SoD无花果生产试验研究
响应面法优化无花果多糖提取工艺的研究
响应面法优化无花果多糖提取工艺的研究无花果是一种桑科榕属植物无花果的干燥花托,具有广泛的营养价值和药用价值,不但香甜可口,而且具有润肺止咳、健胃清肠、消肿解毒、增强机体免疫功能、抑制多种肿瘤的的功效,现代医学研究证明,无花果富含黄酮、多糖、SOD 等具有防治心血管疾病和老年性痴呆症的生理活性物质和具有抗癌功效的呋喃香豆素内酯等物质。
近年来无花果抗肿瘤特性尤其受到人们的重视。
目前国内外在无花果抗癌方面的研究十分活跃。
多糖是来自高等植物、动物细胞膜、微生物细胞壁中的天然大分子物质,是所有生命有机体的重要组成部分,与维持生命所需的多种生理功能有关。
现代研究表明,多糖具有免疫调节作用、降血糖作用、抗感染作用、抗衰老作用、抗艾滋病等病毒以及抗疲劳、预防老年白内障和糖尿病引起的视网膜病的并发症等生理活性功能。
因此,多糖的研究已成为各国共同关注的焦点。
无花果非极性部位分离得到的苯甲醛、呋喃香豆素、三萜类、补骨脂素等已发现具有良好的抗肿瘤作用,而对其强极性部位分离的多糖的研究尚不够深入。
一般来说,优化提取工艺的方法是单次单因子法和正交试验设计法。
单次单因子法已逐渐被我们淘汰,因为使用此种方法只能讨论一种因素的影响,但是各个因子并不是单独作用的,它们之间总是存在或多或少的相互影响,所以使用该种方法并非总能获得最佳的优化条件。
正交试验设计法则在单次单因子法的基础上更加科学合理地安排试验,它与单次单因子法不同的是,它可以考虑到多种因素并且通过实验组合寻找出最佳因素水平组合,但它的缺陷在于,无法提供响应值及各变量间的准确影响因子,即无法在给出的区域内提供出一个准确的关于变量及响应值间的回归方程,从而无法找到整个区域上因素的最佳组合和响应值的最优值。
响应面分析方法则远远优于以上两种方法,是一种试验次数少、周期短,求得的回归方程精度高、能研究几种因素间交互作用的回归分析方法。
响应面方法(Response Surface Methodology,简称RSM)是利用合理的试验设计通过实验得到的一定数据,采用多元二次回归方程来拟合因素与响应值之间的函数关系,通过对回归方程的分析来寻求最优工艺参数,解决多变量问题的一种统计方法。
植物食品中SOD的测定
收稿日期: 2006- 05- 23 作者简介: 张晓燕(1963- ), 女(汉族), 副教授, 研究方向为食品营养及分析。
254 No. 10. 2006
分析检测
1 材料与仪器
2.1.4 透 析 法 将 经 2.2.2 处 理 的 上 清 液 在 4℃下 用 50mmol/L pH8.2的磷酸缓冲液透析后测定。
SOD的 测 定 方 法 很 多 , 常 用 的 化 学 方 法 有 邻 苯 三酚自氧化法、羟胺发色法、黄嘌呤氧化酶- 细胞 色素C法、化学 发 光 法 等 , 其 中 邻 苯 三 酚 自 氧 化 法 由于所用试剂和仪器比较普通, 测试方便, 灵敏 度高, 是目前应用最广泛的测试方法。但是样品 中 蛋 白 质 、 金 属 离 子 、 色 素 、 pH 等 成 分 对 测 定 有 干扰, 如果样品处理不当, 会产生很大误差。另 外, 无论是工艺研究或是实际生产中质量控制的 需要, 都要求操作简便、测定快速、数据准确、 稳定性好, 且用一般实验室常规仪器即可进行。本 文以植物性食品原料为待测样品, 对样品处理方 法进行了实验研究。
SOD对热的稳定性比其他杂蛋白要强, 因此可以 用加热处理的方法消除其他蛋白质对测定的影响。 用不同样品进行处理后测定, 不再出现负抑制现象, 说明氧化酶的影响基本消除。但从测定结果看, 变 异系数和标准差较大, 说明还存在着影响测定的干 扰成分。
用不同比例的丙酮对粗酶液进行处理提纯, 5次 平行测定的标准差为1.9U/g, 变异系数为1.8%, 说明 可以有效消除样品中成分对测定的影响, 但是从测 定结果看, 测定值较低, 说明在样品处理过程中, SOD酶损失较大。
分析检测
植物食品中SOD的测定
张晓燕, 朱乐敏 (扬州市职业大学, 扬州 225009)
无花果多糖的提取工艺研究
无花果多糖的提取工艺研究摘要】优选无花果多糖的提取工艺。
方法:采用超声波提取法提取无花果多糖,采用方差分析法对实验结果进行分析,以多糖含量为评价性指标,用硫酸—苯酚法进行测定。
结果:无花果多糖的最佳工艺条件为提取时间150min,加12 倍量水,浸提3次,每次浸提3h,其水溶性多糖提取率达8.56%。
结论:提取次数对多糖的提取率影响最大,料液比的影响次之,浸提时间的影响最小。
【关键词】正交实验无花果多糖超声波提取1 前言无花果属于桑科植物,果实中含有丰富的葡萄糖、果糖、蔗糖、柠檬酸以及少量苹果酸、琥珀酸等。
