菊花的组织培养
植物的组织培养-菊花
05
结论与展望
实验结论
组织培养技术成功应用于菊花繁殖，通 过无菌操作和适宜的培养条件，可以诱 导菊花愈伤组织形成和分化，进而获得
完整的植株。
实验结果表明，适宜的培养基和激素组 合对菊花组织培养具有显著影响，其中 MS培养基和适量的生长素与细胞分裂 素组合是最适合菊花组织培养的培养条
件。
此外，可以进一步优化培养条件和探索更高效的繁殖方法，提高菊花组织培养的效率和成功 率。同时，加强与其他学科的交叉研究，推动菊花组织培养技术的创新发展。
THANKS
感谢观看
培养过程与管理
总结词
控制适宜的培养条件并定期观察管理
VS
详细描述
适宜的培养条件是菊花组织培养成功的关 键因素之一。在培养过程中，需要控制适 宜的温度、湿度、光照、气体等条件，以 保证外植体的正常生长和发育。同时，需 要定期观察和管理，及时调整培养条件和 发现并解决问题，以确保组培的成功进行 。
04
根据所培养植物的种类和实验需求， 选择适宜的培养基配方。
根据培养基的类型和植物生长的需求， ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ整培养基的酸碱度。
制备培养基
按照所选培养基配方，精确称量各种 成分，按照规定的顺序加入，混合均 匀后进行灭菌处理。
培养条件及其控制
温度控制
光照控制
根据所培养植物的种类和生长阶段，保持 恒定的温度，以满足植物生长的需求。
药物等。
菊花的组织培养研究背景
菊花是中国传统名花之一，具有 丰富的品种和花色。
菊花的组织培养研究始于上世纪 80年代，随着技术的不断发展 和完善，已经实现了菊花的快速
繁殖和种质保存。
目前，菊花的组织培养技术已经 广泛应用于园艺、花卉产业等领
菊花的组织培养
（3）植物激素的影响
常用的植物激素：生长素、细胞分裂素和 赤霉素 生长素、细胞分裂素是启动细胞分裂、脱 分化和再分化的关键性激素 在生长素存在的情况下，细胞分裂素的作 用呈加强的趋势 激素的使用顺序、使用的量及比例影响植 物细胞的发育方向
生长素类： 2，4－二氯苯氧乙酸（2，4－D）、 吲哚乙酸（IAA）、萘乙酸（NAA）、 吲哚丁酸（IBA） 细胞分裂素类： 激动素（KT）、6－苄基嘌呤 （ 6－BA）、玉米素（ZT） 赤霉素类： 赤霉酸（GA3）
嫁接 扦插 压条
植物组织培养的基本过程
影响植物组织培养的因素
菊花的组织培养
植物组织培养
在无菌和人工控制条件下，将离体 的植物器官、组织、细胞，培养在人 工配置的培养基上，给予适宜的培养 条件，诱导其产生愈伤组织、丛芽， 最终形成完整的植株。
关键词： 外植体、脱分化、再分化、愈伤组织
使用顺序 实验结果 先使用生长素，后使用细胞分裂素 有利于细胞分裂，但不利分化 先使用细胞分裂素后使用生长素 同时使用 细胞既分裂、也分化 分化频率高
使用比例
实验结果
生长素
生长素 生长素
> <Leabharlann 细胞分裂素细胞分裂素
有利于根的分化
有利于芽的分化，抑制根的分化 促进愈伤组织生长
＝ 细胞分裂素
思考：以下培养基出现的现象反应了什么问题？
A、大量元素: N、P、 S 、 K、Ca、Mg等
B、微量元素:B、Mn、Cu、Zn、Fe、Mo、I、 Co等
C、有机物：甘氨酸、烟酸、肌醇、维生素、蔗糖等
D、植物激素：生长素、细胞分裂素、赤霉素等
讨论：你能说出各种营养物质的作用吗？同专题 2中微生物培养基的配方相比，MS培养基的配方 有哪些明显的不同？
菊花的组织培养课件(经典)
光照要求
每天光照时间应控制在12-16小时， 光照强度为2000-3000lx，以提供 充足的光照条件，促进菊花组织生 长和分化。
湿度控制
培养室内相对湿度应保持在70%80%之间，以防止培养物失水或过 度吸水。
营养液成分调整策略
01
02
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大量元素调整
根据菊花生长需求，适时 调整营养液中氮、磷、钾 等大量元素的含量和比例。
课程结束后一周内提交。
报告格式
其他要求
采用书面形式，字数不少于1000字，需包 含标题、正文及结论等部分。
报告需真实反映学生的学习情况和自我感 受，不得抄袭或剽窃他人成果。
THANKS
感谢观看
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04
快速繁殖
利用组织培养技术可以快速繁 殖出大量优质种苗，满足市场
需求。
种质保存
通过组织培养技术可以长期保 存菊花的种质资源，避免种质
退化。
遗传转化
利用组织培养技术可以将外源 基因导入菊花细胞，实现遗传
转化和基因工程育种。
新品种选育
通过组织培养技术可以诱导菊 花产生变异，从中选育出优良
新品种。
考核内容
涵盖课程讲授的所有知识点，包括菊花的生物学特性、组织培养 的基本原理、技术操作等。
成绩评定
结合学生的出勤率、课堂表现、实验操作能力及考试成绩等多方 面因素进行综合评定。
学生自我评价报告提交要求
报告内容
提交时间
学生需对自己在课程学习过程中的表现进 行全面评价，包括知识掌握情况、实验将抗病虫害相关基因导入菊花
细胞，提高植株的抗病虫害能力。
06
总结回顾与课程考核要求
关键知识点总结回顾
菊花的组织培养
