HPLC-MS法测定人血浆中那格列奈浓度

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米格列奈钙片健康人体药动学研究

米格列奈钙片健康人体药动学研究恽芸蕾;高守红;樊成辉;缪海均【摘要】目的建立测定人血浆中米格列奈钙的LC-MS/MS法,并应用于健康人体药动学研究.方法 30名健康志愿者,随机分为3组(每组10人,男女各半),分别口服米格列奈钙片5、10、20 mg,采用非房室模型统计矩法计算药动学参数.结果健康受试者单次给药5、10、20 mg后,主要药代动力学参数分别为Cmax(799.5±189.8)、(1 689.8±348.4)和(3032.9±755.6)ng/ml;tmax(0.38±0.16)、(0.43±0.16)和(0.54±0.26)h;AUC0～10(1 051.3±276.4)、(2 324.5±481.8)和(5 028.8±1 283.6) ng·h/ml; AUC0～∞(1 059.4±278.2)、(2 342.8±488.6)、(5 073.9±1315.9)ng· h/ml;t1/2(1.80±0.42)、(1.68±0.37)和(1.56±0.19)h.结论本分析方法准确、灵敏,适用于米格列奈钙片的健康人体药动学研究.【期刊名称】《药学实践杂志》【年(卷),期】2014(032)001【总页数】4页(P45-48)【关键词】米格列奈钙;LC-MS/MS;药代动力学【作者】恽芸蕾;高守红;樊成辉;缪海均【作者单位】第二军医大学附属长征医院药学部,上海200003;第二军医大学附属长征医院药学部,上海200003;第二军医大学附属长征医院药学部,上海200003;第二军医大学附属长征医院药学部,上海200003【正文语种】中文【中图分类】R969.1米格列奈是继瑞格列奈、那格列奈后第3个格列奈类药物，是苯丙氨酸的衍生物。

四川大学华西药学院706药学综合考研试题

四川大学2009年攻读硕士学位研究生入学考试试题科目：药学综合代玛：706#专业：药理学、药物化学、药剂学、生药学、药物分析学微生物与生化药学、生物化学与分子生物学、生物医学工程；（试题共13页）(答案必须写在答题纸上,写在试题上不给分）物理化学部分（50分）一、选择题（第14题为多选题。

答案须全对才给分；其余为单选题每小题2.5分，共50分）（）1、H2(g)和N2(g)在密闭的绝热钢瓶中生成NH3(g)，则体系A. ΔU=0，ΔH<0B. ΔU=0，ΔH=0C. ΔU<0，ΔH=0D. ΔU>0，ΔH=0（）2.基尔霍夫定律(Kirchhoff’s Law)A.只适用于讨论化学反应的热效应随温度的变化B.只适用于讨论相变化时的相变热随温度的变化C.同时适用于讨论化学反应及相变化时热效应随温度的变化D.适用于讨论任何过程的ΔH随温度的变化（）3、在253k 和101325 Pa下，1 mol的过冷水结成冰，则体系、环境及总熵变应该是：A ΔS体系>0, ΔS环境>0，ΔS总>0B ΔS体系<0, ΔS环境>0，ΔS总>0C ΔS体系<0, ΔS环境<0，ΔS总<0D ΔS体系<0, ΔS环境>0，ΔS总<0（）4、2 mol理想气体经一等温可逆压缩过程，则A. ΔG>ΔAB. ΔG=ΔAC. ΔG<ΔAD.无法比较（）5、已知温度T时反应(1)H2O(g)H2(g) + 1/2 O2 (g) 的标准平衡常数K1θ及反应(2)CO2(g)CO(g)+1/2O2(g) 的标准平衡常数K2θ，则同温度下反应(3) CO(g)+H2O(g) CO2(g)+H2(g)的标准平衡常数K3θ为（假定气体均为理想气体）A K3θ=K1θ+K2θB K3θ=K1θ* K2θC K3θ=K2θ/ K1θD K3θ=K1θ/ K2θ（）6.在一个抽空的容器中，放入过量的NH 4I (s)发生下列反应并达平衡：NH 4I(s)NH 3(g)+ HI(g)2HI(g)H 2(g)+ l 2(g)则体系的相数φ、组分数K 和自由度fA. φ=2，K =2， f =2B. φ=2，K =1， f =1C. φ=2，K =2， f =1D. φ=2，K =1， f =0（）7.氯仿（A)和丙酮（B)生成恒沸混合物，最高恒沸温度为337.7K,恒沸组成中B 20%(w/w),现将组成含B 为40%(w/w)的混合液在精馏塔中分离，则：A. 可分离得纯A 和恒沸混合物B. 可分离得纯B 和恒沸混合物C. 可同时分离得纯A 和纯BD. 既不能分离得纯A,也不能分离得纯B（）8.若要使CO 2 在水中的溶解度为最大，应选择的条件是A.高温低压B.高温高压C.低温低压D.低溫高压（）9.电解质溶液在稀释过程中A.电导率增加B.电导率减少C.摩尔电导率增加D.摩尔电导率减少（）10.某电池在298 K 、101325 Pa 下的放电过程，若电池反应的可逆热Q 2=-100 J 则该反应的焓变Δt H mA. Δt H m = -100JB. Δt H m =0JC. Δt H m > -100JD. Δt H m < -100J（）11.下列电池中，反应不可逆的是A. Zn(s) | H 2S04(a) | Cu(s)B. (Pt) H 2 (p) | NaOH (a) | HgO (s) | Hg( I)C. Zn (s) | Zn 2+ (a1)|| H +(a2) | H 2(p) (Pt)D. Cu (s) | Cu 2+(a1) || Ag +(a2) | Ag (s)（）12.某化学反应其反应物消耗一半所需的时间是它消耗掉1/4所需时间的2倍，则反应级数为A. 一级B. 二级C.三级D.零级（）13. 一定温度下,在反应器中刚开始只有反应物A,结果发生如下对峙反应:下列说法中哪一项是不正确的？A 开始时A 的消耗速率最快B. 反应进行的净速率是正，逆反应速率之差C. k1/k2的值是恒定的D. 达到平衡时正、逆反应速率常数相等（）14. 一定体积的水，当聚成一个大水球，或者分散成许多小水滴，同溫度下，两种状态相比较，以下性质保持不变的有：A 表面张力 B.饱和蒸气压 C.液面下的附加压力 D.比表面E.对玻璃的润湿性（）15. 293 K 时，σ=27 X 10-3N·m-1，σ水=72 X 10-3N·m-1，σ正庚醇,水=8 x 10-3正庚醇N·m-1互相饱和后，σ’正庚醇=26 X 10-3N·m-1，σ’水=28X 10-3N·m-1，σ’正庚醇,水=σ正庚醇,水。