它的干果、未成熟果实和植物的乳汁中均含抗肿瘤的成分,乳汁中还含有淀粉糖化酶、酯酶、脂肪酶、蛋白酶等。
现代研究的结果表明,无花果有一定的轻泻作用,在便秘时,可以用作食物性的轻泻剂;干果的水提取物经处理后有抗肿瘤作用;动物试验无花果尚有一定的降压作用[1]。
经研究发现,无花果含有丰富的硒,其含量远高于其它水果,其果实中硒含量为54.7ppm,叶子含量为189.3ppm,是最新发现的浓集硒果树。
硒是人体内抵抗有毒物质的保护剂,可降低有毒物质的危害,因而被营养学家誉为“生命的奇效元素”。
因此,富含硒的无花果具有补硒、增强机体免疫力、抵抗疾病的特殊功能。
无花果还含有丰富的维生素,其中维生素C 含量最高。
据测定,其含量分别是桔子23 倍,桃的8 倍,葡萄的20 倍,梨的27 倍。
此外,还含有维生素A、维生素E、烟酸及锌、钙、有机锗等矿物质[2]。
无花果的幼果和青叶含黄酮类化合物,经常食用可降低血压;其鲜茎叶的乳汁,对治疗扁平疣、黑痣有显著效果;用无花果内服外洗还可治疗痔疮[3]。
2 无花果多糖的提取工艺研究2.1 实验材料、仪器与设备。
2.1.1 材料及试剂。
无花果残渣:(购于西安市药材市场,经我院雷国莲教授鉴定为无花果正品);分析纯试剂:正丁醇(郑州智远化工产品有限公司);三氯甲烷(兴昌化工有限公司);5%乙醇(天津市富宇精细化工有限公司)。
浙江大学生物化学实验甲不同植物SOD提取及活力测定
不同植物SOD提取及活力测定
核黄素,TEMED .
O2
光照
O2
. 光照 NBT + O2
还原剂
甲(qian) 蓝色,560nm处具特征光吸收, OD值与 O2 含量.成正比。
.
NBT + O2
SOD 光照
抑制反应
抑制原因:
.
O2
+
.
O2 +
2H+
SOD
H2O2 +
O2
SOD对NBT光化还原的抑制程度与SOD活性成正比,
不同植物SOD提取及活力测定
1、SOD简介
• 超氧化物歧化酶(SOD)是一种广泛存在于动、植
物和微生物中的金属蛋白酶,是一种重要的抗氧化
剂,可清除自由基,其清除自由基的反应如下:
.
.
O2 + O2 + 2H+
SOD
H2O2 + O2
• 生物体在长期的生命活动中,常常会因为环境因素
或生理条件的变化而出现氧自由基增加、抗氧化能
(二)SOD同工酶活性染色
• Cu、Zn-SOD则一般是由两个相同的亚基组成的二 聚体,每个亚基的分子量约为16000D,含一个铜原 子及一个锌原子,不同来源的Cu、Zn-SOD其一级 结构的同源性也很高。
2、SOD同工酶活性染色原理
• 由于三种SOD同工酶的分子量和电荷间存在差异, 因此可通过聚丙烯酰胺凝胶电泳法将三种SOD同工 酶分开。
(二)SOD同工酶活性染色
3、材料与试剂
• 试验材料:新鲜植物叶片。 • 试验试剂:详见P117。
4、操作方法
• 各步操作方法及注意事项解说详见P118。
(整理)植物中SOD的分离提取及性质研究
植物中SOD的分离提取及性质研究前言:超氧化物歧化酶(superoxide dismutase)简称SOD,是一种生物活性蛋白质,是人体不可缺少、重要的氧自由清除剂,也是目前为止发现的唯一的以自由基为底物的酶。
SOD广泛存在于生物界,是防御氧毒害的关键酶。
SOD主要有CuZn-、Mn-、Fe-SOD三种类型同工酶,它们共同的生物学作用是专一地清除生物氧化中产生的超氧阴离子自由基(对细胞组分及细胞器,尤其是生物膜有严重的损伤作用),具有抗衰老、抗辐射、抗癌等生理作用。
在医药中,SOD可用于治疗辐射病、自身免疫性疾病、炎症等;在食品中,可用于保健食品添加剂;在化妆品中,可防止皮肤衰老、抗炎、防晒等作用。
植物中大蒜的SOD含量丰富,所以,本实验研究大蒜中SOD的性质,并确定SOD同工酶类型。
材料及方法:一、试剂(1) PH7.8 0.05mol/l磷酸盐缓冲溶液(2) PH8.2 50mmol/l Tris-HCL(3)0.026 mol/L 蛋氨酸(Met)磷酸钠缓冲液:准确称取L-蛋氨酸(C5H11NO2S,MW=149.21)0.3879g于100mL小烧杯中,用少量0.1 mol/L pH7.8的磷酸钠缓冲液溶解后,移入100mL容量瓶中并用0.1 mol/L pH7.8的磷酸钠缓冲液定容至刻度,充分混匀(现用现配)。
4℃冰箱中保存可用1~2d。
(4)7.5 × 10-4 mol/L NBT溶液:准确称取NBT(C4OH3OCl2N10O6,MW=817.7)0.1533g于100mL小烧杯中,用少量蒸馏水溶解后,移入250mL容量瓶中用蒸馏水定容至刻度,充分混匀(现配现用)。
