反相高效液相色谱法测定废弃食用油脂中胆固醇

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食用油的反式脂肪酸含量分析方法

食用油的反式脂肪酸含量分析方法食用油中的脂肪酸是人体所需的重要营养物质，但某些油脂加工过程中会产生一种被称为"反式脂肪酸"的物质，其摄入过多可能对健康产生负面影响。

因此，准确测定食用油中的反式脂肪酸含量至关重要。

本文将介绍两种主要的分析方法——气相色谱法和高效液相色谱法，旨在为食用油生产与质量监测提供指导。

一、气相色谱法分析食用油中反式脂肪酸含量1. 样品准备首先，取食用油样品，通过加热至适当温度使样品液化。

然后使用无水醇（如甲醇或乙醇）将非脂类物质从样品中提取出来。

待提取完成后，将样品转移至小瓶中，用氮气吹干。

2. 反式脂肪酸甲酯化将样品中的脂肪酸转化为甲酯形式，以方便后续的气相色谱分析。

这一步骤通常采用甲醇和硫酸催化进行。

3. 气相色谱分析将甲酯化样品注入气相色谱仪，通过设定合适的温度梯度和流速条件，将样品中的反式脂肪酸分离出来。

根据分离出的峰面积和已知标准样品建立标准曲线，以确定样品中反式脂肪酸的含量。

二、高效液相色谱法分析食用油中反式脂肪酸含量1. 样品准备将食用油样品中的纯油脂取出，通过加热使其溶解。

然后，用乙腈等有机溶剂提取样品中的非脂类物质，待提取完成后，经氮气冲洗，使残留的溶剂蒸发。

2. 脂肪酸乙酯化将样品中的脂肪酸转化为乙酯形式，以方便后续的高效液相色谱分析。

这一步骤通常采用甲醇和硫酸催化进行。

3. 高效液相色谱分析将乙酯化样品注入高效液相色谱仪，通过控制流速、检测波长和列温等参数，将反式脂肪酸定量分离和测定。

同样利用标准曲线来计算样品中反式脂肪酸的含量。

三、结论通过气相色谱法和高效液相色谱法可以准确测定食用油样品中的反式脂肪酸含量。

两种分析方法均需要样品的预处理和适当的仪器设备，对于食用油生产厂商和院校实验室而言，能够选择合适的方法进行分析，以提高产品质量，确保人们的健康。

反式脂肪酸含量的准确测定对于开发和改进食用油生产工艺、质量监测以及相关法规的实施具有重要意义。

凝胶色谱净化-高效液相色谱法测定食用油[1]

体复杂和目标物含量低使得样品前处理成为决定分析结果好坏的关键环节。目前常用的胆固
醇样品提取净化方法主要是皂化法。而采用凝胶渗透色谱（GPC）进行样品前处理的报道
还很鲜见。采用合适孔径的惰性多孔材料做固定相，GPC就可以基于分子的空间排阻效应
大小将不同体积的物质分离。食用油中的油脂等高分子化合物在GPC柱上保留很弱，较快
240
210
30
0
胆固醇
1.930
将原样和加标样品同时进行GPC净化处理，并按1.3节的色谱条件进行分析，测定胆固醇的含量，计
算加标回收率。根据平行测定3次样品的回收率计算方法的精密度，相关结果如表1所示。图4和图5则
分别是大豆油与玉米胚芽油中加胆固醇标准溶液的色谱图。由表1可知，采用本文建立的方法对食用油中
胆固醇进行分析具有准确、简便和灵敏度高的特点。
表1 样品加标回收率
目标物
回收率%
平均回收率%
RSD%
大豆油
95.8
96.3
1.50
97.9
紫外检测波长208 nm。
2、结果与讨论
2.1凝胶渗透色谱净化条件的优化
考察大豆油和玉米胚芽油的净化条件，图1是在254nm采集的大豆油、玉米胚芽油和胆固醇标准品的
色谱图，由图可知，收集8.5～16.5min内的馏分即可得到胆固醇。
1. 大豆油，2. 玉米胚芽油，3. 胆固醇标准品
240
210
180
150
120
90
60
30
0
-30
胆固醇
图5 玉米胚芽油中添加胆固醇标准溶液的色谱图

高效液相色谱对食品中有害物质成分检测方法

高效液相色谱对食品中有害物质成分检测方法高效液相色谱（HPLC）是一种常用的食品检测方法，用于分析和测定食品中的有害物质成分。

该方法通过将食品样品中的化学物质分离和定量，可快速准确地检测食品中的有害物质，保障食品安全。

HPLC是一种高效率分离技术，它基于液相流动相分配方式，利用高压将液相样品通过固定填料填充的色谱柱进行分离。

相比传统色谱方法，HPLC具有分离效率高、灵敏度高、选择性好、分析快速等优点，广泛应用于食品安全监测领域。

首先，HPLC可以用于检测食品中的农药残留。

农药是保护农作物免受害虫、病害和杂草侵害的重要手段，但过量使用或不合规使用可能导致农药残留。

通过HPLC技术，可以检测食品中的农药成分并定量分析，以保障食品安全。

其次，HPLC也广泛应用于检测食品中的添加剂。

食品添加剂是在加工过程中为了改善食品质量和特性而添加的物质，但如果超出了安全使用范围，可能对人体健康造成不良影响。

利用HPLC，可以对食品中的防腐剂、抗氧化剂、食品着色剂等添加剂进行快速准确的检测，确保食品安全合规。

另外，HPLC还可用于检测食品中的重金属元素。

重金属元素如铅、汞、镉等，即使以微量存在于食品中也可能对人体健康造成潜在风险。

通过HPLC技术，可以分离、富集和定量分析食品中的重金属元素，为食品安全监测提供有力支持。

此外，HPLC还可用于食品中的残留物检测。

在食品生产和加工过程中，可能会有一些残留物如过敏原、抗生素、激素、毒素等。

这些残留物的存在可能对食品安全构成潜在威胁。

利用HPLC技术，可以对这些残留物进行快速、灵敏的检测，确保食品安全合规。

综上所述，高效液相色谱（HPLC）是一种在食品安全检测中非常重要的技术手段。

它可以有效地分离和定量分析食品中的有害物质成分，如农药残留、添加剂、重金属元素和残留物等。

HPLC技术的高效性、准确性和快速性，使其成为食品安全监测的重要工具，为保障人们的食品安全健康提供有力支持。

高效液相色谱法测定食品中有害物质的研究

高效液相色谱法测定食品中有害物质的研究一、引言随着食品安全问题的日益突出，对食品中有害物质的检测和控制变得越来越重要。

高效液相色谱法（High Performance Liquid Chromatography，HPLC）作为一种重要的分析技术，广泛应用于食品科学领域。

本文旨在探讨高效液相色谱法在食品中有害物质检测方面的应用与研究进展。

二、高效液相色谱法原理及特点高效液相色谱法是利用样品在液态流动的流动相中与固定相之间的选择性分离作用，通过调节流动相的组成、流速和温度等条件，实现对化合物的定性和定量分析。

