生物制药工艺学习题 第七章 凝胶层析
07章 生物制药工艺学 凝胶层析
凝胶柱床大小与所需凝胶量的关系
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（二）凝胶柱的装填
凝胶柱底部支持物，有棉花、玻璃纤 维、玻璃珠、垂熔玻璃等。 空柱中应留约1/5的水或溶剂. 不断搅拌下使胶粒均匀沉降，使不发 生凝胶分层和胶面倾斜。
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（三）凝胶床的检查和维护
观察有无凝胶分层、沟流和气泡等现象。
有色物质溶液过柱，观察柱床有无沟流， 色带是否平整。 检查物质为蓝色葡聚糖。
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五、多孔玻璃微球(Bio-glas)
特点：1、化学稳定性高、强度大。 2、对糖类、蛋白质等物质有吸附作用。 3、编号表示其孔径 , 越大，分离分子量也越大。
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六、疏水性凝胶（hydrophobic gels）
聚甲基丙烯酸酯凝胶和聚苯乙烯凝胶。 Styragel商品, 分离范围为1 600～40 000 000。 生物珠（Bio-Bead S），适于分离分子量较小的 物质。 分离不溶水的有机物质。
（ 一 ） 亲 脂 性 葡 聚 糖 凝 胶 （ Lipophilic Sephadex） 骨架结构上引入一些有机基团，如甲基、羟 丙基，使呈亲脂性，同时保留亲水性。
（二）交联葡聚糖离子交换剂（ Sephadex –ion-exchanger） 将活性交换基团连接于葡聚糖凝胶上制成的 各种交换剂。
（1）使大分子的分配系数Kd=0； （2）小分子的Kd=1。
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2．分级分离
（1）使各种物质的Kd值尽可能 相差大。 （2）不使它们分子量分布在凝胶 分离范围的一侧。 （3）分子量大于渗入限的3倍， 并小于排阻限的1/3。
如用Sephadex G-200分离血清 蛋白质的效果要比Sephadex G150为好。
生物制药工艺学习题凝胶层析
第七章凝胶层析一、填空题1、凝胶层析的分离原理有、、。
这三种分离原理是互相补充的，在通常情况下起主导作用；的作用随流速增加而加强；只有在流速很高时才起作用。
2、琼脂糖凝胶的一个特征是分离的分子量范围非常大，其分离范围随着凝胶浓度上升而，颗粒强度随浓度上升而。
3、凝胶粒度的大小对分离效果有直接的影响。
一般来说，细粒凝胶柱流速低，洗脱峰窄，分辨率，多用于等。
粗粒凝胶柱流速高，洗脱峰平坦，分辨率，多用于等。
4、在作分级分离时，为了提高分辨率，多采用比样品体积大倍以上的柱体积，以上的柱比，较吸液量、较粒的凝胶固定相。
5、溶质通过色谱柱时造成的峰加宽效应包括、、、。
6、葡聚糖凝胶的孔径大小取决于，其越小，凝胶孔径越；而琼脂糖凝胶的孔径却依赖于。
二、选择题1、凝胶层析中，有时溶质的Kd>1，其原因是（）A.凝胶排斥B.凝胶吸附C.柱床过长D.流速过低2、凝胶层析中，有时小分子溶质的Kd<1，其原因是（）A.水合作用B.凝胶吸附C.柱床过长D.流速过低3、在凝胶层析中样品各组分最先淋出的是（）A.分子量最大的B.体积最大的C.分子量最小的D.体积最小的4、为了进一步检查凝胶柱的质量，通常用一种大分子的有色物质溶液过柱，常见的检查物质为蓝色葡聚糖，下面不属于它的作用的是（）A.观察柱床有无沟流B.观察色带是否平整C.测量流速D.测量层析柱的外水体积5、在选用凝胶层析柱时，为了提高分辨率，宜选用的层析柱是（）A.粗且长的B.粗且短的C.细且长的D.细且短的三、名词解释1、全排阻：2、类分离：3、分级分离：4、柱比：5、操作压：6、全渗入：7、分离度R s：四、问答题1、试述公式V e=V0+K d V i 各字母的物理意义。
2、利用凝胶层析如何测定蛋白质的分子量？3、凝胶层析的应用主要有哪些？并说明其原理。
第七章凝胶层析（答案）一、填空题1、凝胶层析的分离原理有平衡排除理论、扩散分离理论、流动分离理论。
生物制药工艺学习题集
⽣物制药⼯艺学习题集⽣物制药⼯艺学习题集第⼀章⽣物药物概⼀、填空：1、我国药物的三⼤药源指的是、、。
