磷源对福美双诱导的肉鸡胫骨软骨发育不良及骨骼钙、磷代谢的影响

合集下载

磷源对福美双诱导的肉鸡胫骨软骨发育不良及骨骼钙、磷代谢的影响

磷源对福美双诱导的肉鸡胫骨软骨发育不良及骨骼钙、磷代谢的影响
收稿日期 : 2012 - 03 - 09
[ 1 ]
基金项目 : 四川省教育厅 重大培育项目 ; 中国磷营养研 究中心 ( 川恒化工 ) 和四川农业大学 双支团队资助 作者简介 : 涂广运 ( 198 6 �) , 男, 河南驻马店 人, 硕士研究生 , 从事矿物元 素研究 � E -m ai l : y unt u_ 198 6 @ 126 .c o m * 通讯作 者 : 张克英, 教 授, 博士生导 师, E -m ai l : zk ey i ng@ y aho o.c o m
9 期
涂 广运等: 磷源对 福美双诱导 的肉鸡胫骨 软骨发育不 良及骨骼钙 � 磷代谢的影 响
1 6 75
1 材 料与方 法
1. 1 试验材料 D C P( 钙含量为 19 .31% , 磷含量为 17.96 % ) 购自四川龙莽集团, M D C P( 钙含量为 16 .10% , 磷 7% ) 购自川恒化工 有限公司 , 含量为 20.8 福美 双
[ 6 -7 ]
关键词 : �; ���; ���� � � � ; � 中图分类号 : S 831 文献标识码 : A no-di ca l ci um phosphat e, M D 磷酸一二钙( m o C P) 是磷 酸二 氢 钙 ( m o no c al ci um phosphat e, M C P) c al ci um phosphat e, D C P) 的共结 晶结 与磷酸氢钙 ( di 合物, 呈颗粒状 , 是一种水溶性磷酸盐与枸溶性 磷 酸盐相结合的新型饲料添加剂 �肉鸡胫骨 软骨 i bi a dy sc hondro pl asi a, TD ) 是 造成 肉 鸡 发育不 良 ( t 腿病的主要 因素 , 肉鸡 腿病每 年给 美国肉 鸡产 业 造成 8000 万到 1.2 亿美元的损失[2], 因此, 研究 M D C P 对肉鸡 TD 的 影响 对其 生产应 用具 有很 大 的现实意义 � M D C P 能够代替 D C P 作为蛋鸡 的磷 源[3], 以生产性能为考 察指标, 其在蛋鸡 上的相对 生物学 效价 也 较 D C P 要 高[4], 但 M D C P对肉鸡

福美双诱发肉鸡胫骨软骨发育不良差异表达基因的筛选与

福美双诱发肉鸡胫骨软骨发育不良差异表达基因的筛选与

福美双诱发肉鸡胫骨软骨发育不良差异表达基因的筛选与鉴定田文霞1,2 ,张万坡1,李家奎*,1 ,毕丁仁1 ,张艳红1 ,覃平1(1.华中农业大学 动物医学院,湖北 武汉,430070;2.山西农业大学 动物科技学院,山西 太谷,030801)摘要 为从基因差异表达的角度研究肉鸡胫骨软骨发育不良的分子机理, 应用抑制差减杂交(SSH)技术构建了福美双诱发肉鸡胫骨软骨发育不良肉鸡与正常肉鸡胫骨软骨生长板的正反消减文库。

在两个文库中随机共挑选了356个有效克隆, 经斑点杂交筛选出30个阳性克隆, 测序后经Blastn网上比对揭示了30个基因, 其中29个EST是已报道基因的cDNA片段, 1个在NCBI 数据库中为未知基因。

关键词 肉鸡胫骨软骨发育不良;抑制差减杂交; 基因差异表达; 差异表达基因鉴定肉鸡胫骨软骨发育不良(Tibial Dyschondroplasa,TD)是肉鸡常见的骨骼疾病之一,以骺板成熟面形成不能血管化亦不能矿化的软骨栓为特点 [1]。

虽然不同品种的肉鸡TD发病率有一定的差异,但通常情况下TD的临床发病率和亚临床发病率可达30%,有时甚至是50%,导致肉鸡抗病性能下降和生产性能降低,诱发胸部囊肿和骨髓炎,降低鸡肉的品质和等级,是目前公认的严重影响现代肉鸡养殖业的三大营养代谢病之一,每年给世界肉鸡养殖业造成巨大经济损失。

因此,肉鸡TD的发病机理和防治研究是目前世界上禽病研究的热点之一 [2,3]。

以往多是采用免疫组化、原位杂交、半定量RT-PCR等对肉鸡TD发生的分子机制进行研究,发现肉鸡患TD时,病变的软骨细胞生长分化相关基因表达紊乱、表达水平降低或表达缺失的现象[4,5,6]。

虽然采用以上方法对TD的发生机理作了一定的阐明,但这些方法通常在实验之前就已经假定要研究基因有可能发生变化,然后通过实验手段去求证,每次实验研究的基因数量有限,并且主要是针对已知的基因,因此存在一定的盲目性和局限性。

饲料营养成分对肉鸡腿部健康的作用

饲料营养成分对肉鸡腿部健康的作用

肉鸡腿病是家禽行业重要的福利和经济问题,据估计,由于腿部异常造成的死亡率、扑杀数量占总损失的0.10%~0.30%。

腿部疾病和肉鸡活动受到许多不同的骨骼、组织和神经疾病以及其他因素的影响,如某些必需营养素的缺乏和过量在禽类多种腿畸形中发挥了重要作用,同时细菌感染也会导致腿部问题,如软骨异常是细菌感染导致的疫源地骨髓炎,感染的近端胫骨和股骨的一部分通常与葡萄球菌有关,而骨骼、关节和软组织传染病及中枢和周围神经系统的感染也可能是腿部异常的原因,但这些通常不受营养因素影响(Farquharson和Jeffries,2000)。

腿部异常的病因学通常是复杂的,表面上与单一因素没有关系,有时这些疾病的病因学、病理和临床症状之间存在重叠,如影响肠道健康,降低营养吸收,如细菌、病毒和寄生虫感染,以及饲料中的抗营养因素也可能引起营养失衡,导致腿疾病(范小蕊,2013)。

因此,遗传、管理、营养、卫生和并发疾病都会导致肉鸡腿部疾病的发生。

在过去的40~50年里,关于这个问题的研究报告层出不穷。

但有时还不能确定这些结果是否仍然适用于现代肉鸡基因型。

因此,本文从营养角度探讨影响肉鸡腿部健康的因素,为改善肉鸡疾病及生产提供理论依据。

1 维生素的作用肉鸡饲料中通常会补充矿物质和维生素以避免营养不足,但相关营养标准是在试验条件下得出的最小需要值。

在商品饲料中大多数维生素是过量添加,满足实际饲养应激条件下的更高需求,弥补在饲料加工和储存过程中发生的损失。

1.1 维生素D 肉鸡饲料中大多数原料含有少量或不含维生素D,因此,维生素D通常以合成形式添加到饲料中。

由于维生素D2对家禽的效力只有D3的10%,因此使用维生素D3作为营养补充剂(McDonald等,1995)。

雏鸡对维生素D3的定量需求通常基于骨骼质量测量,如骨灰分含量或佝偻病发病率,这些通常被认为是比生长速度更敏感的指标。

最近Whitehead等(2004)研究表明,在日粮钙和有效磷浓度足够的情况下,14日龄肉鸡对皮质骨质量的维生素D3需求量为35~50 μg/kg,14日龄后,骨皮质维生素D3对饲料质量的需求量降低到20 μg/kg以下。