4、某园艺场经过长期精心选育，培养出一株 形态优美的兰花，如果要保持母本的优良性 状，并尽快大规模繁殖，最适合的繁殖方式 是（ D ） A．分裂生殖 B．有性生殖 C．孢子生殖 D．组织培养 5、甘薯种植多年后易积累病毒而导致品种退 化。目前生产上采用茎尖分生组织离体培养 的方法快速繁殖脱毒的种苗，以保证该品种 的品质和产量水平。这种通过分生组织离体 培养获得种苗的过程不涉及细胞的 C A.有丝分裂 B.分化 C.减数分裂 D.全能性
讨论：你能说出各种营养物质的作用吗？同 专题2中微生物培养基的配方相比，MS培养基 的配方有哪些明显的不同？
微量元素和大量元素提供植物细胞生活 所必需的无机盐；蔗糖提供碳源，同时能够 维持培养基的渗透压；甘氨酸、维生素等物 质主要是为了满足离体植物细胞在正常代谢 途径受到一定影响后所产生的特殊营养需求。 微生物培养基以有机营养为主。与微生 物的培养不同，MS培养基则需提供大量无机 营养，无机盐混合物包括植物生长必须的大 量元素和微量元素两大类。
(3)是否进行了统计、对照与记录： 做好统计和对照，填好结果记录表，从 第一步开始做好实验记录。可以分组配制不 同培养基，如诱导愈伤组织直接分化丛芽的 培养基，做不同培养基配方的实验比较。
(4)生根苗的移栽技术：
关键是既要充分清洗根系表面的培养基， 又不能伤及根系。一般先使用无土栽培的办 法，培养基要提前消毒，苗壮后再移植到土 壤。可通过统计成活率来衡量移栽水平。
菊花是菊科菊属多年生草本植物，原产 于我国。它花色繁多，品种丰富，具有很强 的观赏价值，是目前世界上栽培最广的切花 及盆花之一，也是中国十大名花之一。它的 繁殖可以用播种法、扦插法，分株法、组织 培养法。
菊花的组织培养
1、掌握植物组织培养相关理论知识； 2、学习植物组织培养的操作方法； 3、掌握植物组织培养过程中使用的无菌技 术 。
菊花的组织培养
基因编辑
通过组织培养技术结合基因编辑技术， 可以对菊花的基因进行精确编辑，提 高菊花的抗性、产量和品质。
转基因技术
通过组织培养技术，可以将外源基因 导入菊花中，实现转基因菊花的培育， 为新品种的研发提供技术支持。
在育种上的应用
品种改良
通过组织培养技术，可以对菊花品种进 行改良，提高其抗性、产量和品质，满 足市场需求。
菊花组织培养
目录
• 引言 • 菊花组织培养的基本流程 • 影响菊花组织培养的因素 • 菊花组织培养的应用前景 • 菊花组织培养的挑战与展望 • 参考文献
01
引言
组织培养技术的简介
01
组织培养是一种通过人工模拟植 物体内环境，将植物的离体组织 或细胞培养成完整植株的技术。
02
该技术可用于快速繁殖、品种改 良、种质资源保存等方面，具有 高效、可控的特点。
织的生长和发育。
规模化生产
通过改进设备和工艺， 实现菊花组织培养的规
模化生产。
未来研究方向与展望
基因编辑技术的应用
利用基因编辑技术，定向改良菊花的某 些性状，提高其观赏价值和抗逆性。
种质资源保护与创新
通过组织培养技术，保存珍稀、濒危 的菊花种质资源，并进行创新利用。
次生代谢产物的生产
利用组织培养技术，生产菊花中的有 效成分，为医药、食品等领域提供原 料。
快速繁殖优良品种
01
02
03
快速繁殖
通过组织培养技术，可以 在短时间内快速繁殖出大 量优良品种的菊花，提高 生产效率和品质。
保持优良性状
组织培养繁殖的菊花能够 保持优良性状，避免传统 繁殖方式中优良性状的丢 失。
实现规模化生产
通过组织培养技术，可以 实现规模化生产，满足市 场需求，降低生产成本。
课题1.菊花的组织培养
02
菊花组织培养的原理
植物细胞的全能性
植物细胞全能性是指植物细胞具有发育成完整个体的潜能。在组织培养过程中， 离体的菊花细胞、组织或器官在适宜的培养条件下，可以重新发育成完整的菊花 个体。
植物细胞全能性的实现需要适宜的培养条件，包括适宜的温度、湿度、光照、营 养物质和激素等。这些条件能够激发植物细胞内部的基因表达，促使细胞分裂和 分化，最终形成完整的植株。
会发生基因突变或重组。
03
菊花组织培养的选择
选择健康、无病虫害的菊花植株 作为外植体来源，通常使用茎尖 、叶片或花蕾等部位。
外植体的处理
对外植体进行清洗、切割和消毒 等处理，以去除表面污垢和微生 物，确保无菌状态。
无菌操作技术
01
02
03
操作环境
在超净工作台中进行操作， 确保环境无菌。
种质资源库
利用组织培养技术，可以建立菊花 的种质资源库，为育种和品种改良 提供丰富的遗传资源。
细胞产物的生产
细胞产物研究
通过组织培养技术，可以研究菊 花的细胞产物，如次生代谢产物
等。
细胞培养生产
利用组织培养技术，可以在细胞 培养条件下生产菊花的有效成分，
如黄酮类化合物、挥发油等。
生物活性研究
通过组织培养技术，可以研究菊 花的生物活性，如抗氧化、抗炎 等作用，为其在医疗、保健等领
菊花组织培养
• 引言 • 菊花组织培养的原理 • 菊花组织培养的步骤 • 菊花组织培养的应用 • 菊花组织培养的展望
01
引言
菊花的简介
01
菊花是多年生草本植物，属于菊 科，具有多种品种和花色。
02
菊花常用的组培方法
菊花常用的组培方法菊花是一种重要的观赏植物，不仅具有美丽的花朵和丰富的品种，而且可以应用于药用和食用等多个领域。
为了满足人们对菊花苗种质的需求和加速菊花育种研究进程，组培技术被广泛用于菊花的育种和繁殖。
本文介绍了菊花常用的组培方法，帮助读者更好地了解菊花组培。
一、愈伤组织培养法愈伤组织培养法是菊花组培研究中最常用的方法之一，也是最基础的组培方法。
该方法是将菊花组织通过切割、去皮等手段形成小型的组织片段，再将其培养在含有适宜营养物质和生长激素的培养基中，让其形成小型愈伤组织并快速生长繁殖。