2、现代⽣物药物已形成四⼤类型，包括、、、。
3、请写出下列药物英⽂的中⽂全称：IFN（Interferon）、IL(Interleukin) 、CSF（Colony Stimulating Factor）、EPO （Erythropoietin）、EGF（Epidermal Growth Factor）、NGF（Nerve Growth Factor）、rhGH（Recombinant Human Growth Hormone）、Ins（Insulin）、HCG（Human Choriogonadotrophin）、LH 、SOD 、tPA4、常⽤的β-内酰胺类抗⽣素有、；氨基糖苷类抗⽣素有；⼤环内酯类抗⽣素有；四环类抗⽣素有；多肽类抗⽣素有；多烯类抗⽣素有；蒽环类抗⽣素有5、嵌合抗体是指⽤替换，保留；⼈源化抗体是指抗体可变区中仅为⿏源，其及恒定区均来⾃⼈源。
6、基因⼯程技术中常⽤的基因载体有、、、等。
⼆、选择题：1、以下能⽤重组DNA技术⽣产的药物为（）A、维⽣素B、⽣长素C、肝素D、链霉素2、下⾯哪⼀种药物属于多糖类⽣物药物（）A、洛伐他汀B、⼲扰素C、肝素D、细胞⾊素C3、能⽤于防治⾎栓的酶类药物有（）A、SODB、胰岛素C、L-天冬酰胺酶D、尿激酶4、环孢菌素是微⽣物产⽣的（）A、免疫抑制剂B、酶类药物C、酶抑制剂D、⼤环内酯类抗⽣素5、下列属于多肽激素类⽣物药物的是（）A、ATPB、四氢叶酸C、透明质酸D、降钙素6、蛋⽩质⼯程技术改造的速效胰岛素机理是（）A. 将猪胰岛素B30位改造为丙氨酸，使之和⼈胰岛素序列⼀致B. 将A21位替换成⽢氨酸，B链末端增加两个精氨酸，使之在pH4溶液中可溶C. 将B29位赖氨酸⽤长链脂肪酸修饰，改变其⽪下扩散和吸收速度D. 将⼈胰岛素B28位与B29位氨基酸互换，使之不易形成六聚体三、名词解释：1、药物Medicine(remedy)2、⽣物药物（biopharmaceutics）3、基因药物（gene medicine）：4、反义药物：5、⽣物制品（biologics）：6、RNA⼲涉（RNAi，RNA interference）：7、siRNA(small interfering RNA) ：四、问答题1、基因重组药物与基因药物有什么区别？2、⽣物药物有那些作⽤特点？3、基因⼯程药物主要有哪⼏类？试举例说明。
关于凝胶部分练习题及答案
第一章凝胶思考题1.什么是凝胶？有何特征（两个不同）？外界条件(如温度、外力、电解质或化学反应)的变化使体系由溶液或溶胶转变为一种特殊的半固体状态，即凝胶。
（又称冻胶）其一，凝胶与溶胶(或溶液)有很大的不同。
溶胶或溶液中的胶体质点或大分子是独立的运动单位，可以自由行动，因而溶胶具有良好的流动性。
凝胶则不然，分散相质点互相连接，在整个体系内形成结构，液体包在其中，随着凝胶的形成，体系不仅失去流动性，而且显示出固体的力学性质，如具有一定的弹性、强度、屈服值等。
其二，凝胶和真正的固体又不完全一样，它由固液两相组成，属于胶体分散体系，共结构强度往往有限，易于遭受变化。
改变条件，如改变温度、介质成分或外加作用力等，往往能使结构破坏，发生不可逆变形，结果产生流动。
由此可见，凝胶是分散体系的一种特殊形式，共性质介于固体和液体之间。
2.举例说明什么是弹性和非弹性凝胶？由柔性的线性大分子物质，如洋菜吸附水蒸气先为单分子层吸附，然后转变为多分子层吸附，硫化橡胶在苯蒸气中的吸附则是从一开始即为多分子层吸附。
这类凝胶的干胶在水中加热溶解后，在冷却过程中便胶凝成凝胶。
如明胶、纤维素等，在水或水蒸气中都发生吸附。
不同的吸附体系，其吸附等温线的形状不同，弹性凝胶的吸附与解析通常会形成较窄的滞后圈。
由刚性质点（如SiO2、TiO2，V2O5、Fe2O3等）溶胶所形成的凝胶属于非弹性凝胶，亦称刚性凝胶。
大多数的无机凝胶，因质点本身和骨架具有刚性，活动性很小，故凝胶吸收或释出液体时自身体积变化很小，属于非膨胀型。
通常此类凝胶具有多孔性结构，液体只要能润湿，均能被其吸收，即吸收作用无选择。
这类凝胶脱水干燥后再置水中加热一般不形成原来的凝胶，更不能形成产生此凝胶的溶胶，因此这类凝胶也称为不可逆凝胶。
3.试述凝胶形成的基本推荐？①降低溶解度，使被分散的物质从溶液中以“胶体分散状态”析出。
②析出的质点即不沉降，也不能自由行动，而是构成骨架，在整个溶液中形成连续的网状结构。
凝胶层析习题.