血浆中药物的浓度检测方法

血浆中药物的浓度检测方法一、引言血浆中药物的浓度检测是临床药学和药物研究的重要内容之一。

通过测定血浆中药物的浓度，可以评估药物的吸收、分布、代谢和排泄情况，从而指导药物的使用和剂量调整。

本文将介绍血浆中药物浓度检测的方法及其应用。

二、常用的血浆中药物浓度检测方法2.1 高效液相色谱法（HPLC）HPLC是目前应用最广泛的血浆中药物浓度检测方法之一。

它基于样品中药物与色谱柱固定相之间的相互作用，通过控制流动相的性质和流速，使药物在柱上以不同速度传输，从而实现药物的分离和定量测定。

2.2 气相色谱法（GC）GC是一种基于样品中药物在气相中的分配行为进行分离和测定的方法。

它适用于易于挥发的药物的检测，具有高分辨率和灵敏度高的优点。

然而，GC需要样品预处理的步骤较多，对仪器的要求也较高。

2.3 质谱法（MS）质谱法结合了质谱仪和色谱仪的优势，可以实现对样品中药物的高灵敏度和高选择性的检测。

质谱法广泛应用于药物代谢动力学研究和药物相互作用的研究中。

2.4 免疫测定法免疫测定法是利用抗体与药物结合的特异性来测定样品中药物浓度的方法。

常用的免疫测定法包括放射免疫测定法、酶联免疫测定法和荧光免疫测定法等。

免疫测定法具有操作简便、快速、灵敏度高的特点，但对抗体的选择和制备要求较高。

三、血浆中药物浓度检测方法的应用3.1 临床药学血浆中药物浓度检测在临床药学中起到了重要的作用。

通过监测患者血浆中药物的浓度，可以评估药物的疗效和安全性，指导药物的使用和剂量调整。

例如，对于某些具有副作用的药物，如抗癫痫药物，通过监测血浆中药物浓度，可以避免药物过量引起的不良反应。

3.2 药物研究血浆中药物浓度检测在药物研究中也有广泛的应用。

药物的吸收、分布、代谢和排泄过程可以通过检测血浆中药物浓度来研究。

这对于药物的药代动力学和药效学研究具有重要意义。

同时，血浆中药物浓度的检测也可以用于药物相互作用的研究，评估不同药物在体内的相互影响。

体内药物分析实验

1.HPLC法测定大鼠血浆中的山奈酚1.1目的要求1.掌握血浆样品的前处理方法。

2.熟悉方法回收率和萃取回收率实验操作和评价。

3.熟悉大鼠眼眶采血技术；熟悉方法学研究中其他评价内容。

1.2 主要实验材料与仪器山奈酚（Kaempferol）及其对照品，黄芩素（baicalein），抗坏血酸，肝素，β-葡萄糖醛酸苷酶（β-glucuronidase）和硫酸酯酶（sulfatase），分析纯甲醇，冰醋酸、无水乙醚，色谱纯乙腈；高效液相色谱仪，氮吹装置，恒温水浴，漩涡混合器，13000r/min台式离心机，不同规格移液枪（5, 20, 50, 100, 200, 1000μL）和容量瓶（10，25mL），5~10mL 具塞离心管若干；雄性SD大鼠（180~220g）。

1.3 实验原理山奈酚吸收进入体内后，多以二相代谢物葡萄糖醛酸苷和硫酸酯的形式存在。

由于山奈酚葡萄糖醛酸苷和硫酸酯的对照品难以获得，故采用加入硫酸酯和葡醛酸苷水解酶处理样品，使代谢物水解后测定苷元山奈酚的浓度。

实验以黄芩素为内标，HPLC法测定血浆XX奈酚浓度，对建立的方法进行方法学评价。

1.4 实验方法1.色谱条件：C18柱（250mm×4.6mm，5μm），配保护柱，柱温40℃；乙腈-0.5%冰醋酸（35:65）为流动相，流速1mL/min；检测波长370nm；进样量20μL。

