紫外可见分光光度计基本常识与使用PPT资料26页

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紫外可见分光光度计的使用课件PPT

紫外可见分光光度计的使用课件PPT

定义与工作原理
定义
紫外可见分光光度计是一种基于 物质对紫外可见光的吸收特性进 行物质定量和定性分析的仪器。
工作原理
通过测量物质在特定波长下的吸光 度,利用朗伯-比尔定律(A=εbc) 计算物质的浓度。
类型与特点
类型
单光束分光光度计、双光束分光光度 计和双波长分光光度计。
特点
具有较高的测量精度和稳定性,广泛 应用于化学、生物学、医学、环境监 测等领域。
每次使用后记录仪器使用 情况,包括测试样品、测 试波长、测试结果等,以 便后续分析。
常见故障排除
波长不准确
检查仪器是否正确设置波长,并 确保仪器没有受到强烈震动或磁
场干扰。
读数不稳定
检查样品是否均匀,仪器是否处于 稳定状态,以及是否有外界干扰。
仪器无响应
检查电源是否正常,仪器是否处于 正常工作状态,以及是否有硬件故 障。
THANKS
开始测量
点击开始按钮,仪器自动扫描并记录 数据。
数据处理
将测量数据导入计算机进行进一步处 理和分析。
实验操作技巧
保持样品池清洁
定期清洗样品池,避免残留物对测量结果的 影响。
选择合适的标准物质
选择与待测样品性质相近的标准物质进行校 准,提高测量准确性。
控制环境因素
确保实验室内温度、湿度和光照等环境因素 稳定,以减小误差。
多次测量求平均值
为减小误差,可以对同一样品进行多次测量, 取平均值作为最终结果。
常见问题及解决方案
波长校准不准确
可能是由于仪器内部棱镜或光路不干 净导致。解决方法是清洁仪器内部并 重新进行波长校准。
测量数据不稳定
数据处理软件崩溃
可能是由于计算机内存不足或软件 bug导致。解决方法是关闭不必要的 程序,释放计算机内存,或更新数据 处理软件。

紫外可见分光光度法基本原理PPT讲稿

紫外可见分光光度法基本原理PPT讲稿
光是由光子流组成,光子的能量:
E=h=hc/
(Planck常数:h=6.626 × 10 -34 J × S ) 光的波长越短(频率越高),其能量越大。 白光(太阳光):由各种单色光组成的复合光 单色光:单波长的光(由具有相同能量的光子组成) 可见光区:400-750 nm 紫外光区:近紫外区200 - 400 nm
生的吸收光谱在紫外—可见光区,称为紫外—可见光谱或分子的 电子光谱。
讨论:
(4)吸收光谱的波长分布是由产生谱带的跃迁能级间的 能量差所决定,反映了分子内部能级分布状况,是物质定性 的依据。 (5)吸收谱带强度与分子偶极矩变化、跃迁几率有关, 也提供分子结构的信息。通常将在最大吸收波长处测得的摩 尔吸光系数εmax也作为定性的依据。不同物质的λmax有时可能 相同,但εmax不一定相同; (6)吸收谱带强度与该物质分子吸收的光子数成正比, 这是定量分析的依据。
* σ σ* (150~210nm)
H
* n σ* (259nm)
HCI
H
(2)不饱和脂肪烃
• 这类化合物有孤立双键的烯烃(如乙烯)和共轭双键的烯
烃(如丁二烯),它们含有π键电子,吸收能量后产生
π→π*跃迁。乙烯(孤立双键)的
m
a
为171nm(
x

15530 L mol1 cm1 );而丁二烯H(2C CH CH CH2 )
列吸收带,称为精细结构吸收带,亦称为B吸收带[从德文 Benzenoid(苯的)得名],这是由于跃迁和苯环的振动的重叠引起的。B 吸收带的精细结构常用来辨认芳香族化合物。 苯环与生色团连结时,有B和K两种吸收带,有时还有R吸收带,其中 R吸收带的波长最长 。
生色团与助色团
生色团(Chromophore): 最有用的紫外—可见光谱是由π→π*和n→π*跃迁产生

