一轮复习 人教版 微生物的培养技术及应用 作业

2023届一轮复习人教版微生物的培养技术及应用作业
[基础达标]
1．下列实验室培养微生物的操作措施中，不能获得较纯菌种的是() A．土壤样品灭菌处理后进行稀释涂布分离纯化
B．培养皿、接种工具和培养基等进行灭菌
C．操作过程需在酒精灯火焰旁进行并在适宜条件下培养
D．如果是固体培养基，则需把培养皿倒置
答案：A
2．(2022·山东泰安一模)养殖池中存在的有毒物质主要是氨及亚硝酸，这两种物质可由硝化细菌吸收利用。

在“养殖池底泥中硝化细菌的分离和计数”实验中，下列说法正确的是()
A．需要配制添加一定浓度铵盐的牛肉膏蛋白胨培养基，以筛选硝化细菌B．应对采集底泥使用的工具进行灭菌，全部接种过程均需在酒精灯火焰旁进行
C．采用平板划线法进行分离和计数时，还需与未接种的空白培养基同时培养
D．若空白对照组上长出了菌落，需要在实验组数据的基础上减去空白对照组的菌落数
答案：B
3．(2022·沈阳高三模拟)下图为实验室培养和纯化酵母菌的部分操作步骤，下列说法正确的是()
A．步骤②中打开含菌种的试管后需将试管口通过酒精灯火焰灭菌
B．步骤④中接种环共需5次灼烧处理
C．将接种后的图④平板放入培养箱中培养时无须倒置
D．①②③步骤操作时并不都需要在酒精灯火焰旁进行
解析：选A。

打开含菌种的试管需通过火焰灭菌，取出菌种后需再次通过火焰，塞上棉塞才可以，A正确；每次接种前后都要灼烧接种环，因此完成步骤④
中的5次划线操作共需灼烧接种环6次，B错误；划线接种结束后，将平板倒置后放入培养箱中培养，这样可以防止表面的水分过快挥发和防止皿盖上的水珠落入培养基造成污染，C错误；①②③步骤操作时都需要在酒精灯火焰旁进行，防止被杂菌污染，D错误。

4．(2022·山东日照一模)实践是动手和动脑的过程，也是解决实际问题的过程。

下列有关生物技术实践的叙述，错误的是()
A．需灭菌的试管等玻璃器皿可用牛皮纸包好放入干热灭菌箱灭菌
B．倒平板后需要持续间歇晃动，以保证固体培养基的表面平整
C．平板划线时，每次转换划线角度后都需要灼烧接种环再划线
D．微生物实验材料在丢弃前一定要进行灭菌处理以免污染环境
答案：B。

倒平板时培养基仍然是液态的，不需要通过晃动来保证培养基表面平整，B错误。

5．(2022·山东聊城开学检测)某些土壤细菌可将尿素分解成CO2和NH3，供植物吸收和利用。

下列关于土壤中分解尿素的细菌的分离和计数的叙述，正确的是()
A．分解尿素的细菌是以尿素的分解产物CO2为碳源的
B．倒平板时应将打开的培养皿皿盖放到一边，以免培养基溅到皿盖上
C．培养基中KH2PO4等的作用之一是作为缓冲剂保持pH稳定
D．若实验组菌落平均数为37个/平板，空白对照平板上有3个菌落，则本组菌落数的平均值为34个/平板
解析：选C。

分解尿素的细菌是异养型细菌，不能以CO2为碳源，A错误；倒平板时，正确的做法是用左手拇指和食指将培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙，右手将锥形瓶中的培养基(10～20 mL)倒入培养皿，左手立即盖上培养皿的皿盖，B错误；无机盐可以作为缓冲剂保持细胞生长过程中pH稳定，所以培养基中KH2PO4等的作用之一是作为缓冲剂保持pH稳定，C正确；在完全正确的操作情况下，空白对照组中不应出现菌落，若空白对照组出现菌落，说明操作过程中
存在杂菌污染，属于实验失误，所有实验数据均不应采用，D错误。

6．(2022·山东德州一模)尿酸氧化酶能分解尿酸(C5H4H4O3)，为获取尿酸氧化酶高产菌株用以研制治疗高尿酸血症的酶类药物，科研人员从海洋泥土中取样后富集培养，3天后吸取培养液梯度稀释到1×10－6，然后接种到固体培养基上分离培养。