相较于传统的液相色谱法，高效液相色谱法具有分离效率高、分析速度快、选择性好、灵敏度高等优点，已成为食品分析中常用的手段。

三、高效液相色谱法在食品中有害物质检测的应用1. 农药残留检测农药残留是当前食品安全的重要问题之一，高效液相色谱法能够对食品中常见的有机磷、氨基甲酸酯等农药进行快速准确的检测。

常用的检测方法包括保留时间法、外标法和内标法等，能够满足对食品中农药残留的不同要求。

2. 食品添加剂检测食品添加剂是为了改善食品质量和保护食品安全而添加到食品中的化学物质。

高效液相色谱法可以有效检测食品中的色素、防腐剂、甜味剂等添加剂，为食品生产和监管提供科学依据。

3. 食品中的毒素检测食品中的毒素是造成食物中毒的重要原因，高效液相色谱法在毒素检测中具有广泛的应用。

例如，通过利用高效液相色谱法可以准确测定食品中的黄曲霉毒素、赤霉素、铅等有害物质，为食品安全提供保障。

4. 食品中的残留药物检测药物残留是由于生产加工过程中使用药物导致的，它对食品安全和人体健康造成潜在威胁。

高效液相色谱法可以对食品中常用的抗生素、非甾体抗炎药等药物进行快速、准确的检测。

5. 其他有害物质的检测除了上述几类有害物质外，高效液相色谱法还能有效检测食品中的重金属、致敏物质、塑化剂等其他有害物质。

通过根据目标化合物的性质和分析要求选择适当的色谱柱和检测方法，可以得到可靠的检测结果。

高效液相色谱法测定鸡蛋中胆固醇研究(一)

高效液相色谱法测定鸡蛋中胆固醇研究(一)【关键词】色谱近年来，随着人们生活水平的不断提高，人们对膳食组成中胆固醇的含量越来越引起重视。

胆固醇可在胆道中沉积形成胆石，在血管中的沉积是动脉粥样硬化的重要原因之一。

鉴于胆固醇对人体的影响，人们不断地采取各种各样的措施来减少食物中的胆固醇含量，这就要求分析工作者建立一种快速、简便而又重现性好的测定胆固醇的方法。

鸡蛋是自然界中营养最为丰富的食品之一，但是蛋黄中的高胆固醇也引起人们的高度关注。

目前胆固醇的测定一般都要求萃取总脂质、移去溶剂、在碱性介质中热皂化、萃取出非皂化物质、洗涤及浓缩等〔1，2〕，这些步骤费时、费力又费材料，并因其繁琐的操作预处理，大大增加了实验结果的可变性，本文采用 2.0mol/L的KOH-乙醇溶液直接皂化，石油醚萃取，以乙腈-甲醇-异丙醇（10∶80∶10）作流动相、C18反相色谱柱分离，UV208nm检测，高效液相色谱法测定，简化了操作步骤，降低了操作强度，减少了试剂使用，并且大大节约了分析时间，整个分析过程仅需1.5h。

本方法用于实际样品的测定，结果满意。

1材料与方法1.1仪器与试剂Agilent1100高效液相色谱仪，紫外检测器G1314A，Agilent1100化学工作站，甲醇、乙腈、异丙醇（均为HPLC级），胆固醇（进口分装），石油醚（重蒸馏，30℃～60℃），无水乙醇、氢氧化钾、氯化钠（均为AR）。

胆固醇标准溶液（1.0mg/ml）:准确称取胆固醇100mg于100ml容量瓶中，用少量甲醇溶解后，用甲醇稀至刻度。

1.2色谱条件分析柱为μBondapakC18TM（30cm×3.9mm），流动相为乙腈-甲醇-异丙醇（10∶80∶10），流速为1.0ml/min，柱温为30℃，紫外检测波长208nm。

1.3样品处理及测定准确称取充分混匀的鸡蛋约0.20g于50ml具塞比色管中，加入2.0mol/L 的KOH-乙醇液5.0ml，振荡混匀，置65℃水浴中皂化30min（每隔5min振摇1次）后取出，经流水冷却，加入饱和氯化钠溶液2.0ml后再加入石油醚20.0ml，旋涡混匀后离心分离，吸取上清液10.0ml于10ml刻度比色管中，通氮气吹干，再用1.0ml甲醇溶解残渣，过0.45μm 滤膜后，吸取10.0μl注入液相色谱仪，按上述色谱条件进行测定，外标法定量。

食品中胆固醇氧化产物的分析与控制研究

食品中胆固醇氧化产物的分析与控制研究胆固醇氧化产物是指胆固醇在食品加工或保存过程中与氧气接触产生的化合物。

它们在食品化学中具有重要的研究价值和实际应用意义。

本文将探讨食品中胆固醇氧化产物的分析与控制研究，并对其影响因素进行讨论。

一、胆固醇氧化产物的分析方法1. 高效液相色谱法高效液相色谱法是一种常用的分析胆固醇氧化产物的方法，该方法能够分离和测定多种胆固醇氧化产物，如胆甾烯醇、13-羟基胆固醇等。