凝胶层析习题1.凝胶层析法的基本原理？答：凝胶层析法的基本原理是不同相对分子质量的物质通过凝胶床(柱)时，相对分子质量低的物质由于可以在凝胶内扩散，因此移动速度较慢，而相对分子质量高的物质则容易通过，从而达到分离的目的。
2.凝胶层析法常用凝胶的种类和特点答：凝胶层析法常用的凝胶有天然凝胶（如琼脂凝胶）和人工合成凝胶（如交联葡聚糖凝胶和聚丙烯酰胺凝胶）。
特点：①琼脂凝胶有较大的孔隙，允许较大的分子渗入，因而其工作范围远大于交联葡聚糖凝胶和聚丙烯酰胺凝胶，琼脂凝胶的最大弱点是它带有大量电荷（主要是磺酸基，也带有一定量的羧基），层析时常需使用较高离子强度的洗脱液，这使得洗脱物中含有一定量的盐分而影响产品纯度。
②聚丙烯酰胺凝胶由于全有碳——碳骨架构成，因而它是完全惰性的，适宜作为凝胶层析的载体，缺点是不耐酸，遇酸时酰胺键会水解成羟基，使凝胶带有一定的离子交换基团，一般只在PH2～11的范围内使用。
③交联葡聚糖凝胶化学性质比较稳定，不溶于水、弱酸、碱和盐溶液。
3.不同性质的物料（热敏性、高粘度、易结垢或易析出晶体、发泡性、腐蚀性）如何蒸发浓缩设备？答：1.对于热敏性的发酵产品；蒸发温度要低、滞留时间要短；选用薄膜式蒸发器。
2.对于高粘度的溶液；溶液流速要高，不停搅动；选用强制循环型、刮板式、降膜式薄膜蒸发器。
3.对于易结垢或易结晶的溶液；垢层和结晶不易粘附在管壁；强制循环蒸发器。
4.对于发泡性的溶液；使泡沫破裂，添加消泡剂。
选用强制循环型、长管膜式蒸发器；5.对于腐蚀性的物料；设备材料抗腐蚀，使用不锈钢、石墨、玻璃、搪瓷、防腐涂层等。
4.简述强制循环蒸发浓缩和薄膜式蒸发浓缩过程的特点及适用范围？答：强制循环蒸发浓缩的优点为料液流速大，达3.5m/s，传热系数较高，可防止料液结垢；缺点：动力消耗大。
适宜于浓缩粘度大、易结晶析出与易结垢的发酵和发酵产品的物料。
薄膜式蒸发浓缩的优点：占地少，传热效率较高，料液受热时间短，在加热管内停留几秒到几十秒。
生物制药工艺学试题及答案
生物制药工艺学名词解释第一章：1. 药品：一定剂型和规格的药物并赋予一定的形式（如包装），而且经过有关部门的批准，有明确的作用用途。
药物：能影响机体生理、生化和病理过程，用以预防、诊断、治疗疾病和计划生育的化学物质。
2. 生物药物Biopharmaceuticals：以生物体、生物组织或其成份为原料综合应用生物学、物理化学与现代药学的原理与方法加工制成的药物。
3. 生物活性Biological activity,Bioactivity：对活组织如疫苗有影响的特性。
4. 酶工程enzyme engineering：酶学与工程学互相渗透结合，发展形成的生物技术，它是从应用目的出发，研究酶和应用酶的特异催化功能，并通过工程化过程将相应原料转化成所需产物的技术。
5. 固定化酶immobilized enzyme：是指借助于物理和化学的方法把酶束缚在一定空间内并具有催化活性的酶制剂。
6. 组合生物合成combinatorial biosynthesis（组合生物学combinatorial biology）：应用基因重组技术重新组合微生物药物的基因簇，产生一些非天然的化合物。
7. 药物基因组学：一门研究个人的基因遗传如何影响身体对药物反应的科学。
8. 凝聚作用coagulation：指在电解质作用下，胶粒粒子的扩散双电子层排斥电位降低，破坏了胶体系统的分散状态，使胶体粒子发生聚集的过程。
9. 萃取extraction：将物质从基质中分离出来的过程。
一般指有机溶剂将物质从水相转移到有机相的过程。
10. 反萃取stripping/back extraction：将萃取液与反萃取剂相接触，使某种被萃入有机相的溶质转入水相的过程。
11. 萃取因素/萃取比：萃取溶质进入萃取相的总量与该溶质在萃余相中总量之比。
12. 分离因素separation factor：在同一萃取体系内两种溶质在同样条件下分配系数的比值。
13. 双相萃取技术two-aqueous phase extraction：利用不同的高分子溶液相互混合可产两相或多相系统，静置平衡后，分成互不相溶的两个水相，利用物质在互不相溶的两水相间分配系数的差异来进行萃取的方法。
制药工艺学复习资料
第一章生物药物概述1、我国药物的三大药源指的是化学药物、生物药物、中草药。
2、现代生物药物已形成四大类型，包括基因工程药物、基因药物、天然生物药物、医学生物制品。
一、药物、生物药物、生物制品、药物：用于预防、治疗或诊断疾病或调节机体生理功能、促进机体康复保健的物质，有4大类：预防药、治疗药、诊断药和康复保健药。