愈伤组织培养常用的培养基有MS、B5、N6等，最主要的激素为2,4-D、NAA、IBA、TDZ等。
在菊花愈伤组织培养过程中，应注意菌株选取、外植体处理、培养基配方、温度、光周期等因素的控制。
二、叶片和茎段组织培养法叶片和茎段组织培养法是将菊花的叶片或者茎段切割成小段，通过营养液或者培养基中适宜的生长激素刺激其生长而得到苗。
这种方法的最大优势是能够利用大量已有菊花株的组织进行繁殖，且培养的时间短。
这种方法同样需要注意菌株的选择、外植体的处理、培养基的配方等因素的控制。
三、花粉培养法花粉培养法是通过将菊花的花粉切割种植在含有营养物质的培养基上，让花粉萌发并生长为菊花幼苗的方法。
在花粉培养过程中，需要注意花粉的提取、消毒和筛选，以及培养基的配方和温度的控制。
四、微繁殖法微繁殖法是通过将菊花的细胞分化成愈伤组织细胞，再通过诱导分化为芽或根，将其形成小苗并逐步培育成成苗的方法。
此方法能够得到大量质量较高的菊花苗，而且操作简单，对于推广和产业化应用有很大的意义。
组培技术为快速育种和大规模生产高质量菊花苗提供了核心技术支持，应当得到更深入的研究和广泛的应用。
菊花组培技术在菊花栽培和育种应用中的优势已经得到了广泛认可。
虽然不同的组培方法略有差异，但基本原理是相似的，都是在营养基质中通过适宜生长激素的加入利用组织培养达到繁殖和育种的目的。
实验十二菊花的组织培养
实验十二菊花的组织培养背景知识1. 植物组织培养，即利用植物细胞的全能性，在无菌和人工控制的环境条件下，利用适当的培养基，对离体的植物器官、组织、细胞或原生质体进行培养，获得再生的完整植株或生产相关产品的技术。
植物组织培养广泛应用于植物快速繁殖、脱毒（脱除植物病毒）、种质资源保存、单倍体或多倍体育种、杂交、诱变等方面，也是遗传学、分子生物学等其他生物学科研究的一种基本技术。
2. 菊花，菊科菊属多年生草本，高60-150厘米。
茎直立，分枝或不分枝，被柔毛。
叶卵形至披针形，长5-15厘米，羽状浅裂或半裂，有短柄，叶下面被白色短柔毛。
头状花序直径2.5-20厘米，大小不一。
总苞片多层，外层外面被柔毛。
舌状花颜色各种。
管状花黄色。
对菊花进行组织培养，既可快速繁殖，又可使其脱毒而提高产量和品质。
活动目标1．基本目标（1）理解植物组织培养的原理。
（2）叙述组织培养过程中，植物从外植体发育到完整植株的变化过程。
（3）建立无菌概念，学习无菌技术。
（4）学习并尝试植物组织培养的技术与方法。
2．发展目标（1）体验严谨细致的生物学实验操作。
（2）感受科学技术在生产实践中的重要价值。
（3）通过审视自己动手操作的过程，总结分析实验成败原因。
实验准备1．实验原理（1）离体的植物器官、组织、细胞或原生质体，在无菌和人工控制的环境条件下，处于适当的培养基中，可以经过脱分化形成愈伤组织，愈伤组织经过再分化，形成完整植物体。
在植物组织培养的各个阶段中，植物激素的种类、用量、比例需进行适当调整已达成不同培养目标。
（2）无菌技术。
凡是暴露在（未经处理的）空气中的物体，曾经接触过自然水源的物体都是有菌的。
培养所用的培养基含有植物细胞生长所必需的各类营养物质，也使各种细菌、真菌易于滋生繁殖。
组织培养必须采用无菌技术，在取材、接种、培养的整个过程中，必须严格进行培养基和培养材料的灭菌，同时，严格进行无菌操作，防止污染。
2．材料、试剂、器具（1）材料：菊花，可进行生根培养的菊花试管苗。
高二生物 3.1菊花的组织培养
高二生物 3.1菊花的组织培养
5
应用领域
4、突变育种 采用组织培养可以直接诱变和筛 选出具抗病、抗盐、高赖氨酸、高蛋白等优良性状 的品种。
5、基因工程 基因工程主要研究DNA的转导， 而基因转导后必须通过组织培养途径才能实现植株 再生。
6、生物制品 有些极其昂贵的生物制品，如抗 癌首选药物--紫杉醇等，可通过组织培养方式生产。
高二生物 3.1菊花的组织培养
培养基配制(I)—母液配制：
按照MS培养基成分表, 配制分别配制培养基的
母液。 1、大量元素母液(10倍液)
分别称取10倍用量的各种大量无机盐，依次溶 解于大约800ml热的（60-80℃）蒸馏水中。（一 种成分完全溶解后再加入下一种，最后加水，定容 至1000ml后装入试剂瓶中，冰箱内贮存备用）。
3
离体（in vitro)条件下利用人工培养条件 在无菌情况下培养、生长、发育再生出完整 植株的过程。
1958年，英国科学家Steward 等用胡萝 卜根的愈伤组织细胞进行悬浮培养，成功诱 导出胚状体并分化为完整的小植株，不但使 细胞全能性理论得到证实，而且为组织培养 的技术程序奠定了基础。
高二生物 3.1菊花的组织培养
15
植物组织培养营养条件-培养基 (Culture Medium)
培养基是植物组织培养的重要基质。 培养基的成分主要可以分水、无机盐、 有机物、天然复合物、培养体的支持材 料等五大类。
高二生物 3.1菊花的组织培养
16
国际上流行的培养基有几十种，常 用的培养基有：
MS培养基、B5培养基、White培养基、 N6培养基、KM-8P培养基
③ 3-4周后完全形成愈伤组织状态（脱分化） 组织块失去色素
菊花的组织培养
组织培养是指在人工培养基上，离体培养植物的器官、组织、细胞 和原生质体，并使其生长、增殖、分化以及再生植株的技术。
一、基础知识 、植物的组织培养
（）细胞的分化
①概念：在个体发育中，相同细胞的后代在形态、 结构、生理功能上发生稳定性差异的过 程.
