8.常用培养基制备.
培养基的制备
培养基的制备
1.配制培养基中所需的化合物，并将其分别加入到适量的蒸馏水中。
2.将配制好的化合物充分混合，加热搅拌至化合物完全溶解。
3.调节pH值，使用盐酸或氢氧化钠来调整pH值到所需的范围。
4.加入适量的琼脂糖（用于固化培养基），充分搅拌至琼脂糖完全溶解。
5.倒入细菌平板或试管中，待培养基凝固后即可使用。
注意事项：
1.所有容器和仪器必须完全干净，以避免细菌污染。
2.培养基中添加的化合物必须按正确的比例配制，否则会影响到细菌的生长。
3.pH值必须精确调节，否则可能会影响到细菌的生长。
4.培养基必须严格遵守使用期限，过期的培养基可能会导致细菌污染和生长受阻。
各种培养基配方范文
各种培养基配方范文
培养基是用于细菌、真菌、植物细胞等生物的培养和繁殖的一种营养
物质。不同生物种类和培养目的需求不同，所以有许多种不同的培养基配方。以下是几种常见的培养基配方：
1. LB培养基（Luria-Bertani培养基）
LB培养基是一种常用于培养细菌的全面培养基，其配方包括：5g酵
母膏、10g蛋白胨、10g氯化钠，可以用1升蒸馏水溶解，调节pH至7.0。LB培养基可用于大多数菌种的培养，是最常用的细菌培养基之一
2. TSB培养基（Tryptic Soy Broth培养基）
TSB培养基是一种适用于多种细菌的全面营养培养基，其配方包括：
15g胰胨蛋白胨、5g酵母膏、5g氯化钠，可以用1升蒸馏水溶解，调节
pH至7.3、TSB培养基可用于培养细菌、真菌等微生物。
3. MS培养基（Murashige and Skoog培养基）
MS培养基是一种用于植物组织培养的配方，适用于各种植物种类的
生长和繁殖。其配方包括：4.4gMS盐基础培养基粉、30g蔗糖，可以用1
升蒸馏水溶解，调节pH至5.8、MS培养基还可以根据不同植物种类的需
求调整添加适当的植物激素。
4. YPD培养基（Yeast Peptone Dextrose培养基）
YPD培养基是用于酵母菌培养的常用培养基，其配方包括：10g蛋白胨、20g葡萄糖、20g酵母浸出物，可以用1升蒸馏水溶解，调节pH至
6.0。YPD培养基可满足酵母菌对碳源、氮源等营养物质的需求。
5. SDA培养基（Sabouraud Dextrose Agar培养基）
SDA培养基是一种常用的真菌培养基，其配方包括：20g葡萄糖、15g 琼脂、10g酵母提取物，可以用1升蒸馏水溶解，调节pH至5.6、SDA培养基可用于分离和培养真菌。
真菌常用培养基配方
[沙氏葡萄糖蛋白胨琼脂，沙堡弱培养基，SDA]
（一）组成
葡萄糖 40.0g
蛋白胨 10.0g
琼脂12.0～15.0g
蒸馏水 1000ml
（二）制法
上述混合后加入200mg氯霉素，121摄氏度10分钟灭菌后备用。
（三）目的
是常用的分离或保存菌种的培养基。
[沙氏液基，SDB]
（一）组成
葡萄糖 40.0g
蛋白胨 10.0g
蒸馏水 1000ml
（二）制法
上述混合后加入200mg氯霉素，121摄氏度10分钟灭菌后备用。
[加抗生素沙氏葡萄糖蛋白胨琼脂基，SDA with antibiotic]
（一）组成
葡萄糖 40.0g
蛋白胨 10.0g
琼脂12.0～15.0g
蒸馏水 1000ml
（二）制法
上述混合后加入200mg氯霉素。250mg放线菌酮，121摄氏度10分钟灭菌后备用。[改良沙氏葡萄糖蛋白胨琼脂基，modified SDA]
（一）组成
葡萄糖 20.0g
蛋白胨 10.0g
琼脂12.0～15.0g
蒸馏水 1000ml
（二）制法
上述混合后121摄氏度10分钟灭菌后备用。
（三）目的
保存菌种培养基。
[马铃薯葡萄糖琼脂，PDA]
（一）组成
马铃薯 200.0g
葡萄糖 20.0g
琼脂12.0～15.0g
蒸馏水 1000ml
（二）制法
先将马铃薯洗净去皮切片，加水180ml，煮沸30分钟后过滤，再加葡萄糖、琼脂，将过滤液补足到1000ml，121摄氏度灭菌后备用。
（三）用途
此培养基是培养真菌较好的培养基，同时也是鉴定真菌较好的培养基之一。鉴定皮肤癣菌一般不用此培养基。
[玉米吐温80琼脂，CMA with Tw80]