2.溶液配制：取山奈酚对照品约2.5mg，精密称定，置25mL量瓶中，用甲醇溶解并定容。

精密吸取适量，分别用甲醇稀释成0.3、0.6、3、6、9、20和30μg/mL的标准系列溶液，置4℃冰箱保存。

另取黄芩素适量，精密称定，用甲醇溶解并定量稀释至0.1mg/mL的溶液，精密吸取1.5mL置10mL量瓶中，用甲醇定容，得内标溶液，置4℃冰箱保存。

3.血浆样品处理：取大鼠血浆样品120μL，加入甲醇20μL、1%冰醋酸（含2mg/mL抗坏血酸）32μL、β-葡萄糖醛酸苷酶（20U/mL）和硫酸酯酶（6U/mL）的混合水溶液50μL，37℃水浴温育30min后，加入内标溶液50μL，然后加无水乙醚2mL，漩涡混合5min，于12000r/min离心5min；取上清液在氮气流下挥干，残留物用100μL 甲醇复溶，12000r/min离心5min，取上清液进样分析。

超高效液相色谱-串联质谱在中西医药品检测与分析中的应用

2020年12月邓博等.超高效液相色谱-串联质谱在中西医药品检测与分析中的应用49超高效液相色谱-串联质谱在中西医药品检测与分析中的应用邓博，邓护军，杨飞，门靖西安万隆制药股份有限公司，西安710119摘要超高效液相色谱-串联质谱（UPLC-M S/MS)是一种高效、迅速、稳定性和精密度高的综合性分析技术,其应用前景十分广阔。

本文着重介绍了近年来UPLC- MS/MS在人体化学药品、动物体内化学药品、以及中医药分析与检测三方面的最新应用研究，并展望了其发展前景，以期为医药产品检测与分析、临床药物应用提供参考。

关键词液相色谱串联质谱中西医检测分析应用超高效液相色谱-串联质谱（UPL C - M S/ M S)检测分析技术具有高效分离度和超高灵敏度的优势，可显著提高数据分析与检测的可靠性与耐用性，增强目标化合物的分析效率与准确度，是分析检测领域内的一种综合性的分析手段[3_4]。

近年来,UPLC - M S/M S分析技术在医药[5-6]、化工[7]、生物工程[84、保健食品[1°]、特种材料"1]等众多领域应用广泛，尤其是化工与医药产品的检测与残留分析凭借U P L C- M S/M S获得了大幅度的提升与改进。

本文将重点综述U P L C- M S/M S在中西医药品检测与分析中的应用研究现状，从人体化学药品、动物体内化学药品、以及中医药分析与检测三方面归纳U P L C -M S/M S最新应用研究进展。

1 UPLC-M S/M S应用于人体化学药品的检测1.1 UPLC- M S/M S检测抗菌药物泊沙康唑是一种三唑类广谱抗真菌药物，具有高效、广谱、低毒等特点[U]。

检测该药物在人体血浆中的浓度对监测药物吸收、指导临床用药安全尤为重要[1243]。

金鸿宾等[14]建立了一种特异性强、灵敏度高的U P L C - M S/M S法测定血浆中泊沙康唑浓度方法。

液相色谱串联质谱检测血液中43种药物的方法[发明专利]

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 201910769993.1(22)申请日 2019.08.20(66)本国优先权数据201910181323.8 2019.03.11 CN(71)申请人成都民用航空医学中心地址 610200 四川省成都市双流区双流国际机场东四路成都民用航空医学中心(72)发明人席彰　周亚兰　(74)专利代理机构成都虹桥专利事务所(普通合伙) 51124代理人张小丽(51)Int.Cl.G01N 30/88(2006.01)G01N 30/06(2006.01)(54)发明名称液相色谱串联质谱检测血液中43种药物的方法(57)摘要本发明属于药物检测技术领域，具体涉及一种液相色谱串联质谱检测血液中43种药物的方法。

针对现有技术中缺乏一种能够同时检测7种常见毒品、11种降压药物、11种降糖药物以及14种精神类药物的方法，本发明提供了一种方法，包括以下步骤：a、待测样品采用乙腈沉淀蛋白；b、采用高效液相色谱-串联质谱法的多反应监测MRM模式针对所选药物进行检测，以化合物保留时间、两对或三对母离子/子离子对分段进行质谱筛查分析。

本发明方法能在25min内一次性快速准确的完成常见降血压药物、降血糖药物、精神类药物及毒品等43种药物的筛查分析，检测效率高，方法灵敏度好，适宜推广使用。

权利要求书2页说明书31页附图5页CN 110531014 A 2019.12.03C N 110531014A1.液相色谱串联质谱检测血液中43种药物的方法，其特征在于，包括以下步骤：a、采集待测抗凝血液，第一次离心，取上清液采用乙腈沉淀蛋白，涡旋混合，第二次离心，转移有机层至另一离心管中，干燥后残渣用初始比例流动相溶解，涡旋混合，第三次离心，取上清液；b、采用高效液相色谱-串联质谱法的多反应监测MRM模式对步骤a得到的上清液针对所选药物进行检测，以化合物保留时间、两对或三对母离子/子离子对分段进行质谱筛查分析。

体内药物分析技术的研究进展

体内药物分析技术的研究进展摘要】本文通过查阅近年来国内外有关体内药物分析理论的文献，结合个人的实践经验和认识，对其测定前样品的处理以及测定的基本程序等方面进行了综述。

【关键词】体内药物分析样品处理样品测定体内药物分析是药物分析的重要分支，具有自身独特的理论体系。

该理论是研究生物机体中药物及其代谢物和内源性物质的质与量变化规律的分析方法学，从而获得药物代谢动力学的各种参数、及代谢的方式、途径等信息，有助于药物的研究和临床合理应用[1]。