低钙、磷水平饲粮添加高剂量植酸酶对1~42日龄黄羽肉鸡生长性能、胫骨指标和钙磷代谢的影响

低钙、磷水平饲粮添加高剂量植酸酶对1~42日龄黄羽肉鸡生长性能、胫骨指标和钙磷代谢的影响

动物营养学报2019,31(4):1743⁃1753ChineseJournalofAnimalNutrition㊀doi:10.3969/j.issn.1006⁃267x.2019.04.032低钙㊁磷水平饲粮添加高剂量植酸酶对1 42日龄黄羽肉鸡生长性能㊁胫骨指标和钙磷代谢的影响范秋丽㊀蒋守群∗㊀苟钟勇㊀李㊀龙㊀林厦菁㊀王一冰(广东省农业科学院动物科学研究所,畜禽育种国家重点实验室,农业部华南动物营养与饲料重点实验室,广东省动物育种与营养公共实验室,广东省畜禽育种与营养研究重点实验室,广州510640)摘㊀要:本试验旨在研究低钙㊁磷水平饲粮添加高剂量植酸酶对1 42日龄黄羽肉鸡生长性能㊁胫骨指标和钙磷代谢的影响㊂试验选用1080只1日龄岭南黄羽肉公雏,随机分为6个组,每组6个重复,每个重复30只㊂正对照组(PC组)饲喂基础饲粮,正常添加磷酸氢钙;中钙㊁磷水平饲粮组(MP组)磷酸氢钙添加量降低50%,MP+2000㊁MP+4000组分别在MP组基础上添加2000㊁4000FTU/kg植酸酶;低钙㊁磷水平饲粮组(LP组)不添加磷酸氢钙,LP+2000㊁LP+4000组分别在LP组基础上添加2000㊁4000FTU/kg植酸酶㊂各组钙磷比保持在1.4ʒ1.0㊂试验期42d㊂结果表明:1)各植酸酶添加组体重㊁平均日增重㊁平均日采食量显著高于MP组(P<0.05),且MP+4000㊁LP+4000组显著高于PC组(P<0.05)㊂2)MP+2000㊁MP+4000组胫骨骨密度显著高于MP组(P<0.05);各植酸酶添加组胫骨脱脂脱水重显著高于MP组(P<0.05),LP+4000㊁MP+2000㊁MP+4000组显著高于PC组(P<0.05);LP+2000㊁LP+4000组胫骨灰分含量显著低于MP㊁PC组(P<0.05);LP+2000组胫骨磷㊁钙含量显著低于MP㊁PC组(P<0.05)㊂3)各植酸酶添加组血清碱性磷酸酶活性显著低于MP组(P<0.05)㊂4)MP+4000组肾脏成纤维生长因子受体1(Fgfr1)的表达量显著高于MP㊁PC组(P<0.05)㊂5)LP+4000组粪钙含量显著低于MP组(P<0.05),LP+2000㊁LP+4000组显著低于PC组(P<0.05);LP+2000㊁LP+4000组粪磷含量显著低于MP组(P<0.05),MP+4000㊁LP+2000㊁LP+4000组显著低于PC组(P<0.05);LP+4000组钙代谢率显著高于PC组(P<0.05)㊂综上,低钙㊁磷水平饲粮添加高剂量植酸酶可提高1 42日龄黄羽肉鸡生长性能,提高胫骨脱水脱脂重,降低血清碱性磷酸酶活性㊂中钙㊁磷水平饲粮添加高剂量植酸酶可提高胫骨密度,上调肾脏Fgfr1基因的表达㊂仅考虑生长性能㊁血清生化指标㊁胫骨指标及钙磷代谢指标,1 42日龄岭南黄羽肉鸡玉米-豆粕型饲粮中添加高剂量植酸酶可以部分或者完全代替磷酸氢钙㊂关键词:植酸酶;生长性能;胫骨指标;钙磷代谢;黄羽肉鸡中图分类号:S831㊀㊀㊀㊀文献标识码:A㊀㊀㊀㊀文章编号:1006⁃267X(2019)04⁃1743⁃11收稿日期:2018-09-06基金项目:国家肉鸡产业技术体系项目(CARS⁃41);国家 十二五 科技支撑计划项目子课题(2014BAD13B02);广东省科技计划项目(2017B020202003);广东省畜禽育种与营养研究重点实验室运行经费(2014B030301054);广州市科技计划项目(201804020091)作者简介:范秋丽(1987 ),女,陕西渭南人,助理研究员,硕士,从事黄羽肉鸡营养研究㊂E⁃mail:649698130@qq.com∗通信作者:蒋守群,研究员,硕士生导师,E⁃mail:1014534359@qq.com㊀㊀畜禽体内大部分钙㊁磷参与骨骼和牙齿的构成,其余则维持正常的生理功能[1]㊂饲粮中钙㊁磷主要来自磷酸氢钙及植物原料[2-3]㊂玉米-豆粕型饲粮中60% 90%的磷以植酸磷形式存在[4],因单胃动物体内缺乏分解植酸磷的植酸酶,仅能利用10% 30%的磷[5],造成资源浪费和环境污染㊂植酸酶可水解植酸磷,解除抗营养作用,产生能被机体利用的磷和微量矿物质[6-8],从而改善生长性㊀动㊀物㊀营㊀养㊀学㊀报31卷能,提高矿物元素沉积[9-13]㊂一般在畜禽饲粮中添加500FTU/kg植酸酶[14]㊂研究表明,超量添加植酸酶(4倍甚至更多)可充分降解植酸,获得更好的生长性能[15]㊂但植酸酶的超量添加并非无限制,韩进诚等[16]研究表明,植酸酶添加水平为4000FTU/kg时,生长性能及其他生理指标最佳,植酸酶添加水平超出4000FTU/kg后并无显著差异㊂目前,关于黄羽肉鸡饲粮植酸酶超量添加的研究较少㊂因此,本试验选用黄羽肉鸡,研究低钙㊁磷水平饲粮添加高剂量(2000㊁4000FTU/kg)植酸酶对1 42日龄黄羽肉鸡生长性能㊁胫骨指标和钙磷代谢的影响,以期为黄羽肉鸡饲粮中植酸酶的科学利用提供理论参考㊂1㊀材料与方法1.1㊀试验设计㊀㊀试验在广东省农业科学院动物科学研究所试验场进行,采用单因子随机设计,选用初始体重为35.83g㊁健康状况良好的1日龄岭南黄羽肉公雏1080只,根据体重一致原则随机分为6个组,每组6个重复,每个重复30只㊂1.2㊀试验饲粮㊀㊀试验采用玉米-豆粕型基础饲粮,根据‘中国饲料成分及营养价值表(2004年第15版)“,并参考我国‘鸡饲养标准“(NY/T33 2004)试验饲粮,试验饲粮组成及营养水平见表1㊂各组饲粮除钙㊁磷含量外其他营养水平保持一致㊂正对照组(PC组)饲喂基础饲粮,正常添加磷酸氢钙;中钙㊁磷水平饲粮组(MP组)磷酸氢钙添加量降低50%,MP+2000㊁MP+4000组分别在MP组基础上添加2000㊁4000FTU/kg植酸酶;低钙㊁磷水平饲粮组(LP组)不添加磷酸氢钙,LP+2000㊁LP+4000组分别在LP组基础上添加2000㊁4000FTU/kg植酸酶㊂各组钙磷比保持在1.4ʒ1.0㊂配制饲粮时,植酸酶按照不同添加水平等重量替代预混料的载体玉米芯粉㊂试验用耐热植酸酶由挑战集团提供,植酸酶为颗粒性,活性为10000FTU/kg,制粒后留存率大于40%㊂表1㊀试验饲粮组成及营养水平(饲喂基础)Table1㊀Compositionandnutrientlevelsofexperimentaldiets(as⁃fedbasis)%项目Items1 21日龄1to21daysofage基础饲粮Basaldiet中钙㊁磷水平饲粮Mediumcalciumandphosphorusleveldiet低钙㊁磷水平饲粮Lowcalciumandphosphorusleveldiet22 42日龄22to42daysofage基础饲粮Basaldiet中钙㊁磷水平饲粮Mediumcalciumandphosphorusleveldiet低钙㊁磷水平饲粮Lowcalciumandphosphorusleveldiet原料Ingredients玉米Corn56.1656.1656.1661.9061.9061.90豆粕Soybeanmeal32.4032.4032.4025.4025.4025.40玉米蛋白粉Cornproteinpowder2.502.502.503.003.003.00双低菜籽粕Double⁃lowrapeseedmeal2.502.502.503.003.003.00豆油Soybeanoil2.002.002.002.502.502.50赖氨酸Lysine0.110.110.11蛋氨酸Methionine0.120.120.120.070.070.07石粉Limestone1.261.191.141.201.141.10磷酸氢钙CaHPO41.760.881.520.76食盐NaCl0.300.300.300.300.300.30预混料Premix1)1.001.001.001.001.001.00沸石粉Zeolitepowder0.951.880.821.62合计Total100.00100.00100.00100.00100.00100.0044714期范秋丽等:低钙㊁磷水平饲粮添加高剂量植酸酶对1 42日龄 续表1项目Items1 21日龄1to21daysofage基础饲粮Basaldiet中钙㊁磷水平饲粮Mediumcalciumandphosphorusleveldiet低钙㊁磷水平饲粮Lowcalciumandphosphorusleveldiet22 42日龄22to42daysofage基础饲粮Basaldiet中钙㊁磷水平饲粮Mediumcalciumandphosphorusleveldiet低钙㊁磷水平饲粮Lowcalciumandphosphorusleveldiet营养水平Nutrientlevels2)代谢能ME/(MJ/kg)12.1012.1012.1012.4712.4712.47粗蛋白质CP20.9220.9220.9218.8418.8418.84赖氨酸Lys1.051.051.050.980.980.98蛋氨酸Me0.460.460.460.400.400.40半胱氨酸Cys0.370.370.370.340.340.34钙Ca1.000.770.540.900.700.51总磷TP0.710.550.390.640.510.37非植酸磷NPP0.450.300.150.400.270.14㊀㊀1)预混料为每千克饲粮提供Thepremixprovidedthefollowingperkgofdiets:1 21日龄1to21daysofage,VA15000IU,VD33300IU,VB11.8mg,VB23.6mg,VB63.5mg,VB120.01mg,VE10IU,VK0.5mg,烟酸nicotinicacid35mg,泛酸钙calciumpantothenate10mg,叶酸folicacid0.55mg,生物素biotin0.15mg,氯化胆碱cholinechloride1000mg,Fe80mg,Cu8mg,Zn60mg,Mn80mg,I0.35mg,Se0.15mg;22 42日龄22to42daysofage,VA15000IU,VD33300IU,VB13mg,VB29mg,VB66mg,VB120.03mg,VE10IU,VK6mg,烟酸nicotinicacid300mg,泛酸钙calciumpantothenate18mg,叶酸folicacid1.5mg,生物素biotin0.36mg,氯化胆碱cholinechloride750mg,Fe80mg,Cu12mg,Zn75mg,Mn100mg,I0.35mg,Se0.15mg㊂㊀㊀2)营养水平为计算值㊂Nutrientlevelswerecalculatedvalues.1.3㊀饲养管理㊀㊀试验鸡地面平养,自由采食颗粒料及饮水,常规饲养和免疫㊂1.4㊀样品的采集与制备㊀㊀试验结束,每重复选取接近平均体重的2只鸡称重,翅静脉采血5mL,室温静置1h,离心(3500r/min,10min)制备血清,-20ħ保存备测血清生化指标㊂采血后试验鸡颈部放血屠宰,剖取肾脏装于1.5mL离心管,做好标记后立即置于液氮中,待样品采集完后转移至-80ħ冰箱保存,备测钙磷代谢关键基因表达量㊂取两侧胫骨,去除表面肌肉筋膜组织并编号,右侧胫骨于采样当天测胫骨断裂强度,左侧胫骨置于-20ħ保存,备测其他指标㊂1.5㊀指标测定与方法1.5.1㊀生长性能㊀㊀试验开始和结束前1天22:00断料供水,次日08:00以重复为单位准确称试验鸡体重,统计耗料量,计算平均日采食量(ADFI)㊁平均日增重(ADG)㊁料重比(F/G)㊂试验全期每日观察鸡只健康状况和精神状态,出现死鸡,立即称重并计算耗料量,以消除死鸡对试验结果的影响㊂1.5.2㊀胫骨指标㊀㊀右侧胫骨采用嫩度仪(INSTRON-441型,In⁃stron公司,美国)测定胫骨断裂强度㊂左侧胫骨外送暨南大学附属第一医院核医学科测定胫骨密度㊂测定骨密度后的胫骨高温蒸煮6min后剥离所有软组织,105ħ烘干24h脱水后用纯度为99.5%的乙醚浸泡96h,65ħ烘干4h至恒重,称重,胫骨粉碎过40目筛,混匀550ħ马弗炉中灰化24h,称重计算灰分含量㊂灰分含量测定参照GB/T6438 1992的方法,灰分中钙含量测定采用乙二胺四乙酸(EDTA)直接容量法(GB/T6436 1992),灰分中磷含量测定采用钒钼酸铵法(GB/T6437 1992)㊂1.5.3㊀血清生化指标㊀㊀血清钙㊁磷含量和碱性磷酸酶(AKP)活性的测定在多功能酶标仪(SpectraMaxM⁃5,Molecular5471㊀动㊀物㊀营㊀养㊀学㊀报31卷Devices公司,美国)上进行,试剂盒由南京建成生物工程研究所提供,检测方法和结果计算按说明书进行㊂1.5.4㊀钙磷代谢关键基因表达㊀㊀在80mg肾脏样品中加入1mLTrizol试剂(TaKaRa,日本)提取总RNA㊂依照试剂盒(TaKaRa,日本)说明书将提取的RNA(1μg)反转录为cDNA㊂根据GenBank中鸡的基因序列,使用PrimerPremier3.0设计引物(表2)㊂荧光定量PCR反应体系(20μL):2μLcDNA,10μLSYBRGreen2ˑMix,上㊁下游引物各1μL(100nmol/L),6μLddH2O㊂反应条件:95ħ预变性3min;95ħ变性15s,退火30s,72ħ延伸30s,40个循环㊂以β-肌动蛋白(β⁃actin)作为实时荧光定量PCR的内参基因㊂采用2-ΔΔCt法计算目的基因表达量㊂表2㊀实时定量PCR引物序列Table2㊀Primersequencesforreal⁃timeqPCR基因名Genenames引物序列Primersequences(5ᶄ 3ᶄ)大小Size/bp登录号AccessionNo.退火温度Tm/ħβ-肌动蛋白β⁃actinF:GAGAAATTGTGCGTGACATCAR:CCTGAACCTCTCATTGCCA152NM_205518.160克洛索蛋白KlothoF:CGGCTCTTCTTCTTGCATCR:CCCAGGGAAGGTTGTGAGAT229XM_417105.561成纤维生长因子受体1Fgfr1F:CTTCTCCGTCAACGTCTCAGR:GTTCGGCTTGGTGTTATCC103NM_205510.1591α-羟化酶1α⁃hydroxylaseF:ATAGCACAAGCCACTTTCACR:CAGTAGTCACATTCCCATCCT222XM_422077.4581.5.5㊀粪钙㊁磷含量及代谢率㊀㊀42日龄时,每个组选取6只接近平均体重的鸡转移到代谢笼,单笼饲养㊂采用全收粪法进行代谢试验,预饲5d后禁食排空48h,待适应后进入正试期㊂代谢笼下放置集粪盘,每只鸡单独收粪,将其中混有的皮屑和羽毛用镊子夹出,其余收集于装有适量10%盐酸的自封袋内,-20ħ保存㊂连续收集4d,准确记录正试期每只鸡采食量和排泄量㊂试验结束,将每只鸡4d的粪样混匀,65ħ烘干至恒重,置室温下回潮24h后粉碎过40目筛并编号,测定其中钙㊁磷含量,测定方法同胫骨灰分中钙㊁磷含量的测定㊂利用以下公式计算钙㊁磷代谢率:某养分代谢率(%)=[(食入营养分量-粪中该养分分量)/食入营养分量]ˑ100㊂1.6㊀数据统计分析㊀㊀试验数据采用SPSS17.0软件中的ANOVA过程进行单因子方差分析,当处理效应差异显著时进行Duncan氏法多重比较㊂P<0.05表示差异显著,0.05ɤP<0.10表示有趋势㊂试验数据均以平均值ʃ标准误(meanʃSE)表示㊂2㊀结㊀果2.1㊀植酸酶对1 42日龄黄羽肉鸡生长性能的影响㊀㊀由表3可知,与PC组相比,MP组体重㊁ADG㊁ADFI降低(P>0.05);与MP组相比,各植酸酶添加组体重㊁ADG㊁ADFI显著提高(P<0.05),同时MP+4000㊁LP+4000组显著高于PC组(P<0.05)㊂2.2㊀植酸酶对42日龄黄羽肉鸡胫骨指标的影响㊀㊀由表4可知,与PC组相比,MP组胫骨骨密度显著降低(P<0.05);与MP组相比,MP+2000㊁MP+4000组胫骨骨密度显著升高(P<0.05)㊂与PC组相比,MP组胫骨脱水脱脂重显著降低(P<0.05);与MP组相比,各植酸酶添加组胫骨脱水脱脂重显著升高(P<0.05),除LP+2000组外,其他各组显著高于PC组(P<0.05)㊂与PC和MP组相比,LP+2000㊁LP+4000组胫骨灰分含量显著降低(P<0.05)㊂与PC组相比,MP组胫骨磷㊁钙含量降低(P>0.05);与MP和PC组相比,LP+2000组胫骨磷㊁钙含量显著降低(P<0.05)㊂64714期范秋丽等:低钙㊁磷水平饲粮添加高剂量植酸酶对1 42日龄表3㊀植酸酶对1 42日龄黄羽肉鸡生长性能的影响Table3㊀Effectsofphytaseongrowthperformanceofyellow⁃featheredchickensagedfrom1to42days项目Items组别GroupsPCMPMP+2000MP+4000LP+2000LP+4000P值P⁃value体重BW/g1372.52ʃ23.28bc1333.13ʃ12.79c1411.79ʃ11.65ab1450.00ʃ20.54a1416.67ʃ12.83ab1441.33ʃ20.97a<0.001平均日增重ADG/g31.83ʃ0.55bc30.89ʃ0.30c32.76ʃ0.28ab33.67ʃ0.49a32.88ʃ0.31ab33.46ʃ0.50a<0.001平均日采食量ADFI/g60.22ʃ0.60bc59.12ʃ0.62c63.13ʃ0.34a63.13ʃ0.74a62.32ʃ0.44ab63.44ʃ1.92a0.006料重比F/G1.89ʃ0.031.92ʃ0.021.93ʃ0.021.88ʃ0.011.90ʃ0.011.90ʃ0.030.396㊀㊀同行数据肩标无字母或相同字母表示差异不显著(P>0.05),不同小写字母表示差异显著(P<0.05)㊂下表同㊂㊀㊀Inthesamerow,valueswithnoletterorthesamelettersuperscriptsmeannosignificantdifference(P>0.05),whilewithdifferentsmalllettersuperscriptsmeansignificantdifference(P<0.05).Thesameasbelow.