②过程：如：受精卵增殖、生长、分化形成组 织、器官、系统.
珍珠岩：固体基质型，含水量高、蓄水性强、 透性好，适合栽培. 、移栽 幼苗长壮后，移栽到土壤中.
（六）栽培
幼苗移栽后，每天观察并记录幼苗的生长情 况，适时浇水、施肥，直至开花.
三、课题延伸
、一般来说，容易进行无性繁殖的植物，也容 易进行组织培养.
、实例：芦荟、豆瓣绿、秋海棠、月季.
菊花 组织 培养
.愈伤组织:细胞排列疏松而无规则,是高度液泡 化的、成无定形状态的薄壁细胞.
人参的愈伤组织
菠萝的愈伤组织
、影响植物组织培养的因素 （）植物材料的选择
烟草和胡萝卜的组织培养较为容易
枸杞愈伤组织的芽诱导比较难 同一植物材料的年龄、保存时间的长短会 影响实验结果
菊花的组织培养一般选择未开花植株的茎 上部新萌生的侧枝
（2）要促进花粉细胞分裂生长，培养基中应有_____________和 _____________两类激素。
（3）愈伤组织分化是指愈伤组织形成芽和根，再由芽发育成叶 和茎。这一过程必须给予光照，其原因是_____________能利用光 能制造有机物，供试管苗生长发育。
（4）试管苗的细胞核中含_________条脱氧核糖核苷酸链。 （5）培育成的试管苗可能出现的基因型有_____________。 答案：（1）水、无机盐、维生素和小分子有机物 （2）细胞分裂 素 植物生长素 （3）叶绿体 （4）24 （5）AB、aB、Ab、ab
菊花的组织培养技术汇总
一、菊花的组织培养技术 二、蝴蝶兰的组织培养技术 三、大花蕙兰的组织培养技术 四、美国红栌的组织培养技术 五、马铃薯的脱毒与快繁技术
蔡艳丽
菊花的组织培养技术
（一）培养意义
菊花的繁殖可以用播种法、扦插法、分 株法、组织培养法。在种苗生产上运用最为 广泛的方法是扦插和组培。由于菊花的病毒 病种类比较多，而且危害也较为严重。使用 扦插繁殖苗，容易引起病毒病的扩张和蔓延， 因此茎尖脱毒培养和组培快繁生产母株植株， 再生产扦插苗的技术，对优良品种的脱毒和 复壮有重要意义。
5.生根和移栽
菊花无根苗生根一般较容易， 通常在增殖培养时久不转瓶， 即可生根，但这种根的根毛较 少或无，不利于将来移栽和生 长，所以常用下列方法处理：
（1）无根苗的试管生根， 切取3 cm左右无根嫩茎，转插 到1／2MS+NAA(或IBA)0.05 mg/L的培养基中，经10 d左右 即可生根，然后移栽驯化。
2.外植体的处理、接种与初代培养 花梗腋芽的培养：剪取整枝花梗，清水冲洗30 min，
将花梗剪成长约2～3 cm带腋芽的切段，用无菌吸水纸 或纱布吸干水分，带入无菌操作室按无菌操作程序进 行接种。先用70%的酒精溶液浸泡30 s，再用0.1%的升汞 溶液浸泡8～10 min，用无菌水反复冲洗5～8次，接种 在MS+BA 3 mg/L的培养基上，可使腋芽萌发为丛生芽。
花梗节间的培养：
取生长期在45 d以内的蝴蝶兰花梗，经无菌操作消 毒后，（消毒方法同花梗腋芽）斜切成1～1.5 mm厚的薄 片，平放在固体培养基上。培养温度24～28℃，光照强 度500 Lx，每天光照16 h培养。培养基用1.2倍的V&W无 机盐配方，加肌醇100 mg/L，维生素B1、B6和烟酸各0.5 mg/L，BA1 mg/L，蔗糖2%。形成原球茎快而多。
菊花的组织培养精心设计
菊花的组织培养精心设计简介菊花是一种常见的花卉，具有丰富的花形和丰富的花色，备受人们喜爱。
为了满足市场对优质菊花的需求，培育高质量的菊花品种成为了菊花生产的重要环节之一。
本文将介绍菊花的组织培养技术，并提供一套精心设计的菊花组织培养方案。
菊花的组织培养技术菊花的组织培养是利用植物的组织细胞为材料，通过培养基和适当的生长条件，快速繁殖出大量相同的菊花植株。
菊花的组织培养可以有效地提高繁殖效率，加快新品种的选育速度，并且可以克服菊花育种中的某些难点。
菊花的组织培养步骤菊花的组织培养可以分为以下几个步骤：1.材料采集：选择器官发育完全的、无病虫害的菊花植株作为材料，从植株中切取茎段、芽鳞或叶片等组织细胞。
2.无菌处理：将采集到的材料进行表面消毒处理，以保证培养过程中无菌条件的要求。
3.培养基配置：根据菊花的生长需求，配置适宜的培养基，通常包括基本培养基、植物生长调节剂和营养物质等。
4.营养激素添加：根据不同的培养阶段，调整培养基中的营养激素种类和浓度，以促进组织分化和植株生长。
5.培养条件控制：菊花的组织培养需要适宜的光照、温度和湿度等条件，以确保培养过程的顺利进行。
6.观察和记录：定期观察培养过程中的植株生长情况和组织分化情况，并进行记录和分析。