实验室常用培养基配方及制备方法
实验室常用培养基配方及制备方法
实验室中常用的培养基有很多种，不同的培养基适用于不同类型的微生物，如细菌、真菌或细胞系等。下面将介绍几种常用培养基的配方及制备方法。
1. LB培养基（Luria-Bertani培养基）
LB培养基常用于大肠杆菌等细菌的培养。其配方如下：
- Tryptone：10g/L
- Yeast extract：5g/L
-NaCl：10g/L
将上述成分完全溶解于适量蒸馏水中，调节pH至7.0。用自动过滤器过滤液体得到无菌的LB培养基。分装后在121℃高压灭菌器中高压灭菌20分钟即可。
2. Sabouraud葡萄汁蘑菇培养基
Sabouraud培养基常用于真菌的培养。其配方如下：
- Peptone：10g/L
- Dextrose：40g/L
将上述成分完全溶解于适量蒸馏水中，调节pH至5.6、用自动过滤器过滤液体得到无菌的Sabouraud培养基。分装后在121℃高压灭菌器中高压灭菌20分钟即可。
3. DMEM培养基（Dulbecco's Modified Eagle Medium）
DMEM培养基常用于细胞系的培养。其配方如下：
-DMEM粉：每升DMEM培养基50g
-细胞因子或血清等:根据实验要求添加
将DMEM粉溶解于适量蒸馏水中，并根据实验要求添加适量的细胞因子或血清。调节pH至7.2-7.4、用自动过滤器过滤液体得到无菌的DMEM 培养基。分装后在121℃高压灭菌器中高压灭菌20分钟即可。
4.M9液体培养基
M9液体培养基是一种常用于细菌的最小培养基，适用于检验细菌的营养需求。其配方如下：
146种常用培养基配方
146种常用培养基配方
常用培养基是微生物学实验室中常见的一种实验材料，用于培养和繁殖微生物。根据不同的微生物种类和培养需求，常用培养基可以有多种不同的配方。下面将介绍一些常用的培养基配方，并对其成分和应用进行简要介绍。
1. 营养琼脂培养基（Nutrient Agar）
成分：肉汤、琼脂、葡萄糖、盐等。
应用：常用于一般微生物的培养和分离。
2. 大肠杆菌培养基（Luria-Bertani Agar）
成分：酵母提取物、琼脂、葡萄糖、氯化钠等。
应用：适用于大肠杆菌等革兰氏阴性菌的培养。
3. 菌落计数培养基（Plate Count Agar）
成分：琼脂、肉汤、葡萄糖、琼脂胆盐、酵母提取物等。
应用：用于菌落计数和微生物总数的测定。
4. 选择性培养基（Selective Agar）
成分：琼脂、肉汤、葡萄糖、抗生素等。
应用：通过添加抗生素等物质，选择性地培养特定的微生物。
5. 巴斯德培养基（Pasteur Agar）
成分：琼脂、肉汤、葡萄糖等。
应用：常用于无菌实验和微生物的贮存。
6. 铁琼脂培养基（Iron Agar）
成分：琼脂、肉汤、葡萄糖、硫酸亚铁等。
应用：用于微生物对铁的利用能力的测试。
7. 马铃薯葡萄糖琼脂培养基（Potato Dextrose Agar）
成分：马铃薯汁、葡萄糖、琼脂等。
应用：常用于真菌的培养和繁殖。
8. 洗涤剂含氧琼脂培养基（Tween 80 Agar）
成分：琼脂、肉汤、葡萄糖、洗涤剂Tween 80等。
应用：用于细菌的产气试验。
9. 黄曲霉培养基（Aspergillus Agar）
各种培养基配方范文
各种培养基配方范文
以下是一些常见的培养基配方：
1.LB培养基配方：
-水：1000mL
-蛋白胨：10g
-酵母提取物：5g
-NaCl：10g
*将以上成分溶解在水中，并调节pH至7.0。加热至沸腾，搅拌溶解完全后，用纸质过滤器过滤消毒，装入培养瓶中。
2.TSB培养基配方：
-水：1000mL
-蛋白胨：17g
-酵母提取物：3g
-葡萄糖：2.5g
-NaCl：5g
*将以上成分溶解在水中，并调节pH至7.0。加热至沸腾，搅拌溶解完全后，用纸质过滤器过滤消毒，装入培养瓶中。
3.M9盐基培养基配方：
-水：1000mL
-Na2HPO4：6g
-KH2PO4：3g
-NaCl：0.5g
-NH4Cl：1g
*将以上成分溶解在水中，并调节pH至7.0。加热至沸腾，搅拌溶解完全后，用纸质过滤器过滤消毒，装入培养瓶中。
4. MacConkey琼脂培养基配方：
-水：1000mL
