气质联用法测定生食水产品中的挥发性N-亚硝胺

气质联用法测定生食水产品中的挥发性N-亚硝胺
陈彬;丁红梅;杨兴龙;陈刚
【摘要】利用二氯甲烷提取腌制生食水产品中的挥发性N-亚硝胺,即:N-二甲基亚硝胺(ND MA)、N-二乙基亚硝胺(NDEA)、N-亚硝基吡咯烷(NPYR)、N-二丙基亚硝胺(NDPA).利用气质联用仪采用选择离子法(SIM)进行定性定量检测.本检测方法前处理简单快捷,易于操作,线性相关系数分别可达0.999 1、0.999 1、0.999 0、
0.999 5;线性范围分别可达0～250 μg/mL:方法重现性良好,其RSD可达1.49%～
1.94%;回收率可达90%～105%;灵敏度高,检测限分别为0.04 μg/kg、0.025
μg/kg、0.05μg/kg、0.01 μg/kg.
【期刊名称】《河南工业大学学报（自然科学版）》
【年(卷),期】2010(031)006
【总页数】4页(P67-69,73)
【关键词】挥发性亚硝胺;气质联用;选择离子法
【作者】陈彬;丁红梅;杨兴龙;陈刚
【作者单位】南通市产品质量监督检验所,江苏,南通,226005;南通市产品质量监督检验所,江苏,南通,226005;南通市产品质量监督检验所,江苏,南通,226005;南通市产品质量监督检验所,江苏,南通,226005
【正文语种】中文
【中图分类】TS201.6
亚硝基化合物是一类重要的环境致癌物,人们已经研究的 300多种亚硝基化合物中有 200多种是亚硝胺,其中 90%左右致癌作用已在大量的动物试验中得到证实[1].亚硝胺由于相对分子质量不同,可以表现为蒸气压力大小不同,能够被水蒸气蒸馏出来并不经衍生化直接经仪器测定的为挥发性亚硝胺,否则称为非挥发性亚硝胺[2].我国制订了部分亚硝胺检测方法和限量标准,即GB/T5009.26-2003《食品中 N-亚硝胺类的测定》和 GB2762-2005《食品中污染物限量》对海产品和肉制品中的 N-二甲基亚硝胺、N-二乙基亚硝胺做了限量要求.在 GB/T5009.26-2003中方法 1中采用气相色谱 -热能分析仪检测,虽然检测灵敏度高,但是仪器检测面窄,不适合推广检测;方法 2中采用蒸馏法前处理复杂,耗时长.目前还见有报道用 GC/NPD[3],以及 SPME-GC/MS[4]等方法检测的,但是一般都前处理复杂或成本高.本法前处理简单,耗时少,溶剂可以回收重复利用,成本低,检测限能满足定量要求.
二氯甲烷:分析纯,用全玻璃蒸馏装置重蒸馏;无水硫酸钠:分析纯;N-二甲基亚硝胺标准品、N-二乙基亚硝胺标准品、N-亚硝基吡咯烷标准品、N-二丙基亚硝胺标准品:上海安谱.
Agilent 7890A/5975C气相色谱 -质谱仪:美国 Agilent公司,配备 7683B自动进样器、增强型化学工作站;色谱柱:HP—5MS毛细管色谱柱(30 m×0.25 mm
×0.25μm);超声波清洗仪KQ5200DA:常州诺基仪器有限公司.
1.3.1 样品前处理
准确称取已粉碎并混匀的样品 20.0 g,加入适量的无水硫酸钠混匀,用重蒸二氯甲烷超声提取 3次,每次 40 mL.合并有机溶剂相,经无水硫酸钠过滤脱水后,在40℃水浴下抽真空浓缩,定容至 1.0 mL,备用.
1.3.2 标准溶液处理
N-亚硝胺标准使用液:准确称取 4种N-亚硝胺标准品 0.1 g(精确到 0.000 1 g),用二氯甲烷定容至 100 mL,得 N-亚硝胺储备液,浓度 1 mg/mL.
1.3.3 色谱条件
HP—5MS毛细管色谱柱;进样口温度200℃;分流进样,分流比 5︰1;载气为氦气 (纯度99.999%),流速 1 mL/min;程序升温:40℃下保持 1 min,以9 ℃/min升至
200 ℃,保持 1 min,全部程序时间 19.7 min,自动进样,进样量1μL.
1.3.4 质谱条件
电子轰击 (EI)离子源;电子倍增器电压1 301 eV;电离电压 70 eV;离子源温度230℃;四极杆温度150℃;接口温度250℃;SI M/全扫描(SCAN)采集模式,扫描质量范围:m/z30～150;采样频率 2.
采用保留时间和MS/SCAN方法来定性.
标样和样品溶液同时上机测定,分别进样1 μL.利用选择特征离子 N-二甲基亚硝胺:m/z(42、43、74);N-二乙基亚硝胺:m/z(42、56、102);N-亚硝基吡咯
烷:m/z(41、68、100);N-二丙基亚硝胺:m/z(70、43、130),采用外标法进行定量计算.
标准品的总离子图及各个标准品的质量扫描图见图 1～图 5.
用重蒸二氯甲烷配制 4种挥发性 N-亚硝胺标准溶液系列:0μg/mL、1μg/mL、
5μg/mL、50μg/mL、100μg/mL 、250μg/mL,利用定量离子峰面积绘制标准曲线.
取 4种生食水产品样品进行加标回收试验,分别在样品中添加1.00μg/kg和
2.00μg/kg的混合标准品,按照样品处理方法,经过气质联用仪检测,得到的回收率结果见表2.
取 4种生食水产品样品各进行 6次样品处理进行测定.
取10μg/mL的N-亚硝胺的标样,进样量为1μL,测得信噪比,检测限以 3倍噪声计算,得到N-亚硝胺的仪器检测限;以 20.0 g称样量,最后定容体积为 1 mL,进样量
1μL(同标样)计,得本方法的各个 N-亚硝胺检测限.
在试验过程中,用非程序升温即保持200℃、3种程序升温即40℃下保持 1 min,以9℃/min升至200℃,保持1 min;40℃下保持 1 min,以12℃/min升至200℃,保持1 min;40℃下保持 1 min,以5℃/min升至200℃,保持 1 min,做对比试验,从分离效果、程序所用时间,以及样品进入情况 3个方面选择了本文采用的程序升温方案.
本文中所建立的气相色谱 -质谱测定生食水产品中挥发性亚硝胺具有前处理简单快速,特异性强,重现性的 RSD小于 2%,回收率为 90%～110%,线性范围在 0～
250μg/mL之间,方法检测限为0.04μg/kg、0.025μg/kg、0.05μg/kg、
0.01μg/kg.该方法可作为应急食品安全事件的快速检测方法.
【相关文献】
[1] 许牡丹,毛跟年.食品安全性与分析检测[M].北京:化学工业出版杜,2003:23.
[2] 吴永宁.现代食品安全科学 [M].北京:化学工业出版社,2003:248-259.
[3] 吴烈钩.气相色谱检验方法 [M].北京:化学工业出版社,2000:127-129.
[4] 陶燕飞,黄红林,张桃芝,等.啤酒中 N-亚硝胺的 SPME-GC-MS分析 [J].分析测试学
报,2003,19(1):82-84.。