Bcl-6蛋白表达与非霍奇金淋巴瘤的 临床疗效及预后的相关性研究

Bcl-6蛋白表达与非霍奇金淋巴瘤的临床疗效及预后的相关性
研究
吴国武;曾娟紫
【摘要】摘要:目的:检测Bcl-6蛋白在非霍奇金淋巴瘤中表达,并研究其与临床疗效及预后的相关性.方法:随机收集128例非霍奇金淋巴瘤病例,并检测Bcl-6蛋白在每例患者非霍奇金淋巴瘤组织中的表达情况,与其临床病理特点相比较,分析其相关性；同时分析Bcl-6蛋白与非霍奇金淋巴瘤预后的相关性.结果:Bcl-6蛋白表达对总生
存期(OS),无瘤生存期(DFS)无显著影响；在不同IPI评分组中,Bcl-6蛋白表达差异
仅在中高危组的DFS及高危组OS、DFS中有显著性.且Bcl-6蛋白表达与完全缓
解(CR)与否无关.结论:Bcl-6蛋白表达是中高危非霍奇金淋巴瘤的预后预测指
标,Bcl-6蛋白的阳性表达是预后不良的标志.
【期刊名称】《赣南医学院学报》
【年(卷),期】2011(000)004
【总页数】2页(P552-553)
【关键词】乳腺癌;bcl-6蛋白;预后
【作者】吴国武;曾娟紫
【作者单位】广东省梅州市人民医院肿瘤内科,广东梅州514031;广东省梅州市人
民医院肿瘤内科,广东梅州514031
【正文语种】中文
【中图分类】R733.4
非霍奇金淋巴瘤(NHL)是我国恶性淋巴瘤的主要类型(所占比例达90%以上)，其发病率居高发肿瘤的第11～14位[1]。

研究非霍奇金淋巴瘤的发生发展机制，并进
一步揭示其与临床疗效以及预后之间的相关性，对于提高非霍奇金淋巴瘤的临床疗效具有重要意义。

Bcl家族成员众多，主要可以分为凋亡抑制基因和凋亡促进基因两大类，前者包括Bcl-2，Bcl-xl，Bcl-6等;后者主要有bax，bak，bad等。

Bcl-6是Bcl家族的重
要成员。

大量研究显示:Bcl-6的功能与抑制细胞凋亡有关[2－3]。

研究Bcl-6的表达与非霍奇金淋巴瘤的临床疗效以及预后的相关性具有重要意义。

本研究通过检测Bcl-6在非霍奇金淋巴瘤中的表达，研究Bcl-6的表达水平与非霍奇金淋巴瘤的临床疗效以及预后的相关性，现报告如下。

1 材料与方法
1.1 组织标本及试剂本研究收集2001～2003年非霍奇金淋巴瘤临床病例共128例，所有病例均按WHO 1999年提出的淋巴系统恶性肿瘤临床归类方案[4]均为
进展型非霍奇金淋巴瘤。

所有病例按国际预后指数(IPI)进行评分，并以此归纳为不同预后组。

所有病例均接受CHOP方案化疗4程或以上化疗。

所有患者均成功获
得其存档蜡块。

每个蜡块均按4 μm厚度行连续病理切片，每例病例均行HE染色，并用免疫组织化学检测Bcl-6的表达。

Bcl-6单克隆抗体均购自DAKO公司(丹麦);二抗及HRP
标记系统为免疫组化LSABkit、DAB显色系统、抗原修复液及苏木素衬染剂均购
自DAKO公司(丹麦);用2%APES防脱液对所有载玻片进行防脱片处理。

1.2 实验方法应用免疫组织化学LSAB法进行检测，方法如下:将准备就绪的石蜡
切片脱蜡入水，微波抗原修复后滴加一抗，37℃孵育过夜;滴加生物素标记的二抗，37℃孵育2 h，加辣根酶标记的链酶卵白素，37℃孵育1 h，PBS冲洗后DAB现
色，在显微镜下观测，在信噪比最佳时中止显色。

每批试验均设阳性对照和阴性对照:以PBS替代一抗为阴性对照;以已知的阳性片为阳性对照。

免疫组化结果评判:阳性反应:细胞质或细胞核(视不同研究抗体而不同)呈棕黄色细
颗粒状;每个标本随机检测5个以上视野。

数500个以上肿瘤细胞，按其阳性百分数分为5级，分别为－(0～20%)，±(21～40%)，+(41～60%)，++(61～80%)，+++(81～100%);其中－、±为阴性。

+为阳性，++为中度阳性，+++为强阳性。

1.3 统计学处理采用SPSS1
2.0统计软件进行数据处理。

2 结果
在检测的128例标本中，Bcl-6蛋白阳性表达61例，阴性67例;Bcl-6蛋白表达
的阳性率为47.7%(61/128)。

阳性信号呈深棕黄色，主要分布在细胞核中，阳性
细胞散在分布，淋巴滤泡和周边部位均有阳性细胞分布。

运用Kaplan-Meier生存分析计算阳性表达和阴性表达病例的总生存率、无瘤生存率，经log-rank检验差异未见显著性，P值分别为P=0.1098 和 P=0.0634。

按不同的IPI评分研究Bcl-6的表达对患者总生存期和无瘤生存期的影响，显
示:IPI评分低危时，Bcl-6阳性或阴性的患者其总生存期、无瘤生存期差异均无显
著性，P值分别为0.841和0.829。