-蛋白胨：17g
-胆盐混合物：1.5g
-红薯提取物：10g
-中性红：0.03g
-结晶紫：0.001g
-蔗糖：10g
-氯化钠：5g
*将以上成分溶解在水中，并调节pH至7.1、加热至沸腾，搅拌溶解完全后，用纸质过滤器过滤消毒，装入培养瓶中。
5. Sabouraud琼脂培养基配方：
-水：1000mL
-葡萄糖：40g
-氯化钠：5g
-氯化钾：1g
-磷酸二氢钾：1g
-氯化镁：0.5g
-氯化钙：0.01g
-硫酸亚铁：0.5g
-红曲霉素：0.05g
*将以上成分溶解在水中，并调节pH至5.6、加热至沸腾，搅拌溶解完全后，用纸质过滤器过滤消毒，装入培养瓶中。
以上是一些常见的培养基配方，不同的微生物或细胞需要不同的培养基来提供适合它们生长和繁殖的营养条件。因此，在实际使用时，需要根据具体需求和文献资料进行配方的选择和调整。
常用培养基配方汇总
常用培养基配方汇总
1. 营养琼脂培养基 (Nutrient Agar)
- 夏洛特奥康纳 (Charlote A. O'Connor) 配方:
-蛋白胨:5克
-麦芽提取物:3克
-胰蛋白酶胨:1.5克
-硫酸镁:0.2克
-地膜:15克
-pH值调整到7.2-7.4
-用1L水来溶解以上成分，加热煮沸后冷却并灭菌。
2. 肉蔗糖琼脂培养基 (Tryptic Soy Agar, TSA)
- 条件反射琼脂 (孟德尔和赛尼·特鲁斯 ('Sneath and Tres') 配方):
-牛肉蛋白胨:17克
-大豆酪蛋白胨:3克
-肉汤提取物:5克
-葡萄糖:2.5克
-地膜:15克
-pH值调整到7.2-7.4
-用1L水来溶解以上成分，加热煮沸后冷却并灭菌。
3. MAC琼脂培养基 (MacConkey Agar)
- 麦康奈 (MacConkey) 配方:
-紫胆杆菌胨:17克
-葡萄糖:1.5克
-硫酸盐:1.5克
-中性红:0.03克
-石蕊:0.3克
-氯化钠:5克
-地膜:10克
-pH值调整到7.1-7.5
-用1L水来溶解以上成分，加热煮沸后冷却并灭菌。
4. LB琼脂培养基 (Luria-Bertani Agar)
- 古斯塔夫·诺维斯 ('Gustaf Novis') 配方:
-研磨大豆饼粉:10克
-酵母提取物:5克
-部分脱脂酪蛋白:5克
-氯化钠:1克
-地膜:15克
-pH值调整到7.2-7.4
-用1L水来溶解以上成分，加热煮沸后冷却并灭菌。
5. 马铃薯葡萄糖琼脂培养基 (Potato Dextrose Agar, PDA)
- 林登麦卡蒂 ('Lindenmuth and McCarty') 配方:
常用培养基配制
常用培养基
参考文献
1.Atlas, R.M., Handbook of Microbiological Media, second edition, Ed. Parks,
L.C., CRC Press, N.Y., 1997.
2.Sambrook, J., et al., Molecular Cloning: A Laboratory Manual, second edition,
Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, NY, A1.2-A2.12, 2001.
常用储存液
参考文献
1.Atlas, R.M., Handbook of Microbiological Media, second edition, Ed. Parks,
L.C., CRC Press, N.Y., 1997.
2.Sambrook, J., et al., Molecular Cloning: A Laboratory Manual, second edition,
Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, NY, A1.2-A2.12, 2001.
常用缓冲液
参考文献
1.Atlas, R.M., Handbook of Microbiological Media, second edition, Ed. Parks,
L.C., CRC Press, N.Y., 1997.