紫外可见分光光度计原理及操作.ppt

紫外可见分光光度计原理及操作.ppt

吸收光谱曲线,可根据吸收光谱上的某些特征波长处的吸光度的高低判别或
测定该物质的含量,这就是分光光度定性和定量分析的基础。 3)紫外分光光度法使用基于朗伯-比耳定律(Lambert-Beer)。
朗伯-比耳定律是光吸收的基本定律,俗称光吸收定律,是分光光度法
定量分析的依据和基础。
朗伯-比耳定律
一、透射率T%
dT d lg T 0.434 bdc T
将上两式相比,并将 dT 和 dc 分别换为T 和 c,得
c 0.434T c T lg T
当相对误差 c/c 最小时,求得T=0.368 或 A=0.434。即当A=0.434 时,吸光度读数误差最小! 通常可通过调节溶液浓度或改变光程 b来控制A的读数在0.15~1.00范类型来自3.比例双光束分光光度计
由同一单色器发出的光被分成两束,一束直接到达检测器,另一束 通过样品后到达另一个检测器。这种仪器的优点是可以监测光源变化带
来的误差,但是并不能消除参比造成的影响
UV-2550的特点
6 挡狭缝可选
PC 控制存储、调用方便 可采用复制、拷贝方法在电子表格和字处理软件中处理数据和打印报 告 可加载膜厚、动力学、多波长、色彩分析等软件 DDM(双闪耀波长双单色器)降低杂散光,提高长波长区的能量响应 (UV-2550)
它的作用是放大信号并以适当方式指示或记录下来。现在一般的紫
外可见分光光度计有计算机控制和主机单片机控制两种类型,功能基本 类似。
类型
紫外-可见分光光度计的类型很多,但可归纳为三种类 型,即单光束分光光度计、双光束分光光度计和比例双光束 分光光度计。
1.单光束分光光度计 经单色器分光后的一束平行光,轮流通过参比溶液和样品溶液,以 进行吸光度的测定。这种简易型分光光度计结构简单,操作方便,维修 容易,适用于常规分析。

紫外可见分光光度计基本原理PPT资料(正式版)

紫外可见分光光度计基本原理PPT资料(正式版)

,该溶液的吸光度A与溶液的浓度c及液层厚度l的乘积成正比关系,称为朗伯比尔定律。
利用标准物质定性分析 的ε的单位为L/mol ,它表示物质的浓度为1mol/L,液层厚度为1cm时,溶液的吸光度。
设入射光强度为I0,吸光强度为Ia,透射光强度为It,
朗伯比尔定律—吸光系数
n σ*跃迁:含有-OH,-NH2, -X,-S等基团的化合物,其杂原子中孤对电子吸
λ / nm
优点
朗伯比尔定律
透光率和吸光度
当一束平行单色光垂直照射均匀的溶液 时,光的一部分被吸收,一部分透过溶 液,还有一部分被器皿表面反射。设入 射光强度为I0,吸光强度为Ia,透射光强 度为It,
则: I0 = Ia + It
朗伯比尔定律—透光率 则: I0 = Ia + It
当l以cm,c以g/L为单位,K称为吸光系数,用a表示。 朗伯比尔定律—吸光系数 朗伯比尔定律—吸光系数 适用条件:单色光、稀溶液
朗伯比尔定律—吸光系数
百分吸光系数 百分吸光系数是指百1分% 含量为,l为1cm
时的吸光度值,用E 1cm 表示。
Ε=
前提条件
入射光为平行单色光且垂直照射; 吸光物质为均匀非散射体系; 溶液为稀溶液; 辐射与物质之间的作用仅限于光吸收过
程,无荧光和光化学现象发生。
应用
定性分析
当一束平行的单色光通过某一均匀、无散色的含有吸光物质的溶液时,在入射光的波长强度以及溶液的温度等因素保持不变的情况下
透光率越大,溶液对光的吸收越少,
反之,透光率越小,溶液对光的吸收越大。
朗伯比尔定律—吸光度
2、吸光度(A)
物质对光的吸收程度
吸光度A公式:
I0
A= -lg T = lg