挑取单菌落检测尿酸氧化酶的酶活性(用每分钟转化1 μmol尿酸所需要的酶量表示)，结果如下表所示。

下列分析错误的是()
A.
B．需要在以尿酸为唯一氮源的固体培养基上分离培养
C．菌株3的酶活性最高，可作为实验所需的目的菌
D．分离培养时采用了平板划线法进行接种
解析：选D。

为避免杂菌污染，应在无菌条件下富集培养，A正确；实验目的是获取尿酸氧化酶高产菌株，故需要在以尿酸为唯一氮源的固体培养基上分离培养，B正确；酶活性用每分钟转化1 μmol尿酸所需要的酶量表示，故所需酶量越少，说明酶活性越大，由表可知菌株3的酶活性最高，故其可作为实验所需的目的菌，C正确；分离培养时采用了稀释涂布平板法进行接种，D错误。

7．防止外来杂菌的入侵，获得纯净的培养物，是研究和应用微生物的前提。

下列叙述错误的是()
A．实验室里可以用紫外线或化学药物进行消毒
B．接种环、接种针等金属用具，直接在酒精灯火焰的内焰部位灼烧灭菌C．在实验室中，切记不可吃东西、喝水，离开实验室时一定要洗手，防止被微生物感染
D．使用后的培养基丢弃前一定要进行灭菌处理，以免污染环境
解析：选B。

灼烧灭菌应该在酒精灯火焰的充分燃烧层(外焰部位)灼烧，B 错误。

8.(2022·山东青岛期末)细菌性肺炎一般需要注射或口服抗生素进行治疗。

当细菌出现耐药性时，疗效下降。

金黄色葡萄球菌(SAU)是细菌
性肺炎的病原体之一。

A、B、C、D四种抗生素均可治疗SAU
引起的肺炎。

为选出最佳疗效的抗生素，研究者分别将含等剂
量抗生素A、B、C、D的四张大小相同的滤纸片a、b、c、d
置于SAU均匀分布的平板培养基上，在适宜条件下培养48 h，结果如图所示。

下列相关叙述不正确的是()
A．可选择牛肉膏蛋白胨培养基，对SAU进行扩增培养
B．对实验使用的培养皿进行灭菌，可以采用干热灭菌的方法
C．A、B、C、D四种抗生素，抑菌效果最佳的是抗生素D
D．滤纸片b周围透明圈中出现一菌落，可能是该菌落中的SAU发生了基因突变
解析：选C。

可选择牛肉膏蛋白胨培养基培养SAU，A正确；干热灭菌法适用于玻璃器皿、金属用具等，B正确；A、B、C、D四种抗生素均可抑制SAU的增殖，所形成的透明圈越大，说明抑制效果越强，因此抑菌效果最佳的是抗生素A，C错误；滤纸片b周围透明圈中出现一菌落，说明抗生素不能抑制该菌落的生命活动，则可能是该菌落中的SAU发生了基因突变，D正确。

9．(2022·山东济宁一模)餐厨废水含有丰富的糖类、蛋白质等有机物，研究者将三种细菌单独或混合接种于餐厨废水培养液中，通过测定菌悬液细胞密度(结果如下表所示)研究三者的关系，以期为利用餐厨废水制备复合菌肥的研究提供依据。

下列叙述错误的是()
组别
细胞密度/
(×107cfu·mL－1)菌株对照组
单独培
养组
三种细
菌混合
培养组
解磷巨大芽孢杆菌
08.498.24
圆褐固氮菌 5.09 3.35解钾胶质芽孢杆菌 2.81 1.41
注：cfu·mL－1指每毫升样品中培养出的菌落数。

A．餐厨废水中的有机物为表中细菌提供碳源、氮源等营养物质
B．对照组的培养液为餐厨废水
C．可用稀释涂布平板法计算不同条件下的活菌数
D．由结果可知，解磷巨大芽孢杆菌的竞争能力较强
解析：选B。