2. 气相色谱法气相色谱法利用气相色谱仪进行分析，通过测定胆固醇氧化产物的特征峰进行定性和定量分析。

这种方法具有分析速度快、灵敏度高和样品准备简单等优点。

3. 质谱法质谱法是一种高灵敏度的分析方法，利用其对分子的质荷比进行分析和鉴定。

通过质谱法可以对胆固醇氧化产物进行准确的定性和定量分析。

二、胆固醇氧化产物的控制方法1. 降低氧气浓度胆固醇氧化产物的生成与氧气浓度密切相关，因此控制食品中氧气浓度是减少胆固醇氧化产物的有效方法。

在食品加工和保鲜过程中，可以采用真空包装、气调包装等方式来降低氧气浓度，减少胆固醇氧化的可能性。

2. 添加抗氧化剂抗氧化剂能够与氧气发生反应，从而减少氧气对胆固醇的氧化作用。

常用的抗氧化剂包括维生素C、维生素E、多酚等。

在食品生产过程中添加适量的抗氧化剂能够显著降低胆固醇氧化产物的生成。

3. 控制温度和pH值胆固醇氧化产物的生成受温度和pH值的影响较大。

高温和酸性环境会加速胆固醇的氧化，因此在食品加工过程中应控制好温度和pH值，避免过高的温度和过酸的环境。

三、影响胆固醇氧化产物生成的因素1. 温度温度是影响胆固醇氧化的重要因素之一。

较高的温度会促进胆固醇的氧化反应，因此在食品加工和保存过程中应尽量控制好温度，避免过高的温度。

2. 氧气浓度氧气浓度高会加速胆固醇的氧化反应，因此在食品加工和保存过程中应尽量减少氧气的接触，采取合适的包装方式。

3. 光照光照也是促进胆固醇氧化的因素之一。

胆固醇分析(高效液相色谱仪)

植物甾醇分析（生物制药专用液相色谱仪）——湖南创特科技发展有限公司LC600专用液相色谱仪应用简介：液相色谱应用液相色谱用途广泛，已经成为大多数化学行业和生命科学行业中的标准配置。

南京科捷液相色谱和液－质联用系统正为各种客户群服务，如分析药留溶剂残留,药物研制和生产、蛋白质、食品安全、环境、国土安全和石油化工等市场。

随着新应用和改进应用的开发，液相色谱的市场增长很快，包括制药和生命科学市场，中国和印度增长势头尤为强劲。

糖类分析（食品分析专用液相色谱仪湖北）制药：制药行业是南京科捷液相色谱和液－质联用系统的主要用户。

从药物研制到开发、制造和QA/QC，液相色谱在药物的整个生命周期中发挥着重要作用。

糖类分析（食品分析专用液相色谱仪湖北）它使得科学家能够迅速进行筛选、纯化的分析工作。

液相色谱和液－质联用系统也是用来检查药物化合物质量和数量的主要工具，它在法规环境中使用固定方法，为药物制造提供支持。

蛋白质：液相色谱和液－质联用系统正在不断增长的一个市场机会是识别、隔离和净化细胞和体液中的蛋白质。

液相色谱用途广泛，为分析蛋白质和其它生物分子提供了理想的技术，包括大的、非常灵敏、分析困难的蛋白质和生物分子。

环境：南京科捷的客户主要是重点满足和实施法规标准的政府实验室、工业实验室和独立实验室。

液相色谱和液－质联用系统分析包括非挥发性杀虫剂、除草剂、多核芳香碳氢化合物及不适合气相色谱的其它化合物。

食品安全：食品安全分析包括检测农产品和食品中的添加剂、残留物、杂质和毒素，其主要重点是满足和实施法规标准。

糖类分析（食品分析专用液相色谱仪湖北）在全球贸易自由化、法规监管环境不断完善及食品安全问题的公众意识不断提高的情况下，食品分析需求正在迅速增长。

法律医学：南京科捷科技是用于药物筛选和毒理学研究的气相色谱/质谱仪系统的全球领导型供应商。

作为气相色谱/质谱设备的补充,南京科捷的液相色谱/质谱系统已开始被应用于法医分析。

高效液相色谱法在酚类化合物和胆固醇分析中的应用研究

高效液相色谱法在酚类化合物和胆固醇分析中的应用研究高效液相色谱法是非常常见的一种针对分离和分析的技术，它与传统的分离与分析技术相比，主要使用的是高压泵等设备，因为这种分离技术能够将指定的物质分离，而且在对其进行分析时，效率特别高，这也是它能够得到广泛使用的主要原因。

本文主要通过对这种技术的应用和发展状况的分析，进而探讨了这种技术在酚类化合物和胆固醇中的具体应用，仅此提供借鉴。

标签：高效液相色谱法酚类化合物胆固醇应用研究在所有色谱技术中，液相色谱法是最早（1903年）发明的，但其初期发展比较慢，在液相色谱普及之前，纸色谱法、气相色谱法和薄层色谱法是色谱分析法的主流。

到了20世纪60年代后期，将已经发展得比较成熟的气相色谱的理论与技术应用到液相色谱上来，使液相色谱得到了迅速的发展。

特别是填料制备技术、检测技术和高压输液泵性能的不断改进，使液相色谱分析实现了高效化和高速化。

从此，这种分离效率高、分析速度快的液相色谱就被称为高效液相色谱法，也称高压液相色谱法或高速液相色谱法。

高效液相色谱法在我国的很多领域都得到了广泛的使用，比如化工、食品、农业、石油、医药行业等。

这种技术随着时代和科技的发展，在几乎所有学科领域中广泛应用，大大提高了分离和分析技术水平。

因为高效液相色谱法操作相对简单，原理也不复杂，最为重要的一点是，在某些行业应用这种技术能够起到环保的效果，在此，就高效液相色法在酚类化合物和胆固醇分析中的相关问题进行研究。

一高效液相色谱法简单原理及其发展现状1、简单原理高效液相色谱法开始逐渐引起人们的关注是在上世纪七十年代，它与传统分离技术相比，有很多的优势，可以说是一种新型的柱色谱技术。

虽然分离技术不止这一种，但是它无疑是最重要的一种。

因为样品中各组分在两相中有着不一样的吸附作用和不同的分配系数等，尤其是在固定相和流动相中这种不同体现的更为明显，而高效液相色谱法主要利用的就是不同组分在这些方面的不同来分离样品，各组分性质的不同使之在分离的过程中保留时间也不一样，这样就可已达到分离的效果。

高效液相色谱法检测食用油脂中TBHQ的探讨

高效液相色谱法检测食用油脂中TBHQ的探讨高效液相色谱法检测食用油脂中TBHQ的探讨摘要(伊犁州产品质量检验所张磊)1分析对象TBHQ (特丁基对苯二酚)是一种亲油性抗氧化剂，因其抗氧化性能好，能阻止或延迟油脂氧化变质，广泛用于食用油脂，目前已在全世界多个国家使用。