表4㊀植酸酶对42日龄黄羽肉鸡胫骨指标的影响Table4㊀Effectsofphytaseontibiaindexesofyellow⁃featheredchickensat42daysofage项目Items组别GroupsPCMPMP+2000MP+4000LP+2000LP+4000P值P⁃value断裂强度Brokingstrength/N20.13ʃ1.1517.75ʃ1.3121.12ʃ1.2422.63ʃ1.7418.79ʃ0.7320.17ʃ1.020.120骨密度Bonedensity/(g/cm3)0.14ʃ0.00ab0.13ʃ0.00c0.14ʃ0.00ab0.15ʃ0.00a0.13ʃ0.00abc0.13ʃ0.00bc0.016脱水脱脂重Dehydratedanddegreasedweight/g3.80ʃ0.08b3.54ʃ0.04c4.07ʃ0.07a4.13ʃ0.12a3.96ʃ0.06ab4.10ʃ0.04a<0.001灰分含量Ashcontent/%47.23ʃ0.63a46.48ʃ0.34a47.49ʃ0.26a47.15ʃ0.34a44.78ʃ0.42b45.15ʃ0.59b<0.001磷含量Phosphoruscontent/%8.79ʃ0.21a8.43ʃ0.12ab8.76ʃ0.12a8.70ʃ0.08a7.86ʃ0.07c8.22ʃ0.14bc<0.001钙含量Calciumcontent/%16.88ʃ0.22a16.34ʃ0.23ab16.94ʃ0.17a16.52ʃ0.14ab15.60ʃ0.23c16.05ʃ0.17bc<0.0012.3㊀植酸酶对42日龄黄羽肉鸡血清生化指标的影响㊀㊀由表5可知,与PC组相比,MP组血清AKP活性显著升高(P<0.05);与MP组相比,各植酸酶添加组血清AKP活性显著降低(P<0.05),但与PC组相比差异不显著(P>0.05)㊂2.4㊀植酸酶对42日龄黄羽肉鸡钙磷代谢关键基因表达的影响㊀㊀由表6可知,与MP和PC组相比,MP+4000㊁LP+4000组肾脏克洛索蛋白(Klotho)表达量有上升的趋势(P=0.092)㊂与PC组相比,MP组肾脏成纤维生长因子受体1(Fgfr1)表达量上升(P>0.05);与MP和PC组相比,MP+4000组肾脏Fg⁃fr1表达量显著上升(P<0.05)㊂7471㊀动㊀物㊀营㊀养㊀学㊀报31卷表5㊀植酸酶对42日龄黄羽肉鸡血清生化指标的影响Table5㊀Effectsofphytaseonserumbiochemicalindexesofyellow⁃featheredchickensat42daysofage项目Items组别GroupsPCMPMP+2000MP+4000LP+2000LP+4000P值P⁃value钙含量Calciumcontent/(mmol/L)3.17ʃ0.083.10ʃ0.123.35ʃ0.053.37ʃ0.073.19ʃ0.043.27ʃ0.090.118磷含量Phosphoruscontent/(mmol/L)1.09ʃ0.091.03ʃ0.051.13ʃ0.061.26ʃ0.061.04ʃ0.051.10ʃ0.070.171碱性磷酸酶活性AKPactivity/(U/L)92.11ʃ1.24b141.09ʃ3.69a79.25ʃ1.77b73.90ʃ1.29b90.82ʃ1.99b66.89ʃ0.96b0.037表6㊀植酸酶对42日龄黄羽肉鸡钙磷代谢关键基因表达的影响Table6㊀Effectsofphytaseontheexpressionofkeygenesofcalciumandphosphorusmetabolismofyellow⁃featheredchickensat42daysofage项目Items组别GroupsPCMPMP+2000MP+4000LP+2000LP+4000P值P⁃value克洛索蛋白Klotho1.04ʃ0.130.89ʃ0.141.13ʃ0.111.50ʃ0.261.04ʃ0.211.32ʃ0.130.092成纤维生长因子受体1Fgfr11.04ʃ0.13b0.89ʃ0.20b1.35ʃ0.14b1.81ʃ0.10a1.09ʃ0.16b1.24ʃ0.18b0.0061α-羟化酶1α⁃hydroxylase1.02ʃ0.081.44ʃ0.311.45ʃ0.350.80ʃ0.221.21ʃ0.231.41ʃ0.270.3822.5㊀植酸酶对42日龄黄羽肉鸡粪钙、磷含量及代谢率的影响㊀㊀由表7可知,与PC组相比,MP组粪钙含量降低(P>0.05);与MP组相比,LP+4000组粪钙含量显著降低(P<0.05),同时显著低于PC组(P<0.05)㊂与PC组相比,MP组粪磷含量降低(P>0.05);与MP组相比,LP+2000㊁LP+4000组粪磷含量显著降低(P<0.05);且MP+4000㊁LP+2000㊁LP+4000组显著低于PC组(P<0.05)㊂与PC组相比,MP组钙代谢率显著升高(P<0.05);与MP组相比,MP+4000组钙代谢率显著降低(P<0.05);LP+4000组钙代谢率显著高于PC组(P<0.05)㊂与MP和PC组相比,LP+4000组磷代谢率有升高的趋势(P=0.067)㊂3㊀讨㊀论3.1㊀植酸酶对1 42日龄黄羽肉鸡生长性能的影响㊀㊀单胃动物不能有效地利用植物性饲料中的植酸磷,需额外添加无机磷,造成磷资源的浪费和成本增加[17]㊂植酸酶水解植酸,产生肌醇和正磷酸,解除抗营养作用,释放氨基酸㊁消化酶㊁脂肪酸等,促进动物对营养物质吸收,改善生长性能[18]㊂研究表明,饲粮中钙㊁磷水平降低会影响肉鸡生长性能[19-20],饲粮添加植酸酶可提高生长性能,且添加量越高效果越明显[21-22]㊂本试验表明,饲粮钙㊁磷水平降低,试验鸡体重㊁ADG㊁ADFI降低,但与正常钙㊁磷水平组相比,差异不显著,可能是钙㊁磷水平的减少不足以影响试验鸡生长性能[23]㊂饲粮添加2000㊁4000FTU/kg植酸酶均可提高体重㊁ADG㊁ADFI,且4000FTU/kg添加组效果优于84714期范秋丽等:低钙㊁磷水平饲粮添加高剂量植酸酶对1 42日龄2000FTU/kg添加组,说明低钙㊁磷水平饲粮添加高剂量植酸酶可提高1 42日龄黄羽肉鸡生长性能㊂表7㊀植酸酶对42日龄黄羽肉鸡粪钙㊁磷含量及代谢率的影响Table7㊀Effectsofphytaseoncontentsandmetabolicratesofcalciumandphosphorusinfaecesofyellow⁃featheredchickensat42daysofage%项目Items组别GroupsPCMPMP+2000MP+4000LP+2000LP+4000P值P⁃value钙含量Calciumcontent2.07ʃ0.05a1.78ʃ0.19ab2.06ʃ0.18a2.04ʃ0.13a1.49ʃ0.09bc1.30ʃ0.09c<0.001磷含量Phosphoruscontent1.67ʃ0.07a1.40ʃ0.16ab1.49ʃ0.11ab1.36ʃ0.09b1.02ʃ0.05c0.90ʃ0.06c<0.001钙代谢率Metabolicrateofcalcium17.12ʃ3.38bc28.92ʃ3.26a26.97ʃ2.85ab11.99ʃ2.59c19.39ʃ4.15abc29.41ʃ2.89a0.002磷代谢率Metabolicrateofphosphorus20.79ʃ3.8826.75ʃ1.0326.07ʃ1.3426.26ʃ2.5525.92ʃ2.8732.73ʃ1.890.0673.2㊀植酸酶对42日龄黄羽肉鸡胫骨指标的影响㊀㊀骨折断力㊁骨灰分㊁骨密度㊁骨重量都是衡量骨骼矿化的常用指标,可反映出饲粮中矿物质,特别是钙㊁磷的平衡情况[24-25]㊂研究表明,钙㊁磷缺乏会导致结构性骨被吸收,引起骨质疏松[26],低钙㊁磷水平饲粮添加植酸酶可提高骨密度和脱水脱脂重[27-28]㊂本试验结果表明,低钙㊁磷水平饲粮显著降低了胫骨骨密度㊁脱水脱脂重,MP+2000㊁MP+4000组胫骨骨密度显著升高,各植酸酶添加组胫骨脱脂脱水重显著升高,且4000FTU/kg添加组效果优于2000FTU/kg添加组和PC组,但植酸酶完全替代磷酸氢钙对胫骨骨密度无显著影响,可能植酸酶的添加只是缓解了软骨细胞增生引起的骨密度降低,并未完全消除[29]㊂研究表明,机体摄入钙㊁磷不足时会动员骨组织中钙㊁磷,导致骨中钙㊁磷㊁灰分含量降低[30],添加植酸酶可提高胫骨灰分㊁钙㊁磷含量[31-32]㊂本试验表明,低钙㊁磷水平饲粮降低了胫骨灰分㊁磷㊁钙含量,MP+2000㊁MP+4000组胫骨灰分㊁钙㊁磷含量提高;但LP+2000㊁LP+4000组胫骨灰分㊁钙㊁磷含量降低,可能无磷酸氢钙添加时胫骨灰分㊁钙㊁磷含量降低严重,添加植酸酶也无法弥补[33]㊂3.3㊀植酸酶对42日龄黄羽肉鸡血清生化指标的影响㊀㊀AKP是畜禽对磷需要的敏感指标[34]㊂研究表明,饲粮磷水平降低,血清AKP活性升高[35],饲粮添加植酸酶可降低血清AKP活性[36]㊂本试验结果表明,降低饲粮钙㊁磷水平,血清AKP活性显著增加,饲粮添加2000㊁4000FTU/kg植酸酶可显著降低血清AKP活性㊂也有研究表明,植酸酶添加水平越高,血清AKP活性降低越明显[37],本试验中,4000FTU/kg添加组与2000FTU/kg添加组相比血清AKP活性有所降低,但差异不显著,与本试验胫骨磷含量的研究结果相一致㊂3.4㊀植酸酶对42日龄黄羽肉鸡钙磷代谢关键基因表达的影响㊀㊀肾脏作为机体钙㊁磷吸收最主要的器官之一,在调节钙磷平衡方面起到了尤为重要的作用[38]㊂成纤维生长因子23(Fgf23)可远距离作用于肾脏,通过Fgf23⁃Klotho⁃Fgfr1复合体抑制肾小管上皮细胞中Ⅱ型钠离子依靠磷转运载体a(NaPi⁃Ⅱa)的表达来调节血磷平衡[39]㊂研究表明,血磷增加超过机体所需量时,肾脏中Fgfr1表达量增多,肾脏对磷的重吸收减少[40]㊂本试验结果表明,MP+4000组肾脏Fgfr1基因的表达显著上调,降低了肾脏对磷的重吸收,维持机体磷平衡㊂3.5㊀植酸酶对42日龄黄羽肉鸡粪钙㊁磷含量及代谢率的影响㊀㊀研究表明,饲粮中添加植酸酶能有效地提高钙㊁磷利用率,降低磷排泄量[41-42]㊂本试验表明,9471㊀动㊀物㊀营㊀养㊀学㊀报31卷与PC组相比,LP+2000㊁LP+4000组粪钙㊁磷含量显著降低,且效果优于MP+2000㊁MP+4000组;LP+4000组钙㊁磷代谢率提高,且效果优于MP+2000㊁MP+4000组㊂这说明高剂量植酸酶完全替代磷酸氢钙可提高钙㊁磷代谢率,减少钙㊁磷排放,且饲粮钙㊁磷水平越低,植酸酶发挥作用的效果越显著[43]㊂4㊀结㊀论㊀㊀①低钙㊁磷水平饲粮添加高剂量植酸酶可提高1 42日龄黄羽肉鸡生长性能,提高胫骨脱水脱脂重,降低血清AKP活性㊂㊀㊀②中钙㊁磷水平饲粮添加植酸酶可提高胫骨骨密度,上调肾脏Fgfr1基因的表达㊂㊀㊀②仅考虑生长性能㊁血清生化指标㊁胫骨指标及钙磷代谢指标,1 42日龄岭南黄羽肉鸡玉米-豆粕型饲粮中添加高剂量植酸酶可以部分或者完全代替磷酸氢钙㊂参考文献:[1]㊀刘开武,戴红安,邢建成.矿物质缺乏对家禽生理功能的影响[J].湖北畜牧兽医,2008(1):14-15.[2]㊀刘禹含.不同钙水平日粮对仔猪各肠段钙主动吸收影响的比较研究[D].硕士学位论文.长春:吉林农业大学,2013:4-45.[3]㊀GUGGENBUHLP,WACHEY,NUNESCS,etal.Comparativeeffectsofthreephytasesonthephosphor⁃usandcalciumuseintheweanedpiglet[J].JournalofAnimalScience,2012,90(Suppl.4):95-97.[4]㊀GREINERR,LIMBL,CHENGCW,etal.Pathwayofphytatedephosphorylationbyβ⁃propellerphytasesofdifferentorigins[J].CanadianJournalofMicrobiol⁃ogy,2007,53(4):488-495.[5]㊀李光辉.微量元素间及其与营养素之间的协同与拮抗作用[J].乳业科学与技术,2005,27(2):80-82.[6]㊀YUSK,KVIDTGAARDMF,ISAKSENMF,etal.CharacterizationofamutantButtiauxellaphytaseusingphyticacidandphyticacid⁃proteincomplexassub⁃strates[J].AnimalScienceLetters,2014,1(1):18-32.[7]㊀ADEOLAO,LAWRENCEBV,SUTTONAL,etal.Phytase⁃inducedchangesinmineralutilizationinzinc⁃supplementeddietsforpigs[J].JournalofAnimalSci⁃ence,1995,73(11):3384-3391.[8]㊀ALMEIDAFN,SULABORC,STEINHH.EffectsofanovelbacterialphytaseexpressedinAspergillusoryzaeondigestibilityofcalciumandphosphorusindietsfedtoweanlingorgrowingpigs[J].JournalofAnimalScienceandBiotechnology,2013,4(1):8.[9]㊀SELLEPH,RAVINDRANV.Microbialphytaseinpoultrynutrition[J].AnimalFeedScienceandTech⁃nology,2007,135(1/2):1-41.[10]㊀张胜燕.植酸酶在动物生产中应用的研究进展[J].家畜生态学报,2015,36(2):84-86.[11]㊀侯爽,王昕陟.植酸酶对畜禽微量元素利用影响的研究进展[J].黑龙江畜牧兽医,2018(1):74-76.[12]㊀葛文华,柯昌娇,郑惠文,等.低锌水平秸秆饲粮中添加植酸酶对5 16周龄五龙鹅生长性能㊁胫骨发育及抗氧化能力的影响[J].动物营养学报,2017,29(7):2357-2365.