餐厨废水含有丰富的糖类、蛋白质等有机物，为表中细菌提供碳源、氮源等营养物质，A正确；对照组的培养液是经过灭菌处理的餐厨废水或者无菌水，B错误；计算不同条件下的活菌数，可用稀释涂布平板法，C正确；三种细菌混合培养组中，解磷巨大芽孢杆菌的菌落数最多，说明解磷巨大芽孢杆菌的竞争能力较强，D正确。

10．下表是某公司研发的一种培养大肠杆菌的培养基配方，请根据表格和所学知识回答下列相关问题：
若要用上述培养基来筛选出土壤中的尿素分解菌，培养基的营养成分必须怎样更改？____________。

(2)图1和图2是培养大肠杆菌的结果图，则获得图2效果的接种方法是________________。

运用图1所示接种方法统计的菌落数常常比活菌的实际数目少，其原因是________________________________________________。

(3)在微生物培养的过程中，为防止杂菌污染，需要对培养基和培养皿进行________；操作者的双手需要进行清洗和________。

答案：(1)鉴别将蛋白胨改成尿素(2)平板划线法当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落(3)灭菌消毒
[素养提升]
11．(不定项)下列有关“土壤中分解尿素的细菌的分离与计数”实验的叙述，正确的是()
A．只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素
B．将实验组和对照组平板倒置，25 ℃恒温培养1～2 d
C．接种时不能划破培养基，否则难以达到分离单菌落的目的
D．倒置平板可防止培养基被滴落的水珠污染和防止培养基中水分过快蒸发答案：ACD
12．(不定项)下表所示为某培养基的配方，下列叙述正确的是()
A.
B．微生物在该培养基表面形成肉眼可见的菌落
C．根据培养基的配方可知，该培养基培养的微生物的同化作用类型是异养型
D．固体培养基中加入少量水即可形成液体培养基
解析：选BC。

从培养基成分来看，题表所示的培养基配方中有琼脂，因此属于固体培养基，A、D错误；微生物在固体培养基表面生长，形成肉眼可见的菌落，B正确；该培养基中的葡萄糖可作为有机碳源，因此其培养的微生物的同化作用类型是异养型，C正确。

13．(不定项)(2022·山东济宁一模)下图表示研究人员在实验室中使用的分批培养细菌的方法，下列叙述正确的是()
A．尿素分解菌可利用培养基中的尿素是因为能合成脲酶
B．在酒精灯火焰附近打开皿盖，用接种环在培养基表面迅速划3～5条平行线，灼烧接种环后再划线
C．液体选择培养基通常可用于选择培养，增加目标菌种的浓度
D．将锥形瓶放在摇床上振荡培养能提高溶氧量和养料的利用率
解析：选ACD。

尿素分解菌可利用培养基中的尿素是因为能合成脲酶，而其他微生物不能合成脲酶，故不能分解尿素，A正确；在酒精灯火焰附近将皿盖打开一条缝隙，用接种环在培养基表面迅速划3～5条平行线，盖上皿盖，灼烧接种环，待其冷却后再划线，B错误；液体选择培养基通常可用于选择培养，增加目标菌种的浓度，C正确；将锥形瓶放在摇床上振荡培养既能提高溶氧量，提高有氧呼吸的速率，又能提高养料的利用率，D正确。

14．(不定项)大肠杆菌是人和动物肠道寄生菌，在一定条件下会引起胃肠道等局部组织感染。

检验水样中大肠杆菌数目是否符合生活饮用水卫生标准，常用滤膜法测定，其操作流程如下图所示。

大肠杆菌的代谢产物能与伊红美蓝(EMB 培养基的指示剂)反应，菌落呈黑色。

下列对实验操作的分析，错误的是()
A．测定前，滤杯、滤膜和滤瓶均可用干热灭菌法灭菌处理
B．过滤操作要在酒精灯火焰旁进行，防止杂菌污染
C．将过滤完的滤膜紧贴在EMB培养基上，完成大肠杆菌的接种操作
D．EMB培养基属于选择培养基，只有大肠杆菌能正常生长并形成黑色菌落解析：选D。