1 体内药物分析中的样品预处理体内药物分析的样品成分复杂，被测组分含量低。

因此，测定前样品需经过分离、纯化、富集、改变属性等处理后，方可进行测定。

根据样品的种类、所用的测定手段、被测药物的种类及浓度等不同，预处理方法各异。

1.1 预处理的基本理论[2]1.1.1 预处理的一般原则体内药物分析中的样品预处理方法的选择，主要依据生物样品的类型、药物的结构及性质及测定方法的种类等。

例如，血浆或血清需除蛋白，使药物从蛋白结合物中释出；唾液样品主要采用离心去除粘蛋白沉淀等。

药物的酸碱性（PKa）与溶解性涉及到药物的萃取手段；药物在样品中的浓度相差悬殊，浓度大的样品对前处理要求稍低，浓度越低则样品前处理要求越高等。

放射免疫测定法由于具有较高的灵敏度和专属性，生物样品只需经初步处理去除主要干扰物质后即可直接用于测定；而高效液相色谱法，为防止蛋白质等物质在色谱柱上沉积，上柱前需对生物样品进行去蛋白或进行溶剂萃取或制备衍生处理等。

1.1.2 预处理的基本方法1.1.2.1 蛋白质的去除沉淀蛋白的方法有多种，依据沉淀试剂种类的不同，析出的蛋白质的形状亦不同，且所得上清液的pH值也稍有差别。

例如，加入与水混溶的有机溶剂可使蛋白质分子内及分子间的氢键放生变化而使蛋白质凝聚；加入中性盐，使溶液的离子强度发生变化，蛋白质脱水而沉淀；加入强酸及含锌盐及铜盐的沉淀剂，使溶液的pH值异于蛋白质的等电点，蛋白质以不溶性盐形式析出；此外，测定一些与蛋白结合牢固或形成缀合物的药物时，常采用有机破坏、酶解、酸水解或酶水解等方法，使被测药物得以释出。

人血浆中游离甲氧基去甲肾上腺素与甲氧基肾上腺素的高效液相色谱串联质谱检测方法

人血浆中游离甲氧基去甲肾上腺素与甲氧基肾上腺素的高效液相色谱串联质谱检测方法人血浆中游离甲氧基去甲肾上腺素（NMN）与甲氧基肾上腺素（NM）是两种重要的生物活性物质，它们在人体内具有重要的生理功能。

因此，准确、快速地检测人血浆中这两种物质的含量对于了解它们在生理过程中的作用具有重要意义。

本文将介绍一种高效液相色谱串联质谱（LC-MS/MS）方法，用于人血浆中游离NMN与NM的检测。

首先，我们需要准备实验所需的试剂和设备。

试剂包括：纯化的NMN和NM标准品、甲醇、乙腈、乙酸、磷酸二氢钾、无水硫酸钠等。

设备包括：高效液相色谱仪、质谱仪等。

接下来，准备血浆样品。

首先，将血浆样品离心，并将上清转移至离心管中。

然后，在离心管中加入甲酸，使样品蛋白质沉淀。

接着，用乙腈沉淀样品中的蛋白质，并在甲酸中转移溶解。

最后，用乙酸醇和磷酸二氢钾溶液处理样品，以去除杂质。

然后，进行色谱条件的优化。

以甲酸-乙腈为流动相，在色谱柱上进行梯度洗脱，以实现NMN和NM的分离。

优化的条件包括流速、流动相组成、温度等。

接下来是检测。

将预处理的样品注入高效液相色谱仪进行分离，然后进入质谱仪进行检测。

质谱仪的条件需要进行优化，包括碰撞能量、离子源温度、离子种类等。

最后，使用外标法计算样品中NMN和NM的浓度。

通过建立标准曲线，根据样品中峰的面积与标准品峰面积的比值，计算出样品中两种物质的浓度。

总结起来，本文介绍了一种利用高效液相色谱串联质谱的方法，用于人血浆中游离NMN与NM的测定。

通过优化分离条件和质谱条件，可以快速、准确地检测样品中这两种生物活性物质的含量。

这种方法对于研究NMN和NM在人体内的生理功能具有重要意义。

样品前处理以及测定的程序

体内药物分析是药物分析的重要分支，是一门研究生物机体中药物及其代谢物和内源性物质的质与量变化规律的分析方法学。

它是通过分析人或动物体液及各组织器官中药物及其代谢物浓度，了解药物在体内数量和质量的变化，获得药物代谢动力学的各种参数和转变，以及代谢的方式、途径等信息，从而有助于药物的研究、临床合理应用等。

体内药物分析特点是样品成分复杂，被测组分含量低，因此，测定前要对样品进行处理，适当处理之后进行测定。

1 体内药物分析中的样品预处理在体内药物分析中，生物样品成分复杂，除被测组分外，往往含有大量内源性物质、代谢产物及共存药物等干扰物质，且被测组分的含量很低，要准确地测定生物样品中的药物浓度，必须除去妨碍测定的杂质，对样品进行预处理。

生物样品中的药物必须经过分离、纯化、富集，必要时还需对待测组分进行化学改性处理。

根据生物样品的种类、所用的测定手段、被测药物的种类及浓度等不同，预处理方法各异。

传统的生物样品处理方法有沉淀蛋白、离心和过滤、液液萃取等，这些方法虽还在广泛使用，但它们不利于在线处理、实现自动化，或需要消耗大量有毒试剂，不利于环保和操作人员的身体健康。

近年来，随着固相萃取技术(SPE)、固相微萃取技术(SPME)、微透析取样技术(MD)、柱切换(column switching，cs)等多种新技术新方法的采用，使得生物样品的处理技术向着低污染、低用量、高选择、高通量、自动化、在线化方向发展。