菊花的组织培养方案为了提高菊花的组织培养效果，下面是一套精心设计的菊花组织培养方案：1. 材料采集：选择茎段为材料，茎段长度约为2-3厘米，要选取茎段顶部的生长点。
2. 无菌处理：将采集到的茎段进行外层消毒处理，可以使用75%酒精或次氯酸钠溶液进行浸泡消毒。
3. 培养基配置：本方案采用MS培养基，配方如下：•植物生长调节剂：添加0.3 mg/L的6-BA（6-苄氨基腺嘌呤）和0.1 mg/L的NAA（萘乙酸）。
•pH值调节：将培养基的pH值调整至5.8-6.2。
4. 营养激素添加：根据不同的培养阶段，可以适当调整培养基中的营养激素浓度。
例如，在茎段分化阶段，可以增加6-BA的浓度，以促进茎段的分化生长。
3-1菊花的组织培养
接种后立即盖好瓶盖。
实验具体操作过程
3、材料的切取和接种
插入时应注意方向，不要倒插，茎段、茎尖基部插入培养基利于吸收水分和养 分。
形态学上端在上，形态 学下端在下。
进行外植体的接种
接种前用体积分数为70%的酒精将工作台擦拭一遍，打开紫外灯照射20 分钟。工作台消毒后，首先点燃酒精灯。
酒精摇动
③用母液配制培养基时，需要根据各种母液的浓缩倍数，计算用量
实验具体操作过程
2、配置培养基 ①定容
②调PH
③培养基的分装
实验具体操作过程
3、灭菌 分装好的培养基连同其他器械一起进行高压蒸汽灭菌。
请阅读教材15-16页——“（二）无菌技术”相关内容，了解实验室常用的消毒和灭 菌方法。
注意：
①温度为121℃时，维持15-20分钟。若灭菌时间过长，会使培养基中的某些成分变 性失效。 ②某些生长调节剂如赤霉素等以及某些维生素遇热是不稳定的，不能同培养基一 起高压灭菌，而需要进行过滤灭菌。
再分化
根
植物 体
激素使用顺 先使用细 同时使用； 同时使用； 生长素/细 序及使用比 胞分裂素； 生长素/细 生长素/细 胞分裂素 胞分裂素 例情况
胞分裂素 适中 低 高
活学活用
D
1.下列关于影响植物组织培养的因素的说法，正确的是( 养的难易程度相同
B.在植物组织培养中，培养基中必须添加植物激素 C.植物激素中生长素和细胞分裂素的作用是互相独立的 D.pH、温度、光照条件等对植物组织培养特别重要
)
A.不同植物组织培养的难易程度不同，同一种植物材料培
问题导析
(1)植物的种类、材料的 年龄 和保存时间
的 长短 等都会影响植物组织培养。 (2) 植物激素 的种类和比例，决定了细胞分化的方向， 各种植物激素是 相互影响 的。 (3) 全能性表达比较容易 能发育成植株。 的组织不用添加植物激素就
菊花的组织培养
菊花的组织培养
1°细胞分化在植物的个体发育过程中，细胞在形态、结构和生理功能上都会
出现稳定性的差异，形成这些差异的过程叫做细胞分化。
①脱分化由高度分化的植物组织或细胞产生愈伤组织的过程。
称为植物细胞的脱分化。
②再分化脱分化产生的愈伤组织继续进行培养，又可以重新
分化成根或芽等器官，这个过程叫再分化。
2°影响植物组织一般选择未开花植株的茎上部新萌生的侧枝培养的因素主要成分：①大量元素（N、P、K、Ca、Mg、S）
②微量元素（B、Mn、Cu、Fe、Mo、I。
Co）
③有机物
④植物激素（生长素和细胞分裂素）
⑤PH（5.8左右）
⑥温度（18℃-22℃）
⑦光照（12h）
3°外植体用于离体培养的植物器官或组织片段，叫做外植体
外植体消毒：氯化汞
4°接种插入时应注意方向，不要倒插
5°容易进行无性繁殖的植物，也容易进行组织培养。
菊花的植物组织培养
污染控制
组织培养过程中，污染是常见的问题之一，需要采取有效 的措施来控制污染的发生，以保证培养过程的顺利进行。
菊花的植物组织培养的前景
品种改良
通过植物组织培养技术，可以快速繁殖优 质品种，提高菊花的抗逆性、产量和观赏
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05
菊花的植物组织培养的 实验操作
实验材料准备
菊花幼嫩茎段
选择健康、无病虫害的菊花幼嫩茎段作为实验材料，确保其具有旺 盛的生长力和良好的遗传性状。
培养基
制备适合菊花组织培养的培养基，通常包含无机盐、糖、维生素、 氨基酸等营养成分，以及适量的植物生长调节剂。
实验设备
准备组织培养所需的各种实验设备，如超净工作台、培养皿、接种 工具、培养瓶等。
菊花植物组织培养
contents
目录
• 植物组织培养概述 • 菊花的植物组织培养技术 • 菊花的植物组织培养的应用 • 菊花的植物组织培养的挑战与前景 • 菊花的植物组织培养的实验操作
01
植物组织培养概述
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