紫外可见分光光度计基本常识与使用

紫外可见分光光度计基本常识与使用

检查仪器的光源、单色器、检测器等部件是 否正常工作。
参数设置与校准
根据实验需求,设置波长范围、 扫描速度、狭缝宽度等参数。
进行波长校准,确保波长准确。
进行吸光度或透过率校准,使用 标准物质进行校准,确保测试结
果的准确性。
样品处理与测试
将样品放入比色皿或石英 池中,注意擦拭干净比色 皿或石英池的外表面。
波长准确度与重复性
高准确度和重复性的波长定位是保证测量准 确的关键。
样品室与检测系统
01
02
03
样品室设计
可容纳不同类型的样品池, 如石英比色皿、微量池等。
检测器类型
常用硅光电池、光电倍增 管等作为检测器,具有高 灵敏度和宽线性范围。
背景校正
采用双光束设计,自动扣 除背景干扰,提高测量精 度。
数据处理与显示系统
02
紫外可见分光光度计基本构造
光源系统
光源类型
通常使用氘灯和钨灯作为紫外和 可见光区的光源,具有稳定、连 续的光谱输出。
光源寿命
光源寿命有限,需要定期更换, 以保证测量准确性和稳定性。
单色器系统
单色器类型
采用棱镜或光栅作为分光元件,将复合光分 解为单色光。
波长范围
覆盖紫外和可见光区,可根据需求选择不同 的波长范围。
副产品监控
某些生产过程中会产生副产品,通 过对其吸收光谱的测量,可以监控 副产品的生成情况,以便及时采取 措施。
新产品开发与研究
1 2
新材料研究
紫外可见分光光度计可用于研究新材料的光学性 能,如吸收、反射、透射等,为新材料开发提供 数据支持。
配方优化
在产品配方开发过程中,通过测量不同配方的吸 收光谱,可以优化配方组成,提高产品性能。

紫外可见分光光度计基本常识与使用PPT文档共27页

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紫外可见分这个字(法语是一个字 ),只 在愚人 的字典 中找得 到。--拿 破仑。 37、不要生气要争气,不要看破要突 破,不 要嫉妒 要欣赏 ,不要 托延要 积极, 不要心 动要行 动。 38、勤奋,机会,乐观是成功的三要 素。(注 意:传 统观念 认为勤 奋和机 会是成 功的要 素,但 是经过 统计学 和成功 人士的 分析得 出,乐 观是成 功的第 三要素 。
39、没有不老的誓言,没有不变的承 诺,踏 上旅途 ,义无 反顾。 40、对时间的价值没有没有深切认识 的人, 决不会 坚韧勤 勉。
谢谢你的阅读
❖ 知识就是财富 ❖ 丰富你的人生
71、既然我已经踏上这条道路,那么,任何东西都不应妨碍我沿着这条路走下去。——康德 72、家庭成为快乐的种子在外也不致成为障碍物但在旅行之际却是夜间的伴侣。——西塞罗 73、坚持意志伟大的事业需要始终不渝的精神。——伏尔泰 74、路漫漫其修道远,吾将上下而求索。——屈原 75、内外相应,言行相称。——韩非