本实验对采用高效液相色谱荧光检测法测定TBHQ 进行了研究，检出限大大降低而灵敏度显著提高。

2 实验部分2.1仪器与试剂日本岛津HPLC高效液相色谱仪及控制器，配有荧光检测器(RF-20)；旋转蒸发仪；溶剂过滤器。

TBHQ标准品(美国Fluka，g98.5%)；L抗坏血酸棕榈酸盐；甲醇、乙腈，正己烷等化学试剂均为色谱纯，水为去离子水。

2.2 色谱分析条件色谱柱：C18(250L×4.6mm)；流动相：V(0.02mol/L磷酸)∶V(甲醇)∶V(乙腈)=6∶2∶2；流速：1.0 mL/min；荧光检测器最大激发波长293，最大发射波长为332 nm；柱温：40℃；进样量：20μL。

2.3 样品制备准确称取色拉油样品5.0 g(精确至0.01 g)于25 mL烧杯中，用经乙腈饱和的正己烷溶解并转移至50mL容量瓶中定容，充分混匀，然后用经正己烷饱和的乙腈提取3次，每次50 mL，合并乙腈提取液于浓缩瓶中，在40℃下，用旋转蒸发仪浓缩至1~2 mL，最后将浓缩液转移至刻度管中并用乙腈定容至5 mL，经0 45 mm滤膜过滤后供高效液相色谱分析。

如果对人身防护很看重，可以用乙醇代替甲醇，但它与油分的互溶程度大些，提取液似乎没有那么"干净"。

当处理某些轻质油如代可可脂时，会有完全混溶现象，这时只能用甲醇。

2.4 标准曲线的绘制准确称取THBQ标准品100 mg于容量瓶中，用乙腈溶解并准确定容至100 mL，制成TBHQ 标准溶液储备液(浓度为1.0g/L)。

用乙腈将储备液稀释成0.02、0.05、0.1、0.5、1.0、2.0和5.0 mg/L的系列标准使用溶液，分别进行高效液相色谱分析，制作标准工作曲线。

食品油脂中胆固醇含量的测定方法研究

食品油脂中胆固醇含量的测定方法研究食品油脂是我们日常生活中不可或缺的重要食物成分之一。

然而，过量摄入胆固醇可能导致心血管疾病的发生，因此正确测定食品油脂中的胆固醇含量对我们的健康至关重要。

本文将探讨食品油脂中胆固醇含量的测定方法研究。

随着科技的不断进步，人们对食品安全和质量的需求也越来越高。

胆固醇在食品油脂中的含量直接关系到食品的营养价值和对人体健康的影响。

那么，如何准确地测定食品油脂中的胆固醇含量，成为了研究的焦点之一。

传统的测定方法主要依靠分光光度法和色谱法。

分光光度法是利用胆固醇在特定波长下的吸光度对其含量进行测定。

这种方法具有操作简单、成本低廉的优点，但是由于在分光光度法中存在一些干扰物质，如脂肪酸和其他酯类化合物，这就要求在测定过程中进行样品的预处理和清洁，以提高准确性。

色谱法是一种高效分离和测定化合物的方法，可以用于分析食品油脂中胆固醇的含量。

色谱法的原理是利用样品中化合物在流动气体和固定相之间的相互作用来对化合物进行分离，并通过探测器来测定其浓度。

色谱法的优点是灵敏度高、分离度好，适用于各种类型的食品油脂中胆固醇的测定。

然而，色谱法的操作过程较为复杂，需要专业的设备和技术支持。

除了传统的测定方法外，近年来，新的测定技术也在不断涌现。

一种颇受关注的新方法是基于纳米技术的胆固醇检测。

纳米技术可以将物料制备成纳米级颗粒，提高分析灵敏度。

这种方法的优点是操作简便、灵敏度和精确度高。

通过纳米技术，研究者可以准确测定食品油脂中的胆固醇含量，为人们提供更精准的营养信息。

此外，利用生物传感器进行胆固醇的检测也是一项具有潜力的技术。

生物传感器是一种利用生物识别原理来检测目标物质的装置。

通过与特定酶的反应，可以对胆固醇进行快速、准确的测定。

这种方法的优点是高灵敏度、实时性强，可应用于食品油脂的快速检测。

但是，生物传感器技术尚处于发展初期，仍需进一步研究和完善。

综上所述，食品油脂中胆固醇含量的测定方法研究具有深远意义。

高效液相色谱法分析食品中的有害物质

高效液相色谱法分析食品中的有害物质现代社会，人们越来越重视自身健康保护，食品安全问题逐渐成为人们关注的热点话题。

食品中的有害物质含量是否符合标准，是食品安全问题的重要一环。

而高效液相色谱法作为一种有效的检测手段，在食品安全监管中扮演了重要的角色。

一、高效液相色谱法的基本原理高效液相色谱法是一种利用分配系数分离分析化合物的方法。

色谱柱中填充有固定相，色谱柱内流速快，分离时间短，故称“高效液相色谱法”。

其基本原理是利用样品分子分配在流动液相和固定相之间达到分离的目的。

固定相一般是填充在色谱柱中的柱填料，流动液相以一定的流速从柱顶端流入，通过固定相，最后流出柱底端。

在这个过程中，流动液相和固定相分别扮演着不同的角色，分别影响分离的效率和能力。

而对于高效液相色谱法检测食品有害物质的实验基本步骤，它首先是将待检样品制备出稳定的管理状态，再经过提取、净化、浓缩等步骤，最后通过将待检物质加入给定的分离柱中进行分离，主要是利用不同化学成分的习性，分离出待检物质，然后利用检测仪器对检测样品进行检测。

二、高效液相色谱法分析食品中的有害物质现如今，食品制造商为了让食品具有较长的保质期，往往会添加大量化学合成物。

虽然这些添加剂有助于维持食品的色、香、味等方面，但其中很多的合成物是有害污染物。

比如人们习惯吃的烤肉串，老干妈酱，方便面，等等，其中都含有不同的污染物。

高效液相色谱法能够检测出食品中的有害物质，据了解，高效液相色谱法主要应用于检测食品中的防腐剂、色素、农药、饲料添加剂、抗生素、激素等化学成分的含量。

其检测的基本流程为：将样品进行提取、净化、浓缩等步骤，再利用高效液相色谱法进行分离、检测。

利用高效液相色谱法检测食品有害物质，可以分析出样品中各种组分的含量，从而准确判断食品安全。

三、高效液相色谱法分析技术的优点高效液相色谱法作为分析检测领域的先进技术，不仅具有分析速度快、准确度高、分离效率高、广谱性等优点，而且具有高灵敏度和高选择性，可以容易地确定样品中的未知组分，避免了无用数据的产生，为检测人员提供了帮助。

