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无菌物品管理
对手术室内使用的无菌物品进 行严格管理,确保在有效期内 使用,避免过期或污染。
手术器械处理
对手术器械进行严格的清洗、 消毒和灭菌处理,确保手术过 程中无菌操作。
医疗废弃物处理要求
分类收集 对医疗废弃物进行分类收集,包 括感染性废弃物、损伤性废弃物 、药物性废弃物和化学性废弃物 等。
环保要求 在处理医疗废弃物时,应符合环 保要求,避免对环境造成污染。
专用容器 使用专用的医疗废弃物容器进行 收集,容器应防渗漏、防破裂、 易于清洗和消毒。
安全处理 对收集的医疗废弃物进行安全处 理,包括高温焚烧、化学处理、 微波消毒等方法,确保废弃物中 的病原体被彻底杀灭。
THANKS
感谢观看
辐射灭菌法
原理
应用
利用放射性核素60Co发射的γ射线或电子 加速器产生的高能电子束(阴极射线)穿 透物品,杀死其中的微生物。
适用于不耐高温和不能用其他方法灭菌的 物品,如一次性使用的医疗器械和用品、 药品、食品等。
优点
缺点
灭菌效果可靠,不损伤物品,无残留毒性 。
设备费用高,操作技术要求高,需要专门 的安全防护措施。
消毒目的
消毒的目的是切断传播途径,防 止和控制传染病的传播和流行。
灭菌定义及目的
灭菌定义
灭菌是指用物理或化学方法杀灭外环 境中所有的微生物,包括细菌芽孢和 非芽孢菌、病毒、真菌等的过程。
灭菌目的
灭菌的目的是彻底消除外环境中的一 切微生物,以达到无菌状态,保证医 疗、科研等活动的安全进行。
消毒与灭菌关系
05
消毒与灭菌效果评价
消毒效果评价方法及标准
细菌学指标
消毒前后细菌数量对比,计算杀菌率。
化学指标

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油剂、粉剂、玻璃器皿、金属制品等各类物品。 灭菌条件为:160℃持续2h ,或165℃持续1h 或
180℃持续30min 注意事项:不适于纤维织物、塑料制品等的消毒灭菌
烤箱
对物品的要求: 高温下不变质, 不损坏、不蒸发 的物品,如油剂、 金属制品、玻璃 器具等。
1、热力消毒灭菌法-----湿热法
由空气和水蒸气导热,传热快,穿透力强。
1、热力消毒灭菌法-----干热法
1)燃烧法 定义:是一种简单、迅速、彻底的灭菌方法。 特点:简单、迅速、彻底 适用:1)无保留价值的污染物品,如废弃物、病
理标本、带脓性分泌物的敷料和纸张等 2)某些金属器械或搪瓷类物品急用时也可
用燃烧法(锐利刀剪禁用此法以免锋刃 变钝)。
第二节 消毒、灭菌
教学目标
1、掌握清洁、消毒、灭菌的概念 2、掌握消毒灭菌的方法 3、熟悉常见的清洁、消毒、灭菌工作
一、概念:
(一)清洁(cleaning):是指用物理方法清除物体 表面的污垢、尘埃和有机物.
目的: 去除和减少微生物,但并非杀灭微生物。
(二)消毒(disinfection): 用物理或化学的方法清除或杀灭除芽胞以外的所
灭菌灯内装有臭氧发生管,在电场作用下,可 将空气中的氧气转换成高纯臭氧。主要用于空气、 物品表面等的消毒。
(2)紫外线灯管消毒法
2)使用方法
1、空气消毒:消毒前做好室内清洁卫生工作(紫外线
易被灰尘微粒吸收而影响效果),关闭门窗,人员停止走动, 每10m2安装30W紫外线灯管一支,有效距离不超过2m,照射 时间为30~60分钟;
2、物品消毒:消毒时应将物品摊开或挂起以减少遮挡
(紫外线穿透力差),有效距离为25㎝~60cm,照射时间为 20~30分钟。