生物药物：是利用生物体、生物组织、细胞或其成分，综合应用生物与医学、生物化学与分子生物学、微生物学与免疫学、物理化学与工程学和药学的原理与方法进行加工、制造而成的一大类预防、诊断、治疗和康复保健的制品。
生物制品：是应用普通的或以基因工程、细胞工程、蛋白质工程、发酵工程等生物技术获得的微生物、细胞与各种动物和人源的组织和液体等生物材料制备的，用于人类疾病预防、治疗和诊断的药品。
生化药物：指从生物体（动物、植物、和微生物中获得的天然存在的生化活性物质（或者合成、半合成的天然物质类似物）。
基因重组药物与基因药物有什么区别？基因重组药物：应用基因工程和蛋白质工程技术制造的重组活性多肽、蛋白质与其修饰物。
基因药物：以基因物质（RNA或DNA与其衍生物）作为治疗的物质基础，包括基因治疗用的重组目的DNA片段、重组疫苗、反义药物和核酶等。
生物药物有那些作用特点？药理学特性：1、活性强: 体内存在的天然活性物质。
2、治疗针对性强,基于生理生化机制。
3、毒副作用一般较少，营养价值高。
第二章生物制药工艺技术基础1、生化活性物质浓缩可采用的方法有盐析浓缩、有机溶剂沉淀浓缩、葡聚糖凝聚浓缩、聚乙二醇浓缩、超滤浓缩2、生化活性物质常用的干燥方法有喷雾干燥、冷冻干燥、、减压干燥等3、冷冻干燥是在低温、低压条件下，利用水的化学性能而进行的一种干燥方法。
4、固定化酶常采用的方法可分为吸附法、包埋法、共价结合法和交联法四大类1、由于目的蛋白质和杂蛋白分子量差别较大，拟根据分子量大小分离纯化并获得目的蛋白质，可采用（ C ）A、SDS凝胶电泳 B、盐析法 C、凝胶过滤 D、吸附层析2、分离纯化早期，由于提取液中成分复杂，目的物浓度稀，因而易采用（ A ） A、分离量大分辨率低的方法 B、分离量小分辨率低的方法C、分离量小分辨率高的方法D、各种方法都试验一下，根据试验结果确定（重点）简述生物活性物质分离纯化的主要原理。
《生物制药工艺学》7凝胶层析
外水体积（V0）
内水体积（Vi）
凝胶体积（Vg）
柱床体积（Vt）
凝胶层析柱各种体积示意图（阴影部分）
2. 参数之间的关系 (1)床体积与vo，Vi，Vg之间的关系式是： Vt=Vo+Vi+Vg (2)洗脱体积与Vo，Vi的关系式为： Ve=V0+ KdVi Kd= (Ve-V0)/Vi
式中 Kd---样品组分在流动相和固定相之间的分配系
第二节 凝胶的结构和性质
要求:
惰性,不带电荷 孔径、颗粒均匀 良好的化学稳定性
种类: 1.天然多糖为骨架：
Sephadex；Sepharose；纤维素 2.人工合成骨架：聚丙烯酰胺凝胶 3.天然多糖与人工合成聚合物合并
如聚丙烯酰胺和琼脂糖之间的交联物
一、葡聚糖凝胶 (Sephadex) 二、修饰葡聚糖凝胶 (Modified Sephadex) 三、聚丙烯酰胺凝胶 （Bio-Gel P） 四、琼脂糖类凝胶 （Sepharose ） 五、多孔玻璃微球 (Bio-glas) 六、疏水性凝胶（hydrophobic gels）
（二）分配系数Kd及Kav的测算
Kd= (Ve-V0)/Vi；Kav= (Ve-Vo)/(Vt-Vo)
Kd及Kav Ve被认为是一种组分对于某一个 凝胶柱的特征常数。
（三）分辨率
意义：1.R>1,两物质完全分开；R<1，完全不能分开 2.提高R的方法： 增大 Ve即增加Vi（较大柱床体积）； 减少Wa+Wb(浓缩样品，选用小粒度的凝胶，
第七章 凝胶层析 (Gel chromatography)
1
掌握凝胶层析的理论和实验条件的选择 掌握常用凝胶的结构和性质 熟悉凝胶层析的特点和应用范围
生物制药工艺学题库答案
第一章生物药物概述1、生物药物(biopharmaceuticals)指运用生物学、医学、生物化学等的研究成果，从生物体、生物组织、细胞、体液或其代谢产物，综合利用化学、生物技术、分离纯化工程和药学等学科的原理和方法加工、制成的一类用于预防、治疗和诊断疾病的物质。
2、抗生素（antibiotics）：抗生素是生物，包括微生物，植物和动物在内，在其生命活动过程中所产生的(或由其它方法获得的)，能在低微浓度下有选择地抑制或影响它种生物机能的化学物质”。
3、生化药品从生物体分离纯化得到的一类结构上十分接近人体内的正常生理活性物质，具有调节人体生理功能，达到预防和治疗疾病的物质4、生物制品（biological products）是指用微生物（包括细菌、噬菌体、立克次体、病毒等）、微生物代谢产物、动物毒素、人或动物的血液或组织等直接加工制成，或用现代生物技术方法制成，作为预防、治疗、诊断特定传染病或其他有关疾病的免疫制剂。