植物组织培养的定义
植物组织培养是指在人工控制的条件下，将植物的离体器官（如根、茎、叶、花等）、组织或细胞等，培养在人工配置的培 养基上，经过脱分化和再分化，最终形成完整的植株的技术。
品质，为菊花品种改良提供有力支持。
生物防治
通过组织培养获得大量无病毒植株，可以 有效防治菊花病毒病的发生和传播，提高
菊花种植效益。
基因工程
利用基因工程技术，将优良性状基因导入 菊花中，可以培育出具有特殊用途的新品 种，满足市场需求。
生态恢复
3.1菊花的组织培养
（二）影响植物组织培养的因素
3、不同植物激素使用顺序和使用量 生长素 细胞分裂素 植物激素中_______和___________是启动细胞分裂、 脱分化和再分化的关键性因素。 _______________、 植物激素的浓度 使用的先后顺序 _______________以及___________等，都会影响实 用量的比例 验结果。 ①不同植物激素使用顺序
上述个大的马铃薯、炫丽的菊花都 是利用植物的一块组织，甚至一个细胞 通过植物组织培养技术培养成的完整植 株。 运用这种技术： ①可以实现优良品种的快速繁殖， 保持遗传性状的一致 ②可以培养出大量不含病毒的幼苗， 提高作物的产量 ③可以实现花卉的连续生产，不受 开花季节的限制 ④· · · ···
科学研究表明，当植物细胞脱离了原 来所在植物体的器官或组织而处于离体状 态时，在一定的营养物质、激素和其他外 界条件的作用下，就可能表现出全能性， 发育成完整的植株。科学家用植物组织培 养的方法，已经把许多植物的离体的组织 或细胞，培养成了完整的植物体。 本课题中，我们将通过菊花组织培 养的实验来学习这一技术。
你听说过袖珍马铃薯吗？
为什么当年从市场上买回家的菊花开放 非常美丽、花瓣长、花朵大、花期特别长？
因为市场上销售的菊花多半是当年用菊花植 株的幼嫩茎扦插培育而形成，感染的病毒少，几 乎不影响菊花的生命活动。
从第二年开始为什么菊花的花瓣、花期逐渐 缩短，花朵与杭白菊相似？
随着种植时间的延长，菊花感染的病毒 增多，严重影响了菊花的生命活动。
（二）影响植物组织培养的因素
4、环境因素：
不同 不同的植物对各种条件的要求往往______。 如进行菊花的组织培养，一般将 pH控制在__________左右； 5.8 温度控制在__________ ； 18～22 ℃ 12h 并且每天用日光灯照射_____ 。
菊花的组织培养
• （4）以组织培养繁殖的种苗与母株有著相同的 遗传基因。所以使用这项技术可让优良的品种不
•
• 1、植物细胞表现出全能性的必要条件是 • A.导入其他植物细胞的基因 • B.将成熟的细胞核移植到去核的卵细胞中 • C.用适当浓度的秋水仙素处理 • D.脱离母体后，给予适宜的营养和适宜的 • 温度等外界条件
。
•
•2、植物为自养生物，为什么在培养的过程中 需要加入糖类等有机物？
•因为植物组织培养是利用离体的植物组织 或细胞，在其脱分化过程中不能进行光合 作用合成糖类，因此必须加入糖类，作为 碳源和能源物质，同时维持培养基的渗透 压。
•
•植物组织培养过程:
•植物细胞培养
•细胞分裂
•离
素>生长素
体 组
•脱分化
器官、组织、细胞，培养在人工配置的培养基上 ，给予适宜的培养条件，诱导其脱分化产生愈伤 组织再分化形成丛芽，最终形成完整的植株。
又称：植物离体培养 •思考 ： •1、植物组织培养的原理是什么
？•植物细胞具有全能性
•
•（2）细胞的全能性
•①定义 •已分化的细胞具有发育成完整个体的
：
潜能的特性
•②原理 •生物体的每一个细胞都包含有该物种所
•(2).愈伤组织：愈伤组织是通过细胞分裂形成的 ，其细胞排列疏松而无规则，高度液泡化呈无定 形状态的薄壁细胞。
➢2-3周，愈伤组织开始形成。
•
• (1).脱分化（去分化）：已经分化的植物器官 、组织或细胞产生愈伤组织的过程。 •
•(已经分化的植物器官、组织或细胞，当受到创伤或进行 离体（也受到创伤）培养时，已停止分裂的细胞，又重 新恢复分裂，细胞改变原有的分化状态，失去原有结构 和功能，成为具有未分化特性的细胞。)
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普通高中课程标准实验教科书——生物选修1[人教版]课题1 菊花的组织培养★课题目标（一）知识与技能1、熟悉植物组织培养的基本过程2、理解细胞分化的概念及离体植物细胞的脱分化和再分化3、通过联系农业生产实际，培养学生活学活用，理论联系实际的能力（二）过程与方法归纳MS培养基的配制方法，并设计表格比较微生物培养基与MS培养基的配方的异同。