1.1固相萃取技术(SPE) 固相萃取技术自上世纪70年代诞生以来，以其高效、高选择性、高度自动化的特点，被广泛应用于各种生物样品的分离和纯化。

固相萃取技术以选择性吸附与选择性洗脱的液相色谱分离原理，对样品进行分离和纯化。

按照所采用固相萃取剂的种类，可将固相萃取法分为3类：正相、反相和离子交换固相萃取。

固相萃取一般有4个步骤：活化、上样、淋洗和洗脱。

新一代的聚合物吸附剂，如Waters的0asis HLB，不需活化，也不怕溶剂流干，简化了样品制备过程，而且有很宽的pH范围，能萃取亲水、疏水、酸性、碱性或中性组分，特别适用于血浆、尿液等生物样品的制备。

血浆中药物的浓度检测方法

血浆中药物的浓度检测方法
血浆中药物的浓度检测方法
血浆中药物的浓度检测是临床药学中的重要环节，它可以帮助医生确
定药物的剂量和疗效，从而更好地治疗患者。

目前，常用的血浆中药
物浓度检测方法主要包括高效液相色谱法、气相色谱法、质谱法等。

高效液相色谱法是一种常用的血浆中药物浓度检测方法。

它通过将血
浆样品与内标物混合后，采用高效液相色谱仪进行分离和检测。

该方
法具有分离效果好、灵敏度高、准确性高等优点，可以检测多种药物
的浓度。

气相色谱法也是一种常用的血浆中药物浓度检测方法。

它通过将血浆
样品与内标物混合后，采用气相色谱仪进行分离和检测。

该方法具有
分离效果好、灵敏度高、准确性高等优点，可以检测多种药物的浓度。

质谱法是一种高灵敏度的血浆中药物浓度检测方法。

它通过将血浆样
品与内标物混合后，采用质谱仪进行分离和检测。

该方法具有灵敏度高、准确性高等优点，可以检测多种药物的浓度。

除了以上几种方法外，还有一些新兴的血浆中药物浓度检测方法，如
电化学法、荧光法、免疫学法等。

这些方法具有灵敏度高、准确性高
等优点，但目前还处于研究阶段，需要进一步的实验验证。

总的来说，血浆中药物浓度检测是临床药学中的重要环节，不同的检
测方法各有优缺点，医生可以根据具体情况选择合适的方法进行检测。

未来，随着科技的不断发展，血浆中药物浓度检测方法也将不断更新
和完善，为临床药学的发展提供更好的支持。

hplc药物浓度检测步骤

hplc药物浓度检测步骤HPLC（高效液相色谱法）是一种广泛应用于药物分析领域的定量检测方法。

它通过将样品溶液注入进高效液相色谱仪内，利用不同化学成分在移动相和固定相之间的差异，实现对药物浓度的定量分析。

下面将介绍一般的HPLC药物浓度检测步骤。

1. 准备样品：首先，需要准备待测药物溶液。

根据药物的特性和浓度范围，决定溶剂的选择和配比。

一般来说，常用的溶剂有水、乙腈、甲醇等。

为了保证准确性和重复性，样品的制备过程中需要避光和严格控制温度。

2. 筛选固定相：根据药物的特性，选择适当的固定相。

固定相是一种固体材料，其表面经过了特殊处理，可以吸附样品中的目标分析物。

常用的固定相有C18柱、C8柱、糖柱等。

选择正确的固定相可以提高分离效果和分析的准确性。

3. 设定分离条件：在HPLC的操作过程中，需要设定适当的分离条件。

首先是移动相的配制，根据固定相的特性和目标分析物的极性，选择合适的溶剂组合和浓度比例。

然后是流速的设定，流速需要根据样品和固定相的性质来调整，以实现药物的充分分离和剂量测定。

4. 注射样品：将准备好的待测药物溶液加入HPLC装置的样品瓶中。

在注射之前，需要进行样品过滤，以保证样品中没有杂质或颗粒物。

然后使用自动注射器或手动注射器将样品注入进HPLC系统。

5. 数据采集和分析：在注射样品后，HPLC系统会自动开始运行。

通过荧光检测器或紫外可见光检测器等设备，检测样品在固定相上的吸光度或荧光发射度，得到药物浓度随时间的变化曲线。

通过计算峰面积或峰高，可以确定药物的浓度。

6. 结果分析与确认：根据HPLC测得的药物浓度曲线，可以计算出药物在样品中的浓度。

与标准品进行对照，确认测定结果的准确性。

同时，需要进行结果的统计分析，包括平均值、相对标准偏差等指标的计算。

如果结果符合预期，则可以确定样品中药物的浓度。

7. 记录与报告：在完成HPLC测定后，要将测定结果记录下来，并撰写检测报告。

报告应包括样品信息、HPLC分析方法、测定结果以及结果的解释和结论。

高效液相色谱法测定人体血浆中茶碱、多索茶碱的浓度

实验操作

色谱条件
色谱柱：Waters-C18柱(4.6mm×150mm，5μm) 检测波长：274 nm 流动相：甲醇:水=30:70 流速：1.0 ml/min 柱温：40 ℃
进样量：20 μl
实验操作

血浆样品处理
取血浆样品200 L于1.5 mL离心管中，加入 600 L甲醇，旋涡2 min，于12000 r· min-1高速
HPLC法测定人体血浆中茶碱、多索茶碱的浓度
临床药学
主要内容
1.研究背景 2.实验操作 3.结果分析 4.讨论
研究背景