在IPI评分中低危的患者中，Bcl-6阳性或阴
性的总生存期及无瘤生存期的差异均无显著性，其P值分别为:0.714和0.717。

IPI评分中高危的患者，Bcl-6阳性或阴性患者的总生存期差异无显著性(P=0.087)，而无瘤生存期的差异存在显著性(P=0.037)。

在IPI评分高危的患者，Bcl-6阳性或阴性的患者其总生存期的差异存在显著性(P=0.015)，无瘤生存期(P=0.04)差异存在显著性。

3 讨论
恶性淋巴瘤从部位上可起源于任何淋巴结和结外淋巴组织的免疫细胞。

在临床上，我们可以观察到同一病理学类型，即使有着相同到IPI评分，其临床疗效和预后也
可以截然不同。

患者个体之间的分子异质性是造成上述现象的原因。

从分子水平研究与恶性淋巴瘤不同亚型临床特征相关的肿瘤标记物，并以此对恶性淋巴瘤按照不同临床特征进行治疗前分类，不仅对病理学分类是个良好的补充，对于恶性淋巴瘤的临床治疗则有着更为直接的意义。

Offit等[5]于1989年率先发现并报道了9例弥漫性非霍奇金淋巴瘤存在
t(3;22)(q27;q11)，此后，恶性淋巴瘤中染色体3q27易位受到人们关注[6]。

1993年，4个不同的实验室几乎同时独立地克隆出位于染色体3q27断裂点附近的新的原癌基因bcl-6基因[7];Bcl-6基因异常是弥漫大B细胞淋巴瘤的最常见基因标志，可作为弥漫大B细胞淋巴瘤的诊断和化疗预后的一个肿瘤标记物，它对淋巴瘤化疗后微小残留灶的检测也具有重要的应用价值。

Chang CC等[8]研究显示:应用免疫组化方法检测包括Bcl-6在内的几种肿瘤标记物，可以较好地预测弥漫大B细胞淋巴瘤地预后，并且相对于IPI是独立地预后指标。

Braaten KM等[9]研究认为，Bcl-6蛋白表达与原发中枢的弥漫性大B细胞淋巴瘤的预后有显著相关性;Bcl-6蛋白表达预示OS的延长。

Lossos IS[10]选取了39例原发性弥漫大B细胞淋巴瘤病例(所有患者都接受过以蒽环类药物为基础的化疗)，分别应用real-time PCR和免疫组化方法检测其Bcl-6 mRNA的表达以及Bcl-6蛋白表达，结果表明:两种方法均显示Bcl-6蛋白或mRNA表达为弥漫大B细胞淋巴瘤的独立的预后指标，Bcl-6蛋白表达预示预后良好。

但也有相反的研究结果，Chang CC等[8]研究显示:对于中枢神经系统的弥漫大B细胞淋巴瘤Bcl-6蛋白表达是预后不良的肿瘤标记物。

我们研究显示:Bcl-6蛋白表达对OS，DFS无显著影响;在不同IPI评分组中，Bcl-6蛋白表达差异仅在中高危组的DFS及高危组OS、DFS中有显著性。

且Bcl-6蛋白表达与CR与否无关。

我们认为，目前对Bcl-6蛋白表达的研究均存在样本含量较小的缺点，因而，不同的研究得出的结论有较大差距，因此，尚待进一步研究。

参考文献:
【相关文献】
[1]朱梅刚.恶性淋巴瘤病理诊断学[M].广州:广东科技出版社，2003:114-115.
[2]Miura M，Zhu H，Rotello R，et al.Induction of apoptosis in fibro-blasts by IL-1 converting enzyme，a mammalial homolog of the C elegans cell death gene ceds[J].Cell，1993，75:653.
[3]Lazebnik YA，Kaufmann SH，Desnoyers D，et al.Cleavage of poly(-ADP-
ribose)polymerase by proteinase with properties like ICE[J].Nature，1994，371:346-347.
[4]Jaffe ES，Harris NL，Diebold J，et al.World Health Organization classi-fication of neoplastic diseases of the hematopoitic and lymphoid tissues:a progress report[J].Am J Clin Pathol，1999，111(Supp l1):8-12
[5]Offit K，Jhanwar S，Ebrahim SA，et al.t(3;22)(q27;q11):a novel translocation associated with diffuse non-Hodgkin＇s lymphoma[J].Blood，1989，74(6):1876.
[6]Ladanyi M，Offit K，Parsa NZ，et al.Follicular lymphoma with t(8;14)(q24;q32):a distinct clinical and molecular subset of t(8;14)-bearing lymphomas[J].Blood，1992，
79(8):2124-2130.
[7]Chen W，Lida S，Louie DC，et al.Heterologous promotors fused to Bcl-6 by chromosomal translocations affecting band 3q27 cause its deregulated expression during
B cell differentiation[J].Blood，1998，91(2):603-607.
[8]Chang CC，Kampalath B，Schultz C，et al.Expression of p53，c-Myc，or Bcl-6 suggests a poor prognosis in primary central nervous system diffuse large B-cell lymphoma among immunocompetent individuals[J].Arch Pathol Lab Med，2003，
127(2):208 －12.
[9]Braaten KM，Betensky RA，de Leval L，et al.BCL-6 expression predicts improved survival in patients with primary central nervous system lymphoma[J].Clin Cancer Res，2003，9(3):1063.
[10]Durnick DK，Law ME，Maurer MJ，et al.Expression of LMO2is associated with
t(14;18)/IGH-BCL2fusion but not BCL6 translocations in diffuse large B-cell
lymphoma[J].Am J Clin Pathol，2010，134(2):278-281.。