凝胶渗透色谱-高效液相色谱法测定食用油中胆固醇含量

凝胶渗透色谱-高效液相色谱法测定食用油中胆固醇含量陈果
【期刊名称】《食品与药品》
【年(卷),期】2016(018)005
【摘要】目的建立利用凝胶渗透色谱-高效液相色谱法(GPC-HPLC)测定食用油中胆固醇的方法.方法食用油用乙酸乙酯-环己烷溶解,经GPC净化,流速:5.0 mL/min,收集流出时间18～24 min组分,净化后样品采用C18色谱柱分离,二极管阵列检测器在205 nm波长处检测.结果胆固醇的线性范围为0.05～0.8 mg/mL,检出限为7.07 mg/kg,平均回收率为69.96 ％～93.87％,RSD为0.38 ％～6.76％.结论该方法前处理简单,自动化程度高,可用于食用油中胆固醇含量测定.
【总页数】3页(P361-363)
【作者】陈果
【作者单位】重庆市食品药品检验检测研究院,重庆401121
【正文语种】中文
【中图分类】TS207.3
【相关文献】
1.凝胶渗透色谱-高效液相色谱法同时测定食用油中BaP、BHA、BHT、TBHQ、DBP、DEHP [J], 朱晓玲;刘杰;范志勇;曹晖;彭青枝
2.凝胶净化结合高效液相色谱-蒸发光散射检测器测定食用油脂中胆固醇含量 [J], 吴立平;曾辉;孙咏梅;谢冰莹
3.凝胶渗透色谱-气相色谱-质谱法测定食用油中8种邻苯二甲酸酯类增塑剂 [J],
吴雪;董海峰;汤桦;李春欣;陈大舟
4.凝胶色谱净化-高效液相色谱法测定植物油中胆固醇含量鉴定动物油掺杂比例的研究 [J], 鲍晓瑾;倪炜华;蔡丹萍
5.凝胶色谱净化-超高效液相色谱法测定食用油中苯并芘残留 [J], 傅英文;花锦;王静慧;刘晓琳
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高效液相色谱法测定食品中的胆固醇

教学目标：1. 让学生通过自测题了解自己在英语学习中的优势和不足。

2. 培养学生自主学习和自我评价的能力。

3. 提高学生的英语阅读、听力、语法和写作等基本技能。

教学重点：1. 自测题的命题原则和方法。

2. 自测题的评分标准和反馈方式。

教学难点：1. 如何根据学生的实际情况制定合适的自测题。

2. 如何帮助学生正确评价自己的英语水平。

教学过程：一、导入1. 教师简要介绍自测题的作用和意义。

2. 引导学生思考：如何通过自测题提高自己的英语水平？二、自测题命题1. 教师展示自测题的命题原则和方法，如：题型、题量、难度等。

2. 学生分组讨论，根据所学知识，共同命题。

三、自测题实施1. 学生根据自测题进行自我检测，教师巡视指导。

2. 学生独立完成自测题，不得相互抄袭。

四、自测题评分与反馈1. 教师根据自测题的评分标准进行评分。

2. 学生了解自己的得分情况，教师进行针对性指导。

3. 教师针对学生的不足之处，提出改进建议。

五、总结与反思1. 教师总结自测题的实施过程，强调自测题的重要性。

2. 学生分享自己在自测过程中的收获和体会。

3. 教师引导学生思考：如何根据自测结果调整自己的学习方法？教学评价：1. 评价学生自测题的命题质量。

2. 评价学生在自测过程中的表现，如：认真程度、答题速度等。

3. 评价学生对自测结果的反馈和改进措施。

教学延伸：1. 教师根据学生的自测结果，制定个性化的辅导计划。

2. 鼓励学生参加英语角、英语演讲等活动，提高自己的英语实际运用能力。

教学资源：1. 自测题命题模板2. 自测题评分标准3. 英语学习资料教学反思：本节课通过自测题，让学生了解自己在英语学习中的优势和不足，培养学生自主学习和自我评价的能力。

在教学过程中，要注意以下几点：1. 自测题的命题要具有针对性和实用性，避免过于简单或复杂。

2. 教师在自测过程中要关注学生的表现，及时给予指导和帮助。

3. 自测结果的反馈要客观、公正，鼓励学生不断进步。

凝胶净化结合高效液相色谱-蒸发光散射检测器测定食用油脂中胆固醇含量

凝胶净化结合高效液相色谱-蒸发光散射检测器测定食用油脂中胆固醇含量吴立平;曾辉;孙咏梅;谢冰莹【摘要】建立了凝胶净化系统与高效液相色谱-蒸发光散射检测器结合对食用油脂中胆固醇含量测定的方法.结果表明:胆固醇质量浓度在2 ～200 μg/mL范围内,胆固醇质量浓度的对数与峰面积对数线性关系良好,相关系数为0.998 9,检出限为10 mg/kg,回收率为94.01％～ 103.80％,相对标准偏差为1.12％～7.25％.该方法可有效减少烦琐的前处理过程对样品中胆固醇含量造成的损失,避免检测过程中出现溶剂响应和溶剂峰干扰,方法简单、可行、有效.%A method for the determination of cholesterol content in edible oils and fats was established by gel permeation chromatography system combined with liquid chromatography-evaporative light scattering detector.The results showed that the linearity correlation was good in the range of 2-200 μg/mL with correlation efficient 0.998 9.The limit of detection,recovery rate and relative standard deviation were 10 mg/kg,94.01％-103.80％ and 1.12％-7.25％ respectively.The method could effectively reduce the loss of cholesterol caused by cumbersome pre-treatment process,and avoid solvent response and solvent peak interference during detection.The method was proved to be simple,feasible and effective.【期刊名称】《中国油脂》【年(卷),期】2018(043)006【总页数】3页(P147-149)【关键词】食用油脂;胆固醇;凝胶净化;蒸发光散射检测器【作者】吴立平;曾辉;孙咏梅;谢冰莹【作者单位】攀枝花市产品质量监督检验所,四川攀枝花617000;攀枝花市产品质量监督检验所,四川攀枝花617000;攀枝花市产品质量监督检验所,四川攀枝花617000;攀枝花学院,四川攀枝花617000【正文语种】中文【中图分类】TS227;O657.7胆固醇又称胆甾醇，是动物组织细胞不可缺少的重要物质，其不仅参与形成细胞膜，而且是合成胆汁酸、维生素D以及甾体激素的原料[1-2]。