茶碱(theophylline)和多索茶碱(doxofylline)均属于黄嘌呤的衍生物，常用于支气管哮喘和喘息性支气管炎缓解期的治疗。茶碱的最佳治疗窗的血药浓度在10-20 µ g/ml，血药浓度过大时，不良反应发生率明显上升。多索茶碱相比茶碱作用较强，起效快，作用时间长，安全性较高。
实验操作

精密度和准确度试验
分别精密制备含茶碱和多索茶碱的低、中、高三个浓度的质控血样，按上述血浆样品处理方法处理后进样。1d内测定5次，计算得各浓度血样茶碱和多索茶碱的日内RSD均小于2%。同法制备上述三个浓度的血样，连续测定3天，求得两者的日间RSD均小于 3%。准确度试验表明计算值与理论值的RE%均小于 5%。

研究背景

高效液相色谱(HPLC)以液体为流动相，采用高压输液系统，将具有不同极性流动相泵入装有固定相的色谱柱，在柱内各成分被分离后，进
入检测器进行检测，从而实现对试样的分析。
该方法已成为化学、医学、工业、农学、商检和法检等学科领域中重要的分离分析技术。
实验操作

高效液相色谱法测定人血浆中还原型谷胱甘肽浓度

文章编号:1008 9926(2008)03 0251 03 中图分类号:R927.2 文献标识码:A高效液相色谱法测定人血浆中还原型谷胱甘肽浓度颜鸣 ,史国兵,隋因,郭涛,张景旺,范胜军!( 沈阳军区总医院辽宁沈阳 110016;沈阳药科大学药学院辽宁沈阳 110016;!大连医科大学药学院辽宁大连 116027)摘要:目的建立HPLC方法测定人血浆中还原型谷胱甘肽(GS H)的浓度。

方法采健康人体血浆样品,加入定量的二硫苏糖醇(DTT),用10%高氯酸沉淀蛋白,在硼酸缓冲液中与邻苯二甲醛(OPA)进行衍生化,取上清液20 l进样测定。

C18色谱柱,流动相为0.02m o l∀L-1KH2PO4缓冲盐乙腈(V#V=94#6);流速1m l/m in;荧光检测波长 ex340n m, e m420n m。

结果G S H标准曲线在0.5~200mg∀L-1内,线性良好,r=0.9968(n=7)。

日内和日间精密度的RSD均在9%以内,3种浓度下样品的方法回收率均>95%。

结论该方法准确,无干扰,可用于人体药动学及生物等效性研究。

关键词:还原型谷胱甘肽;体内浓度;H PLCD eter m i nati on of R educed G lutathione i n H u m an P l as m a by RP HPLCYAN M i n g ,S H I Guo B i n g,SU I Y in,GUO Tao,Z HANG Jing W ang,FAN Sheng Jun!( The GeneralH osp ital o f Shenyang M ilitar y Reg i o n,L i a on i n g 110016,Shenyang Chi n a)(Shenyang Phar m aceuticalUn iversity,L i a on i n g 110016,Shenyang China)(!Da lian M edicalUn i v ersity,D alian 116027,L iaon i n g Ch i n a)ABSTRACT:A i m To establish an H PLC m ethod for the deter m i n a ti o n of reduced g lutathione(GS H)i n hum an plas m a.M et hods B l o od sa m p les w ere injected i n to heparinized tubes pre treated w ith fixed quantity d ithiothre ito l (DTT).10%perch loric aci d w as added to prec i p itate the pro teins.O phthala l d ehyde(OPA)w as used as deriva ti v e agent of GSH.The der i v ation w as carried ou t i n bor i c ac i d buffer.20 l of the super natan t li q u i d w as injected i n to t h e H PLC syste m.The sa m plesw ere separated on a C18chro m atogra m column usi n g a m ob ile phase consistingof0.02m o l∀L-1KH2PO4buffer and A cetonitrile(V#V=94#6).The flo w rate w as1m l/m i n.The excitation and em issi o n waveleng th w ere set at340n m and420nm respecti v e l y.Results The standard curve w as li n ear over the range of0.5to200m g∀L-1(r=0.9968,n=7).The intra day and i n ter day RSD s w ere be lo w9%.The recover ies of the contro l sa m ples o f lo w,m ediu m and h i g h concentra ti o ns w ere above95%.Conc l u sions Them ethod is ac curate and suitab le fo r the research o f tforage cr opphar m acok i n etic and t h e bioequ i v alence i n hum ans.KEY W ORD S:GSH;Plas m a concen trati o n;H PLC还原型谷胱甘肽(GSH)化学名称N (N L r 谷氨酸 L 半胱氨酸),由谷氨酸,半胱氨酸和甘氨酸组成,是机体重要的生物活性物质。

那格列奈片使用说明

感恩初三作文大全800字感恩是一盏灯，照亮了幸福的大路；感恩是一首歌，唱响了春天的故事；感恩是一份情，温暖了我们的心。

学会感恩并不是有多富有，也不是你有多伟大。

下面就是我给大家带来的感恩作文，希望能帮助到大家!感恩初三作文大全800字1山感恩地，方成其高峻；海感恩溪，方成其博大；我感恩父母，他们给了我生命。

感恩是一种生活态度：它是一种知足，一种珍惜。

父母的养育，朋友的帮助，老师的教导，大自然的恩赐，花鸟鱼虫，困难逆境，都能让我们感恩。

就在这周，我们组织开展了一次研学旅行活动。

在这次收获颇丰的活动中，我们既欣赏了祖国的大好河山，又品尝了一些有名的特产，并且领悟到了许多人生的道理。

在这次研学旅行中，令我感触最深的莫过于千龙湖的一位军人的演讲了，他为我们演讲的主题是?感恩?，大概讲述的是这么一个故事：一家人出去旅游，而一位老奶奶却不愿去，她的孙子屡次劝其一同前往，但她却屡次以腿脚不方便而拒绝，很多分钟后，其儿子还是无动于衷，不耐烦了，干脆让她在家里，大家都走了，只有这一位老人流着眼泪默默地走进了自己的房间。