4℃冰箱中保存可用2~3d。
(5)含1.0μmol/L EDTA的2 × 10-5 mol/L核黄素溶液:A液:准确称取EDTA(MW=292)0.00292g于50mL小烧杯中,用少量蒸馏水溶解。
B液:准确称取核黄素(MW=376.36)0.0753g于50mL小烧杯中,用少量蒸馏水溶解。
富硒无花果生产试验初报
31
·研究简报·
北方园艺2011(23):31~32
图 1 3 种 无 花 果 喷 施 硒 肥 后 果 实 硒 含 量 变 化
2.2 不 同 处 理 对 3 种 无 花 果 可 溶 性 固 形 物 含 量 的
影响
由 表 1 可 知 ,喷 施 硒 肥 后 ,3 种 无 花 果 可 溶 性 固 形
物含量较 喷 清 水 对 照 显 著 提 高,以 稀 释 500 倍 和 750
32
倍液 增 幅 最 为 显 著 ,“金 傲 芬 ”的 可 溶 性 固 形 物 含 量 较
对照分 别 提 高 了 2.7% 和 2.0%,“波 姬 红 ”提 高 了
4.1%和2.5%,‘B1011’提高了0.7%和2.5%。
表1 3种无花果喷施硒肥后可溶性固形物含量变化
处理
CK 250 倍 500 倍 750 倍
“金 傲 芬 ”/% 13.8b 14.6b 16.5a 15.8a
“波 姬 红 ”/% 11c
13.2b 15.1a 13.5b
‘B1011’/% 11.8b 10.5b 12.5b 14.3a
2.3 不同处理对3种无花果单果重的影响
由表2可知,喷施硒肥后,3种无花果单果重较喷清
水对照显著增 加。 喷 施 250、500、750 倍 液 后,“金 傲 芬”
的单果重较对照分别增加了14.8%、13.8%和16.5%,
表2 3种无花果喷施硒肥后单果重变化
ห้องสมุดไป่ตู้
处理
CK 250 倍 500 倍 750 倍
“金 傲 芬 ”/g 34.23c 39.3c 47.32b 56.6a
“波 姬 红 ”/g 38.77c 45.32b 44.36b 50.16a
雪莲果sod超声萃取工艺研究
雪莲果sod超声萃取工艺研究摘要:本文以雪莲果为原料,探究了超声萃取工艺对其提取效果的影响。
结果表明,在超声功率为200W、萃取时间为30min、液料比为1:10的条件下,雪莲果sod超声萃取效果最佳,其总多酚和总黄酮含量分别达到13.24mg/g和10.58mg/g,具有较好的抗氧化活性和保健效果。
关键词:雪莲果;超声萃取;总多酚;总黄酮;抗氧化活性1.引言雪莲果是一种珍贵的高原果实,含有大量的多酚类化合物和黄酮类化合物,具有很高的营养价值和药用价值。
其中,SOD(超氧化物歧化酶)是一种重要的抗氧化酶,在抗氧化、抗氧化应激等方面具有重要的生物学活性。
因此,采用超声萃取技术提取雪莲果中的SOD成分,具有很高的研究价值和应用前景。
2.实验材料和方法2.1 实验材料雪莲果(来源:西藏雪域高原)2.2 实验方法超声萃取:以干燥的雪莲果为原料,取适量样品,加入足量乙醇(浓度为80%),以液料比1:10的比例分别进行超声萃取(超声功率为100W、150W、200W、250W、300W,每个功率下萃取时间分别为10min、20min、30min、40min、50min)。
超声萃取结束后,用滤纸过滤,收集提取液,去除乙醇后用蒸馏水进行水浴浓缩,即得样品。
2.3 总多酚和总黄酮含量测定取0.2g样品,加入5mL80%的乙醇,振荡震荡萃取,离心10min,取上清2mL,加入2mL Folin-Ciocalteu试剂溶液,15min后加入10mL0.75g/L的Na2CO3溶液,室温下放置30min,通过检测OD值计算总多酚含量。
取0.2g样品,加入5mL80%的乙醇,振荡震荡萃取,离心10min,取上清1mL,加入3mL 5% NaNO2溶液,过5min加入3mL 10% AlCl3溶液,再经过6min后再加入3mL 1mol/L NaOH溶液,室温下放置30min,通过检测OD值计算总黄酮含量。
2.4 抗氧化活性测定采用DPPH自由基清除法测定样品的抗氧化活性。
SOD果品生产技术
收稿 日期 : 2 0 1 7 - 0 2 - 2 1
2 . 3 抗病能力强 对腐烂病防效可达 6 0 % " 7 0 %, 防 治苹果霉心病效果可达 7 %一 8 %, 蚜虫危害减轻, 叶绿 素含量提高, 叶色浓绿 。抗冻力增强, 冻害减轻 。 2 . 4 耐储运 S O D果 品富含超氧化岐化酶 ( s O D ) , 活性酶存活时间长 ,可在 自然条件下存活 1 年 以上,
l 生产 应 用机理
树膨果增大, 营养状况得到显著改善 , 增产效果明显。 施用 S O D可使水果增产 1 0 %  ̄ 1 5 %。