5、基因工程药物采用新的生物技术方法，利用细菌、酵母或哺乳动物细胞作为活性宿主，进行生产的作为治疗、诊断等用途的多肽和蛋白质类药物6、生物药物分类按生理功能和用途分类（1）治疗药物：对疑难杂症如肿瘤、爱滋病、免疫性疾病、内分泌障碍等具有特殊的作用；（2）预防药物：对传染病的预防；（3）诊断药物：免疫诊断试剂、单克隆抗体诊断试剂、酶诊断试剂、放射性诊断药物和基因诊断药物等；某些生物活性物质亦是检测疾病的指标，如谷草转氨酶等；（4）其它生物医药用品：生物药物在其他方面应用也很广泛：如生化试剂、保健品、化妆品、食品、医用材料等。
按原料的来源分类（1）人体组织来源的生物药物：主要有人血液制品类、人胎盘制品类、人尿制品类；（2）动物组织来源的生物药物：动物的脏器、其他小动物制得的药物如蛇毒、蜂毒等。
（3）植物组织来源的生物药物：中草药、有效成分；（4）微生物来源的药物：抗生素、酶、氨基酸、维生素等；（5）海洋生物来源的药物；7、生物药物的特性（1）药理学特性（2）在生产、制备中的特殊性（3）检验上的特殊性（4）剂型要求的特殊性（5）保藏及运输的特殊性第二章生物药物的质量管理与控制1、生物药物质量检验的程序与方法基本程序：取样、鉴别、检查、含量测定、写出检验报告2、药物的ADMEA: absorption，药物在生物体内的吸收；D: distribution, 药物在生物体内的分布；M: metabolism，药物在体内的代谢转化；E: excretion，药物及其代谢产物自体内的排除。
生物制药工艺学(技术与基础)_中国药科大学中国大学mooc课后章节答案期末考试题库2023年
生物制药工艺学（技术与基础）_中国药科大学中国大学mooc课后章节答案期末考试题库2023年1.盐析法与有机溶剂沉淀法比较，其优点是()答案:变性作用小2.将配基与可溶性的载体偶联后形成载体-配基复合物，该复合物可选择性地与蛋白质结合，在一定条件下沉淀出来，此方法称为( )答案:亲和沉淀3.“类似物容易吸附类似物”的原则, 一般非极性吸附剂适宜于从下列何种溶剂中吸附非极性物质答案:极性溶剂4.在凝胶层析中Sepharose的基本骨架是( )答案:琼脂糖5.下列关于离子交换选择性的说法不正确的是( )答案:树脂交联度降低，交换选择性增加6.亲和层析的洗脱过程中，在流动相中加入配基的洗脱方法称作( )答案:竞争洗脱7.将四环素粗品溶于pH2的水中，用氨水调pH4.5—4.6，28－30℃保温，即有四环素沉淀结晶析出。
此沉淀方法称为( )答案:等电点法8.以下能作为超临界萃取使用的萃取剂是( )答案:二氧化碳9.工业生产过程中，拟使用有机溶剂萃取法纯化红霉素，可以使用的溶剂为（ )答案:乙酸丁酯10.为得到较大的晶体，以下结晶操作方法正确的是( )答案:使用共沸蒸馏结晶技术11.下列哪一个是腺病毒载体的使用特点（）答案:宿主范围广12.以下对于幽门螺旋杆菌，下列说法正确的是（）答案:是引起胃炎或胃溃疡的致病菌13.关于包涵体的复性，以下说法错误的是（）答案:可以使用超滤的方法进行复性14.对于人源化抗体的生产，可采用的宿主细胞是（）答案:动物细胞15.在下列转子中，“壁效应”最大的是（）答案:角度转子16.以下阳离子对带负电荷的胶粒凝聚能力最强的是（）答案:铝离子17.当向蛋白质纯溶液中加入中性盐时，蛋白质溶解度（）答案:先增大，后减小18.用大网格高聚物吸附剂吸附的弱酸性物质，一般用下列哪种溶液洗脱( )答案:高pH19.凝胶层析中，如对于Sephadex G25（渗入限1000，排阻限5000）氯化钠之K d为0.8，葡萄糖的K d为0.9，其作为小分子溶质的Kd都小于1，其原因是答案:水合作用20.用钠型阳离子交换树脂处理氨基酸时，吸附量很低，这是因为( )答案:偶极排斥21.在红霉素的分离工艺中，将其从碱性的丁酯洗脱液反萃取到醋酸缓冲液，醋酸缓冲液的pH应调节到( )答案:4～522.乌本美司是微生物产生的( )答案:免疫增强剂23.基因治疗中，哪一种载体介导的基因在细胞基因组中是随机整合的？( )答案:逆转录病毒载体24.以下能用重组DNA技术生产的药物为( )答案:人生长素25.在透析过程中，主要的推动力是( )答案:浓度差26.在离心分离过程中,若离心机的转速为2000转/分种,离心半径为5厘米,相对离心力约为 ( )答案:223×g27.732树脂属于( )答案:强酸型阳离子交换树脂28.在凝胶层析中Sephadex的基本骨架是( )答案:葡聚糖29.蛋白质类物质的分离纯化往往是多步骤的，其前期处理多采用哪类方法( )答案:负载量大30.下列哪类药物属于ADC药物( )答案:抗体-药物偶联物31.