[13]㊀PIRGOZLIEVV,BEDFORDMR,ODUGUWAO,etal.Theeffectofsupplementarybacterialphytaseondi⁃etarymetabolisableenergy,nutrientretentionanden⁃dogenouslossesinprecisionfedbroilerchickens[J].JournalofAnimalPhysiologyandAnimalNutrition,2012,96(1):52-57.[14]㊀郝甜甜,杜红方.植酸酶在饲粮中超量添加的研究进展[J].动物营养学报,2017,29(2):382-388.[15]㊀乔伟.植酸酶超量添加理论和应用效果[J].饲料工业,2016,37(12):59-62.[16]㊀韩进诚,杨晓丹,杨凤霞,等.微生物植酸酶与1 21日龄肉鸡饲粮无机磷当量模型研究[J].畜牧兽医学报,2008,39(7):907-914.[17]㊀孟艳莉,张军民,赵青余.植物植酸酶在饲料中应用的研究进展[J].饲料工业,2009,30(16):16-18.[18]㊀于明,边连全,程波.低磷日粮中添加植酸酶对生长猪生产性能及饲料中磷㊁钙和蛋白质表观消化率的影响[J].畜牧与兽医,2013,45(2):32-36.[19]㊀张芹,曾福海,邹增丁,等.耐热植酸酶对肉鸡生产性能㊁血液及骨骼钙磷含量的影响[J].中国饲料,2010(3):33-36,41.[20]㊀唐亚东,郑涛,左建军,等.25⁃OH⁃VD3和植酸酶对肉鸡生长性能及血清生化指标的影响[J].饲料工业,2011,32(23):20-24.[21]㊀廖志超,夏中生,封伟贤,等.植酸酶对肉鸡生长性能及饲粮养分利用率的影响[J].畜牧与兽医,2010,42(10):33-37.[22]㊀TAHERIHR,JABBARIZ,ADIBNIAS,etal.Effectofhigh⁃dosephytaseandcitricacid,aloneorincom⁃bination,ongrowthperformanceofbroilersgivendietsseverelylimitedinavailablephosphorus[J].BritishPoultryScience,2015,56(6):708-715.05714期范秋丽等:低钙㊁磷水平饲粮添加高剂量植酸酶对1 42日龄[23]㊀蒋显仁,罗发洪,张海军,等.日粮非植酸磷水平与植酸酶来源对肉鸡生产性能㊁血清生化指标和胫骨指标的影响[C]//第二届全国家禽营养与饲料科技研讨会论文集.北京:中国畜牧兽医学会,2007:302-307.[24]㊀ONYANGOEM,HESTERPY,STROSHINER,etal.Bonedensitometryasanindicatorofpercentagetib⁃iaashinbroilerchicksfedvaryingdietarycalciumandphosphoruslevels[J].PoultryScience,2003,82(11):1787-1791.[25]㊀李恒芝,贺志雄,颜琼娴,等.妊娠期母体营养调控子代骨骼发育与代谢的研究进展[J].基因组学与应用生物学,2015,34(8):1663-1668.[26]㊀FLEMINGRH,MCCORMACKHA,MCTEIRL,etal.Digitisedfluoroscopy(DF)predictsbreakingstrengthinosteoporoticavianboneinvivo[J].BritishPoultryScience,1998,39(Suppl.1):49-51.[27]㊀徐晓娜,王宝维,葛文华,等.植酸酶对五龙鹅屠宰性能及胫骨指标的影响[J].中国畜牧杂志,2014,50(1):30-34.[28]㊀CHUNGTK,RUTHERFURDSM,THOMASDV,etal.Effectoftwomicrobialphytasesonminerala⁃vailabilityandretentionandbonemineraldensityinlow⁃phosphorusdietsforbroilers[J].BritishPoultryScience,2013,54(3):362-373.[29]㊀葛文华,柯昌娇,郑惠文,等.低锌水平秸秆饲粮中添加植酸酶对5 16周龄五龙鹅生长性能㊁胫骨发育及抗氧化能力的影响[J].动物营养学报,2017,29(7):2357-2365.[30]㊀徐晓娜,李立文.植酸酶在肉鸡日粮中应用效果的研究进展[J].饲料博览,2013,(5):29-32.[31]㊀SHIRLEYRB,EDWARDSHM,Jr.Gradedlevelsofphytasepastindustrystandardsimprovesbroilerper⁃formance[J].PoultryScience,2003,82(4):671-680.[32]㊀MANOBHAVANM,ELANGOVANAV,SRIDHARM,etal.Effectofsuperdosingofphytaseongrowthperformance,ilealdigestibilityandbonecharacteristicsinbroilersfedcorn⁃soya⁃baseddiets[J].JournalofAnimalPhysiologyandAnimalNutri⁃tion,2016,100(1):93-100.[33]㊀朱连勤.不同的日粮磷水平下蛋用鸡生长㊁骨骼发育产蛋性能以及植酸酶应用效果的研究[D].博士学位论文.北京:中国农业大学,2004:3-56.[34]㊀杨维仁,王庆云,杨在宾,等.不同无机磷水平日粮添加植酸酶对肉鸡生长性能和血清矿物质的影响[J].中国农业大学学报,2008,13(4):87-92.[35]㊀张现玲,梁陈冲,于会民,等.新型耐热植酸酶对肉仔鸡生长性能及血清生理生化指标的影响[J].畜牧兽医学报,2013,44(4):570-576.[36]㊀黄翔,李泽英,刘北华,等.低磷日粮添加植酸酶对肉鸡血清生化指标和养分利用率的影响[J].畜牧兽医科学,2017(8):91-92.[37]㊀孙宏选,高秀华,杨禄良.玉米-豆粕型日粮中添加高剂量植酸酶对肉鸡生长性能和血清生化指标的影响[J].中国畜牧兽医,2011,38(4):11-15.[38]㊀卜舒扬.不同产蛋期蛋鸡小肠及肾脏钙磷代谢相关因子表达变化的研究[D].硕士学位论文.沈阳:沈阳农业大学,2017:4-36.[39]㊀NAKATANIT,SARRAJB,OHNISHIM,etal.Invi⁃vogeneticevidenceforklotho⁃dependent,fibroblastgrowthfactor23(Fgf23)⁃mediatedregulationofsys⁃temicphosphatehomeostasis[J].TheFASEBJournal,2009,23(2):433-441.[40]㊀金炯娜,翟福利,马厚勋.Klotho㊁成纤维细胞生长因子-23及其基因表达与原发性骨质疏松症关系[J].国际老年医学杂志,2010,31(1):24-29.[41]㊀邝声耀,唐凌,白国勇,等.植酸酶对肉鸭生产性能及钙磷代谢的影响[J].中国畜牧杂志,2008,44(3):35-37.[42]㊀郭文文.饲粮不同磷水平和钙磷比添加植酸酶对母猪和仔猪钙磷代谢的影响[D].硕士学位论文.泰安:山东农业大学,2015:16-17.[43]㊀贺丹艳.添加了植酸酶的生长肥育猪饲粮中粗蛋白质和磷水平对其钙磷代谢的影响[J].广东饲料,2011,20(1):39-40.1571㊀动㊀物㊀营㊀养㊀学㊀报31卷∗Correspondingauthor,professor,E⁃mail:1014534359@qq.comEffectsofLowCalciumandPhosphorusDietSupplementedwithHighDosePhytaseonGrowthPerformance,TibiaIndexesandCalciumandPhosphorusMetabolismofYellow⁃FeatheredChickensAgedfrom1to42DaysFANQiuli㊀JIANGShouqun∗㊀GOUZhongyong㊀LILong㊀LINXiajing㊀WANGYibing(StateKeyLaboratoryofLivestockandPoultryBreeding,MinistryofAgricultureKeyLaboratoryofAnimalNutritionandFeedScienceinSouthChina,GuangdongPublicLaboratoryofAnimalBreedingandNutrition,GuangdongKeyLaboratoryofAnimalBreedingandNutrition,InstituteofAnimalScience,GuangdongAcademyofAgriculturalSciences,Guangzhou510640,China)Abstract:Theaimofthisexperimentwastostudytheeffectsoflowcalciumandphosphorusdietsupplemen⁃tedwithhighdosephytaseongrowthperformance,tibiaindexesandcalciumandphosphorusmetabolismofyellow⁃featheredchickensagedfrom1to42days.Onethousandandeighty1⁃day⁃oldLingnanyellow⁃feath⁃eredmalechickenswererandomlyassignedtosixgroupswithsixreplicatespergroupand30chickensperrep⁃licate.Chickensinthepositivecontrolgroup(PCgroup)fedabasaldietwithnormaldicalciumphosphatesup⁃plementation;chickensinmediumcalciumandphosphoruslevelsdietgroup(MPgroup)reducedby50%di⁃calciumphosphatesupplementation,chickensinMP+2000andMP+4000groupsweresupplementedwith2000and4000FTU/kgphytasebasedonMPgroup,respectively;chickensinlowcalciumandphosphoruslevelsdietgroup(LPgroup)didnotsupplementwithdicalciumphosphate,chickensinLP+2000andLP+4000groupsweresupplementedwith2000and4000FTU/kgphytasebasedonLPgroup,respectively.Theratioofcalciumtophosphorusremainedat1.4:1.0ineachgroup.Theexperimentlastedfor42days.There⁃sultsshowedasfollows:1)thebodyweight,averagedailygainandaveragedailyfeedintakeofphytasesup⁃plementationgroupsweresignificantlyhigherthanthoseofMPgroup(P<0.05),andthoseofMP+4000andLP+4000groupsweresignificantlyhigherthanthoseofPCgroup(P<0.05).2)ThetibiabonedensityofMP+2000andMP+4000groupswassignificantlyhigherthanthatofMPgroup(P<0.05);thedehydratedanddegreasedweightoftibiaofphytasesupplementationgroupswassignificantlyhigherthanthatofMPgroup(P<0.05),andthatofLP+4000,MP+2000andMP+4000groupswassignificantlyhigherthanthatofPCgroup(P<0.05);thetibiaashcontentofLP+2000andLP+4000groupswassignificantlylowerthanthatofMPandPCgroups(P<0.05);thetibiaphosphorusandcalciumcontentsofLP+2000groupweresignificantlylowerthanthoseofMPandPCgroups(P<0.05).3)Theserumalkalinephosphataseactivityofphytasesup⁃plementationgroupswassignificantlylowerthanthatofMPgroup(P<0.05).4)Theexpressionoffibroblastgrowthfactorreceptor1(Fgfr1)inkidneyofMP+4000groupwassignificantlyhigherthanthatofMPandPCgroups(P<0.05).5)ThefecalcalciumcontentofLP+4000groupwassignificantlylowerthanthatofMPgroup(P<0.05),andthatofLP+2000andLP+4000groupswassignificantlylowerthanthatofPCgroup(P<0.05);thefecalphosphoruscontentofLP+2000andLP+4000groupswassignificantlylowerthanthatofMPgroup(P<0.05),andthatofMP+4000,LP+2000andLP+4000groupswassignificantlylowerthanthatofPCgroup(P<0.05);thecalciummetabolismrateofLP+4000groupwassignificantlyhigherthanthatofPCgroup(P<0.05).Inconclusion,lowcalciumandphosphorusdietsupplementedwithhighdosephytase257135714期范秋丽等:低钙㊁磷水平饲粮添加高剂量植酸酶对1 42日龄canimprovethegrowthperformanceofyellowfeatheredchickensagedfrom1to42days,increasedthede⁃hydratedanddegreasedweightoftibia,reducetheserumalkalinephosphataseactivity.Mediumcalciumandphosphorusdietsupplementedwithhighdosephytasecanimprovetibiabonedensity,andup⁃regulatetheex⁃pressionofFgfr1geneinkidney.Onlyconsideringthegrowthperformance,serumbiochemicalindexes,tibiaindexesandcalciumandphosphorusmetabolismindex,highdosephytasecanbeusedtopartiallyorcomplete⁃lyreplacethedicalciumphosphateinthecorn⁃soybeanmealofLingnanyellowfeatheredchickensagedfrom1to42days.[ChineseJournalofAnimalNutrition,2019,31(4):1743⁃1753]Keywords:phytase;growthperformance;tibiaindex;calciumandphosphorusmetabolism;yellow⁃featheredchickens(责任编辑㊀武海龙)。