高效液相色谱法测胆固醇含量鉴别地沟油

胆固醇标样、菜籽油、掺入 1%、10%、40% 地沟油的菜籽油样品，检测结果如图 3～7 所示。
图 4 与图 3 菜籽油色谱图对比，当菜籽油中仅仅掺入 1% 的地沟油时，它的色谱图 1～8min 出来的峰型基线严重漂移，随着地沟油掺入量增加，漂移程度越大，信号越强烈。而在高效液相实验条件下，检测的其他样品分离情况良好，并未发生基线严重漂移现象。说明峰型基线漂移并不是流动相、实验条件及设备本身的原因，在检测波长为 205nm 条件下油中大部分物质都有信号响应，地沟油所含物质更为复杂，多种共存物质难以分离导致基线漂移。
detected in qualified rapeseed oil. Thus cholesterol content could be used as an indicator for identification of oil adulterated with
hogwash oil with the lowest detection limit of 0.05 mg/g.
1.3.1 样品制备菜籽油中分别掺入质量分数为 1% 、10%、20%、
40%、60%、80% 的地沟油样品，分别记为 1～6 号。对照组食用油有菜籽油、花生油、大豆油、花生调和油。
收稿日期：2008-12-11 基金项目：武汉工业学院研究生创新基金项目(07cx004) 作者简介：郭涛(1983 －)，男，硕士研究生，研究方向为油脂加工与提取。E-mail：guotao1-1@ * 通讯作者：何东平(1957 －)，男，教授，博士，研究方向为油脂工程。E-mail：hedp123456@
286 2009, Vol. 30, No. 22
食品科学
※分析检测
高效液相色谱法测胆固醇含量鉴别地沟油