实验室常用培养基的配制方法
实验室常用培养基的配制方法
实验室中常用的培养基有很多种，包括通用培养基、选择性培养基、富集培养基等。下面以常用的LB培养基和M9培养基为例，介绍它们的配制方法。
1. LB培养基（Luria-Bertani agar）
LB培养基是一种通用培养基，适用于许多不同类型的细菌。它由三种主要成分组成：蛋白胨、酵母提取物和氯化钠。
配方如下：
-蛋白胨：10克
-酵母提取物：5克
-NaCl：10克
-精制水：1000毫升
步骤如下：
1)在一个大容量烧杯中加入蛋白胨、酵母提取物和NaCl。
2)加入适量的精制水，搅拌溶解。
3) 将溶液移至一个继续器中，并用精制水补足至1000ml。
4)蓄满培养基的瓶子，盖上盖子，并使用自动压力灭菌器进行高压灭菌，或者将瓶子放入高压灭菌器中，将压力调至15磅（每平方英寸）。
2.M9培养基
M9培养基是一种无机盐培养基，常用于细菌的生长和培养。它的配方相对简单，由无机盐、葡萄糖和维生素B1组成。
配方如下：
-Na2HPO4：6克
-KH2PO4：3克
-NaCl：0.5克
-NH4Cl：1克
-葡萄糖：0.4克
-维生素B1：0.1克
-精制水：1000毫升
步骤如下：
1)在一个大容量烧杯中加入Na2HPO4、KH2PO4、NaCl和NH4Cl。
2)加入一部分的精制水，搅拌溶解。
3)加入葡萄糖和维生素B1，搅拌均匀。
4) 将溶液移至一个继续器中，并用精制水补足至1000ml。
5)蓄满培养基的瓶子，盖上盖子，并使用自动压力灭菌器进行高压灭菌，或者将瓶子放入高压灭菌器中，将压力调至15磅（每平方英寸）。
常用培养基的制备及注意事项
常用培养基的制备及注意事项
培养基是细菌、真菌、细胞等微生物进行繁殖和培养的营养地，广泛
应用于微生物学和生物技术领域。下面将介绍几种常用的培养基的制备方
法及注意事项。
1.琼脂培养基：
琼脂培养基是最常见的一种培养基，它以琼脂凝胶为基质，通过加入
不同的营养成分，满足微生物的生长需求。制备方法如下：
1）称取适量琼脂，加入适量蒸馏水中搅拌均匀。
2）加入适量皂液，加热融化琼脂。
3）待琼脂溶液冷却至40°C左右时，加入已经制备好的培养基成分，如碳源、氮源、维生素等。
4）搅拌均匀，调整pH值，加热煮沸。
5）倒入装有适量培养基的培养皿中，使其凝胶化。
注意事项：
1）使用较干燥的琼脂可减少湿润时间。
2）煮沸或加热时间不宜太长，以免过度加热导致一些营养成分失活。
3）制备过程中要注意无菌操作，避免细菌等微生物污染。
2.液体培养基：
液体培养基适用于微生物的扩大培养、动态研究等实验。制备方法如下：
1）称取适量蒸馏水，加热至沸腾。
2）加入培养基成分，如碳源、氮源、维生素等，搅拌均匀。
3）调整pH值，加热至沸腾。
4）倒入试管或烧杯中，用胶塞或铝箔盖好。
注意事项：
1）加热过程中要注意及时搅拌，避免成分沉积或变色。
2）制备前要将试管或烧杯等容器进行高温灭菌处理。
3）使用培养基前要进行菌液均匀混合，避免因成分沉积而导致的营养不均匀。
3.固体选择性培养基：
固体选择性培养基是指根据微生物对特定组分的感受性选择性地制备的培养基。制备方法如下：
1）制备好的琼脂培养基加热至融化，放置冷却至40°C左右。
2）加入特定的抗生素、色素或指示剂等，搅拌均匀。
常用细菌培养基制备及注意事项
常用细菌培养基制备及注意事项
细菌培养基制备是细菌繁殖和生长的唯一途径，它是细菌数量检测、菌液量检验、药物敏感性测定和细菌学研究等细菌学实验的基础。细菌培养基可以为细菌提供营养元素，使细菌获得有生命活动所必需的营养成分，从而使菌落的生长和增殖。此外，还可以用来维持支持细菌的正常生理环境，如温度和酸碱度等。
细菌培养基的制备需要满足一定的技术要求，可以采用配制、消毒和培养使用。首先，根据配方和实验要求，将碱、游离氨基酸、脂类、氨基葡萄糖和磷酸钙等营养元素以适当的重量称取，用普通净水溶解，然后按照配比，用收到的细菌消毒器将培养基管消毒，加热处理掉落的细菌，再将可溶性的物质混合溶于普通净水中，搅拌混匀内容物，然后放入培养基瓶，长时间搅拌，升温到室温，放置培养箱中均匀灭菌。