干热灭菌法适用于需要保持干燥的玻璃器皿、金属用具等的灭
菌，对滤杯、滤膜和滤瓶可用干热灭菌法进行灭菌；酒精灯火焰附近有一无菌区域，在酒精灯火焰附近操作可以避免杂菌污染；由于过滤完后细菌黏附在滤膜上，将过滤完的滤膜紧贴在EMB培养基上，可以将黏附的菌种接种在培养基上；大肠杆菌的代谢产物能与伊红美蓝反应，菌落呈黑色，说明EMB培养基属于鉴别培养基。

15．(不定项)鞣质(单宁)是一种具有止血、杀菌等作用的中药成分，在植物中广泛分布。

为探究鞣质对自然界中生存条件相同的甲、乙、丙三种细菌的杀伤能力，某科研小组将等量的甲、乙、丙三种细菌接种到含有适量鞣质的完全培养基和不含鞣质的完全培养基上，在相同且适宜的条件下培养一段时间，观察菌落大小，结果如下图所示。

下列相关说法正确的是()
A．实验中用的培养皿等玻璃器材，可以采用干热灭菌的方法
B．由图中结果可知，对鞣质的抵抗能力乙细菌>丙细菌>甲细菌
C．本实验还需设置未接种细菌的含鞣质的完全培养基作为空白对照
D．接种前，可以用显微镜计数法判断三种细菌接种量是否相等
解析：选ABD。

对培养皿等玻璃器材进行灭菌时，可以采用干热灭菌的方法，干热灭菌法一般用于耐高温、需要保持干燥的物品，如玻璃器皿、金属用具，A正确；可以观察对照组与实验组中菌落的直径变化来衡量三种细菌对鞣质的抵抗能力，抵抗能力越强，菌落直径变化越小，B正确；为排除杂菌污染，本实验还需设置未接种细菌的不含鞣质的完全培养基和未接种细菌的含鞣质的完全培养基作为空白对照，C错误；显微镜计数法和稀释涂布平板法是测定微生物数量的常用方法，接种前，可以用显微镜计数法判断三种细菌接种量是否相等，D正确。

16．(2020·高考江苏卷)产脂肪酶酵母可用于含油废水处理。

为筛选产脂肪酶
酵母菌株，科研人员开展了相关研究。

请回答下列问题：
(1)常规微生物实验中，下列物品及其灭菌方法错误的是________(填编号)。

(2)
__________________后，获得细胞密度不同的菌悬液。

分别取0.1 mL菌悬液涂布在固体培养基上，其中10倍稀释的菌悬液培养后平均长出了46个酵母菌落，则该样本中每克土壤约含酵母菌________个。

(3)为了进一步提高酵母菌产酶能力，对分离所得的菌株，采用射线辐照进行________育种。

将辐照处理后的酵母菌涂布在以________为唯一碳源的固体培养基上，培养一段时间后，按照菌落直径大小进行初筛，选择直径________的菌落，纯化后获得A、B两突变菌株。

(4)在处理含油废水的同时，可获得单细胞蛋白，实现污染物资源化。

为评价
A、B两菌株的相关性能，进行了培养研究，结果如下图所示。

据图分析，应选择菌株________进行后续相关研究，理由是______________________________________________________。

解析：(1)涂布器一般用灼烧灭菌法或干热灭菌法进行灭菌。

(2)99 mL无菌水中加入1.0 g土壤制成的菌悬液为100 mL，取稀释10倍后的菌悬液0.1 mL涂布平板，平板上的平均菌落数为46，则每克土壤约含酵母菌46÷0.1×10×100 ＝4.6×105(个)。

(3)辐射可以提高基因突变的频率，利用射线辐照进行的育种为诱变育种。

本实验的目的是筛选产脂肪酶的菌株，所用的培养基应该以脂肪(或油
脂)为唯一碳源；最终形成的菌落直径越大，形成该菌落的菌株分解脂肪(或油脂)的能力越强，生产脂肪酶的能力也越大。

(4)由图可知，相对于菌株A，菌株B的增殖速度更快，降解脂肪能力更强；根据题干信息“在处理含油废水的同时，可获得单细胞蛋白”可进一步推知菌株B处理含油废水时可得到更多的单细胞蛋白，故菌株B更适合作为后续研究的材料。

答案：(1)④(2)梯度稀释 4.6×105(或460 000)
(3)诱变脂肪(或油脂)较大(4)B该菌株增殖速度快，单细胞蛋白产量高；降解脂肪能力强，净化效果好。