我们也流下了眼泪，其实我们都知道她并不是不想去，只是儿子不大愿意，没有一颗感恩的心，不知道孝敬父母，从小以自我为中心，不知道养成感恩的好习惯。

这个故事也让我们知道了从小培养感恩的重要性。

感恩是一种爱，是一种感谢，是一种回报。

这些我们都懂但当老师说到一个道理时，我们也就愣住了。

这让我联想到了我的父母，他们为我无私奉献，情愿自己挨饿受冻，省吃俭用，也总是想尽他们所能，把他们最好的给我。

而我们却还十分挑剔，甚至还觉得是理所当然，整天在家过着“衣来伸手，饭来张口〞的皇帝般的生活。

又想到母亲为我们做这做那，而我们连一件小小的洗手洗脚都做不好，泪水也就在顷刻间流下来了……感谢父母，他们给了我们生命去体会这世间的美好；感恩父母他们养育了我，无微不至的照顾了我，他们的恩情令我难忘，他们的爱像松柏一样挺拔，像山一样雄伟，像海那样宽阔……落叶在空中盘旋，那是在谱写感恩的乐曲，那是在对养育着大树的泥土的感恩；白云在天空中自由的飘荡，那是在绘画着感恩的画，是对养育着白云的天空的感恩；溪水在清澈的流淌，那是在歌唱着感恩的歌，是在对养育着溪水的雨水的感恩……感恩就是这样，朴素，大方，让生活更美好，让世界充满爱，世间万物都少不了感恩。

Rp-HPLC法测定人血浆中三唑仑的浓度

Rp-HPLC法测定人血浆中三唑仑的浓度摘要】目的建立以反相高效液相色谱法测定人血浆中血药浓度三唑仑的方法。

方法采用Diamonsil C18(250nm×4.6nm，5μm)色谱柱，流动相为甲醇：水(60:40)，流速为1.0ml/min，检测波长为234nm，柱温为25℃，采用蛋白沉淀法处理血浆样品。

结果三唑仑血浆浓度在7.70～38.50μg(r=0.9997)范围内线形关系良好，低、中、高三种浓度的平均相对回收率分别为101.23％、103.88％，102.25％，RSD均小于3％。

结论本方法简便、快速、准确、灵敏度高，可用于三唑仑血药浓度测定和人体药动学研究。

【关键词】三唑仑反相高效液相色谱法血药浓度三唑仑(diazepam) 具有抗惊厥、抗癫痫、抗焦虑、镇静催眠、中枢性骨骼肌松弛和暂时性记忆缺失（或称遗忘）作用。

三唑仑 , 又称海乐神、酣乐欣，淡蓝色片剂，口服后可以迅速使人昏迷晕倒，可溶于水及各种饮料中,三唑仑没有任何味道，见效迅速，药效比普通安定强45-100倍。

因此监测其血药浓度对临床治疗和中毒抢救均有重要意义。

本试验拟建立简便、快速、准确的反相高效液相色谱法测定的三唑仑血药浓度，为临床治疗和中毒抢救提供理论依据。

该药物的定性定、量方法，国内外文献有不同的报道，本文结合文献资料和实验筛选建立了相应的提取方法和色谱条件，结果方法简便、快速、重现性好，适合于临床血药浓度监测和药动学研究。

1 仪器与试药1.1仪器日本岛津LC-20AT高效液相色谱仪；Shimadzu LCSolution色谱工作站。

CPA225D电子分析天平；TGl6G型台式高速离心机；WH-2微型旋涡混合仪(上海沪西分析仪器厂有限公司)；艾科浦超纯水系统(Aquapro公司)。

1.2试药三唑仑化学对照品(中国药品生物制品检定所提供)；水为超纯水；甲醇(色谱纯)；乙酸铵(分析纯，北京化工厂)。

2 方法与结果2.1溶液的制备2.1.1 三唑仑标准贮备液精密称取于105℃干燥至恒重三唑仑对照品15.40mg置10ml棕色量瓶中，甲醇溶解后并定容至刻度，配得1.540 mg/ml标准贮备液，密封置于4℃冰箱保存。

超高效液相色谱-串联质谱法测定人血浆利伐沙班浓度

超高效液相色谱-串联质谱法测定人血浆利伐沙班浓度何佳珂;陈志青;万蓉;饶美英;熊爱珍;洪葵【摘要】目的建立测定人血浆中利伐沙班浓度的超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)法.方法以乙腈沉淀蛋白处理血浆样品,d4-利伐沙班为内标.色谱柱为Thermo Hypersil Gold C18(2.1 mm×100 mm,1.9μm).流动相为乙腈-水(含0.1％甲酸和5 mmol·L-1醋酸铵),梯度洗脱.质谱条件为电喷雾离子源,正离子模式检测,扫描方式为多反应离子监测.用于定量分析的离子反应分别为m/z436.1→m/z 145.1(利伐沙班)和m/z 440.2→m/z 145.0(d4-利伐沙班).结果利伐沙班在1～500 ng·mL-1范围内线性良好,定量下限为1 ng·mL-1,日内日间精密度均<8％,绝对回收率90.09％～95.23％,基质效应93.50％～100.09％.血浆样品室温(20℃)放置4 h,处理后(4℃)放置24 h,冻存(-80℃)50 d以及反复冻融3次稳定性良好,样品浓度均无显著变化.结论该分析方法灵敏、准确,样品处理简便、快速,能为该药的药物相互作用评价和个体化用药实践提供方法学参考.【期刊名称】《医药导报》【年(卷),期】2019(038)003【总页数】4页(P384-387)【关键词】利伐沙班;色谱-串联质谱法,超高效液相;血浆浓度【作者】何佳珂;陈志青;万蓉;饶美英;熊爱珍;洪葵【作者单位】南昌大学第二附属医院心内科,南昌 330006;南昌大学第二附属医院药学部,南昌 330006;南昌大学第二附属医院心内科,南昌 330006;南昌大学第二附属医院分子医学重点实验室,南昌 330006;南昌大学第二附属医院输血科,南昌330006;南昌大学第二附属医院药学部,南昌 330006;南昌大学第二附属医院心内科,南昌 330006【正文语种】中文【中图分类】R969.1;R973新型口服抗凝药利伐沙班是第一个口服直接Xa因子抑制剂，可抑制凝血酶生成[1]。