（三）情感、态度与价值观通过阅读植物组织培养技术的发展史，课下查阅植物组织培养技术在生产实践中应用的资料，关注学生科学态度的教育，拓展学生视野，感受科学技术在生产实践中的重要价值。
★课题重点植物组织培养过程中使用的无菌技术★课题难点植物组织培养过程中使用的无菌技术★教学方法启发式教学★教学工具多媒体课件★教学过程（一）引入新课上节课我们探讨学习了如何从土壤中分离出尿素分解菌和纤维素分解微生物及其计数方法。
这节课我们来学习研究植物的组织培养技术。
（二）进行新课1．基础知识知识回顾：联系“植物细胞工程”，回答下列问题：1．1具有某种生物全套遗传信息的任何一个活细胞，都具有发育成完整个体的能力，即每个生物细胞都具有全能性。
但在生物体的生长发育过程中并不表现出来，这是因为在特定的时间和空间条件下，通过基因的选择性表达，构成不同组织和器官。
1．2植物组织培养技术的应用有：实现优良品种的快速繁殖；培育脱毒作物；制作人工种子；培育作物新品种以及细胞产物的工厂化生产等。
活动1：阅读“植物组织培养的基本过程”，讨论并完成以下问题：1．3细胞分化：个体发育中细胞在形态、结构和生理功能上出现稳定性差异的过程。
〖思考1〗细胞分化是一种持久性的变化，它有什么生理意义？使多细胞生物体中细胞结构和功能趋向专门化，有利于提高各种生理功能的效率。
1．4愈伤组织是通过细胞分裂形成的，其细胞排列疏松而无规则，高度液泡化呈无定形状态的薄壁细胞。
〖思考2〗填表比较根尖分生组织和愈伤组织的异同：1．5植物组织培养的过程可简单表示为：活动2：阅读“影响植物组织培养的条件”，讨论并完成以下问题：1．6材料：植物的种类、材料的年龄和保存时间的长短等都会影响实验结果。
菊花组织培养一般选择未开化植物的茎上部新萌生的侧枝作材料。
〖思考3〗一般来说，容易进行无性繁殖的植物容易进行组织培养。
〖思考4〗选取生长旺盛嫩枝进行组培的原因是嫩枝生理状态好，容易诱导脱分化和再分化。
1．7营养：常用的培养基是MS培养基，其中含有的大量元素是N、P、S、K、Ca、Mg，微量元素是Fe、Mn、B、Zn、Cu、Mo、Cl、Ni、I、Co，有机物有甘氨酸、烟酸、肌醇、维生素、蔗糖等。
1．8激素：在培养基中需要添加生长素和细胞分裂素等植物激素，其浓度、使用的先后顺序、用量的比例等都影响结果。
1.9环境条件：PH 、温度、光等环境条件。
菊花组培所需PH 为5.8，温度为18-22℃，光照条件为每日用日光灯照射12小时。
2．实验设计活动3：阅读“制备MS 固体培养基”，回答下列问题：212．1配制各种母液：将各种成分按配方比例配制成的浓缩液。
使用时根据母液的浓缩倍数，计算用量，并加蒸馏水稀释。
2．2配制培养基：应加入的物质有琼脂、蔗糖、大量元素、微量元素、有机物和植物激素的母液，并用蒸馏水定容到1000毫升。
在菊花组织培养中，可以不添加植物激素，原因是菊花茎段组织培养比较容易。
2．3灭菌：采取的灭菌方法是高压蒸汽灭菌。
［思考6］MS 培养基中各种营养物质的作用是什么？肉汤培养基相比，MS 培养基有哪些特点？大量元素和微量元素提供植物细胞所必需的无机盐；蔗糖提供碳源，维持细胞渗透压；甘氨酸、维生素等物质主要是为了满足离体植物细胞在正常代谢途径受到一定影响后所产生的特殊营养需求。
微生物培养基以有机营养为主，MS 培养基则需提供大量无机营养。
活动4：阅读“外植体消毒”，填写下列流程图：［思考7］在此消毒过程中，是不是强度越大越好，为什么？不是。
对外植体进行表面消毒时，既要考虑到药剂的消毒效果，又要考虑到植物的耐受力。
3．发酵操作活动5：阅读“接种、培养、移栽和栽培”，填写：3．1前期准备：用70％的酒精消毒工作台，点燃酒精灯。
注意所有接种工作都必须在酒精灯旁进行，器械使用前后都要用火焰灼烧灭菌。
3．2接种操作：接种过程中插入外植体时形态学上端朝上，每个锥形瓶接种7～8个外植体。
〖思考8〗外植体接种与细菌接种相似之处是操作步骤相同，而且都要求无菌操作。
3．3培养过程应该放在无菌箱中进行，并定期进行消毒，保持适宜的温度和光照。
3．4移栽前应先打开培养瓶的封口膜，让其在培养间生长几日，然后用流水清洗根部培养基。
然后将幼苗移植到消过毒的蛭石或珍珠岩等环境中生活一段时间，进行壮苗。
最后进行露天栽培。
［思考9］外植体在培养过程中可能会被污染，你认为造成污染的原因有哪些？外植体消毒不彻底；培养基灭菌不彻底；接种中被杂菌污染；锥形瓶密封性差等。
（三）课堂总结、点评（四）实例探究例1 甘薯种植多年后易积累病毒而导致品种退化。