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红外线
红外线辐射是一种0.77~1000微米波长的电磁波,有 较好的热效应,尤以1~10微米波长的热效应最强。 红外线由红外线灯泡产生,不需要经空气传导,所以 加热速度快,但热效应只能在照射到的表面产生,因 此不能使一个物体的前后左右均匀加热。 红外线的杀菌作用与干热相似,利用红外线烤箱灭菌 的所需温度和时间亦同于干烤。 人受红外线照射较长会感觉眼睛疲劳及头疼;长期照 射会造成眼内损伤。因此,工作人至少应戴能防红外 线伤害的防护镜。
输液器等) --不能用于人体的消毒。
3、微波:波长10-1~10-9m或更短的电磁波。 --常用于药品和食品灭菌。 --微波长期照射可引起眼睛的晶状混浊、睾丸损伤和神经功
能紊乱等全身性反应
三、超声波杀菌法
不被人耳感受的>20千Hz/秒的声波,称为超 声波。 可使细菌细胞裂解而死亡,但往往有残存的 活细胞。对G-菌效果最好,葡萄球菌最差。 主要用于粉碎细胞,提取其中的化学成分。
四、 滤过除菌法
将液体或空气通过含有微细小孔的滤器, 只允许小于孔径的物体如液体和空气通过, 大于孔径的的物体不能通过。 主要用于一些不耐热的血清、毒素、抗生 素、药液、空气等除菌。一般不能除去病毒、 支原体和细菌的L型。
滤器的种类
滤膜滤器:由硝基纤维素制成薄膜,装于滤器上,其 孔径大小不一,常用于除菌的为0.22um。硝基纤维 素的优点是本身不带电荷,故当液体滤过后,其中有 效成分丧失较少。 蔡氏滤器(Seitz):是用金属制成,中间夹石棉滤板, 有石棉K、EK、EK-S三种,常用EK号除菌。 玻璃滤器:是用玻璃细砂加热压成小碟,嵌于玻璃漏 斗中一般为G1、G2、G3、G4、G5、G6六种,G5、 G6可阻止细菌通过。 实验室等处应用的超净工作台,就是利用过滤除菌的 原理去除进入工作台空气中的细菌。

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消毒与灭菌-基本概念
(3)中水平消毒法:是可以杀灭和去除细 菌芽孢以外的各种病原微生物的消毒方法, 包括超声波、碘类消毒剂(碘伏、碘酊等)、 醇类、季铵盐(包括双链季铵盐)类化合 物的复方、酚类等消毒剂进行消毒的方法。
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消毒与灭菌-基本概念
(4)低水平消毒法:只能杀灭细菌繁殖体 (分枝杆菌除外)和亲脂病毒的化学消毒 剂和通风换气、冲洗等机械除菌法。如季 铵盐类消毒剂
消毒与灭菌
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消毒与灭菌
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基本概念 物理方法 化学方法 影响因素
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消毒与灭菌-基本概念
❖ 消毒(disinfection) 杀死物体上病原微生物的方法,并不一定能 杀死含芽胞的细菌和非病原微生物。
❖ 灭菌(sterilization) 杀死物体上所有微生物的方法。包括杀死病 原和非病原微生物,繁殖体、芽胞等。
芽胞则需1-2小时才被杀死。
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消毒与灭菌-物理方法-热力
❖ 湿热消毒灭菌法
流通蒸汽消毒法
又称常压蒸汽消毒法,是利 用一个大气压下100oC的水蒸 汽进行消毒。
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消毒与灭菌-物理方法-热力
❖ 湿热消毒灭菌法
间歇蒸汽灭菌法 在流通蒸汽消毒法的基础上改良
蒸--孵--蒸
❖ 干热灭菌法






红外线
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消毒与灭菌-物理方法-热力
❖湿热消毒灭菌法
巴氏消毒法 由巴斯德创用,方法有:

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紫外线的穿透能力弱,不能通过普通玻 璃、尘埃、纸张等 用于消毒物体表面及空气:手术室、传
染病房、无菌室、细胞培养间及烧伤病 房等,亦可用于不耐热物品表面消毒。
促进维生素D的活化 杀菌波长的紫外线对人体皮肤、眼睛均 有损伤作用,使用时应注意防护。
2 电离辐射 包括β和γ射线等。具有较高的能量与穿 透力,可在常温下对不耐热的物品灭菌,故 又称“冷灭菌”。 其机理在于产生游离基,破坏DNA。
薄膜滤器由硝基纤维素制成薄膜, 装于滤器上,其孔径大小不一,常用 于除菌的为0.22um。
(四)干燥与低温抑菌法
低温抑菌法 干燥(高渗) 低温干燥可使细菌的新陈代谢减慢, 常用作保存细菌菌种。
冷冻真空干燥法(lyophilization)是 目前保存菌种的最好方法。
二、化学消毒灭菌法
消毒剂的种类:酚类、醇类、重金 属盐类、氧化剂、表面活性剂、烷 化剂。 消毒剂的应用:病人排泄物与分泌 物、皮肤、粘膜、饮水、厕所、空 气、手等。
作用机制 不同的化学消毒剂其作用原理不完全相同, 大致归纳为三个方面: (1)改变细胞膜通透性 表面活性剂、酚类及醇 类可导致胞浆膜结构紊乱并干扰其正常功能。使 小分子代谢物质溢出胞外,影响细胞传递活性和 能量代谢。甚至引起细胞破裂。
(2)蛋白变性或凝固 如酸、碱、醇、重金 属盐、氧化剂、醛类、染料等可改变蛋白 构型而拢乱多肽链的折叠方式,造成蛋白 变性。
disinfection and sterilization