紫外分光光度计的使用原理和方法 ppt课件

紫外分光光度计的使用原理和方法 ppt课件

助色团:是指带有非键电子对的基团,如OH、-OR、-NHR、-SH、-Cl、-Br、-I等, 它们本身不能吸收大于200nm的光,但是当 它们与生色团相连时,会使生色团的吸收峰
向长波方向移动,并且增加其吸收强度。见 表3-4。
紫外分光光度计的使用原理和方法
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红移和紫移
在有机化合物中,常常因取代基的变更 或溶剂的改变,使其吸收带的最大吸收波长 λmax发生移动。向长波方向移动称为红移(表33),向短波方向移动称为紫移。
2. 溶剂 注意如下几点:
(1)尽量选用低极性溶剂; (2)能很好地溶解被测物,并且形成的溶液 具有良好的化学和光化学稳定性; (3)溶剂在样品的吸收光谱区无明显吸收。
3. pH值
紫外分光光度计的使用原理和方法
17
1.5 紫外-可见吸收光谱的应用
紫外-可见吸收光谱除主要可用于物质的定量 分析外,还可以用于物质的定性分析、纯度鉴定、 结构分析。
1. 物质对光的选择性吸收
物质对光的吸收是选择性的,利用 被测物质对某波长的光的吸收来了解物 质的特性,这就是光谱法的基础。
紫外分光光度计的使用原理和方法
6
通过测定被测物质对不同波长的光的吸 收强度(吸光度),以波长为横坐标,吸光 度为纵坐标作图,得出该物质在测定波长范 围的吸收曲线。如图3-1;
致,光学元件的缺陷引起的多次反射等,均
造成光径不一致,从而与定律偏离。
紫外分光光度计的使用原理和方法
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§3. 紫外-可见分光光度计
一、主要部件的性能与作用 基本结构:
光源→单色器→吸收池→检测器→信号显示系统 ↑ 样品
紫外分光光度计的使用原理和方法
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1 光源
在紫外可见分光光度计中,常用的光源 有两类:热辐射光源和气体放电光源
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光栅单色器在整个光学光谱区具有良好的几乎相
同的色散能力。因此,现代紫外—可见分光光度 计上多采用光栅单色器。
(三)吸收池
吸收池是用于盛放溶液并提供一定吸光厚度的 器皿。
它由玻璃或石英材料制成。
玻璃吸收池只能用于可见光区。最常用的吸收 池厚度为1cm。
(四)检测器
检测器的作用是检测光信号。常用的检测器有 光电管。
D212工作曲线
y = 0.1051x + 0.0046 R2 = 0.9999
1
0.8
0.6
0.4
0.2
0
0
2
4
6
8
10 12 14
以S902作溶剂:2%D212——最大吸收峰位:430nm;峰值:0.277
4%D212——最大吸收峰位:430nm;峰值:0.422
6%D212——最大吸收峰位:430nm;峰值:0.633
2、紫外可见吸收光谱的特点
(1)紫外可见吸收光谱所对应的电磁波长较短,能量大, 它反映了分子中价电子能级跃迁情况。主要应用于共轭 体系(共轭烯烃和不饱和羰基化合物)及芳香族化合物 的分析。
(2)由于电子能级改变的同时,往往伴随有振动能级的 跃迁,所以电子光谱图比较简单,但峰形较宽。一般来 说,利用紫外可见吸收光谱进行定性分析信号较少。
氢灯或氘灯 180-375nm 氘灯的发射强度比氢 灯大4倍
玻璃对这一波长有强吸收,必须用石英光窗。
紫外—可见分光光度计同时具有可见和紫外两 种光源。
(二) 单色器
单色器是从连续光谱中获得所需单色光的装置。 常用的有棱镜和光栅两种单色器。
棱镜单色器的缺点是色散率随波长变化,得到的
光谱呈非均匀排列,而且传递光的效率较低。
D939
D939的 次强峰
显而易见十字绣黑色墨水为D939、D212、D921三色的混合黑色 !
不同的199有不同的紫外可见光谱
黑——D231 绿——D732A 红——D232 蓝——新原料
D241、D881分析客户墨水
蓝——D881 红——D241 黑——客户墨水
四、如何使用紫外可见分光光度计
一、紫外可见吸收光谱简介