食品中胆固醇的测定

食品安全国家标准食品中胆固醇的测定1范围本标准规定了食品中胆固醇的测定方法㊂本标准适用于食品中胆固醇的测定,第一法气相色谱法适用于肉及肉制品㊁蛋及蛋制品㊁乳及乳制品等各类动物性食品以及植物油脂中胆固醇的测定;第二法高效液相色谱法适用于肉及肉制品㊁蛋及蛋制品㊁乳及乳制品等各类动物性食品中胆固醇的测定;第三法比色法适用于肉及肉制品㊁蛋及蛋制品等动物性食品中胆固醇的测定㊂第一法气相色谱法2原理样品经无水乙醇-氢氧化钾溶液皂化,石油醚和无水乙醚混合提取,提取液浓缩至干,无水乙醇溶解定容后,采用气相色谱法检测,外标法定量㊂3试剂和材料除非另有说明,本方法所用试剂均为分析纯,水为G B/T6682规定的一级水㊂3.1试剂3.1.1甲醇(C H3O H):色谱纯㊂3.1.2无水乙醇(C2H5OH)㊂3.1.3石油醚:沸程30ħ~60ħ㊂3.1.4无水乙醚(C4H10O)㊂3.1.5无水硫酸钠(N a2S O4)㊂3.1.6氢氧化钾(K O H)㊂3.2试剂配制3.2.160%氢氧化钾溶液:称取60g氢氧化钾,缓慢加水溶解,并定容至100m L㊂3.2.2石油醚-无水乙醚混合液(1+1,体积比):将石油醚和无水乙醚等体积混合均匀㊂3.3标准品胆固醇标准品(C27H46O,C A S号:57-88-5):纯度ȡ99%㊂3.4标准溶液配制3.4.1胆固醇标准储备液(1.0m g/m L)称取胆固醇标准品0.05g(精确至0.1m g),用无水乙醇溶解并定容至50m L,放置0ħ~4ħ密封可贮藏半年㊂3.4.2胆固醇标准系列工作液分别吸取标准储备液(1.0m g/m L)25μL㊁50μL㊁100μL㊁500μL㊁2000μL,用无水乙醇定容至10m L,该标准系列工作液的浓度分别为2.5μg/m L㊁5μg/m L㊁10μg/m L㊁50μg/m L㊁200μg/m L㊂现用现配㊂4仪器和设备4.1气相色谱仪:配有氢火焰离子化检测器(F I D)㊂4.2电子天平:感量为1m g和0.1m g㊂4.3匀浆机㊂4.4皂化装置㊂5分析步骤5.1试样制备5.1.1肉及肉制品等各类固体试样取样品的可食部分200g进行均质㊂将试样装入密封的容器里,防止变质和成分变化㊂试样应在均质化24h内尽快分析㊂5.1.2植物油脂㊁乳品等液体试样取混匀后的均匀液体试样装入密封容器里待测㊂5.2样品处理5.2.1皂化称取制备后的样品0.25g~10g(准确至0.001g,胆固醇含量约为0.5m g~5m g),于250m L圆底烧瓶中,加入30m L无水乙醇,10m L60%氢氧化钾溶液,混匀㊂将试样在100ħ磁力搅拌加热电热套皂化回流1h,不时振荡防止试样黏附在瓶壁上,皂化结束后,用5m L无水乙醇自冷凝管顶端冲洗其内部,取下圆底烧瓶,用流水冷却至室温㊂5.2.2提取定量转移全部皂化液于250m L分液漏斗中,用30m L水分2次~3次冲洗圆底烧瓶,洗液并入分液漏斗,再用40m L石油醚-无水乙醚混合液(1+1,体积比)分2次~3次冲洗圆底烧瓶并入分液漏斗,振摇2m i n,静置,分层㊂转移水相,合并三次有机相,用水每次100m L洗涤提取液至中性,初次水洗时轻轻旋摇,防止乳化,提取液通过约10g无水硫酸钠脱水转移到150m L平底烧瓶中㊂5.2.3浓缩将上述平底烧瓶中的提取液在真空条件下蒸发至近干,用无水乙醇溶解并定容至5m L,待气相色谱仪测定㊂不同试样的前处理需要同时做空白试验㊂5.3测定5.3.1仪器参考条件a)色谱柱:D B-5弹性石英毛细管柱,柱长30m,内径0.32mm,粒径0.25μm,或同等性能的色谱柱;b)载气:高纯氮气,纯度ȡ99.999%;恒流2.4m L/m i n;c)柱温(程序升温):初始温度为200ħ,保持1m i n,以30ħ/m i n速率升至280ħ,保持10m i n;d)进样口温度280ħ;e)检测器温度:290ħ;f)进样量:1μL;g)进样方式:不分流进样,进样1m i n后开阀;h)空气流量:350m L/m i n;i)氢气流量:30m L/m i n㊂5.3.2标准曲线的制作分别取胆固醇标准系列工作液注入气相色谱仪,在上述色谱条件下测定标准溶液的响应值(峰面积),以浓度为横坐标㊁峰面积为纵坐标,制作标准曲线㊂5.3.3测定试样溶液注入气相色谱仪,测定峰面积,由标准曲线得到试样溶液中胆固醇的浓度㊂根据保留时间定性,外标法定量㊂胆固醇标准溶液的色谱图见图A.1㊂6分析结果的表述试样中胆固醇的含量按式(1)计算:(1)X=ρˑVmˑ1000ˑ100式中:X 试样中胆固醇含量,单位为毫克每百克(m g/100g);ρ 试样溶液中胆固醇的浓度,单位为微克每毫升(μg/m L);V 试样溶液最终定容的体积,单位为毫升(m L);m 试样质量,单位为克(g);1000㊁100 换算系数㊂计算结果应扣除空白㊂结果保留三位有效数字㊂7精密度在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10%㊂8其他当称样量为0.5g,定容体积为5.0m L,方法的检出限为0.3m g/100g,定量限为1.0m g/100g㊂第二法高效液相色谱法9原理样品经无水乙醇-氢氧化钾溶液皂化,石油醚和无水乙醚混合提取,提取液浓缩至干,无水乙醇溶解定容后,采用高效液相色谱仪检测,外标法定量㊂10试剂和材料除非另有说明,本方法所用试剂均为分析纯,水为G B/T6682规定的一级水㊂10.1试剂10.1.1甲醇(C H3O H):色谱纯㊂10.1.2无水乙醇(C2H5O H)㊂10.1.3石油醚:沸程30ħ~60ħ㊂10.1.4无水乙醚(C4H10O)㊂10.1.5无水硫酸钠(N a2S O4)㊂10.1.6氢氧化钾(K O H)㊂10.2试剂配制10.2.160%氢氧化钾溶液:称取60g氢氧化钾,缓慢加水溶解,并定容至100m L㊂10.2.2石油醚-无水乙醚混合液(1+1,体积比):将石油醚和无水乙醚等体积混合均匀㊂10.3标准品胆固醇标准品(C27H46O,C A S号:57-88-5):纯度ȡ99%㊂10.4标准溶液配制10.4.1胆固醇标准储备液(1.0m g/m L):称取胆固醇标准品0.05g(精确至0.1m g),用无水乙醇溶解并定容至50m L,放置0ħ~4ħ密封可贮藏半年㊂10.4.2胆固醇标准系列工作液:分别吸取标准储备液(1.0m g/m L)25μL㊁50μL㊁100μL㊁500μL㊁2000μL,用无水乙醇定容至10m L,该标准系列工作液的浓度分别为2.5μg/m L㊁5μg/m L㊁10μg/m L㊁50μg/m L㊁200μg/m L㊂现用现配㊂11仪器和设备11.1匀浆机㊂11.2高效液相色谱仪:配有紫外检测器或相当的检测器㊂11.3电子天平:感量为1m g和0.1m g㊂12分析步骤12.1试样制备12.1.1肉及肉制品等各类固体试样样品取可食部分200g,使用绞肉机或匀浆机将试样均质㊂将试样装入密封的容器里,防止变质和成分变化㊂试样应在均质化24h内尽快分析㊂12.1.2乳品等液体试样取混匀后的均匀液体试样装入密封容器里待测㊂12.2样品处理12.2.1皂化称取制备后的样品0.25g~10g(精确至0.001g,胆固醇含量约为0.5m g~5m g),于250m