饲料营养对鸡腿病的影响及防治措施

饲料营养对鸡腿病的影响及防治措施

饲料营养对鸡腿病的影响及防治措施一、影响肉鸡腿病的饲料因素1、日粮能量、蛋白质和氨基酸水平使用蛋白质含量(尤其是动物性蛋白质)很高的饲料喂鸡,会导致鸡发生关节性痛风症。

常量元素供应量肉鸡容易产生钙、磷缺乏症,致鸡患软骨症,表现出骨质疏松脆软、教麻痹、站立困难、常常侧卧等症状。

日粮中虽有足够的钙、磷,但如果长期比例不当,生长鸡也会表现两腿无力,走路不稳,跛行,重者侧卧不起,两腿呈“八”字型。

另外,过量的氯造成酸中毒,可影响正常的发育和钙化;缺钾时,会引起鸡雏步态不稳,生长受阻;若缺氯,使肾脏受损伤,雏鸡还表现特有的神经反应(身躯前跌,双腿后伸等现象)。

2、微量矿物质元素的含量与肉鸡腿病有关的微量元素主要有锰、锌、硒等。

当肉鸡缺艋时,行走困难,生长中的肉鸡对锰的最低需要量为每公斤体重为40-50毫克;锌缺乏时,病鸡表现为两腿软弱、运动失调、长骨短粗、跗关节肿大、腿脚皮呈磷片状,重者发生坏死性皮炎。

当肉鸡骨骼异常,腹部皮肤呈磷片状、易成片脱落、这是缺锌的表现。

硒和维生素E缺乏往往同时发生,缺硒能使维生素E的吸收作用受到影响,从而引起雏鸡脑软化、两腿痉挛、麻痹,共济失调。

3、维生素维生素B1(硫氨酸)缺乏会引起鸡多发性神经炎和外周神经麻痹,患鸡厌食,腿软无力,步伐不稳,趾向内卷曲,刚开始患鸡扬头高抬脚行走,随着病情发展,跗关节着地移动,身体屈曲腿上,重者两肢瘫痪,卧地不起,两腿伸直,头向后呈“观星”状态。

维生素B2(核黄素)缺乏时,患鸡以一只脚行走或以跗关节着地行走,关节肿大,脚趾向内卷曲,或一腿朝前一腿向后,行走困难,走时两肢展开,维持身体平衡。

维生素E缺乏时,行走困难,两腿麻痹,倒地侧卧,腿外伸,一侧性角弓反张,两腿发生痉挛、抽搐,不久死亡。

胆碱缺乏,可引起骨短粗病,跗关节增大,脚弯向旁边而产生滑腱症。

维生素A缺乏,腿关节肿大,关节囊中有白色尿酸盐,行走困难。

维生素D缺乏,也叫软骨症、佝偻病,是由于体内钙、磷代谢障碍引起的,其症状与钙磷缺失完全一样。

蛋鸡缺磷症的诱因、症状及治疗措施

蛋鸡缺磷症的诱因、症状及治疗措施
综上所述袁 在蛋鸡养殖过程中袁 蛋鸡体内磷元素过多会对 蛋鸡健康和产量造成影响遥 如果磷元素过低会造成蛋鸡骨骼变 形袁 同时影响新陈代谢袁 进而造成育成率下降遥 不仅如此袁 产 出的鸡蛋也会存在蛋壳过薄尧 容易破碎等问题袁 不利于养殖场 的可持续发展遥 所以袁 要采取有效的防控措施袁 合理控制蛋鸡 饲料中的微量元素袁 避免蛋鸡钙磷元素的缺乏遥 针对患病鸡要 根据病情严重性采取有效的治疗措施袁 避免危害扩大遥
可以选用亚硒酸钠溶液进行饮水治疗袁 溶液浓度为 10%袁 兑入量为每 100ml 清水兑入 1ml 亚硒酸钠溶液袁 患病蛋鸡自由 饮水服用即可遥 连续使用 2d 后降低溶液浓度袁 改用 0.1%亚硒
酸钠溶液袁 每 1000ml 清水中兑入 1ml 药液袁 患病蛋鸡自由饮 水服用即可袁 该服用剂量持续一周遥 员 周后袁 每隔 猿 周服用 1 次袁 能加速患病蛋鸡的恢复速度遥 3.2 拌料喂服
造成磷缺乏的主要原因是饲料中缺少足够的钙磷元素或比 例失调遥 也有可能受到疾病尧 生理状态的影响袁 进而导致钙磷 需求量增加袁 如果不及时补充很有容易诱发磷缺乏症遥 2.2 症状
患有磷缺乏症的雏鸡会出现佝偻病袁 发病速度很快袁 普遍 出现在 1耀4 周龄的蛋鸡中遥 常见症状为发育不良尧 羽毛生长不 良尧 双腿无力尧 站立不稳尧 跛脚腿瘸遥 还有骨质软化问题容易 出现骨折袁 胸骨会逐渐畸形遥 成年蛋鸡会出现骨软症袁 骨质疏 松尧 骨头的硬度降级尧 骨骼逐渐变形 [2]遥 腿无力袁 长时间躺卧 在地上无法站立遥 爪子尧 喙龙骨弯曲尧 鸡蛋的生产数量下降遥 产出的鸡蛋会出现蛋壳较软尧 无壳尧 表面畸形等情况遥 解剖检 测可发现胸骨尧 肋骨出现自然骨折的情况袁 部分骨骼位置会出 现珠状突起遥 3 蛋鸡磷缺乏症的治疗措施 3.1 饮水疗法

饲料中钙、磷水平对4至6W肉鸡胴体钙、磷分布的影响

饲料中钙、磷水平对4至6W肉鸡胴体钙、磷分布的影响

5 个钙水平( 0 . 6 %、 0 . 8 %、 1 . 0 %、 1 . 2 %和 1 . 5 %) , 4 个非 植 酸磷 水平 ( 0 . 3 5 %、 0 . 4 5 %、 0 . 5 5 %和 0 . 6 5 %) 。将 8 0 0 只2 2 日 龄 健 康 肉鸡 随机 分 为 2 0 个处理, 每 个 处理 4 个重 复 , 每 个重 复 1 0 只鸡 , 试 验期 为 4 ~ 6 w 。结 果表 明 : 日粮 钙 、
关键词: 肉鸡; 钙; 磷; 胴体钙 ; 胴体磷
中图分 类号 : ¥ 8 3 1
文献标 识 码 : B
文章编 号 : 1 0 0 4 — 5 0 9 0 ( 2 0 1 7 ) 0 5 — 0 0 0 9 — 0 3 浆 中的 钙 含 量 无 显 著影 响 , 而 丁 角立 等 ( 1 9 9 4 ) 研 究 认
粮钙、 磷 状况 , 尚未 见 国 内报 道 。该 试 验通 过 在 玉 米 一 豆 粕 型 日粮 中添 加 不 同水 平 钙 和磷 , 研究 钙 、 磷 水平 及 比例 对 肉鸡 血 液 、 肝脏 、 腿 肉和胸 肉中钙磷 含 量和 分布 的影 响 ,
确定 肉鸡钙 、 磷缺乏症早期的临床和试验室诊 断指标 , 进
为, 日 粮 中钙和有效磷为 0 . 3 5 %时 , 血浆中钙含量显著提 高。刘光富等( 2 0 0 3 ) 报道 , 日粮中高磷( 0 . 6 %无机磷 ) 能
显著提高血浆 中的钙 、 磷含量和肝脏中的钙 、 磷含量 。从 肉鸡血液 、 肝脏和肌 肉组织钙 、 磷含量及变化规律 , 揭示 日
影响 [ J ] . 黑龙江 畜牧兽 医 , 2 0 1 2 , ( 1 3 ) . [ 3 ] 闫 民朝. 大蒜秧 粉对 蛋鸡 生产性 能 的影响 [ J ] . 河 南 畜牧 兽医 , 2 0 1 0 , ( 8 ) : 6 — 7 . [ 4 ] 孔 雪旺 , 周敏 , 等. 大蒜秧 在肉羊育肥 中的应用研 究 [ J ] . 河南畜牧兽医 , 2 0 1 2 , ( 9 ) : 1 l — l 2 . [ 5 ] 王忠红 , 李振. 大蒜秸 秆对 肉兔生产性 能的影 响 [ J ] .