在细菌培养基制备时应注意以下几点：
1、在配制时，首先应采用熔融技术将各种营养元素混合，混合前应先将各元素严格称取，费精心搅拌，以防出现混淆，造成不必要的偏差。
2、在混合时，应注意混杂物质的温度应保持在常温左右，尽量减少成分的损失，以保证培养基的质量。
3、在培养前，应将培养基瓶灭芽，以免细菌的污染，同时应把被实验的细菌以消毒仪处理，以防细菌感染。
4、培养器应用时应小心谨慎，以防细菌受到污染，培养箱中的
细菌应调整到室温以及合适的温度、湿度和酸碱度。
5、在细菌培养时，应定期对细菌进行检测，以检查培养基是否被污染，如果出现异常，应立即将其清除更换。
6、细菌培养实验完成后，应及时进行清洗彻底消毒，防止培养基污染，使其保持原有质量。
综上所述，细菌培养基制备应注意操作规范、材料的准确量取和温度控制，消毒使用，检测异常和及时清洗消毒等。只有这样，才能有效地保证培养基质量，使细菌繁衍生息，有利于实验结果的准确性。
常用培养基的配方
伊红美蓝培养基
原理
一般用来鉴定大肠杆菌;
伊红为酸性染料,美蓝为碱性染料;
当大肠杆菌分解乳糖产酸时细菌带正电荷被染成红色,再与
美蓝结合形成紫黑色菌落,并带有绿色金属光泽;
在碱性环境中不分解乳糖产酸的细菌不着色,伊红和美蓝不
能结合,故沙门氏菌等为无色或琥珀色半透明菌落;金葡菌在此培养基上不生长;
常用的伊红美蓝乳糖培养基,可用来鉴别饮用水和乳制品中
是否存在大肠杆菌等细菌;如果有大肠杆菌,因其强烈分解乳糖而
产生大量的混合酸,菌体带H+,故菌落被染成深紫色,从菌落表面
的反射光中还可以看到金属光泽;
用伊红美蓝培养基鉴定水中大肠杆菌
步骤如下：
①制作伊红美蓝培养基,趁热注入培养皿中,凝成平板,待用;
②用灭过菌的锥形瓶盛取河水或沟水,按1：10稀释;
③取0.1毫升稀释液接种于伊红美蓝培养基上;用平板划线
分离法进行分离;
④将划线后的培养皿倒置37℃温箱中培养18～24小时;培养基中会出现大肠杆菌菌落,菌落中心呈暗蓝黑色,发金属光泽;
⑤将菌落接种于斜面培养基上由营养琼脂培养基制成;
蛋白胨 10g
乳糖 10g
磷酸氢二钾 2g
琼脂 20~30g
蒸馏水 1000ml
2%伊红水溶液 20ml
0.5 %美蓝水溶液 13ml
储备培养基的制备
先将琼脂加至900ml蒸馏水,加热溶解,然后加入磷酸氢二钾及蛋白胨,混匀使之溶解,再以蒸馏水补足至1000ml,调整PH为7.2~7.4;趁热用脱脂棉或绒布过滤,再加入乳糖,混匀后定量分装于烧瓶内,置高压蒸汽灭菌器内以115℃灭菌20min,贮存于冷暗处备用;
制法
将蛋白胨、磷酸盐和琼脂溶解于蒸馏水中,校正PH,分装于烧瓶内,121℃高压灭菌15min备用;临用时加入乳糖并加热溶化琼脂,冷至50～55℃,加入伊红和美蓝溶液,摇匀,倾注平板;
常用培养基的制备、灭菌与消毒幻灯片PPT
消毒与灭菌
消毒：消灭病原菌和有害微生物的营养体 灭菌：杀灭一切微生物的营养体，芽胞和孢子。
方法：
一、物理的方法：加热、过滤、辐射 二、化学的方法：用化学试剂抑制或杀灭微生物。
主要破坏细菌代谢机能。如重金属离子，磺胺 类药物及抗生素等。
加热法：
干热法：火焰灼烧灭菌和热空气灭菌。
1、火焰灼烧适用于接种环、接种针和金属用具如 镊子等，试管口和瓶口，涂布用玻璃棒。
2、制备污水稀释液：10g土样，参加90ml 无菌水中，在三角瓶中振摇20min。取0.5ml 参加 盛有4.5ml无菌水的试管中，以此类推，制成不同稀 释度。
3、涂布：将上述每种培养基平板底面标记 稀释度，然后用无菌吸管从最后三种稀释度，即104、10-5和10-6的试管中吸取0.1ml对号放入平板上， 用玻棒涂布。
可用胶塞代替棉塞或在斜面上 覆盖一层无菌液体石蜡来进一步延长 保存期。 2、载体法
3、悬液法 将细菌、酵母菌细胞悬浮在一定的溶液中保存。
溶液包括蒸馏水、糖溶液、磷酸缓冲液、食盐水等。
