普通微生物的形态观察

培 养 基
培养基是人 工配制的适合微 生物生长繁殖或 积累代谢产物的 营养基质，用以 培养、分离、鉴 定、保存各种微 生物或积累代谢 产物。
超净工作台
超净工作 台是进行微生 物操作最常用 的仪器。其空 气过滤装置和 紫外杀菌灯管 保证超净工作 台内是一个无 菌的环境。
制作平板培养基
接 种
无菌操作
将玻片置于显微镜下观察
大肠杆菌形态
放线菌形态
酿酒酵母形态
青霉形态
革兰氏染色
革兰氏染色法是细菌学中最 重要的鉴别染色法，可将细菌分 成革兰氏阳性菌（染色蓝紫色） 和革兰氏阴性菌（染色红色）两 大类。原理是由于这两类菌细胞 壁的结构和组成不同。
步骤：
制片（涂片、干燥、固定） 初染（结晶紫，1-2min） 媒染（碘液，1min） 脱色（95%乙醇，滴洗） 复染（番红，2min） 干燥 镜检
二、实验原理
微生物与人的关系：
1. 地球上存在的CO2 90%以上是微生物分 解有机物产生的。 2. 一个成人胃肠道内容物中约有1～2公斤 微生物细胞。 3. 常用抗生素约有80-90%由微生物产生。
常见的四大类微生物
微生物 原核微生物 细菌 真核微生物 霉菌
放线菌 酵母菌
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自然界中各种微生物是混杂生活 在一起的。在实验室中，可以利用特 定的培养基及特殊的培养方法对微生 物进行纯培养。不同的微生物其培养 特征不同。由于微生物细胞小而透 明，因此必须借助显微技术和染色技 术才能进行细胞结构和形态的观察和 研究。
恒温培养箱
三 实验内容
(一) 微生物的培养及菌落形态观察
微生物的菌落形态
单个微生物细胞在适宜的固体培养 基表面或内部生长、繁殖到一定程度 可以形成肉眼可见的、有一定形态结 构的子细胞生长群体，称为菌落。当 众多菌落连成一片时，便成为菌苔。 不同微生物在特定培养基上生长形成 的菌落或菌苔一般都有稳定的特征， 可以成为对该微生物进行分类、鉴定 的重要依据。
Hale Waihona Puke Baidu
简单染色法
这是最常用的染色方法。由 于细菌在中性环境下一般带负电 荷，所以通常采用一种碱性染料 如美蓝、碱性复红、结晶紫等进 行染色。美蓝还是一种活体染 料，用它可对活细胞和死细胞进 行鉴别。
步骤：
涂片干燥 固定 染色 （美蓝，1-2min）镜检
超净台上点燃酒精灯
滴加一滴生理盐水于玻片上
灼烧接种棒灭菌
挑取一环菌体
使菌体与载玻片上的水滴充分混匀 涂成薄膜
使涂片在室温中自然干燥 （也可用电吹风吹干）
烤片：涂菌一面朝上，载玻 片过微火2‾3次
玻片不能直接在火上烤，否则细胞形态毁坏！
滴加染色液覆盖于涂菌处，染色约2分钟
水洗多余的染液
水流不能直接冲洗在涂菌的地方！
标本自然晾干（也可用电吹风吹干）
微生物的形态观察
What is true for E.Coli is also true for elephant , only more so .
一、实验目的
1. 学习无菌操作技术。 2. 学习微生物培养的基本知识， 比较四大类微生物的菌落形态。 3. 学习微生物涂片、染色的技 术，初步认识微生物的细胞形 态。
细 菌
大肠杆菌
单菌落
放线菌
培养正面观
培养背面观
放线菌 5460
酵母菌
菌苔 菌落
酿酒酵母
酵母菌
红酵母
霉 菌
黑曲霉
霉 菌
青霉
（二）微生物的染色及细胞形态观察
微生物个体微小，且较透明，研究 其形态必须借助染色法使菌体着色，与 背景形成对比，才能在显微镜下进行观 察。根据实验目的的不同，可分为简单 染色法、鉴别染色法和特殊染色法等。
枯草杆菌
大肠杆菌
结论：
大肠杆菌：红色，G－ 枯草杆菌：蓝紫色，G+
四、问题与分析
1. 在日常生活中，微生物给我们带 来了哪些有益的影响和有害的影 响? 2. 试比较四大类微生物的菌落和细 胞形态特征。
实验全程录像