3 生产 技术
1 ) 萌芽前用 S O D 1 0 0 倍液喷干枝, 也可用 S O D
5 O倍液涂 干 ; 果 树灌 根 , 每棵 树 ( 5 年 生 以上 ) 用S OD 5 0 0 g 对水 2 0 0- 5 0 0倍 ( 根 据土壤 和空 间湿度 而定) , 挖
kebnnsl126corn呋六呋呋呋呋六六六六六呋六六呋呋呋六呋呋呋吹六呋呋呋呋呋六呋毋呋六呋六呋六六呋六呋六呋呋六六素7生产sod农产品要选择具有特色优良商品价值品集营养保健于一身长期食用能延缓细胞分裂死高的高端品种培育生产做好包装打造品牌做地域亡时间对人体可起到抗衰老养颜美容延年益寿的知名农产品
● 作者简介 : 金柏来自 , 男, 硕士研 究生 学历 , 2 0 1 0 年晋升高级农艺师 职称 。长期主持大连市土肥工作 , 现任大连市农业技术推广 中心土肥 站站长 .E - m a i h 4 3 8 8 4 8 9 4 3 @q q . o o m
河北果树 H E B E I F R I 胛S 2 0 1 7( 4 )
无花果干果不同溶剂提取物及其抗氧化活性研究
a n d l f a v o n o i d s c o n t e n t o f f o u r d i f e r e n t e x t r a c t s wa s h i g h e r , t h e s a me a s t h e t r e n d o f t h e i r a n t i o x i d a n t a c t i v i t y( e t h a n o l e x t r a c t >e t h y l
关键 词 : 无花果干果 ; 提取方法 ; 抗 氧 化 活 性
中 图 分类 号 : ¥ 6 6 3 . 3 文 献 标识 码 : A 文章编号 : 1 0 0 2 — 2 4 8 1 ( 2 0 1 7) 0 9 — 1 y o n Di f f e r e n t S o l ve n t Ex t r a c t s o f Fi g Dr i e d Fr ui t a nd I t s An t i o x i da t i v e Ac t i v i t y
d r i e d i f g f r u i t s b y t h e t wo d i f e r e n t me t h o d s o f o n e - t i me e x t r a c t i o n a n d d u a l — s o l v e n t e x t r a c t i o n ,t h e t o t a l c o n t e n t o f w h i c h w e r e me a s u r e d .
At t h e s a me t i me ,t he a nt i o x i da n t a c t i v i t y we s c o mpa r e d b y t he s c a v e n g i ng a c t i v i t i e s a g a i n s t h y dr o x y l a nd r e d uc i n g c a p a c i t y e va l u a t e d. Th e r e s u l t s s ho we d t ha t t h e c o n t e nt o f t o t a l p he n o l s a nd la f v o n o i ds b y o n e —t i me e x t r a c t i o n we r e hi g h e r t h a n du a l - s o l v e nt e x t r a e t i o n, a l s o wi t h t he i r a n t i o x i da nt a c t i v i t y c o r r e s p o n di ng l y . Us i n g t h e s a me e x t r a c t i o n me t h o d, t he p o l a r i t y o f s o l v e n t e x t r a c t s wa s g r e a t e r ,t o t a l p he n o l s
抗寒大果无花果――“石无一号”
抗寒大果无花果――“石无一号”无花果营养丰富,是名贵水果,果大色艳,果中无核,浆饱味美,软甜似蜜,每100克果肉含糖15~28克,高于荔枝、苹果等,且所含糖中95%单糖,易被人体吸收。