基本概念

物理消毒灭菌法
化学消毒灭菌法 影响消毒灭菌效果的因素
自学
一、基本概念
灭菌(sterilization):杀灭物体上所有微生物 的方法。包括杀灭细菌芽胞在内的全部病原或非 病原微生物。 消毒(disinfection):杀死物体上或环境中的病 原微生物的方法,但不一定能杀死芽胞。用于消 毒的化学药品称为消毒剂(disinfectant)。 灭菌比消毒要求高

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第三章 消毒与灭菌
第十一章 消毒与灭菌
基本概念
消毒(disinfection): 杀灭物体上或环境中的病原微生物、并不一定杀
死细菌芽胞或非病原微生物的方法;消毒剂(disinfectant)
灭菌(sterilization): 杀灭物体上 所有的微生物,包括细菌芽胞在内的
全部微生物。
灭菌后的物品状态称为无菌状态。
无菌(asepsis) : 指不含活菌的状态,是灭菌的结果。
抑菌(bacteriostasis) : 抑制细菌生长的方法。 防腐(antisepsis): 防止和抑制微生物的生长繁殖。用于防腐的药物
称为防腐剂(antiseptics)。
热力灭菌法
物理消毒灭菌法
干热灭菌法
焚烧 烧灼 干烤(160~170℃/2h) 红外线
物理消毒灭菌法
热力灭菌法 湿热灭菌法
用较低温度杀灭液体中的病原菌或特定微 生物,而仍保持物品中所需的不耐热成分 不被破坏的消毒方法。
61.1 ℃ ~62.8℃ 30min
巴氏消毒法pasteurization 71.7℃
煮沸法
流动蒸气消毒法
间歇蒸气灭菌法 高压蒸气灭菌法
121.3℃, 15个大气压/103.kPa, 15~20min
15~30s
同一温度下,湿热比干热效果好
物理消毒灭菌法
辐射杀菌法
紫外线
波长:260~266nm最强 使DNA链相邻的胸腺嘧啶以共价健结合形成二聚体,干扰DNA复制与转录; 穿透力较弱:普通玻璃、纸张、尘埃、水蒸气等均能阻挡紫外线; 常用于:手术室、病房、无菌实验室等。
能量高、穿透力强
电离辐射 高速电子、X射线、g射线等;

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1、噬菌体的形态结构
• 噬菌体有四种外形,即蝌蚪形、球 形、丝状和柠檬形。
• 典型的噬菌体呈蝌蚪形,由头部和 尾部组成。头部由核酸和蛋白质衣 壳构成,呈20面体对称;尾部主要 含蛋白质,呈螺旋形,分尾领、尾 鞘、尾髓、尾板、尾刺和尾丝几部 分,尾部有的能收缩,有的不能收 缩。
2、噬菌体的增殖
• 噬菌体只能在活的敏感菌细胞内增 殖,并将菌体细胞裂解。其寄生生 活有严格的菌种及菌型的特异性, 即一种噬菌体只能寄生及裂解一种 和它相应的细菌,或仅作用于该种 细菌的某一型。
蔡氏滤器
微孔滤膜
玻璃耐酸滤器
五、低温抑菌法
低温抑菌的机理
大多数微生物对低温抵抗力很强,在 低温条件下微生物的代谢活动降低到 最低水平,生长繁殖停止,但仍可长 时间保持生命。
低温在微生物学工作中的用途
主要用于保存微生物,如:
0~4℃保存细菌
-20℃以下保存病毒
低温保存微生物注意事项
① 有少数细菌和病毒对低温特别敏感, 如 淋 球 菌 、 巴 氏 杆 菌 在 4℃ 保 存 比 室 温 保 存 死 亡 更 快 , 疱 疹 病 毒 在 -20℃ 保存比4℃死亡更快。
温和噬菌体的增殖
噬菌体的应用
• 由于噬菌体感染具有菌种或菌型的特异 性,故可用噬菌体进行细菌的鉴定和分 型、检测未知细菌、进行流行病学调查。
• 此外,噬菌体也是分子生物学及基因工 程研究的工具。
第四节 微生物实验室的生物安全
一、生物安全的概念和一般要求
(一)生物安全
是指与生物有关的各种因素对社会、经 济、人类健康可能产生的潜在的有害影 响。而兽医微生物实验室的生物安全是 指在转移、检查和处理病料、污染材料 等过程中,避免污染环境及对人员造成 危害。