请指出下列哪种措施不可以用于克服浓差极化现象（）答案:降低流速32.用来治疗非霍奇金淋巴瘤的利妥昔单抗（rituximab）是针对下列哪个物质的单克抗体？（）答案:CD2033.下列关于离子交换选择性的说法不正确的是（）答案:树脂交联度降低，交换选择性增加34.以下关于盐析的说法正确的是（）答案:盐析常用盐为硫酸铵35.下列哪类药物属于DNA重组药物（）答案:基因工程药物36.根据蛋白质分子形状和大小的不同对其进行纯化的方法有（）答案:凝胶过滤层析37.膜分离过程一般需要有推动力，下列四种膜分离技术中哪种是以浓度差为推动力的（）答案:透析38.链霉素是由下列哪种菌产生的？（）答案:放线菌39.NS-1是稳定的小白鼠BALB/c癌细胞株，除了能在培养基中永续生长外，还有一个重要特性，其缺乏下列哪个DNA代谢的重要酶?（）答案:胸苷激酶和次黄嘌呤-鸟嘌呤磷酸核糖转移酶40.在胰岛素的生产工艺中，若利用胰岛素原原核表达的方法，在工艺中需增加下列两种工具酶？（）答案:胰蛋白酶和羧肽酶B。
生物制药工艺学第二版各章习题
生物制药工艺学第二版各章习题《现代生物制药工艺学》配套习题班级：姓名：学号：第1章绪论习题一、名词解释：1、生物药物：2、生化药物3、生物制品二、填空题：1、按照药物的化学本质，把生物药物分为（）、（）、（）、（）、（）、（）、（）七类。
2、生物药物的原料来源分为（）、（）、（）、（）、（）五大类。
3、肝素的化学成分属于一种（），其最常见的用途是（）。
4、SOD的中文全称是（），能专一性清除（）。
5、辅酶在人体内的酶促反应中起重要的递H、递e等作用，有药用价值，请任意列举4种人体生化反应中重要的辅酶：（）、（）、（）和（）。
6、前列腺素的成分是一大类含五元环的（），重要的天然前列腺素有（）、（）、（）等。
三、选择题1、复方氨基酸注射液临床最主要的用途是（）A，治疗肝脏疾病；B，为重症患者提供蛋白类原料；C，为病人提供能量；D，用做稀释抗生素类药物的载体。
2、某些氨基酸的衍生物具有特殊药效，例如（）是治疗帕金森病的最有效药物。
A，N-乙酰-Cys；B，S-甲基-Cys；C，S-氨基甲酰-Cys；D，L-多巴（L-二羟-Phe）3、下列药物其本质不属于多肽的为（）A，催产素；B，加压素；C，胰岛素；D，胰高血糖素4、细胞因子如EGF、EPO等对特定细胞有重要的调节作用，有重要医用价值，目前发现的细胞因子，其成分主要为（）类。
A，蛋白或多肽；B，多糖；C，固醇；D，核酸5、下列（）药品目前已主要使用基因工程方法制备。
（多选）A，乙肝疫苗；B，胰岛素；C，人生长素；D，抗蛇毒血清6、抗生素的成分大多为（）A，多糖；B，多肽；C，脂类；D，小分子化学物质7、cty C (细胞色素C)参与代谢的机制是（）A，参与细胞内的无氧酵解；B，参与细胞内的有氧呼吸，是呼吸链的组成部分；C，参与氨基酸的转氨基反应；D，参与核苷酸的合成8、胰岛组织中胰岛素的含量仅为（）A，0.5%；B，0.2%；C，0.02%；D，0.002%四、简答题1、请说明酶类药物主要有哪几类，并分别举例。
生物制药工艺学习题-第七章-凝胶层析
生物制药工艺学习题-第七章-凝胶层析第七章凝胶层析一、填空题1、凝胶层析的分离原理有、、。
这三种分离原理是互相补充的，在通常情况下起主导作用；的作用随流速增加而加强；只有在流速很高时才起作用。
2、琼脂糖凝胶的一个特征是分离的分子量范围非常大，其分离范围随着凝胶浓度上升而，颗粒强度随浓度上升而。
3、凝胶粒度的大小对分离效果有直接的影响。
一般来说，细粒凝胶柱流速低，洗脱峰窄，分辨率，多用于等。
粗粒凝胶柱流速高，洗脱峰平坦，分辨率，多用于等。
4、在作分级分离时，为了提高分辨率，多采用比样品体积大倍以上的柱体积，以上的柱比，较吸液量、较粒的凝胶固定相。
5、溶质通过色谱柱时造成的峰加宽效应包括、、、。
6、葡聚糖凝胶的孔径大小取决于，其越小，凝胶孔径越；而琼脂糖凝胶的孔径却依赖于。
二、选择题1、凝胶层析中，有时溶质的Kd>1，其原因是（）A.凝胶排斥B.凝胶吸附C.柱床过长D.流速过低2、凝胶层析中，有时小分子溶质的Kd<1，其原因是（）A.水合作用B.凝胶吸附C.柱床过长D.流速过低3、在凝胶层析中样品各组分最先淋出的是（）A.分子量最大的B.体积最大的C.分子量最小的D.体积最小的4、为了进一步检查凝胶柱的质量，通常用一种大分子的有色物质溶液过柱，常见的检查物质为蓝色葡聚糖，下面不属于它的作用的是（）A.观察柱床有无沟流B.观察色带是否平整C.测量流速D.测量层析柱的外水体积5、在选用凝胶层析柱时，为了提高分辨率，宜选用的层析柱是（）A.粗且长的B.粗且短的C.细且长的D.细且短的三、名词解释1、全排阻：2、类分离：3、分级分离：4、柱比：5、操作压：6、全渗入：7、分离度R s：四、问答题1、试述公式V e=V0+K d V i 各字母的物理意义。