维生素C的含量是桔子2.3倍,桃28倍,梨27倍。
含丰富氨基酸18种和2种儿童必需氨基酸及富含铜、镁、锗、锌、铁、锰、硒、硼等元素。
果实乳汁尚含淀粉糖化酶、酯酶、脂肪酶、蛋白酶、芦丁、生长激素(茁长素)、生物碱。
无花果还含有一种超氧化物歧化酶(简称“SOD”)。
SOD对癌症、炎症、高血压、类风湿、糖尿病、心脏病等疾病有良好的抑制作用,对防辐射和化疗效果显著,特别对防衰老作用明显。
无花果还可治疗痔疮,对年久不愈的肺痨咳嗽,声音嘶哑,降低胆固醇,便秘,胃痛不适,咽喉肿痛等都有疗效。
无花果的幼嫩茎和叶片可作家畜的优质饲料,比其他树叶的营养价值高,牲畜爱吃,嫩叶还可制作保健茶。
无花果除鲜食外,可开发无花果蛋白酶、药用无花果口服液、果酒、果茶、果粉、果晶、果脯、果酱、饮料等系列保健食品。
特征特性:该品种4月上旬萌芽展叶,5~7月生长迅速,占全年生长量80%。
树姿开张,呈广圆形,树皮较粗糙,灰白色,掌状单叶,有长柄,具7裂刻,裂刻深明显,叶片大,浅绿色,分枝角度大。
果实呈扁圆形,平均单果重98~120克,大者178克。
果皮乳黄色,阳面略红晕,基部有明显的白色果点,果肉浅红色,肉质柔软,味极甜而有浓郁芳香味,鲜食口感极佳,品质上等。
鲜果含糖量20%,干果高达70%,为鲜食兼加工的稀有保健果品,具有极高的经济价值和广阔的市场前景。
石无一号无花果,与其他紫皮品种相比有以下显著优点:(1)耐寒性强。
枝干能耐-18℃低温,在北方可露地越冬。
(2)结果性好。
为单性结果,当年育苗,当年见果,第3年丰产,株产果15千克。
(3)果实成熟早,采收期长。
因耐寒后枝梢分化出的果蕾可安全越冬,来年4月中旬成熟。
7月上旬开始采果,秋果8月下旬起至11月下霜止采收,夏秋两季果实采收期长达4个多月,鲜果可源源不断地供应市场。
植物中SOD的分离提取及性质研究实验报告
植物中SOD的分离提取及性质研究--------------------综合实验报告学校:学院:班级:同组成员:一、实验目的SOD广泛存在生物界,是防御氧毒害的关键酶。
SOD主要有CuZn-,Mn-,Fe-SOD三种类型的同工酶,它们的共同的生物学作用是专一的清除氧化中产生的超氧阴离子自由基(对细胞组分及细胞器,尤其是生物膜有严重的损坏作用),具有抗衰老,抗辐射,抗癌等生理作用。
在医药中,SOD可用于治疗辐射病,自身免疫性疾病,炎症等;在食品中,可用于保健食品添加剂;在化妆品中,可防止皮肤衰老,抗炎,防晒等作用。
植物中大蒜的SOD 含量丰富,所以,本实验研究大蒜中SOD的性质,并且确定SOD 同工酶的类型。
根据SOD的性质,我们采用邻苯三酚自氧化法判断同工酶的最适温度,最适PH,以及双氧水对酶的活力抑制。
并采用改进的自氧化法测酶的活力.二、实验原理1、邻苯三酚自氧化法根据国际酶学委员会规定,酶的比活性(specific activity)用每mg蛋白质具有的酶活性单位(U∕mg蛋白)来表示。
因此,测定样品的比活性必须测定:每mL样品中的蛋白质mg数(m g∕mL);每ml样品中的酶活性单位数(U∕mL)。
酶的纯度越高酶的活性也就越高。
SOD酶活性测定方法很多,如邻苯三酚自氧化法、肾上腺素自氧化法、黄嘌呤氧化酶法、NBT光还原法、化学发光法等。
在一般情况下,SOD酶活性只能应用间接活性测定法,本实验采用邻苯三酚自氧化法测定。
利用邻苯三酚在碱性条件下能迅速自氧化,释放出O2-,生成带色的中间产物。
反应开始后先变成黄绿色,几分钟后转为黄色,线性时间维持在3~4min。
加入酶液则抑制其自氧化速度,在325nm处测定溶液的吸光度。
酶活性单位采用1mL 反应液中每分钟抑制邻苯三酚自氧化速率达50%时的酶定量为一个活力单位。
邻苯三酚自氧化速率随其浓度的升高而增加2、不连续电泳不连续电泳是指使用不同孔径和不同缓冲系统的电泳。
SOD奶蜜高营养苹果生产试验总结
SOD奶蜜高营养苹果生产试验总结定明谦;王伟;潘换来【摘要】SOD奶蜜高营养苹果是陕甘两省果树科技工作者,在中国农业大学专家指导下,通过多年生产实践研发的富含SOD(超氧化物歧化酶Superoxide dismutase,缩写为SOD)、高钙、多种维生素的无公害绿色苹果。
这种苹果以其色泽艳丽、果大香脆、口感蜜甜、风味浓郁、美容健身、延缓衰老、食用安全等优点,深受消费者欢迎,不少果农从中受益。
现将3年的试验情况总结如下:【期刊名称】《西北园艺:果树》【年(卷),期】2011(000)005【总页数】3页(P16-18)【关键词】苹果生产;试验总结;SOD;营养;超氧化物歧化酶;中国农业大学;奶;科技工作者【作者】定明谦;王伟;潘换来【作者单位】【正文语种】中文【中图分类】S661.1SOD奶蜜高营养苹果是陕甘两省果树科技工作者,在中国农业大学专家指导下,通过多年生产实践研发的富含SOD(超氧化物歧化酶Superoxide dismutase,缩写为SOD)、高钙、多种维生素的无公害绿色苹果。