L圆底烧瓶中,加入30m L无水乙醇,10m L60%氢氧化钾溶液,混匀㊂将试样在100ħ磁力搅拌加热电热套皂化回流1h,不时振荡防止试样黏附在瓶壁上,皂化结束后,用5m L无水乙醇自冷凝管顶端冲洗其内部,取下圆底烧瓶,用流水冷却至室温㊂12.2.2提取定量转移全部皂化液于250m L分液漏斗中,用30m L水分2次~3次冲洗圆底烧瓶,洗液并入分液漏斗,再用40m L石油醚-无水乙醚混合液(1+1,体积比)分2次~3次冲洗圆底烧瓶并入分液漏斗,振摇2m i n,静置,分层㊂转移水相,合并三次有机相,用水每次100m L洗涤提取液至中性,初次水洗时轻轻旋摇,防止乳化,提取液通过约10g无水硫酸钠脱水转移到150m L平底烧瓶中㊂12.2.3浓缩将上述平底烧瓶中的提取液在真空条件下蒸发至近干,用无水乙醇溶解并定容至5m L,溶液通过0.45μm过滤膜,收集滤液于进样瓶中,待高效液相色谱仪测定㊂不同试样的前处理需要同时做空白试验㊂12.3测定12.3.1仪器参考条件a)色谱柱:C18反相色谱柱,柱长4.6mm,内径150mm,粒径5μm,或同等性能的色谱柱;b)柱温:38ħ;c)流动相:甲醇;d)流速:1.0m L/m i n;e)测定波长:205n m;f)进样量:10μL㊂12.3.2标准曲线的制作分别取10μL胆固醇标准工作液注入高效液相色谱仪,在上述色谱条件下测定标准溶液的响应值(峰面积),以浓度为横坐标㊁峰面积为纵坐标,制作标准曲线㊂12.3.3测定将10μL试样溶液注入高效液相色谱仪,测定峰面积,由标准曲线得到试样溶液中胆固醇的浓度㊂胆固醇标准溶液的色谱图见图A.2㊂13分析结果的表述试样中胆固醇的含量按式(2)计算:(2)X=ρˑVmˑ1000ˑ100式中:X 试样中胆固醇的含量,单位为毫克每百克(m g/100g);ρ 试样溶液中胆固醇的浓度,单位为微克每毫升(μg/m L);V 试样溶液定容体积,单位为毫升(m L);m 试样质量,单位为克(g);1000㊁100 换算系数㊂计算结果应扣除空白㊂结果保留三位有效数字㊂14精密度在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10%㊂15其他当称样量为1g,定容体积为5m L,方法的检出限为0.64m g/100g,定量限为2.1m g/100g㊂第三法比色法16原理样品进行脂肪提取后的油脂,经无水乙醇-氢氧化钾溶液皂化,用石油醚提取,浓缩后加入冰乙酸,以硫酸铁铵试剂作为显色剂,采用分光光度计,在560n m~575n m波长下检测,外标法定量㊂17试剂和材料除非另有说明,本方法所用试剂均为分析纯,水为G B/T6682规定的三级水㊂17.1试剂17.1.1无水乙醇(C2H5O H)㊂17.1.2石油醚:沸程30ħ~60ħ㊂17.1.3硫酸(H2S O4)㊂17.1.4冰乙酸(C2H4O2):优级纯㊂17.1.5磷酸(H3P O4)㊂17.1.6硫酸铁铵[F e N H4(S O4)2㊃H2O]㊂17.1.7钢瓶氮气(N2):纯度99.99%㊂17.1.8海砂㊂17.1.9氢氧化钾(K O H)㊂17.1.10氢氧化钠(N a O H)㊂17.1.11盐酸(H C l)㊂17.1.12乙醚(C2H5O)㊂17.2试剂配制17.2.1铁矾储备液:称取4.463g硫酸铁铵[F e N H4(S O4)2㊃H2O]于100m L磷酸中(如果不能充分溶解,超声后取上清液),贮藏于干燥器内,此液在室温中稳定㊂17.2.2铁矾显色液:吸取铁矾储备液10m L,用硫酸定容至100m L㊂贮藏于干燥器内,以防吸水㊂17.2.350%氢氧化钾溶液:称取50g氢氧化钾,用水溶解,并定容至100m L㊂17.2.45%氯化钠溶液:称取5g氯化钠,用水溶解,并定容至100m L㊂17.2.5盐酸溶液(1+1):将盐酸与水等体积混合均匀㊂17.2.6氢氧化钠溶液(240g/L):称取24g氢氧化钠,用水溶解并定容至100m L㊂17.2.7海砂:取用水洗去泥土的海砂或河砂,先用盐酸溶液(1+1)煮沸0.5h,用水洗至中性再用氢氧化钠溶液(240g/L)煮沸0.5h,用水洗至中性,经100ħʃ5ħ干燥备用㊂17.3标准品胆固醇标准品(C27H46O,C A S号:57-88-5):纯度ȡ99%㊂17.4标准溶液配制17.4.1胆固醇标准储备液(1.0m g/m L):称取胆固醇标准品0.10g(精确至0.1m g),用冰乙酸溶解并定容至100m L㊂放置4ħ密封可贮藏半年㊂17.4.2胆固醇标准工作液(100μg/m L):吸取胆固醇标准储备液(1.0m g/m L)10m L,用冰乙酸定容至100m L㊂现用现配㊂18仪器和设备18.1匀浆机㊂18.2分光光度计㊂18.3电子天平:感量为1m g和0.1m g㊂19分析步骤19.1胆固醇标准曲线的制作吸取胆固醇标准工作液0.0m L㊁0.5m L㊁1.0m L㊁1.5m L㊁2.0m L分别置于10m L试管中,在各管内加入冰乙酸使总体积均达4m L㊂沿管壁加入2m L铁矾显色液,混匀,在15m i n~90m i n内,在560n m~575n m波长下比色㊂以胆固醇标准浓度为横坐标,吸光度为纵坐标制作标准曲线㊂19.2测定19.2.1食品中脂肪的提取与测定根据食品种类分别用索氏脂肪提取法,研磨浸提法和罗高氏法提取脂肪㊂并计算出每100g食品中的脂肪含量㊂19.2.2食品中胆固醇的测定将提取的油脂3滴~4滴(约含胆固醇300μg~500μg),置于25m L试管中,准确记录其质量㊂加入4m L无水乙醇,0.5m L50%氢氧化钾溶液,混匀,装上冷凝管,在65ħ恒温水浴锅中皂化1h㊂皂化时每隔20m i n~30m i n振摇一次使皂化完全㊂皂化完毕,取出试管,用流水冷却㊂加入3m L5%氯化钠溶液,10m L石油醚,盖紧玻璃塞,在电动振荡器上振摇2m i n,静置分层(一般约需1h以上)㊂取上层石油醚液2m L,置于10m L具塞玻璃试管内,在65ħ水浴中用氮气吹干,加入4m L冰乙酸,2m L铁矾显色液,混匀,放置15m i n后在560n m~575n m波长下比色,测得吸光度,在标准曲线上查出相应的胆固醇含量㊂不同试样的前处理需要同时做空白试验㊂20分析结果的表述试样中胆固醇的含量按式(3)计算:X=AˑCˑV1V2ˑmˑ1000 (3)式中:X 试样中胆固醇含量,单位为毫克每百克(m g/100g);A 测得的吸光度值在胆固醇标准曲线上的胆固醇含量,单位为微克(μg);C 试样中脂肪含量,单位为克每百克(g/100g);V1 石油醚总体积,单位为毫升(m L);V2 取出的石油醚体积,单位为毫升(m L);m 称取食品油脂试样量,单位为克(g);1000 换算系数㊂计算结果应扣除空白㊂结果保留三位有效数字㊂21精密度在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10%㊂22其他方法的检出限为2.4m g/100g,定量限为7.2m g/100g㊂附录A胆固醇标准的色谱图A.1胆固醇标准溶液的气相色谱图见图A.1㊂图A.1胆固醇标准溶液的气相色谱图A.2胆固醇标准溶液的高效液相色谱图见图A.2㊂图A.2胆固醇标准溶液的高效液相色谱图。