重组鸡GSTA3蛋白对福美双诱导的TD肉鸡血清中Bax含量的影响

重组鸡GSTA3蛋白对福美双诱导的TD肉鸡血清中Bax含量的影响


要: 为研究谷胱甘肽硫转 移酶 A 3 ( G S T A3 ) 对胫骨软骨发育 不 良( T D) 肉鸡血清 中凋亡 因子 B a x的影 响 , 试验
将9 0羽 1日龄 A A肉仔鸡 预饲 7 d 后, 随机分为 6组 ( A, B, c, D, E和 F组 ) , 分别 在 8 , 9日龄对 D, E, F组饲 喂添
a f t e r b a s a l — d i e t f e e d i n g f o r 7 d a y s . D, E a n d F o f a b o v e 6 g r o u p s we r e f e d wi t h d i e t s c o n t a i n i n g 1 0 0 mg / k g o f t h i r a m a t 8 a n d 9 d a y s o l d .
重 组 鸡 GS T A 3蛋 白对 福 美双 诱 导 的 T D 肉鸡 血清 中 B a x含 量 的影 响
张 宁 , 李 桢 , 李娜娜 , 张旭华 , 张 靖 , 陈柳 妃 , 宁 官保 , 张 鼎 , 田文 霞
( 山西农业大学动物科技学 院, 山西 太谷 0 3 0 8 0 1 )
Z HA NG Ni n g , L I Z h e n, L I Na n a, Z HANG Xu h u a , Z HANG J i n g , CHEN L i u f e i ,
NI NG Gua n ba o, ZHANG Di n g, TI AN We n x i a
( C o l l e g e o f A n i m a l S c i e n c e a n d V e t e r i n a r y M e d i c i n e , S h a n x i A g r i c u l t u r a l U n i v e r s i t y , T a i g u 0 3 0 8 0 1 , C h i n a )

PTHrP-Ihh

PTHrP-Ihh

技有限公司) 。
1 . 2 试 验 材 料
福美双 , 购于南京寿德试验器材有限公司 ; 血浆钙、 磷、 碱 性磷酸酶生化检测试剂 盒 , 购于迈瑞公 司; e D N A S y n t h e s i s K i t
( M— ML V V e r s i o n ) 、 S Y B R P r e mi x E x
P T H r p一/ h h信号轴和相关因子的变化及其相互 作用关系 , 为
探 明肉鸡 T D发生的机理提供依据 。
1 材 料 与方 法
1 . 1 试 验 仪 器
大生产的商品雏鸡料 ( 代谢能 1 3 . 3 9 M J / k g , 粗蛋白 2 3 . 0 %) 。
尤其是胫骨软 骨发 育不 良(t i b i a l d y s c h o n d r o p l a s i a , T D ) 的发 病率显著增加 , 不仅影 响动物福利 , 同时也带来 了较大 的经济
损失 …。胫骨软骨发育不 良是现代 肉鸡养殖业最 常见、 危 害 最严重的骨骼疾病之一 , 该病 以在胫骨近端生 长板下形成无 血管 、 未钙化 、 不透明的软骨栓为 主要特征 。T D的发病机 理
-.—

2 0 2- - — —
江苏农 业科 学 2 0 1 5年第 4 3卷第 8期
徐令 东,陈 萌,张 华 , 等. P T H r P — l h h信号轴在 肉鸡胫骨软骨发育不 良 发 生中的调控机理 [ J ] .江苏农业科学, 2 0 1 5 , 4 3 ( 8 ) : 2 0 2— 2 0 4
I n s t r u m e n t s hd . , 英 国) ; R M 2 2 3 5软 组 织 切 片 机 ( L e i e a , 德 国) ; H 5 5 0 5光学显微 镜( N i k o n , 3本 ) 1 ; 自动生化 分析仪 ( S e — l e c t a r E , 荷 兰) ; MI C R O T E K 5 6 0 0透射式 扫描仪 ( 上海 中晶科

磷缺乏日粮添加植酸酶对肉鸡生长性能的影响

磷缺乏日粮添加植酸酶对肉鸡生长性能的影响

69 2020年第20期中国饲料文献中对植酸酶底物的命名法有多种:六磷酸肌醇与钾、镁和钙的复合物、植酸(六磷酸肌醇)和动物营养中最常用的术语-植酸盐,它最初被认为是植物萌发过程中磷的来源,同时在降低氧化应激和胚胎死亡方面也扮演着重要角色(Selle 和Ravindran,2007),因为与植酸螯合碘、钙和锌等矿物质的能力有关,可以减少在萌发过程中活性氧的形成。

在动物营养学中,植酸是肉鸡和猪不可获得的磷来源,但最近随着外源性植酸酶的出现,这种情况发生了改变(于彩云等,2019)。

同时还可能是植酸磷可降低蛋白质和矿物质吸收,增加黏液的产生,干扰肉鸡性能(Linares等,2007)。

赵建飞等(2018)认为,植酸酶可以降低植酸的抗营养作用,肉鸡日粮中添加高水平的植酸酶可以改善肉鸡生长性能和抗氧化状态。

因此,本研究旨在探讨植酸的抗营养作用,以及在低水平磷的日粮中添加不同水平的植酸酶对肉鸡生长性能的影响。

1 材料与方法1.1 试验动物分组 试验将648只1日龄商品肉鸡根据平均体重随机分为6组,每组6个重复,每个重复18只。

6组肉鸡分别饲喂6种饲料,即正常磷水平日粮、正常磷水平日粮+500 FTU/kg 植酸酶、磷缺乏日粮、磷缺乏日粮+500、1000或1500 FTU/kg植酸酶。

整个试验分为1~21 d和22~35 d两个阶段。

正常日粮中磷水平参考《中国鸡饲养标准 NY/T33~2004》制定。

表1 正常和磷缺乏日粮组成及营养水平原料组成1~21 d22~35 d玉米/(g/kg)572587.5658.1671.3豆粕/(g/kg)342.9340.2271.5269.5大豆油/(g/kg)38.032.932.428.1石粉/(g/kg)12.411.810.08.7磷酸氢钙/(g/kg)18.811.514.38.7小苏打/(g/kg)1.51.51.51.5赖氨酸/(g/kg)1.81.81.11.1DL-蛋氨酸/(g/kg)2.62.61.81.8苏氨酸/(g/kg)0.20.2——预混料/(g/kg)6.56.56.56.5营养水平代谢能/(kcal/kg)3050305031003100粗蛋白质/%22.022.019.019.0粗脂肪/%6.36.06.05.7粗纤维/%2.52.52.52.5钙(实测值)/%0.90.750.700.60总磷(实测值)/%0.750.600.650.55赖氨酸/%1.251.251.001.00蛋氨酸+胱氨酸/%0.900.900.750.75磷缺乏日粮添加植酸酶对肉鸡生长性能的影响薛瑞婷,李 栋(吕梁学院,山西吕梁 033000)[摘要]植酸磷不仅是肉鸡不可利用的磷源,而且具有抗营养、降低蛋白质和矿物质吸收、增加内源损失和降低肉鸡生产性能的负面作用。

肉鸡蛋白质及矿物质缺乏症诊治

肉鸡蛋白质及矿物质缺乏症诊治
常侵害幼龄鸡群,多呈急性暴发,死亡率高。主 要特征是精神萎顿和昏迷,不吃、脫水、消瘦。病程短而急,突 然致死。
主要侵害单眼或双眼、视力丧失或减弱。眼虹 膜色素消失,混浊的淡灰色呈同心环样斑点。瞳孔边缘呈锯 齿形状不整齐。到后期整个瞳孔只剩下针尖大小。
此类型较少发病,主要表现为毛囊增大,形成 淡白色的小结节或肿瘤状物。最初见于颈部、大腿部及双翅 皮肤,严重时会遍及全身皮肤。 3 病理变化
肉鸡较容易缺乏的矿物质主要是:钙Ca)、磷P)、锰 (M n)、锌Zn)、镁M 8)、铜Cu)、硒Se)、碘I)等。一般而言, 散养禽可以自由自主采食天然食物源所以极少发生矿物质 缺乏症,但某些地区可能存在地方性缺硒、缺碘、缺锌等情
况,则亦有可能发生某种矿物质缺乏症;规模化、集约化、全
封闭全舍饲)养殖条件下,肉鸡的饲料以采购饲料源自主配
制为主,上述矿物质长期添加量不足或配比不当则可能发生
某种矿微元素缺乏症。
2.1

缺乏Ca、P物质重点影响家禽骨骼发育,可致欣孵化雏 鸡肢体骨骼发育不良或畸形、身体孱弱无力、发育滞缓或发
育不健全等,且出壳后1~1 5d内陆续发生死亡、死亡率几近
100%曰对于产蛋鸡有明显的影响,可导致产劣质蛋软壳、薄 壳)、产蛋量下降甚至完全停产。防治要点:本病与光照关系
(骨钙粉、肉钙粉,添加比1%~2% )或鱼粉 添加比1%~3% )
的添加量,适宜钙磷比推荐雏鸡2.2:1 ,育成鸡2.5:1,产蛋鸡
6.5:1 冶;农牧区养殖户平常注意尽可能投喂多样化的五谷杂
粮及新鲜牧草、果蔬等以补充天然微量元素;对症治疗首选
Va、Vd同补、钙磷同补效果发挥最佳。
2.2其他矿微缺乏症
科学搭配动、植物蛋白。常见的谷物玉米、稻谷、小麦、 高粱)和豆类大豆、蚕豆、豌豆、四季豆)是植物蛋白的重要 来源,豆饼、棉籽饼、菜籽饼中也含有一定量的植物蛋白;动 物蛋白补充部分主要是用鱼粉、血粉、肉骨粉等来代替。肉鸡 饲料中蛋白的均衡量以雏鸡需量较大,一般为21 ±1%,产蛋 鸡为16±1%,商品育肥鸡为18±1 %。其中,动物性蛋白均衡 配比量为4±1 %遥养殖过程注意定期检测当前使用饲料中各 种氨基酸是否保持平衡,并尽量消除颉颃关系、限制性氨基 酸缺乏影响其他氨基酸正常转化利用的影响因素,综合检测 结果有针对性的增加缺乏的某一限制性氨基酸,并相应提高 同组其他氨基酸的量以促进饲料的完全消化和吸收利用遥农 牧区养殖户在养殖过程要注意避免长期使用营养单一的饲 料,比如仅仅使用未经加工的谷物类投喂鸡群,最好每天适 量补充少部分均衡配比的全价配方饲料参考国标),同时定 期投喂瓜果蔬菜等青绿饲料以补充天然微量元素不足部分。 2 矿物质缺乏症

鸡钙、磷失衡或缺乏症诊治措施

鸡钙、磷失衡或缺乏症诊治措施

Veterinary clinical science | 兽医临床科学98 ·2021.090 引言钙、磷等微量元素是蛋鸡生长发育和代谢中不可或缺的重要组成部分。

钙磷元素的失衡或者缺乏是造成佝偻病、软骨病、影响产蛋鸡正常生产、影响蛋壳质量、造成蛋鸡生产能力下降的主要原因。

钙磷的失衡或者缺失还会造成体内血红蛋白、红细胞的数量显著下降,影响机体的新陈代谢,诱发组织坏死。

不管是肉鸡养殖或者蛋鸡养殖产业,都要求养殖管理人员充分重视钙磷元素的科学添加,要从营养调控,科学搭配饲料等角度入手,做好科学预防工作。

1 病例探讨2020年4月13日,一个规模化蛋鸡养殖场养殖的43日龄鸡群中陆续出现瘫痪,不能正常行走,生长发育不良的发病情况,在出现临床症状1周后,出现233只死亡鸡,死亡率25%以上。

出现发病情况后,养殖户认为饲料中的营养物质添加不足,增加能量饲料和蛋白质饲料的添加量,但是病情并没有得到有效缓解。

更换资料连续养殖1月后,大多数蛋鸡的体重严重超标。

增重越快的鸡死亡率越高,发病过程越短。

通过对发病情况进行认真细致的检查,主要以40~60日龄的蛋鸡发病为主,成年阶段的鸡呈现不同程度的临床症状。

从总体的流行情况分析,整个养殖场呈现群发流行,且发病率和致死率呈现逐渐升高的趋势。

兽医接到求助后赶到养殖场进行认真细致的发病情况调查。

该养殖场除养殖规模较大,密度较大,卫生环境不良外,还是自行搭配资料。

通过对饲料配方进行认真细致的检查,发现各种维生作者简介:李玉东(1967-),男,河南浚县人,中专,兽医师,研究方向:动物疾病诊断。

鸡钙、磷失衡或缺乏症诊治措施李玉东(河南省鹤壁市浚县畜牧局,鹤壁 456250)摘要:鸡在整个生长发育阶段除要保证能量饲料、蛋白质饲料充分投入外,还应确保微量元素的科学供给。