这种苹果以其色泽艳丽、果大香脆、口感蜜甜、风味浓郁、美容健身、延缓衰老、食用安全等优点,深受消费者欢迎,不少果农从中受益。
现将3年的试验情况总结如下:1 材料与方法1.1 供试果园试验在甘肃省庆阳市西峰区肖金镇肖金村、董志乡董志村、温泉乡黄官寨村,庆城县赤城乡周庄、范村,镇原县屯子乡马堡12处果园进行。
每处果园面积不少于6 670 m2,供试品种为红富士,栽植密度为3 m×4 m、5 m×6 m,树龄 14~24年,树形为高光效开心形。
地形为黄土高原,海拔1 300~1 450 m,4~10 月份平均气温为18.4 ℃,9~10月昼夜温差在10℃以上,无霜期200天以上,年日照时数2 570小时,≥10℃积温4 000℃左右,年平均降雨量620 mm。
果园土壤均为黑垆土,壤质,土层深厚肥沃;pH值7.5~8.2,无灌溉条件。
无花果生产实习报告
无花果生产实习报告篇一:农业生产实习报告学生实习报告实习名称:实习时间:专业班级:姓名学号:生产实习报告XX年五月中旬,青岛农业大学农学与植物保护专业08级植物保护专业生产实习如火如荼的进行了,我们主要去了寿光、城阳的上马街道、农大校园及其周围。
在此过程中我们捕捉到了很多农业害虫,也认识到了很多的病虫害,主要实习过程如下:一、实习的目的和意义目的在于使学生综合运用所学的专业知识,独立解决生产实际问题,对生产实际中的病、虫、草害的发生发展、防治方法等进行全面、系统的调查研究,并在导师指导下开展研究,掌握科学的研究方法,提高独立思考问题、分析问题和解决问题的能力,为顺利走向社会、开展各项工作打下坚实的基础。
二、实习时间:XX年5月9日至5月26日三、实习地点:寿光国际蔬菜博览会、上马温室大棚、农大校园及实验田5月9日,由负责本次生产实习的鄢老师给我们召开动员大会,主要讲述了实习的目的、主要实习场所、时间安排、对我们的要求以及安全性问题。
5月13日,早七点乘车去寿光,参观第十二届寿光国际蔬菜科技博览会,约中午十一点到达,开始参观各个展馆。
首先是一号馆,一楼最显眼的是一座用各种蔬菜拼凑成的天坛,寓意风调雨顺,国泰民安。
周围陈列着小南瓜,西红柿,和一些绿色植物,还有一些高大的菜形雕塑。
三号馆和四号馆大同小异,里面种了很多蔬菜和水果,有橘子、橙子、香蕉、小南瓜、无花果、葫芦等等。
在这里接触到了很多先进的蔬菜生产及栽培技术,如墙体栽培、培养液栽培、管道栽培、水培土豆、滚筒栽培、空中结薯、立柱栽培等,让我们领略了国际农业水平的先进之处。
5月16日:下午两点半乘车去上马的绿色蔬菜生态基地,虽然天气很炎热,但我们无所畏惧,在老师的带领下参观了各个大棚温室,不仅采到了需要的标本材料,而且还充分认识到这些病虫害造成危害的严重性,对各种植物病虫害有了更加深刻的认识。
5月17日:早上八点在主楼后集合,由老师带领我们在校园内观察病害及昆虫。
超声波破碎在植物SOD提取中的应用
7.3 116 源自7.2 115 114 113
7.1 7
112
酶的比活性
6.9
111
总蛋白含量
6.8
110
6.7
200 250 300 350 400 450
破碎功率(w)
图 1 破碎功率对 SOD 提取率及活性的影响
2.2 超声波破碎时间对 SOD 的提取率及活性的影响 在一定的功率下,考察不同破碎时间所得浸提液的总
蛋白含量和总酶活性. 在 0~3min 时总蛋白含量基本接 近,总酶活及比活基本不变,说明破碎的细胞数量没有增 多,SOD 的活性也没有损失;在 3~7min 时总蛋白含量 提高了 5%左右,但在 6min 后酶的比活有所下降,说明 超声波使部分酶失活,由图 2 可以得出,最佳破碎时间为
总蛋白含量(mg) 酶的比活性(u/mg )
250W 时,总蛋白含量与比活性基本不变,说明超声波对 细胞破碎及酶活性作用不很明显;在 300~450W 时,总 蛋白含量有所提高,但在 350~450W 时,酶的比活有下 降趋势,说明酶的活性有损失,由图 1 可以得出,最佳破 碎功率为 300W.
总蛋白含量(mg) 酶的比活性(u/mg )
117
SOD 酶活的测定[2]:采用邻苯三酚自氧化法测定. SOD 酶活性单位的定义: 在 1mL 反应液中每分钟 抑制邻苯三酚自氧化速率 50%时的酶量为一个酶活单位. 总蛋白浓度测定:在浸提液中加入 1.2 倍体积冷丙酮 (4℃),离心得沉淀,冷冻干燥后,用天平称量.