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(三) 湿热灭菌技术
3高压蒸汽灭菌法 ▪ 由于蒸汽有很强的穿透能力,湿热灭菌
对耐热芽孢杆菌来说,温度升高10 ℃时, 灭菌速度常数可增加8~10倍,对营养细 胞更高。
▪ 蒸汽来源方便,价格低廉,灭菌效果可 靠,是目前最为常用的灭菌方法。因此 实验室、工厂化生产中广泛采用湿热灭 菌。湿热灭菌有经济快速等特点
• 主要针对必须保持干燥的实验器具或材料 (培养皿、接种针、固定化细胞用的载体 材料等)。
(二)火焰灭菌法
利用火焰直接杀死微生物的灭菌法称 为火焰灭菌法。该法方法对设备要求 低,操作简单,灭菌彻底,但使用范 围有限,仅适用于接种针、玻璃棒、 三角瓶口等的灭菌。
(三) 湿热灭菌技术P11
▪ 湿热蒸汽比干热空气穿透力大,易使菌 体蛋白变性而使微生物死亡。利用饱和 蒸汽进行灭菌的方法称为湿热灭菌法。
• 臭氧:原理(常温常压下)O3=O2+O(单个氧原子)。特点: 不存在任何有毒残留物,称为无污染消毒剂。适用:环境消 毒

• 去垢剂:新洁尔灭 (苯扎溴铵、溴化苄烷 铵)
新洁尔灭是表面活性剂类洁净消毒剂。它 在水溶液中以阳离子形式与菌体表面结合, 引起菌体外膜损伤和蛋白变性。10 min能 杀死营养细胞,但对细菌芽孢几乎没有杀 灭作用。一般用于器具和生产环境的消毒, 不能与合成洗涤剂合用,不能接触铝制品。
消毒不一定能达到杀菌的要求,而灭菌能 达到消毒的要求。
思考:消毒与灭菌的概念及区别
第一节 化学灭菌方法P19
• 原理:某些化学药剂能与微生物细胞物质 发生反应而具有杀菌作用。如甲醛、氯 (或次氯酸钠)、高锰酸钾、环氧乙烷、 季铵盐(如新洁尔灭)等。
• 适用范围:化学药剂适于接种室、培养室 等环境的灭菌,接种操作前小型器具的灭 菌等。
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(4) Koch在其《创伤感染原因的研究》和《病原微生 物研究》中,不仅阐述了各种细菌的形态和生物学特 征,而且也介绍了灭菌方法。所以,Koch和Pasture 的功绩不仅在于他们奠定了近代细菌学的基础,而且 也对消毒灭菌的方法和理论作出了重大贡献。
(5)在外科防腐上,Fred Kilmer(弗雷德)也作出
一般采用化学中和法,用什么样的中和剂? 这种中和剂有无中和消毒剂的作用,中和 剂和消毒剂发生反应后的中和产物有无杀 菌或抑菌作用,需要用中和试验来评价。
除采用化学中和剂之外,也可采用物理法 去除残留消毒剂。常用的有吸附法、稀释 法、离心法、过滤法等,这些方法去除残 留消毒剂效果如何,也需要设计试验进行 评价。
19世纪中期以后为应用时期 (1) 1837年,Schwan证明,腐败作用是由微生物引
起的,加热可杀死这种微生物。 (2) 1865,Lister将苯酚应用于外科手术。从而大
大降低了复杂性骨折的病死率。Lister认为,创 伤化脓的原因是由于侵入了“病芽”所致,他用 2.5%石炭酸清洗伤口和医生洗手,用5%石炭酸 溶液消毒器械,用5%石炭酸喷雾杀灭手术室空 气中的浮游苗。Lister为外科防腐开辟了道路。 (3) Pasteur认为医院任何地方都有细菌存在, 不 仅手术器械和医生的手要消毒,而且还要警惕大 气中的浮游病原体。
了杰出贡献,1887年他发表了《现代外科敷料》论 文,1888年出版《现代外科抗菌伤口处理方法》一 书,不仅传播了Lister的思想,而且对外科抗菌方面 作了进一步的阐述。
(6) 1897年,Johnson出版了《科学的灭菌》一书, 阐述了无菌技术的应用。化学消毒剂
20世纪50年代, 甲醛(低温蒸汽)、环氧乙烷气 体和戊二醛的应用。臭氧、碘类、紫外线、微波 等技术迅速发展,为成熟期。
我国消毒学成为一个独立学科是在20世纪 80年代中期。 1998年我国学科分类上将消 毒学列为一个独立的二级学科,属于预防医 学。
二 消毒学研究的内容
1. 研究消毒、灭菌、防腐、保藏的方法 对微生物的杀灭作用及影响因素以及使用程序
和条件。