钙、磷元素在家禽养殖中虽然使用的剂量较少,但参与到鸡生长发育阶段的很多环节,对促进鸡群健康成长和健康生产有很大帮助。

维生素A过量对肉鸡钙`磷沉积及碱性磷酸酶和骨钙素表达的影响

维生素A过量对肉鸡钙`磷沉积及碱性磷酸酶和骨钙素表达的影响

附件2论文中英文摘要作者姓名:郭晓宇论文题目:维生素A过量对肉鸡钙、磷沉积及碱性磷酸酶和骨钙素表达的影响的研究作者简介:郭晓宇,女,1982年2月出生,2007年9月师从于内蒙古农业大学闫素梅教授,于2010年7月获博士学位。

中文摘要动物的钙磷代谢直接影响骨骼发育,进而影响动物的健康与生产。

肉鸡腿病导致较高的死淘率和“弱腿”诱发的胸部囊肿,是制约肉鸡业健康发展的重要因素之一。

维生素A对骨骼正常生长发育,及动物和人类的生长起重要作用。

然而,在目前的肉鸡生产中,通常在日粮中添加较高剂量的维生素A以刺激免疫机能,有的添加剂量高达15000、20000 IU/kg以上。

研究表明,维生素A过量会引起人和大鼠等动物骨密度和骨骼强度降低、骨重和骨灰含量下降、骨骼发育受阻、腿病发生率增加(Hough等,1988;Melhus 等, 1998;Downs等,2003;Cynthia 等,2003)。

本项目前期试验结果也得出了相同的结果,研究也表明维生素A过量是引起肉鸡骨骼钙磷代谢发生障碍的重要原因之一(张海琴,2006;陈彦君,2007;闫素梅等,2007;冯永淼,2007)。

尽管很多资料报道了过量维生素 A 对动物骨骼代谢有显著的负面影响,但关于其影响机制的研究报道极少,结果也不尽一致,对骨骼影响的确切机制尚且无法确定。

碱性磷酸酶(ALP)和骨钙素(BGP)是成骨细胞分泌的,在钙磷的转运和沉积过程中起重要的作用,是重要的骨形成生化指标(Robey,1992;Yasuda等,1998)。

血清碱性磷酸酶(ALP)活性可以反映骨形成,血清骨钙素(BGP)的水平变化直接反映成骨细胞活性,是成骨细胞功能和骨质矿化的特殊标志物。

而小肠、骨骼等组织的 ALP与BGP基因表达量与血清ALP活性与BGP浓度密切相关。

ALP mRNA的表达是成骨细胞在早期分化的主要特征之一,BGP mRNA的转录和蛋白合成是成骨细胞进入矿化期的主要指征之一,是成骨细胞成熟的标志。

导致肉鸡胫骨软骨发育不良的营养因素

导致肉鸡胫骨软骨发育不良的营养因素

导致肉鸡胫骨软骨发育不良的营养因素胫骨软骨发育不良(Tibial Dyschondroplasa,TD)是在1965年由Leach和Nesheim首次发现的。

其特点是胫骨软骨发育异常,在近干,骺端有一锥形未钙化的软骨,可能是肉鸡软胶原蛋白合成速度超过了降解速度所致。

肉鸡胫骨软骨发育不良是对现代肉鸡养殖业造成巨大损失的一种营养代谢病,患胚骨软骨发育不良的病鸡运动不便,采食受限,生长发育受影响,增重明显下降,种禽生殖性能和商品肉禽的肉品质均下降。

其发生受遗传、饲料饲养水平及Ca、P、Mg、CL等含量及肉鸡体内阴阳离子失衡引起的酸碱代谢紊乱有关。

1胫骨软骨发育不良的临床症状胫骨软骨发育不良的临床症状是:鸡胫骨关节肿大,行走困难,随着症状严重程度增加,鸡常卧于笼内,活动量下降,严重者不能站立行走。

2胫骨软骨发育不良患鸡的病理组织变化(1)正常时肉鸡胫骨软骨繁殖区内非成熟软骨细胞由上端向下发育成熟,在骨钙化区钙化。

发育成熟的软骨细胞其特征为软骨细胞小,软骨囊大;发生胫骨软骨发育不良后胫骨骺端软骨繁殖区内不成熟的软骨细胞极度增长,从而形成软骨栓,不成熟软骨细胞的软骨细胞大,而软骨囊小,排列较紧密。

(2)正常时软骨繁殖区内血管粗大,向软骨细胞输送发育、钙化所需的养分,繁殖区内破骨细胞和成骨细胞丰富,分别发生溶骨和成骨作用。

发生胫骨软骨发育不良时繁殖区内血管稀少,缺乏血管周细胞、破骨细胞和成骨细胞,有的血管段增生的软骨细胞挤压而萎缩、变性甚至坏死,不能提供足够的养分,从而使软骨细胞不能钙化。

(3)正常时钙化区骨针向上排列,发生胫骨软骨发育不良时软骨钙化区骨针排列紊乱、扭曲,不成熟的软骨细胞呈杵状伸向钙化区。

此外佟建明(1993)将患胫骨软骨发育不良的小鸡的胫关节纵切,在纵切面上可见到一块白色透明的软骨栓,软骨栓无血管通过。

3影晌胫骨软骨发育不良的因素3.1主要营养因素3.1.1钙磷水平对胫骨软骨发育不良的影响饲料中钙磷水平是影响胫骨软骨发育不良发生的主要营养因素(Edoards,1983)。

肉鸡钙磷缺乏症的原因及防治措施

肉鸡钙磷缺乏症的原因及防治措施

肉鸡钙磷缺乏症的原因及防治措施
孙静
【期刊名称】《河南畜牧兽医》
【年(卷),期】2022(43)23
【摘要】钙磷缺乏症会造成家禽骨骼发育受到影响,出现骨骼发育不良,发育迟缓或者孱弱无力的情况。

在肉鸡1~15日龄内发生钙磷缺乏症会造成肉鸡死亡,影响中大肉鸡生长增重。

如今养鸡行业逐渐朝向规模化养殖发展,采取统一配制饲料饲喂,若由于饲料营养成分不合理,长期缺乏营养物质,极有可能发生钙磷缺乏症,影响养殖户的经济利润。

因此针对钙磷缺乏症发病原因以及影响展开分析,对于保护养殖行业发展、提高养殖收益有重要作用。

【总页数】2页(P51-52)
【作者】孙静
【作者单位】睢县动物卫生监督所
【正文语种】中文
【中图分类】S858.31
【相关文献】
1.猪钙、磷缺乏症的表现与防治
2.猪钙磷缺乏症的表现与防治
3.仔猪钙磷缺乏症的防治
4.鹅钙磷缺乏症的防治
5.鹅钙磷缺乏症的防治分析
因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。

维生素A、D对肉鸡钙、磷代谢的影响

维生素A、D对肉鸡钙、磷代谢的影响

维生素A、D对肉鸡钙、磷代谢的影响闫素梅;冯永淼;张海琴;史彬林;敖力【期刊名称】《动物营养学报》【年(卷),期】2007(19)3【摘要】本试验旨在研究维生素A、D对肉鸡钙、磷代谢的影响.采用4×4完全随机试验设计,将384只8日龄健康艾维茵雄性肉鸡称重后随机分为16个处理组,每个处理组设3个重复,每个重复8只.其中,VA设4个添加水平,分别为1 500、3 000、15 000和45 000 IU/kg日粮;VD设4个添加水平,分别为500、1 250、2 500和5 000IU/kg日粮,共构成16个处理组的试验日粮.结果表明:日粮VA水平对肉鸡钙、磷代谢有显著的影响,日粮VA为45 000 IU/kg时,肉鸡胫骨灰分含量、胫骨矿化度及血清AKP活性相对于1 500、3 000 IU/kg VA组显著下降(P<0.01或P<0.05),胫骨磷含量显著增加(P<0.05),胫骨钙含量趋于增加(P>0.05);日粮VA水平为15 000 IU/kg时,胫骨钙含量、血清AKP活性有降低的趋势,胫骨磷含量趋升高.日粮VD水平在500~5 000 IU/kg范围内,对肉鸡的胫骨灰分含量、胫骨钙、磷含量、胫骨矿化度及血清AKP活性无显著影响(P>0.05),但随着VD添加剂量的增加,血清钙、磷含量呈一次线性增加,胫骨钙含量呈二次曲线上升趋势.日粮VA为15 000 IU/kg时,肉鸡VA临界过量;日粮VA为45 000 IU/kg时,肉鸡VA过量.日粮VD水平在500~5 000 IU/kg范围内,对肉鸡的钙、磷代谢无显著影响.【总页数】7页(P218-224)【作者】闫素梅;冯永淼;张海琴;史彬林;敖力【作者单位】内蒙古农业大学动物科学与医学学院,呼和浩特,010018;内蒙古农业大学动物科学与医学学院,呼和浩特,010018;内蒙古农业大学动物科学与医学学院,呼和浩特,010018;内蒙古农业大学动物科学与医学学院,呼和浩特,010018;内蒙古农业大学动物科学与医学学院,呼和浩特,010018【正文语种】中文【中图分类】S8【相关文献】1.不同钙水平日粮中植酸酶对肉鸡生长和钙磷代谢的影响 [J], 楼洪兴;吴建良;许松;吕玉丽2.维生素A过量对肉鸡早期骨骼钙磷代谢的影响 [J], GUO Xiaoyu;YAN Sumei;SHI Binlin;LI Yinhao;HAN Junying;ZHAO Yanli3.不同添加水平的磷酸一二钙对肉鸡生产性能、钙磷代谢及盲肠微生物的影响 [J], 刘景;陈炳钿;李忠荣;何姝颖;张世忠;邱华玲;缪伏荣;陈卓;陈鑫珠4.维生素A、D对肉鸡钙磷代谢相关激素水平的影响 [J], 曹平;孙建萍;闫素梅;方丽惠;史彬林;郭晓宇;付果花5.钙磷比对饲喂含植酸酶日粮的肉鸡生长性能和钙磷代谢的影响 [J], 楼洪兴;吴建良;许松;吕玉丽因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。

不同无机磷水平日粮添加植酸酶对肉鸡生长发育及养分利用的影响的开题报告

不同无机磷水平日粮添加植酸酶对肉鸡生长发育及养分利用的影响的开题报告

不同无机磷水平日粮添加植酸酶对肉鸡生长发育及养分利
用的影响的开题报告
一、研究背景及意义
无机磷是肉鸡生长发育所必需的重要营养元素,但是其利用率低,约有60%左右的无机磷被排泄,对环境造成污染,同时增加饲料成本。

为了降低饲料成本及保护环境,植酸酶在肉鸡饲料中的应用逐渐被重视。

植酸酶能够降解饲料中的植酸,释放出被植酸包埋的无机磷,从而提高肉鸡对磷的利用率。

但是,不同无机磷水平对植酸酶的影响还不清楚,因此需要进一步探究。

二、研究目的
本研究旨在探究不同无机磷水平下添加不同剂量植酸酶对肉鸡生长发育及养分利用的影响,为肉鸡饲料配方提供科学依据。

三、研究内容
(1)确定实验设计:将肉鸡随机分为6个处理组,分别为正常无机磷水平组、低磷组、高磷组以及这三个组每个组再分为未添加植酸酶和添加不同剂量植酸酶的两个亚组。

(2)测定生长指标:记录生长期、饲料消耗量、肥料产量等指标,分析植酸酶对肉鸡生长发育的影响。

(3)检测血清生化指标:分析血清中钙、磷等营养元素含量及肾脏功能等生化指标,评估植酸酶对肉鸡体内营养物质代谢的影响。

(4)分析肠道pH值、细菌种类及数量:从肉鸡的各个肠段采集内容物,进行pH值测定、细菌菌群组成鉴定,分析植酸酶对肉鸡肠道微生态的影响。

四、研究意义
本研究将通过实验手段探究不同无机磷水平下添加不同剂量植酸酶对肉鸡生长发育及养分利用的影响,为肉鸡饲料配方提供科学依据,降低饲料成本及保护环境,同时拓宽肉鸡饲料添加剂研究的领域,对于肉鸡养殖产业的发展具有积极的推动作用。

不同源铜对肉鸡肝脏线粒体蛋白组及代谢功能的影响的开题报告

不同源铜对肉鸡肝脏线粒体蛋白组及代谢功能的影响的开题报告

不同源铜对肉鸡肝脏线粒体蛋白组及代谢功能的影响的开
题报告
一、研究背景
随着人们对畜禽产品的要求越来越高,对肉鸡生产的要求也越来越高,其中包括对肉质的控制,脂肪含量的控制,以及对肉鸡内脏质量的检验。