4、冷冻法 使菌种始终存放在低温环境下的保藏方法。包括低温法和液
氮法。 此法关键是要抑制细胞的冷冻损伤。注意控制降温速率及保
4、培养：高氏I号和查氏倒置培养于28℃培 养箱中培养3-5days，牛肉膏蛋白胨琼脂培养基在 37℃培养1-2days。
5、挑菌落：转至斜面，检查是否一致，保存。
各种培养基的配方
各种培养基的配方
培养基是科学研究中用于培养和繁殖细胞、组织和微生物的基础性工具。不同类型的细胞和微生物需要不同的培养基来提供适宜的环境和营养物质。下面将介绍几种常用的培养基的配方。
1. LB培养基（Luria-Bertani培养基）：
成分：
-蛋白胨：10g
-酵母提取物：5g
-NaCl：10g
-纯水：1L
2.硫酸亚铁葡萄糖培养基：
成分：
-硫酸亚铁：0.2g
-葡萄糖：1g
-磷酸二氢钠：0.5g
-硫酸镁：0.1g
-硫酸铵：0.5g
-氯化钠：5g
-纯水：1L
3.TSB培养基（液体肉汤培养基）：成分：
-蛋白胨：17g
-酵母提取物：3g
-NaCl：5g
-纯水：1L
4.TSB培养基（固体肉汤培养基）：成分：
-蛋白胨：30g
-酵母提取物：5g
-NaCl：5g
-琼脂：15g
-纯水：1L
5.M9盐基培养基：
成分：
-Na2HPO4：6g
-KH2PO4：3g
-NaCl：0.5g
-NH4Cl：1g
-MgSO4：0.1g
-纯水：1L
6.YPD培养基（酵母精蛋白培养基）：
成分：
-蛋白胨：10g
-酵母提取物：20g
-葡萄糖：20g
-纯水：1L
7. DMEM培养基（Dulbecco's修改Eagle's培养基）：成分：
-高糖DMEM：950mL
-胎牛血清：50mL
- L-谷氨酰胺：2 mmol/L
-纯水：1L
8.RPMI-1640培养基：
成分：
-RPMI-1640培养基：950mL
-胎牛血清：50mL
- L-谷氨酰胺：2 mmol/L
-纯水：1L
9.MRS培养基（乳酸杆菌选择性培养基）：
成分：
-蛋白胨：10g
-肉汤：10g
常用培养基配方范文
常用培养基配方范文
培养基配方是微生物学研究的基础，它们提供了养分和条件，促进微
生物的生长和繁殖。常用培养基配方有多种，以下是几个常用的配方范文。
一、莱文斯坦－鲍德尔培养基（Luria-Bertani agar）配方：
成分：
1.蛋白胨：10克
2.酵母提取物：5克
3.食盐：10克
4.琼脂：15克
5.蒸馏水：1000毫升
6.高氯酸钠（0.1M）：2毫升（pH
7.2）
制备方法：
1.将蛋白胨、酵母提取物和食盐加入蒸馏水中，加热至溶解。
2.加入琼脂并搅拌均匀，再加入高氯酸钠调节pH值。
3.煮沸1~2分钟，然后分装入培养皿中。
注意事项：
1.注意消毒操作，以防止污染。
2.琼脂的煮沸时间通常为15~20分钟。
二、营养琼脂培养基（Nutrient agar）配方：
成分：
1.蛋白胨：5克
2.细胞色素：1克
3.维生素B1：0.1克
4.卵黄：10克
5.食盐：5克
6.琼脂：15克
7.蒸馏水：1000毫升
制备方法：
1.将蛋白胨、细胞色素、维生素B1、卵黄和食盐加入蒸馏水中并加热溶解。
2.加入琼脂并搅拌均匀。
3.煮沸1~2分钟，然后分装入培养皿中。
注意事项：
1.注意消毒操作，以防止污染。
2.煮沸时间可根据需要适当延长，但不要超过20分钟。
三、马尿素琼脂培养基（MacConkey agar）配方：
成分：
1.蛋白胨：17克
2.硼砂：1.5克
3.细胞色素：2.5克
4.氯化钠：5克
5.水合甲基红：0.03克
6.钴绿：0.015克
7.红绿二色砂：0.15克
8.琼脂：13.5克
9.蒸馏水：1000毫升
制备方法：
1.将蛋白胨、硼砂、细胞色素、氯化钠、水合甲基红、钴绿和红绿二色砂加入蒸馏水中并加热溶解。
各种培养基的配方
各种培养基的配方
在微生物学中，培养基是为微生物提供营养和生长所必需的营养物质
的混合物，可以根据微生物的特性和需求来设计不同成分的培养基。不同