2.研究消毒机制和消毒动力学
消毒动力学研究,是研究微生物在物理或化学 因子的作用下,微生物群体死亡的规律,并用 数学式给以表达。这类研究将对物理及化学因 素的使用提供理论依据,也可以为合理应用消 毒灭菌剂提供指导。
但是一个学科的技术应用广泛并不能算作一个独 立的学科。一个独立学科的形成必须具备3个基 本条件:①有一部奠基专著;②有一家专业杂志; ③有一批专业队伍。
(1)1977年美国的Block 出版了 《Disinfection,Sterilization and Preservation》, 这部书详细介绍了消毒灭菌、防腐和保存的 理论和技术,为国际消毒学科的建立奠定了 基础。
间接效益—由于发病的减少带来的其他资 源的消耗减少。病人免于生病而造成的工 时增加,创造价值的增加等。
5 调查微生物的分布和生态学,研究微生物对消毒 剂的抗药性。
对外环境中微生物,尤其是致病性微生物的分布 规律和变化规律进行调查,是消毒学研究的重要 内容,通过这些调查,使我们知道什么地方应消 毒,针对什么样的微生物进行消毒。
3 研究消毒急性毒性、致畸 作用、致突变作用和致癌作用的研究。一种消 毒、灭菌法只有在对微生物的杀灭作用是可靠 的,而其毒性水平又是可接受的情况下,才可 以在临床和人群中使用。
4 对消毒方法和措施进行费用效益分析
一种消毒剂在临床上或人群中使用之后, 应注意研究其使用价值,即进行费用—效 益分析。
(3)2600年前国外学者提出用煮沸的水清洗创伤 部位和医生的手,以防伤口腐烂。
(4)公元前322年前后,古希腊学者亚里士多德向亚 历山大大帝建议,让士兵饮用开水,掩埋粪便以 防病。
(5)至1485年,威尼斯采用食醋熏蒸消毒信封。
(6)1804年,Appert发现密封在容器中的食物, 煮沸加热处理后就不再腐败,可以长期保存。
(2)在我国,1986年薛广波主编出版了我国 消毒学的奠基专著《实用消毒学》。
(3)1984年,刘育京创办我国第一家消毒学 杂志《消毒与灭菌》(后改为《中国消毒学 杂志》)
(4)1985年,王有森等主持召开了北京国 际消毒会议,此后在卫生部的领导下组织和 发展了中国消毒学专业队伍。
(5)1987年,国家卫生部成立了消毒专家 委员会,1988年,成立了消毒学会,并发 布了第1版《消毒技术规范》。
2 评价灭菌效果的试验
(1)定性载体试验
必须就微生物对消毒剂的抗药性进行监测和研究。
三 消毒学的研究方法
(一)、实验室研究 1 去除残留消毒剂持续作用的试验 在消毒试验和灭菌试验中,往往需要观察消毒
剂或灭菌剂的浓度和作用时间,每次试验到预 定时间后,必须停止消毒、灭菌剂的作用,以 观察作用至此时间的杀灭率。这就必须采用一 定的方法去除残留消毒剂,消除其持续作用。
消毒与灭菌
概述

一 消毒学的形成
1 人类与微生物共同生活在一个地球上。 有利,有害
粮食 环境保护
人类健康
能源(乙醇、 甲烷、氢气)
有利方面
药物(胰岛 素、干扰素和
白细胞介素)
2 消毒技术的形成与发展 19世纪中期以前为经验时期 (1) 《本草纲木》 提到采用蒸汽熏蒸病人的衣
服来防止疾病的传播 (2)1700多年前,华佗对手术器械采用火焰灭菌
费用包括直接费用和间接费用,直接费用 包括购买消毒剂费用,医护人员或其他使 用者花费的工时费和由于消毒方法的使用 带来的物品损坏,人员伤害等,间接费用 指由于使用这种消毒方法带来的其他费用 的消耗。
效益包括直接效益—由于这种消毒方法的 采用而带来医院感染的减少及感染性疾病 的减少,以及由于减少疾病而带来的诊疗 费和人力物力的节省。
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