肝脏是一种重要的内脏器官,其代谢功能对鸡的生长和健康表现有重要的影响。

因此,对不同源铜对肉鸡肝脏线粒体蛋白组及代谢功能的影响进行研究,对于提高肉鸡生产的质量和效益有一定的意义。

二、研究目的
本研究旨在探究不同源铜对肉鸡肝脏线粒体蛋白组及代谢功能的影响,为肉鸡生产的科学管理提供参考依据。

三、研究内容
(1)研究肉鸡肝脏线粒体蛋白组及代谢功能的构成。

(2)进行实验,选择不同源铜,观察其对肉鸡肝脏线粒体蛋白组及代谢功能的影响。

(3)通过对实验结果的分析,得出不同源铜对肉鸡肝脏线粒体蛋白组及代谢功能的影响规律。

四、研究方法
选择健康的肉鸡进行实验,将它们随机分为对照组和不同源铜组。

对不同源铜组进行铜离子饲料添加,观察其对肉鸡肝脏线粒体蛋白组及代谢功能的影响。

利用蛋白质组学和代谢组学的技术,并结合相关的生化学和分子生物学技术的分析方法,对肝脏线粒体蛋白表达及代谢功能进行分析,并从分子水平探究不同铜形态的相互关系。

五、研究意义
本研究的结果可以为不同类型肉鸡生产提供控制肝脏代谢功能的参考依据,对提高肉鸡生产的质量和效益有较为积极的作用。

其次,对不同形态铜的影响进行探究,可以对铜形态产生对鸡肝脏代谢功能的影响进行深刻的认识和理解,不同形态铜之间的相互关系也有助于优化禽畜养殖中的饲料添加和喂养策略,最终达到提高养殖效益的目的。

不同来源纤维对肉鸡的生长发育及胫骨矿物元素含量的影响

不同来源纤维对肉鸡的生长发育及胫骨矿物元素含量的影响

不同来源纤维对肉鸡的生长发育及胫骨矿物元素含量的影响王安
【期刊名称】《畜牧兽医学报》
【年(卷),期】1992(23)1
【摘要】采用玉米淀粉-大豆分离蛋白纯合基础饲粮及不同来源纤维,配制6种试验饲粮:1、基础饲粮(不加纤程);2、纤维素;3、小麦麸;4、米糠;5、高粱糠;6、苜蓿粉。

饲于7日龄肉鸡(星布罗),结果如下:1、苜蓿组采食量和体增重显著高于其它各组(P0.05)。

2、鸡不能行走,腿病严重百分率最高者是米糠组,无腿病百分率较高的是基础组和苜蓿组。

3、小麦麸组、米糠组、高粱糠组、苜蓿组胫骨中锰含量显著低于基础组和纤维素组(P<0.05),小麦麸组和米糠组胫骨锌显著低于基础组
(P<0.05),纤维素组和小麦麸组胫骨铁显著高于基础组(P<0.05),苜蓿组胫骨镁显著高于基础组(P<0.05)。

【总页数】1页(P28)
【作者】王安
【作者单位】无
【正文语种】中文
【中图分类】S831.1
【相关文献】
1.纤维,锌对肉仔鸡生长发育和胫骨中矿物元素含量的影响 [J], 王安;单安山
2.镁对肉鸡生长发育及组织中矿物元素含量的影响 [J], 王安;单安山
3.微量矿物元素来源对肉鸡生物学利用率参数影响的研究 [J], 解玉怀;王丽雪;杨维仁(译)
4.饲粮纤维和镁对肉鸡生长发育及组织中矿物元素含量的影响 [J], 王安
5.有机和无机微量元素来源及水平对母猪母体、母体肝脏、初乳、常乳以及后代矿物元素含量的影响(试验持续6胎)Peters J C,Mahan D C,Wiseman T
G,Fastinger N D [J],
因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。

25-OH-VD3和植酸酶对肉鸡生长性能及饲料钙和磷真代谢率的影响的开题报告

25-OH-VD3和植酸酶对肉鸡生长性能及饲料钙和磷真代谢率的影响的开题报告

25-OH-VD3和植酸酶对肉鸡生长性能及饲料钙和磷真代谢率的影响的开题报告
1. 研究背景和意义
肉鸡生长过程中,钙和磷是必需的营养元素,缺乏这些元素会严重影响鸡的生长性能。

目前,饲料生产中通常会添加植酸酶以提高植酸的降解率,以提高饲料中磷的利用率。

同时,维生素D也被广泛添加到饲料中以促进钙和磷的吸收和利用。

25-OH-VD3作为一种生物活性维生素D3代谢产物,被认为具有增强骨骼形成和磷代谢的功能。

因此,探究25-OH-VD3和植酸酶对肉鸡生长性能及饲料钙和磷真代谢率的影响,对进一步提高肉鸡饲养效益和优化饲料配方具有重要意义。

2. 研究内容和方法
通过实验方法,考察25-OH-VD3和植酸酶对肉鸡生长性能及饲料钙和磷真代谢率的影响。

具体内容包括:
(1)确定25-OH-VD3和植酸酶对肉鸡生长性能的影响,通过饲喂不同剂量的25-OH-VD3和不同浓度植酸酶饲料,摄入的钙和磷量不变,观察肉鸡的生长性能,如饲料摄入量、体重、饲料转化率等。

(2)测定25-OH-VD3和植酸酶对肉鸡骨密度、血清钙、磷含量和骨骼矿物质含量的影响。

(3)用同步辐射X射线荧光分析仪检测不同剂量的25-OH-VD3和不同浓度植酸酶对肉鸡饲料中钙和磷的真代谢率的影响。

3. 研究预期结果
预计研究结果能够进一步阐明25-OH-VD3和植酸酶在肉鸡生长中的作用机制和影响,为提高肉鸡饲养效益和优化饲料配方提供科学依据。

同时对于25-OH-VD3和植酸酶的研究也将为其他动物的饲养研究提供参考。

  1. 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性,平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
  2. 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
  3. 3、如文档侵犯您的权益,请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间:9:00-18:30)。

Group DCP
Group MDCP
原料 Ingredients
玉米 Corn
豆粕 Soybean meal
菜籽油 Rapeseed oil
磷酸氢钙 CaHPO4
磷酸一二钙 MDCP
石粉 Limestone
膨润土 Bentonite
蛋氨酸 DL-
DL-Met
食盐 NaCl
胆碱 Choline
维生素预混料 Vitamin premix1),2)
验 22 ~42 d 采用 2 ×2 因子设计,将每种磷源按福美双的添加水平不同再分为 2 个处理(福美双
水平为 0 和 100 mg/kg),每个处理 3 个重复,每个重复 10 只鸡. 福美双组在基础饲粮中添加
100 mg /kg 福美双,于 22 ~28 d 饲喂,然后换喂对应不含福美双饲粮. 结果表明:1) 组 MDCP 肉
与磷酸氢钙 的共结晶结 ( dicalciumphosphate,DCP)
合物,呈颗粒状Βιβλιοθήκη 是一种水溶性磷酸盐与枸溶性磷酸盐相结合的新型饲料添加剂[1]。 肉鸡胫骨软骨
发育不良 是造成肉鸡 ( tibiadyschondroplasia,TD)
腿病的主要因素,肉鸡腿病每年给美国肉鸡产业
造成 8 000 万到 1.2 亿美元的损失[2] ,因此,研究
鸡第 35 天 TD评分相对 DCP组有降低的趋势(P=0.09),但磷源对肉鸡第 28 和 42 天 TD评分
影响差异不显著(P>0.05). 福美双显著升高了肉鸡第 28、35 和 42 天 评分 TD ( P<0.05).
2)福美双和磷源对肉鸡第 35 天胫骨灰分、钙和磷含量交互效应显著(P<0.05). 福美双诱导
条件下,MDCP组肉鸡第 35 天胫骨灰分、钙、磷含量显著高于 组 DCP ( P<0.05). 组第 3) DCP
35 天血清甲状旁腺素含量高于 组 MDCP (P=0.12). 由此可见,相对 DCP,MDCP对福美双诱
导的 TD发生有一定减缓作用,且与肉鸡骨骼钙、磷代谢密切相关. 2 种磷源对肉鸡最终 TD评
MDCP对肉鸡 TD的影响对其生产应用具有很大
的现实意义。 MDCP能够代替 DCP作为蛋鸡的磷
源[3] ,以生产性能为考察指标,其在蛋鸡上的相对
生物学效价也较 要 DCP 高[4] ,但 对 MDCP 肉鸡
TD的影响尚未见任何报道。 饲粮电解质平衡可 能通过改变血液酸碱平衡从而影响肉鸡 的 TD 发 生[5] 较 ,MDCP DCP酸性要强,二者对肉鸡 TD发 生的影响可能不同。 自然条件下,肉鸡 TD发生率 较低,不同磷源对肉鸡 TD的影响差别较小。 福美 双能够显著升高肉鸡 发 TD 病率[6 -7],用福美双建 立肉鸡 TD模型,从而有利于比较不同磷源对缓解 肉鸡 TD发生的作用。 本试验通过比较不同磷源 对福美双诱导的肉鸡 及 TD 骨骼钙、磷代谢的影 响,为 在 MDCP 肉 鸡 上 的 生 产 应 用 提 供 试 验 依据。
(四川农业大学动物营养所,教育部抗病营养重点实验室,雅安 625014)
摘 要: 本试验旨在研究磷酸一二钙(MDCP)和磷酸氢钙(DCP)对福美双诱导的肉鸡胫骨软
骨发育不良(TD)及骨骼钙、磷代谢的影响. 选取 1 日龄科宝( Cobb) 肉雏鸡 120 只,试验 1 ~
21 d采用 2 因子设计,按磷源的不同分为 2 个处理(磷源 和 DCP MDCP),每个处理 60 只鸡;试
分影响差异不显著.
关键词: 磷源;福美双;胫骨软骨发育不良;肉鸡
中图分类号:S831
文献标识码:A
文 章 编 号 :1006 -267 X( 2012 ) 09 -1674 -09
磷 酸 一 二 钙 ( mono-dicalcium phosphate, MD-
是磷酸二氢钙 CP)
( monocalcium phosphate,MCP)
动物营养学报 2012,24(9):1674-1682
ChineseJournalofAnimalNutrition
doi:10.3969/j.issn.1006-267x.2012.09.009
磷源对福美双诱导的肉鸡胫骨软骨发育不良及 骨骼钙、磷代谢的影响
涂广运 白世平 张克英* 彭 西 丁雪梅 曾秋凤
矿物质预混料 Mineralpremix1),2)
合计 Total
营养水平 Nutrientlevels
代谢能 ME/( MJ/kg)
粗蛋白质 CP
赖氨酸 Lys
蛋氨酸 Met
蛋氨酸 +胱氨酸 Met+Cys
钙 Ca
总磷 TP
有效磷 AP
50 .83 39 .56
4 .62 1 .95
收稿日期:2012 -03 -09
基金项目:四川省教育厅重大培育项目;中国磷营养研究中心(川恒化工)和四川农业大学双支团队资助
作者简介:涂广运(1986-),男,河南驻马店人,硕士研究生,从事矿物元素研究。 E-mail: yuntu 1986@
张克英 教授 博士生导师 *通讯作者: , ,
,E-mail: zkeying@
9期
涂广运等:磷源对福美双诱导的肉鸡胫骨软骨发育不良及骨骼钙、磷代谢的影响
1675
1 材料与方法
1.1 试验材料
钙含量为 磷含量为 DCP(
19 .31 % ,
17 .96 % )
购自四川龙莽集团,MDCP(钙含量为 16.10 磷 %,
含量为 20.87%)购自川恒化工有限公司,福美双
购自成都贝斯特试剂有限公司,分析纯。 1.2 试验动物及基础饲粮
选取 1 日龄科宝(Cobb) 肉雏鸡 120 只,购自 成都温江正大鸡场。 基础饲粮参照中华人民共和 国农业行业标准(NY/T33-2004) 中白羽肉鸡营 养需要配制,粉状料,其组成及营养水平见表 1。
表 1 基础饲粮组成及营养水平(风干基础)
Table1 Composition and nutrientlevelsofbasaldiets( air-dry basis)
%
项目 Items
1 ~21 d 1 to 21 days
组 DCP
组 MDCP
22 ~42 d 22 to 42 days
组 DCP
组 MDCP
Group DCP
Group MDCP
相关文档
最新文档