141 y = 0.0047x + 0.0088 y = 0.0075x - 0.006 相关系数R 相关系数 2 0.9964 0.9947 0.9814 Freundlich方程 方程 Ln Qe=1/n ln Ce + ln K y = 0.7167x + 2.012 y = 0.7948x + 2.0245 y = 0.9582x + 2.1151 相关系数R 相关系数 2 0.9768 0.9736 0.9774
50 45 40 35 30 25 20 15 10 5 0 0 50 100 150 200 250 300 350 时间(min)
由上图可知， 由上图可知，载锌树脂对绿原酸的吸附起始阶段吸附速 率较快， 率较快，在120min后基本达到平衡 。 后基本达到平衡
吸 量 mg/g) 附 (mg
3.5 静态吸附等温曲线
二、实验设计
本课题是通过探索大孔树脂对绿原酸吸 附的能力以期找到纯化金银花中绿原酸的最佳 工艺条件。 工艺条件。 实验采用UV光谱法研究树脂吸附锌离子 实验采用 光谱法研究树脂吸附锌离子 的能力;以绿原酸吸附量为指标，通过 的能力 以绿原酸吸附量为指标，通过HPLC定 以绿原酸吸附量为指标 定 量分析法对树脂吸附绿原酸进行静态和动态的 研究，找到纯化绿原酸的最佳工艺条件。 研究，找到纯化绿原酸的最佳工艺条件。
称取载锌D401树脂各 树脂各0.1g，共8份，加入不同浓度的绿原 称取载锌 树脂各 ， 份 酸溶液20mL,分别于 ℃ 、 30℃ 、 40℃ ， 放置24h后测定溶 酸溶液 分别于20℃ ℃ ℃ 放置 后测定溶 分别于 液中绿原酸含量，计算平衡时吸附量和吸附液浓度， 液中绿原酸含量 ， 计算平衡时吸附量和吸附液浓度 ， 绘制载 锌树脂对绿原酸的吸附等温线。 锌树脂对绿原酸的吸附等温线 由于绿原酸在大孔树脂上进行的吸附和洗脱是可逆行为， 由于绿原酸在大孔树脂上进行的吸附和洗脱是可逆行为 ， 其发生的吸附是以范德华引力为基础的物理吸附， 其发生的吸附是以范德华引力为基础的物理吸附 ， 用固体表 面的吸附模型： 吸附等温式及Freundlich吸附经验 面的吸附模型：Langmuir吸附等温式及 吸附等温式及 吸附经验 公式来拟合树脂对绿原酸的吸附等温线。 公式来拟合树脂对绿原酸的吸附等温线。
3.1 树脂载锌量的测定 3.1.1 Zn2+ 标准曲线测定 标准曲线测定——UV法 法
1、显色方法与显色条件 、 显色溶液： 乙醇溶液； 显色溶液：0.001g/mL PAN的95%乙醇溶液； 的 乙醇溶液 缓冲溶液： 的氨水—氯化铵缓冲溶液 缓冲溶液：PH=9.2的氨水 氯化铵缓冲溶液； 的氨水 氯化铵缓冲溶液； 表面活性剂： 的十二烷基苯磺酸钠溶液； 表面活性剂：20g/L的十二烷基苯磺酸钠溶液； 的十二烷基苯磺酸钠溶液 2、测定方法： 、测定方法： 取适量的标准Zn 溶液，依次加入适量的表面活性剂、 取适量的标准 2+溶液，依次加入适量的表面活性剂、 缓冲溶液、显色剂，每加一种试剂都充分摇匀后定容至50 缓冲溶液、显色剂，每加一种试剂都充分摇匀后定容至 mL，以试剂空白为参比在 ，以试剂空白为参比在400～800 nm范围内测定络合 ～ 范围内测定络合 物的吸光度，绘制扫描曲线， 物的吸光度，绘制扫描曲线，在最大吸收波长处测定一系 列标准溶液的吸光度，绘制标准曲线。 列标准溶液的吸光度，绘制标准曲线。
1、HPLC色谱条件 、 色谱条件 Hypersil BDS C18（5um,4.6mm×250nm）; × ） 流速： 流速：0.7mL/min; 流动相：乙腈-0.6%冰醋酸溶液（15:85）； 冰醋酸溶液（ 流动相：乙腈 冰醋酸溶液 ）； 检测波长： 检测波长：327nm； ； 柱温： ℃ 柱温：30℃ 2 、对照品溶液的制备 精密称取绿原酸对照品3.7mg至10ml容量瓶中，加甲醇稀释至刻度， 容量瓶中， 精密称取绿原酸对照品 至 容量瓶中 加甲醇稀释至刻度， 摇匀，备用。 摇匀，备用。 3 、紫外吸收曲线的测定 取一定量对照品甲醇溶液置UV-1800紫外分光光度计中，以甲醇为空 紫外分光光度计中， 取一定量对照品甲醇溶液置 紫外分光光度计中 波长范围内进行扫描， 白，在200~400nm波长范围内进行扫描，测定其吸收曲线。 波长范围内进行扫描 测定其吸收曲线。 4 、标准曲线的制备 精密吸取对照品溶液1、 、 、 、 精密吸取对照品溶液 、2、3、4、5µL，分别注入液相色谱仪中，测 ，分别注入液相色谱仪中， 定其峰面积。以对照品进样量为横坐标，峰面积为纵坐标， 定其峰面积。以对照品进样量为横坐标，峰面积为纵坐标，绘制工作曲 计算得回归方程。 线，计算得回归方程。