2 结果与讨论
2.1 超声波破碎功率对 SOD 的提取率及活性的影响 在相同时间内,考察不同功率下的破碎情况. 在 0~
第7卷 第1期 2005 年 1 月
MDA、SOD含量测定
MDA和SOD的测定SOD活性测定(避光!)【实验用品和仪器】手套、称量纸、电子天平、250ml烧杯*1、500ml烧杯*1、100ml烧杯*2、50ml烧杯*6、玻棒*10、胶头滴管*4、200ml量筒*1、100ml量筒*1、1000ml容量瓶*3、100ml容量瓶*3,200ml棕色容量瓶*1、150ml容量瓶*1、恒温水浴锅、研钵*n、离心管*3n、10ml带塞试管*(n+1)、瓷盘、黑色塑料袋、黑色硬纸套、离心机、人工气候箱、分光光度计、比色杯*4、5ml移液枪、1ml移液枪、枪头、镊子、废液缸、和10ml小烧杯*(n+7)(n表示要做的样品数,x表示分X组比色)【实验药品】液氮、冰、Na2HPO4·12H2O、NaH2PO4·2H2O、甲硫氨酸、氯化硝基四氮唑蓝(NBT)、EDTA-Na2、核黄素、三氯乙酸(TCA)、硫代巴比妥酸(TBA)和去离子水【配制试剂】①50 mmol/L pH7.8的磷酸缓冲溶液(PBS)(含0.1mmol/L EDTA)。
(1)磷酸缓冲液(母液)配制:磷酸A:0.2M Na2HPO4·12H2O:71.64g 加水1000ml;磷酸B:0.2M NaH2PO4·2H2O:31.21g 加水1000ml。
(2)磷酸A 228.75ml + 磷酸B 21.25 ml,加入EDTA-Na2 0.0372g;加水定容至1000ml。
②220 mmol/L甲硫氨酸:称甲硫氨酸3.2824g,用50 mmol/L pH7.8 PBS溶解定容至100ml (现用现配)。
③1.25mmol/L氯化硝基四氮唑蓝(NBT):称NBT 0.1022g,用50 mmol/L pH7.8 PBS溶解定容至100ml避光保存。
(现配现用)(称取时NBT的重量在0.102g-0.1025g之间均可,最好0.1022g)⑤0.033 mmol/L核黄素:称0.00252 g用PBS溶解定容至200ml。
SOD生产 --许祥博
五、SOD的生产
1.SOD酶的提取 称取5克大蒜蒜瓣,加入石 英砂研磨破碎细胞后, 加入 pH7.8,0.05mol/L的磷酸缓冲液(pH7.8 )中,然后 6000r/min冰冻离心 15min,放弃沉淀,取上清液。 2.去除杂蛋白 上清液中加入0.25倍体积的氯 仿——乙醇混合液搅 拌15min,6000r/min 离心15min,放弃沉淀,得到的上清 液即是 粗酶液
六、注意事项
1在破碎细胞时要注意安全,一定要破碎的彻 底 2 PH的控制力度很重要,以及在实验中的温 度等 3分光光度计的各项操作注意事项
二、SOD的作用
世界各国对“超氧化物歧化酶”的作用认定: 美国注册专利号为(CN1152337A):用于 预防和治疗大脑局部出血、溃疡、消除炎症、 心率失常、浮肿、中毒、风湿、类风湿、风湿 性关节炎、放射性损伤、药物中毒等症。 法国注册专利号为(CN1167441A):用于 预防和治疗特异性脑损伤、非特异性脑损伤而 引起的脑功能识别障碍。 欧洲注册专利号为(499621):用于预防和 治疗癌症及术后放、化疗带来的脑损伤,抑制 癌细胞再形成或扩散。
三、应用领域
1.药物类 主要集中在炎症病患者,尤其治疗类风湿关节 炎、慢性多发性关节炎、心肌梗塞、心血管病 、肿瘤患者以及放射性治疗炎症病患者; 2.生化制药 作为一种生化酶制剂,广泛应用于临床和科研 上,可抗衰老,抗肿瘤、调节人体内分泌系统 ;
四、操作流程图
秤取→研磨→离心→取上清液→去 除杂蛋白→SOD酶的沉淀分离→离 心→检测
SOD的 生产
第六组 制作人:许祥博
一、概述
超氧化物歧化酶Orgotein (Superoxide Dismutase, SOD),别名肝蛋白、奥谷蛋白,简称 :SOD。SOD是一种源于生命体的活性物质,能消除 生物体在新陈代谢过程中产生的有害物质。对人体不 断地补充SOD具有抗衰老的特殊效果。超氧化物歧化 酶(Superoxide Dismutase, EC1.15.1.1, SOD)是1938年Marn等人首次从牛红血球中分离 得到超氧化物歧化酶开始算起,人们对SOD的研究己 有七十多年的历史。1969年McCord等重新发现这 种蛋白,并且发现了它们的生物活性,弄清了它催化 过氧阴离子发生歧化反应的性质,所以正式将其命名 为超氧化物歧化酶。
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试验 树 品 种 为金 傲芬 ( 22 、 A 1 )波姬 红 ( 12和 B 0 1 A 3) 11 。
露地 栽培 , 南北 行 , 行 距 38mx . m。 龄 4年 , 季埋 土 株 . 1 树 9 冬
防寒 。 年 自然 生长 免修 剪 。 翌 常规 管理 。
样 品 重量 。
生产 出 具 有保 健 功 能 的 S D水 果【 。 花 果 药 食 兼 用 , O 无 被
誉为 “ 1世纪 人 类 健康 的 保护 神 ” 无花 果 是 威海 市 的传 统 2 。
名果 , 栽培 面 积近 03 .3万 h 是 国 内最大 的无 花果 露 地 栽 m,
13 试 验 设 计 -
于 21 0 0年 7月 2日 、 7月 2 2日 、 8月 1 2日、 8月 3 1日 ,
、
每 2 0d喷 1次 S D微 生 态 制 剂 (O 含 量 为 6 0U g , O SD 8 / ) 共
喷 4次 。 验 设 4个 处 理 , 施 浓 度 分 别 为 50倍 液 ( 、 试 喷 0 A) 10 0倍 液 ( )1 0 液 ( )以喷 清水 为对 照 (K 。 株 0 B 、 50倍 C, C )单
试验 设 在 威海 市农 科 院示 范农 场 。 园地 地 势平 坦 。 土壤
为砂壤土 , 肥力中等,H值 71有排灌条件。 p .,
1 . 试 验 材 料 2
如图 1 示 , 所 喷施 S D微生 态 制剂 后 , 无 花 果果 实 O 3种
的 S D酶 活性 均 明显 增 加 。 照 条 件 下 , O 对 金傲 芬 、 波姬 红 、
小 区 , 重 复 。O 3次 S D酶 于喷施 前 2h置 温水 中充分 溶 解 , 于
6 0 — 1 :0或 l :o 1 :0进行 喷施 , 雨重喷[ ] :0 O o 50一 80 遇 6。 - 7
14 测 定 指 标 及 方 法 .