1、紫外-可见吸收光谱: (Ultraviolet and Visible Spectroscopy, UV-VIS)
统称为电子光谱。紫外-可见吸收光谱法是利用某些 物质的分子吸收200~800nm光谱区的辐射来进行 分析测定的方法。这种分子吸收光谱产生于价电子 和分子轨道上的电子在电子能级间的跃迁,广泛用 于有机和无机物质的定性和定量测定。
另外:S101——最大吸收峰位为197nm;S201——最大吸收峰位为215nm; S102——最大吸收峰位为260nm;
由此根据“不同的有机化合物具有不同的紫外可见吸收光谱”,我们可以对我 们的色料和溶剂进行简单的定性判断与分析。
3、定量分析
不同浓度D212的紫外可见吸收曲线
D212
1.4
1.2
4、定性、定量分析(综合)——配方分析
(1)由配方混合物的紫外可见光谱,判定其主要成分; (2)测试各主要成分在特定浓度下的紫外可见光谱; (3)根据曲线找到各特定峰位下峰值; (4)对各组分列方程,有多少组分就列多少个方程,设多
少个未知数; (5)求解方程即可得配方中各组分的初步浓度; (6)根据经验配方对所求浓度进行修正; (7)按所求值配置样品,测试紫外可见光谱与被分析物曲
(3)紫外可见吸收光谱常用于共轭体系的定量分析,灵 敏度高,检出限低。
3、紫外可见吸收曲线简介
A
末端吸收
最强峰
肩 峰
次强峰 峰谷
max
min
紫外可见吸收光谱示意图
最强峰 次强峰
最大吸收波长
4、紫外可见光谱的两个重要特征
max, A
例:λmaxD211 = 390 nm (A=0.827 ) 稀释比:1:5000
1、样品配置; 2、设备操作; 3、软件操作; 4、数据读取及报告
制作。
光电管
光电管由一个半圆筒形阴极和一个金属丝阳极组 成。当照射阴极上光敏材料时,阴极就发射电子。 两端加压,形成光电流。
——蓝敏光电管为铯锑阴极。适用波长范围:220625nm
—— 红敏光电管为银和氧化铯阴极适用波长范围: 600-1200nm。
三、紫外可见吸收光谱在墨水行业的应用
1、基本原理:
不同的有机化合物具有不同的紫外可见吸 收光谱,可进行简单的定性分析;同一化合物在 不同浓度下的吸光度在一定条件下符合朗伯-比尔 定律:所以我们可以利用有机物的紫外可见光谱 进行定性分析和定量分析
8%D212——最大吸收峰位:430nm;峰值:0.845
12%D212——最大吸收峰位:430nm;峰值:1.268
由上数据发现它们符合朗伯-比尔定律即A=k.C(A为最大吸收波长下的最大吸 收值或最大吸收峰位下的最大峰值;C为溶液的浓度;k为常数)
由此根据“同一化合物在不同浓度下的吸光度在一定条件下符合朗伯-比尔律”, 我们可以对色料和溶剂进行定量分析。
2、定性分析
D211、 D261、 D231、 D241的紫外可见光谱
D211
D261
D231
D241
D211——最大吸收峰位:390nm;峰值:0.827;副峰位:301nm;峰值:0.423 D231——最大吸收峰位:664nm;峰值:0.725;副峰位:624nm;峰值:0.683 D261——最大吸收峰位:545nm;峰值:0.788;副峰位:518nm;峰值:0.764 D241——最大吸收峰位:574nm;峰值:0.926;副峰位:430nm;峰值:0.624
二、UV-1750设备介绍
1、紫外-可见分光光度计的基本结构:
紫外-可见分光光度计由光源、单色器、 吸收池、检测器以及数据处理及记录(计 算机)等部分组成。
双光束分光光度计的原理图
(一)光源
光源的作用是提供辐射——连续复合光 可见光区 钨灯 320-2500nm
优点:发射强度大、使用寿命长
紫外光区
线对比; (8)根据偏差作最终校正,即得最终配方分析结果。
十字绣黑色墨水
D921特征峰
D212特征峰
D939特征峰
原料特征波长
No.
波长(nm)
吸收值Βιβλιοθήκη 对应原料(nm)1
629
0.334
D939
629.5
2
565.5
0.569
D921
563
3
411
0.206
D212
430
D921
D939
D212
D921 D212
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