种类的微生物需要不同的培养基来生长和繁殖，为了获得最佳的生长效果，需根据微生物的特性制备相应的培养基。下面介绍几种常用的培养基及其
配方。
1. 加尔沙基培养基（Luria-Bertani，LB培养基）
LB培养基是一种常用的细菌培养基，适用于大多数细菌的培养。其
成分包括牛肉浸出物、酵母提取物和氯化钠，PH为7.0。
配方：
- 水：1000ml
-氯化钠：10g
-酵母提取物：5g
-牛肉浸出物：10g
LB培养基的主要特点是富含氨基酸和碳源，适合于细菌的快速生长。
2. PDA培养基（Potato Dextrose Agar）
PDA培养基是一种适合真菌和霉菌生长的培养基，成分简单易得。它
主要包括马铃薯提取物、葡萄糖和琼脂。PDA培养基是一种半固体培养基，适合于真菌的产孢。
配方：
-马铃薯提取物：200g
-葡萄糖：20g
-琼脂：20g
-静置180s后，灭菌
PDA培养基适合于真菌和霉菌的生长，常用于菌落计数和生长的研究中。
3.营养琼脂培养基
营养琼脂培养基是一种通用的培养基，适用于多种微生物的培养。它主要包括蛋白水解物、酵母提取物、氯化钠和琼脂。
配方：
-蛋白水解物：5g
-酵母提取物：1g
-氯化钠：5g
-琼脂：15g
- 水：1000ml
-蒸馏后灭菌
营养琼脂培养基适合于大多数微生物的生长，是最常用的培养基之一
4. 马尼特尔-梅尔特培养基（Mannitol-Salt Agar，MSA）
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
&项目八：常用培养基制备
学习目标
能力目标：会进行常用细菌培养基的配制；会正确矫正培养基ｐＨ值；
会对物品进行常规消毒和灭菌。
知识目标：明确常用培养基制备原理、种类及其用途；知道常用培养
基制备程序；知道常用消毒、灭菌的方法。
态度目标：严格按照操作规程进行操作，养成良好的习惯；严格无菌
操作，注意生物安全；配制培养基时准确称量，认真操作。
一、知识链接
培养基是人工地将多种物质按各种微生物生长的需要配置而成的一种混和营养基质，用以培养或分离各种微生物。细菌生长繁殖需要一定的营养物质，不同的细菌对营养的要求不同，但细菌生长需要的营养物质应含有氮源、碳源、无机盐类、生长因子和水等。
（一）培养基的种类与用途
１．根据培养基的物理性状分类
（１）液体培养基：呈液体状态的培养基为液体培养基。在实验室中主要用于微生物的生理、代谢研究和获取大量菌体，在发酵生产中绝大多数发酵都采用液体培养基。
（２）固体培养基：呈固体状态的培养基都称为固体培养基。常用的固体培养基是在液体培养基中加入凝固剂（约２％的琼脂或５％～１２％的明胶），加热至１００℃，然后再冷却凝固而成的。固体培养基主要用于菌种分离、鉴定、菌落计数、抗菌药物敏感试验等。
（３）半固体培养基：半固体培养基是指在液体培养基中加入少量凝固剂（如０．２％～０．５％的琼脂）而制成，可以通过穿刺培养观察细菌的运动能力、厌氧菌的培养及菌种保藏等。
２．根据培养基的功能分类
（１）基础培养基：含有微生物需要的最基本营养成分，可供大多数微生物生长。
（２）营养培养基：在基础培养基中加入葡萄糖、血液、血清、或酵母浸膏等有机物，可供营养要求较高的细菌生长，如血平板、血清肉汤等。
（３）选择性培养基：是利用不同种类细菌对各种化学物质的敏感性不同，制成有利于选择欲分离的细菌而抑制其它细菌生长的培养基。如在培养基中加胆酸盐能抑制革兰氏阳性菌的生长，有
利于革兰氏阴性的肠道致病菌生长。
（４）鉴别培养基：供细菌生化反应试验，借以鉴定细菌之用。如在无糖基础培养基中加入乳糖和ｐＨ指示剂，接种细菌后培养，如细菌能分解乳糖产酸，则指示剂变色，不分解乳糖则颜色不变。如双糖或三糖铁培养基。
（５）厌氧培养基：专性厌氧菌须在无氧条件中才生长。进行厌氧培养的方法，一是将培养基放在无氧环境中培养；另一个办法是在培养基中加入还原性物质，降低培养基的氧化还原电势，并在培养基表面上用凡士林或石蜡封闭，使培养基与外界空气隔绝，让培养基本身成为无氧的环境。如庖肉培养基。
（二）培养基的制备程序