2、利用凝胶层析如何测定蛋白质的分子量？3、凝胶层析的应用主要有哪些？并说明其原理。
第七章凝胶层析（答案）一、填空题1、凝胶层析的分离原理有平衡排除理论、扩散分离理论、流动分离理论。
生物制药学——第七章 凝胶层析
2、交联葡聚糖离子交换剂
在G类凝胶上引入一些酸性或碱性基团后， 则制得各种葡聚糖凝胶离子交换剂 。具有离子 交换和分子筛双重作用。
3、Superdex系凝胶
由高交联度多孔琼脂糖与葡聚糖共价结合而 成的复合凝胶。将交联葡聚糖的优良过滤选择性 及交联琼脂糖的物理化学稳定性集于一身，成为 具有优良选择性及高分辨率的产品。
g，Wr为凝胶吸水量，以mL/g表示）。Vi也可以 从洗脱一种完全不受凝胶微孔排阻的小分子溶质 （如重铬酸钾）的洗脱体积Ve计算，即 Ve＝V0＋Vi
对某物质在凝胶柱内洗脱体积 Ve 、V0 和Vi 之间 的关系可用下式表示：
Ve ＝ V0 ＋ Kd Vi
式中 Ve 为洗脱体积，它包括自加入样品时算 起，到组分最大浓度出现时所流出的体积。 Kd为每 个溶质分子在流动相和固定相之间的一个特定的分 配系数，它只与被分离物质分子大小和凝胶颗粒内 孔隙大小分布有关。Kd可通过实验由 Ve 、 V0 和 Vi 求得。
当0＜Kd＜l时，意味着溶质分子只有部分向凝胶颗 粒内扩散，Kd愈大，进入凝胶颗粒内的程度愈大。
凝胶层析柱洗脱的三部分示意图
A：Kd=0 B：0<Kd<1 C：Kd=1
物质的Kd值（p202表7-1）
对一定种类规格的凝胶，物质的Kd值为该物质的特征常数。
层析技术的分类 ：
凝胶层析（Gel chromatography）：将样品化 合物通过一定孔径的凝胶固定相，利用流经 体积的差异，使不同分子量的组份得以分离 的层析（色谱）方法。 常出现多种名称 ：如凝胶过滤、分子筛层 析、排阻层析、凝胶渗透等。
在分离过程中起主要作用。
2、扩散分离理论
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第七章凝胶层析
一、填空题
1、凝胶层析的分离原理有、、。
这三种分离原理是互相补充的，在通常情况下起主导作用；的作用随流速增加而加强；只有在流速很高时才起作用。
2、琼脂糖凝胶的一个特征是分离的分子量范围非常大，其分离范围随着凝胶浓度上升而，颗粒强度随浓度上升而。
3、凝胶粒度的大小对分离效果有直接的影响。
一般来说，细粒凝胶柱流速低，洗脱峰窄，分辨率，多用于等。
粗粒凝胶柱流速高，洗脱峰平坦，分辨率，多用于等。
4、在作分级分离时，为了提高分辨率，多采用比样品体积大倍以上的柱体积，
以上的柱比，较吸液量、较粒的凝胶固定相。
5、溶质通过色谱柱时造成的峰加宽效应包括、、
、。
6、葡聚糖凝胶的孔径大小取决于，其越小，凝胶孔径越；而琼脂糖凝胶的孔径却依赖于。
二、选择题
1、凝胶层析中，有时溶质的Kd>1，其原因是（）
A.凝胶排斥
B.凝胶吸附
C.柱床过长
D.流速过低
2、凝胶层析中，有时小分子溶质的Kd<1，其原因是（）
A.水合作用
B.凝胶吸附
C.柱床过长
D.流速过低
3、在凝胶层析中样品各组分最先淋出的是（）
A.分子量最大的
B.体积最大的
C.分子量最小的
D.体积最小的
4、为了进一步检查凝胶柱的质量，通常用一种大分子的有色物质溶液过柱，常见的检查物质为蓝色葡聚糖，下面不属于它的作用的是（）
A.观察柱床有无沟流
B.观察色带是否平整
C.测量流速
D.测量层析柱的外水体积
5、在选用凝胶层析柱时，为了提高分辨率，宜选用的层析柱是（）
A.粗且长的
B.粗且短的
C.细且长的
D.细且短的
三、名词解释
1、全排阻：
2、类分离：
3、分级分离：
4、柱比：
5、操作压：
6、全渗入：
7、分离度R s：
四、问答题
1、试述公式V e=V0+K d V i 各字母的物理意义。
2、利用凝胶层析如何测定蛋白质的分子量？
3、凝胶层析的应用主要有哪些？并说明其原理。
第七章凝胶层析（答案）
一、填空题
1、凝胶层析的分离原理有平衡排除理论、扩散分离理论、流动分离理论。
这三种分离原理是互相补充的，在通常情况下平衡排除理论起主导作用；扩散分离理论的作用随流速增加而加强；只有在流速很高时流动分离理论才起作用。
2、琼脂糖凝胶的一个特征是分离的分子量范围非常大，其分离范围随着凝胶浓度上升而下降，颗粒强度随浓度上升而提高。