CK
处理 B
璧5 0
≤ 4 0
赳 烛 3 0
应, 延缓 细 胞 的衰 老 过程 。 年来 , 近 已证实 S D与 人体 健 康 O
有一 定 关 系 , 已在桠 柑 、 桔 、 果 、 枣 和冬 枣 等 上应 用 并 柑 苹 大
式 中 , 为 照 光对 照 管 的吸 光 度 ; A A 为 样 品 管 的吸 光
度; V为样 品液 总 体 积 ; V 为测 定 时样 品用 量 ; 为 测定 时 W
处 理 A 处理 C
141 S D活 性 测 定 。 . O . 采用 氮 蓝 四 唑法 。 鲜 样 3Og 加 磷 称 . , 酸 缓 冲 液 ( .5mo L,H= .)冰 浴 研 磨 , 磨 后 再 加 缓 冲 00 l p 78 , / 研 液定 容 至 3 L, 入 离心 管 中 , 0m 倒 平衡 , 低温 ( ~ 0 4℃) 心 2 离 0 mi ( 0 mi) 取 型 号 相 同 的试 管 , 管 中 加 上 清 液 4 n 50 0r n 。 / 试 0
142 果实 性 状 测 定 。 实 可 溶性 固形 物 用 手 持 式 糖度 计 .. 果 测 定 。 果重 用托 盘天 平测 定 。 单
15 统 计分 析 .
培 集 中区 域 。 进 一步 增强 威海 市 无花 果 的市 场 竞 争力 , 为 在 不 同品 种 的无 花 果 上进 行 了 喷施 S D微 生 态 制剂 试验 , O 以 为 S D无花 果 生产 提供 依 据 。 O
1 材 料 与 方 法 11 试 验 地 概 况 .
统计分析 用 SS P S数 据 统 计 软 件 , 因 素 变 异 系 数 法 单 (n — a NO A) 析 。 o e w yA V 分
2 结 果与 分析 21 不 同 浓 度 S . oD 微 生 态 制 剂 对 3种 无 花 果 果 实 S oD 酶 活 性 的 影 响
浓 度 以 1 0 ~ 0 0 15 0倍 液 为 佳 。 0
关 键词 S D 无花 果 ;OD酶 活性 ; O S 可溶性 固形物含 量 ; 单果 重 中图分 类号 ¥ 6 . 6 33 文 献标 识码 A 文章 编 号 1 0 — 7 9 2 1 )7 0 2 — 1 0 7 5 3 (0 1 1 — 1 3 0
超 氧化 物歧 化 酶 (u e xd i ts) S p r ieD s ae 能够 在 人体 内 O mu 进行 歧 化 反应 , 消除 氧 的 自由基 , 人 体保 持 正常 的 氧化 反 使
S D总 活性 ( F ) ! O U W :
g 2
0 5 Ad .x ×W x 【 Vt
B1 1 0 1果 实 的 S OD酶 活 分 别 为 3 .3 1 .6 3 . F ; 3 、91 、 1 4U W 5 1 喷施 5 0倍 液 、 0 0 1 0倍液 、 5 0倍 液后 , 0 l0 金傲 芬果 实 的 S D O 酶活性分别为 C K的 13 .8倍 、.3倍 、.7倍 , 姬 红 分别 1 9 15 波 为 C 的 1 8倍 、.3倍 、 . K . 5 31 23 8倍 , 0 1分 别 为 C 的 1 2 B1 1 K . 8 倍 、. 18 和 1 4倍 。 5倍 . 7
现代 农 业科 技
21 年第 1 01 7期
园 艺学
S 无 花 果 生产试 验 研 究 oD
孟艳 玲 薛 玉平 毛 积磊 杨 鹤 隋 静
( 东 省 威 海 市农 业科 学 院 。 山 山东 威 海 2 4 0 ) 6 2 0
摘 要 在 3 同的 无花 果上 进行 喷施 S D微 生 态制 荆 试验 , 种 O 结果表 明 : 源 S D微 生 态常 剂影 响果 实 自身的 S D 酶活 性 , 对果 外 O j O 但 实的 可溶性 固形物 含量 和单 果重 无显 著 影响 。 建议进 行 S D无 花 果 生产 时选择 S O OD酶 活性 较 高的 品种 ( 傲 芬和 BI 1 )S 金 O 1 ,OD制 荆喷 施