目前生产上采用茎尖分生组织离体培养的方法快速繁殖脱毒的种苗，以保证该品种的品质和产量水平。
这种通过分生组织离体培养获得种苗的过程不涉及细胞的A.有丝分裂B.分化C.减数分裂D.全能性解析：离体的植物器官、组织或细胞，在培养一段时间后，脱分化，通过细胞分裂，形成愈伤组织；脱分化的愈伤组织继续培养，又可重新分化成根或芽等器官；再分化形成的试管苗，移栽到地里，可以发育成完整的植物体。
由愈伤组织发育为完整的植物体体现了细胞的全能性。
植物组织培养的过程是无性繁殖的过程，不涉及减数分裂，减数分裂是生物在进行有性生殖的过程中的一种分裂方式。
本题解决的关键是要了解植物的组织培养过程。
答案：C例2植物细胞表现出全能性的必要条件是A.导入其他植物细胞的基因B.将成熟的细胞核移植到去核的卵细胞中C.用适当浓度的秋水仙素处理D.脱离母体后，给予适宜的营养和适宜的温度等外界条件解析：植物细胞只有脱离了植物体，在一定的外部因素作用下，经过细胞分裂形成愈伤组织，才能表现出全能性，由愈伤组织细胞发育、分化出新的植物体。
答案：D☆综合应用例3、在离体的植物器官、组织或细胞脱分化形成愈伤组织的过程中，下列哪一项条件是不需要的A.消毒灭菌B.适宜的温度C.充足的光照D.适宜的养料和激素解析：离体的植物器官、组织或细胞脱分化过程是在无菌条件下进行的，在愈伤组织形成过程中，需要适宜的温度、一定的营养物质和植物激素的诱导，但不需要阳光。
答案：C（五）巩固练习1.植物组织培养技术的理论基础之一是：A.植物细胞的完整性B.植物细胞的多样性C.植物细胞的全能性D.植物细胞杂交2.要大量繁殖用植物体细胞杂交方法获得的植物，应该采用哪种繁殖方式？A.种子繁殖B.分裂生殖C.出芽生殖D.营养生殖3.下列关于愈伤组织的说法中不正确的是A.愈伤组织的细胞能够进行细胞分裂B.用叶培养形成的愈伤组织细胞能够进行光合作用C.培养愈伤组织的培养基中应含有有机养料D.人们可以从愈伤组织中提取所需物质4.在一个多细胞生物体内，存在形态、结构和生理功能上具有稳定性差异的细胞，是因为A.细胞失去全能性 B．不同的细胞，基因是不同的C.不同细胞中基因选择性表达的结果 D．变异一般是不定向的5.细胞具有全能性的原因是A.生物体细胞具有使后代细胞形成完整个体的潜能B.生物体的每一个细胞都具有全能性C.生物体的每一个细胞都含有个体发育的全部基因D.生物体的每一个细胞都是由受精卵发育来的6.植物组织培养过程中的脱分化是指A.植物体的分生组织通过细胞分裂产生新细胞B.未成熟的种子经过处理培育出幼苗的过程C.植物的器官、组织或细胞，通过离体培养产生愈伤组织的过程D.取植物的枝芽培育成一株新植物的过程7.下列植物细胞全能性最高的是A.形成层细胞B.韧皮部细胞C.木质部细胞D.叶肉细胞8．植物组织培养是指A．离体的植物器官或细胞培育成愈伤组织B．愈伤组织培育成植株C．离体的植物器官、组织或细胞培养成完整植物体D．愈伤组织形成高度液泡化组织9．某园艺场经过长期精心选育，培养出一株形态优美的兰花，如果要保持母本的优良性状，并尽快大规模繁殖，最适合的繁殖方式是（）A．分裂生殖B．有性生殖 C．孢子生殖 D．组织培养10．胡萝卜的韧皮部细胞通过组织培养，能发育成新的植株。
下列有关的叙述中，不正．．确．的是（）A．说明高度分化的植物细胞具有全能性B．植物细胞的全能性得以表达要离开母体C．新植株的形成是细胞分裂和分化的结果D．高度分化的动物细胞也具有全能答案：1～5 C DBCC 6～10 CACDD★课余作业1、为什么运用植物组织培养技术能把植物离体器官、组织或细胞培养成完整植株？2、植物组织培养与花药培养技术有何相同点与不同点？★教学体会课题背景介绍了植物细胞的全能性，说明离体的植物器官或组织在一定的条件下能够发育成完整的植株。
在教学过程中，教师可以从植物组织培养的发展历史导入，激发学生的学习兴趣。
★资料袋克隆羊多利2003年2月14日苏格兰罗斯林研究所证实世界上首只成年体细胞克隆动物多利已经死亡。
多利的尸体将被制成标本，存放在苏格兰国家博物馆。
多利于1996年7月5日出生，于1997年2月23日被介绍给公众，它是用一只6岁母羊的体细胞进行克隆，由罗斯林研究所与英国PPL医疗公司共同培育而成的。
罗斯林研究所所长哈里·格里芬说，绵羊通常能活11到12年。
但2002年1月科学家发现多利羊的左后腿患上了关节炎这种典型的“高龄病症”，现在，多利羊壮年死于老年羊常得的肺部感染疾病。
研究人员对它实施了“安乐死”。
世界第一只体细胞克隆动物多利羊的诞生曾震惊了世界，它的死也引起了人们对克隆动物的关注、以及对克隆技术发展前景的再思考。