高效液相色谱-质谱联用定量检测人血清5个溶血磷脂酰胆碱的浓度

ZHANG Lei1，2，WU Yu-jing2，FAN Zhi-juan2，KANG Hua2， WANG Yu-fan2，LIU Shu-ye2**，SHAN Zhong-qiang1**
（1．College of Chemical Engineering，Tianjin University，Tianjin 300072，China；2．Department of Inspection，Tianjin Third Central Hospital， Tianjin Artificial Cell Key Laboratory，Ministry of Health Artificial Cell Engineering Technology Research Center，Tianjin 300170，China）
Abstract Objective：To establish a quantitative detection platform for the identification of lysophosphatidylcholine（LPC）substances in human serum by using targeted metabolomics techniques.Methods：The
摘要目的：利用代谢组学代谢靶标分析技术，建立一种定量检测人血清中溶血磷脂酰胆碱（LPC）类物质的方法。方法：以高效液相色谱与串联质谱联用（HPLC-MS/MS）分析平台，利血平为内标物，构建定量检测 LPC 14∶0、LPC 15∶0、LPC 16∶0、LPC 17∶0 和 LPC 18∶0 系列物质的检测方法。绘制每种目标 LPC 对应的标准曲线，分析其相关系数 r 值，并进一步评估检测平台的灵敏度检测下限（LOD）和线性范围。通过加样回收试验验证检测平台的准确度（加样回收率）和精密度（RSD），并进一步分析该平台在检测人血清标本的适用性。在此基础上，利用该 HPLC-MS/MS 平台分析了 LPC 14∶0~LPC 18∶0 5 个 LPCs 在乙肝相关性肝细胞肝癌（HBV-HCC）患者血清中的浓度。结果：本研究建立了基于 HPLC-MS/MS 的 LPC 检测平台，该平台检测稳定性和准确性较高。 LPC 14∶0~LPC 18∶0 5 个物质的检测下限分别是 0.027、0.120、0.320、0.059、0.072 μg·mL-1；标准曲线方程分别为 Y=0.725X-0.002 64、Y=0.212X-0.025 6、Y=1.22X+1.84、Y=0.861X-0.015 5 和 Y=0.813X+0.558，相关系数分别为 0.997 6、0.999 2、0.992 7、0.998 0 和 0.994 3，测量结果准确度和精密度均控制在 85%~115% 范围内。利用 HPLCMS/MS 平台测定的 5 个 LPC 类物质，对不同巴塞罗那期 HBV-HCC 患者具备一定的鉴别能力。结论：本研究利用 HPLC-MS/MS 分析平台，成功建立了一个稳定、灵敏而可靠的定量检测人血清中 LPC 14∶0~LPC 18∶0 5 个目标 LPC 类物质的检测方法，适合临床推广。关键词：代谢组学；液相色谱 - 质谱联用；溶血磷脂酰胆碱（LPC）；内标法；乙肝相关性肝细胞肝癌（HBV-HCC）

MS法测定人体色甘酸钠血浆浓度及其药动学研究的开题报告

HPLC-MS/MS法测定人体色甘酸钠血浆浓度及其药
动学研究的开题报告
一、研究背景
色甘酸钠是一种抗炎药，常被用于治疗痛风、关节炎等疾病。

它能够抑制环氧合酶，从而减少花生四烯酸的合成，进而减轻炎症反应。

目前，市场上已有色甘酸钠注射剂的产品。

但因为其在人体内代谢迅速，药物浓度变化很快，因此对于该药物的药动学研究非常有必要。

二、研究目的
本研究旨在建立高效液相色谱-质谱联用（HPLC-MS/MS）法来测定人体血浆中色甘酸钠的浓度，并研究其在人体内的药动学特征，为临床用药提供依据。

三、研究内容及方法
1.建立HPLC-MS/MS法
采用C18色谱柱，乙腈-0.1%甲酸水溶液为流动相，采用质谱检测器进行检测，通过建立标准曲线和内标法来测定色甘酸钠在人体血浆中的浓度。

2.药物代谢动力学研究
选择6名正常人作为研究对象，给予不同剂量的色甘酸钠注射剂，分别在不同时间点采集血样，并测定样本中色甘酸钠的浓度。

通过计算药物在人体内的药代动力学参数来研究药物的代谢规律和药效学特征。

四、研究意义及预期结果
本研究将为色甘酸钠在临床应用中的合理用药提供重要参考依据。

预期结果将为色甘酸钠在人体内的代谢规律、药动学特征等方面做出有价值的探讨。