长白山软枣猕猴桃组织培养和快繁技术研究
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长白山软枣猕猴桃组织培养和快繁技术研究软枣猕猴桃(Actinidia arguta (Sieb. et Zucc.) Planch. ex Miq.),属猕猴桃科(Actinidiaceae),猕猴桃属(Actinidia),落叶大藤本,具有很高的营养价值和药用价值。
本文针对长白山软枣猕猴桃的组织培养进行研究,探讨提高野生软枣猕猴桃繁殖数量和质量的有效途径,为其苗木产业化生产、优良种质保存提供理论和技术支撑。
采用组培技术手段,应用均匀设计法,通过茎段直接再生芽苗和愈伤组织间接再生芽苗两个途径获得再生芽苗,进一步摸索一步成苗培养基的优化、以及利用节培法达到快速繁殖的目的,主要结论如下:1以带腋芽茎段为外植体直接再生芽苗,采用U<sub>10</sub>(10<sup>3</sup>)均匀试验设计,发现6-BA对腋芽萌发影响最大,其次是NAA,基本培养基浓度影响不显著,最佳培养基为
MS+NAA0.20mg·L<sup>-1</sup>+6-BA1.08mg·L<sup>-1</sup>,启动率超过91%。
2以MS+6-BA0.5mg·L<sup>-1</sup>+2,4-D1.0mg·L<sup>-1</sup>为诱导培养基,MS+6-BA2.0mg·L<sup>-1</sup>+NAA0.3mg·L<sup>-1</sup>为分化培养基,研究不同外植体对愈伤组织的诱导及分化,发现愈伤组织诱导比较好的外植体为茎段,且茎段愈伤组织是最佳的芽分化材料。
3茎段诱导愈伤组织采用U<sub>10</sub>(104)均匀试验设计,发现IAA
对诱导影响最大,其次是6-BA,2,4-D的影响最小,最佳培养基为
MS+6-BA1mg·L<sup>-1</sup>+IAA2mg·L<sup>-1</sup>+2,4-D0.1mg·L<sup>-
1</sup>,诱导率接近100%。
4诱导愈伤组织分化采用U<sub>10</sub>
(10<sup>3</sup>)均匀试验设计,发现6-BA对愈伤分化的影响明显大于NAA,最佳分化培养基为MS+6-BA1.96mg·L<sup>-1</sup>+NAA0.3mg·L<sup>-1</sup>,
分化率超过95%。
5一步成苗阶段采用U<sub>10</sub>(104)均匀试验设计,发现IAA对成苗率的影响最大,其次是IBA,GA<sub>3</sub>的影响最小,最适培养基为MS (改良)+
IAA0.22mg·L<sup>-1</sup>+IBA0.23mg·L<sup>-1</sup>+GA<sub>3</sub>1.1 4mg·L<sup>-1</sup>,成苗率达96%,有利于腋芽和根同时生长。
6用节培法进行快繁,转接到优化后的嫩茎段生根同时腋芽伸长生长的培养基MS(改良)+IAA0.22mg·L<sup>-1</sup>+IBA0.23mg·L<sup>-1</sup>+GA<sub>3</sub>1.1 4mg·L<sup>-1</sup>中进行节增殖和生根培养,发现28d为1个增殖周期,每瓶增殖系数平均达5以上。
7选择健壮的组培苗,打开培养瓶的封口膜,使生根苗在瓶内适应3d,移栽到腐烂松针、泥炭土和细河砂(2∶1∶1)的混合基质中,移栽成活率达82.5%。
试验中各项指标已达到快速繁育苗木的要求,其技术措施可以满足苗木组培生产的需要。