配制一般培养基的主要程序可分为调配、溶化、矫正ｐＨ值、澄清过滤、分装、灭菌及检定等步骤。
１．调配 按培养基处方准确称取各成分，混悬于蒸馏水中。先在三角烧瓶中加入少量蒸馏水，再加入蛋白胨、琼脂等各种固体成分，以防蛋白胨等粘附于瓶底，然后再以剩余的水冲洗瓶壁。
２．溶化 将各种成分混匀于水中，加热溶解，溶化完毕后，应注意补足失去的水分。
３．矫正ｐＨ值 应用酸度计准确可靠，但常用的是比色法或ｐＨ试纸。一般细菌培养基须矫正ｐＨ至７．４～７．６，此外亦有需要酸性或碱性的培养基。培养基在高压灭菌后，其ｐＨ值约降低０．１～０．２，故矫正时应比实际需要的ｐＨ值高０．１～０．２。
４．澄清过滤 培养基配成后一般都有沉渣或混浊，需过滤澄清使其清晰透明方可使用，液体培养基常用滤纸过滤，固体培养基（琼脂培养基）可在加热融化后需趁热以纱布或两层纱布中夹脱脂棉过滤。
５．分装 根据需要将培养基分装于不同容量的三角烧瓶、试管内。分装的量不能超过容器的２／３，以免灭菌时外溢。琼脂斜面分装量为试管容量的１／４～１／３，灭菌后须趁热放制成斜面，斜面长度约为试管长度的２／３。半固体斜面分装量为试管长度的１／３，灭菌后趁热直立，待冷后凝固。高层琼脂分装量约为试管长度的１／３。灭菌后直立凝固待用。如高层琼脂斜面灭菌后略放斜，使之既有高层又有斜面。琼脂平板须将灭菌（或已灭菌好加热融化）后的培养基冷至５０℃左右，以无菌方式倾入灭菌平皿内，内径９ｃｍ的平皿倾注培养基约１３～１５ｍｌ，轻摇平皿底，使培养基平铺于平皿底部，待凝固后即成。
６．灭菌 不同成分、不同性质的培养基，可采用不同的灭菌方法。①高压蒸气灭菌法：一般培养基高压灭菌１０３．４３ｋＰａ， １２１℃，１５～２０分钟即可；含糖的培养基高压灭菌５５ｋＰａ ，１１３℃，１５分钟，以免糖类被破坏。②流通蒸气灭菌法：凡不耐高热的物质，如糖类、明胶、血清等培养基的灭
菌，可用流通蒸气灭菌，使温度达８０～１００℃之间，维持３０分钟，每天一次，连续３天。③血清凝固器灭菌：含血清、鸡蛋的培养基，可应用血清凝固器进行间歇灭菌。④滤过除菌法，可用于糖溶液、尿素液、血清等因加热即破坏的物质，可用滤菌器过滤除菌。
７．检定 每批培养基制成后须经检定后方可使用，检定时将培养基置３５℃温箱内培养２４小时后，看是否有细菌生长，以此来证明无菌，同时用已知菌种检查在此培养基上的生长繁殖及生化反应情况，符合要求者方可使用。
８．保存 制好的培养基，不宜保存过久，以少量、勤做为宜。每批应注明制作日期。平日少量分装的试管培养基均宜存放于４℃冰箱内，其他基础培养基等可保存于冷暗处。
二、技能训练
（一）训练目的
１．掌握培养基制备的基本过程。
２．熟悉常用培养基的原理、种类及其用途。
（二）材料准备
１．试剂 基础培养基干粉、营养培养基干粉、半固体培养基干粉、ＳＳ（沙门氏菌－志贺氏菌琼脂）培养基干粉、麦康凯培养基干粉、脱纤维羊血。
２．器材及其他 试管、三角瓶、烧杯、量筒、玻璃棒、分装器、天平、牛角匙、高压蒸汽灭菌锅、ｐＨ试纸、棉花、牛皮纸、记号笔、麻绳、纱布、吸管、培养皿、电烘箱、注射器、微孔滤膜过滤器、镊子等。
（三）训练内容
１．培养基制备的基本过程
（１）称量：按培养基配方比例依次准确地称取酵母提取物、蛋白胨、ＮａＣｌ放入烧杯中。蛋白胨很易吸潮，在称取时动作要迅速。
（２）溶化：在上述烧杯中可先加入少于所需要的水量，用玻棒搅匀，然后加热使其溶解。待完全溶解后，补充水分到所需的总体积。如果配制固体培养基，将称好的琼脂放入已溶化培养基中，再加热溶化，在琼脂溶化的过程中，需不断搅拌，以防琼脂糊底使烧杯破裂，最后补足所失的水分。
（３）调ｐＨ：在未调ｐＨ前，先用精密ｐＨ试纸测量培养基的原始ｐＨ值，如果ｐＨ偏酸，用滴管向培养基中逐滴加入１ｍｏｌ／Ｌ ＮａＯＨ，边加边搅拌，并随时用ｐＨ试纸测其ｐＨ值，直至ｐＨ达７．６。反之，则用１ｍｏｌ／Ｌ ＨＣｌ进行调节。注意ｐＨ值不要调过头，以避免回调，否则，将会影响培养基内各离子的浓度。对于有些要求ｐＨ值较精确的微生物，其ｐＨ值的调节可用酸度计进行。