3、凝胶粒度的大小对分离效果有直接的影响。
一般来说，细粒凝胶柱流速低，洗脱峰窄，分辨率高，多用于精制分离等。
粗粒凝胶柱流速高，洗脱峰平坦，分辨率低，多用于脱盐等。
4、在作分级分离时，为了提高分辨率，多采用比样品体积大25 倍以上的柱体积，25 以上的柱比，较大吸液量、较细粒的凝胶固定相。
5、溶质通过色谱柱时造成的峰加宽效应包括分子扩散、涡流扩散、流动相中传质阻力、固定相中传质阻力。
6、葡聚糖凝胶的孔径大小取决于交联度，其越小，凝胶孔径越大；而琼脂糖凝胶的孔径却依赖于琼脂糖浓度。
二、选择题
1、凝胶层析中，有时溶质的Kd>1，其原因是（B ）
A.凝胶排斥
B.凝胶吸附
C.柱床过长
D.流速过低
2、凝胶层析中，有时小分子溶质的Kd<1，其原因是（A）
A.水合作用
B.凝胶吸附
C.柱床过长
D.流速过低
3、在凝胶层析中样品各组分最先淋出的是（B）
A.分子量最大的
B.体积最大的
C.分子量最小的
D.体积最小的
4、为了进一步检查凝胶柱的质量，通常用一种大分子的有色物质溶液过柱，常见的检查物质为蓝色葡聚糖，下面不属于它的作用的是（C）A.观察柱床有无沟流 B.观察色带是否平整
C.测量流速
D.测量层析柱的外水体积
5、在选用凝胶层析柱时，为了提高分辨率，宜选用的层析柱是（A）
A.粗且长的
B.粗且短的
C.细且长的
D.细且短的
三、名词解释
1、全排阻：
当具有一定分子量分布的高聚物溶液从柱中通过时，较大的分子完全不能进入颗粒内部，只能从颗粒间隙流过，称“全排阻”。
其流经体积最小，等于外水体积V0。
2、类分离：
将分子量极为悬殊的两类物质分开，如蛋白质与盐类，称作类分离或组分离.选择凝胶时，应使样品中大分子组的分子量大于其排阻限，而小分子组的分子量小于渗入限。
大分子的分配系数Kd=0，小分子的Kd=1。
3、分级分离：将分子量相差不大的大分子物质加以分离，如分离血清球蛋白与白蛋白，分级分离应尽量使待分离各物质的Kd值相差大些，并使分子量分布不在凝胶分离范围的一侧。
4、柱比：层析柱的长度与直径的比值一般称作“柱比”。
5、操作压：凝胶层析柱由于进出口之间液位压力差形成的对凝胶颗粒的压力称作“操作压”。
6、全渗入：被分离组分的分子量小于该种凝胶的渗入限，其分子可以自由进出凝胶颗粒，这叫做“全渗入”。
其流经体积最大，等于外水体积与内水体积之和，V0 ＋Vi。
7、分离度Rs：
式中Ve1、Ve2——对应于两个峰的淋出体积；W1、W2和σ1、σ2——两个峰宽度和标准偏差。
四、问答题
1、试述公式Ve=V0+KdVi 各字母的物理意义。
答：公式Ve=V0+KdVi中Ve代表被分离组分的流经体积，V0代表外水体积，Vi代表内水体积。
Kd称作“排阻系数”或“分配系数”，它反映了物质分子进入凝胶颗粒的程度。
对一定种类规格的凝胶，物质的Kd值为该物质的特征常数。
排阻系数：
当Kd=1时，洗脱体积Ve=V0+Vi，为全渗入。
当Kd=0时，洗脱体积Ve=V0，为全排阻。
0＜Kd＜1时，洗脱体积V e=V o+KdVi，为部分渗入。
2、利用凝胶层析如何测定蛋白质的分子量？
答：当具有一定分子量分布的高聚物溶液从柱中通过时，较小的分子在柱中停留时间比大分子停留的时间要长，于是样品各组分即按分子大小顺序而分开，最先淋出的是最大的分子（2分）。
对于一个特定体系（凝胶柱），待测定物质的洗脱体积与分子量的关系符合公式
Ve=-KlogM +C
先以3个以上（最好更多些）的已知分子量的标准蛋白过柱，测取各自的Ve值。
以Ve作纵坐标，logM作横坐标制作标准曲线（2分）。
在同一测定系统中测取未知物质的Ve值便可由标准曲线求得分子量（2分）。
3、凝胶层析的应用主要有哪些？并说明其原理。
当具有一定分子量分布的高聚物溶液从柱中通过时，较小的分子在柱中停留时间比大分子停留的时间要长，于是样品各组分即按分子大小顺序而分开，最先淋出的是最大的分子（2分）。
应用：
一、脱盐：脱盐用的凝胶多为大粒度的，高交联度的凝胶。
此时溶液中蛋白质等大分子的Kd=0，盐类的Kd=1。
由于交联度大，凝胶颗粒的强度较好，加之凝胶粒度大，柱层操作比较便利，流速也高。
二、分子量测定：对于一个特定体系（凝胶柱），待测定物质的洗脱体积与分子量的关系符合公式
Ve=-KlogM+C
先以3个以上（最好更多些）的已知分子量的标准蛋白过柱，测取各自的Ve值。
以Ve作纵坐标，logM作横坐标制作标准曲线。
在同一测定系统中测取未知物质的Ve值便可由标准曲线求得分子量。
三、分离纯化：根据分子量不同流出先后顺序不同，收集单一洗脱峰的物质，得以纯化。