富马酸酮替芬分散片健康人体药代动力学特征及其生物等效性研究

富马酸酮替芬分散片健康人体药代动力学特征及其生物等效性研究
目的：研究富马酸酮替芬分散片健康人体药代动力学特征、相对生物利用度，并评价其生物等效性。

方法：选取20名健康男性受试者，采取二阶段交叉设计试验方法，分别给予单剂量口服富马酸酮替芬分散片（受试品）与富马酸酮替芬片（参比品）2 mg，采用高效液相色谱串联质谱法检测受试者血浆样品不同时刻血药浓度，并计算人体药代动力学参数及相对生物利用度。

结果：受试制剂与参比制剂的主要药动学参数：t1/2分别为（5.66±0.64）h、（5.82±0.72）h；tmax分别为（2.85±0.42）h、（3.15±0.53）h；Cmax分别为（401±53）ng·L-1、（390±64）ng·L-1；AUC0～36分别为（2848±129）ng·h·L-1、（2774±153）ng·h·L-1。

用面积法（AUC0～36）估算的受试制剂相对于参比制剂的生物利用度为（107.54±12.31）%。

结论：富马酸酮替芬分散片与富马酸酮替芬片的药代动力学参数相近，相对生物利用度为（107.54±12.31）%，具有生物等效性。

标签：富马酸酮替芬分散片，药代动力学，生物等效性
富马酸酮替芬为新型抗变态反应药物，可强效抗组胺及抑制过敏反应介质的释放。

富马酸酮替芬不仅可以抑制支气管周围黏膜肥大细胞释放白细胞三烯、组胺、血小板激活因子等炎症介质，还可抑制血清、抗原、钙离子介导的中性粒细胞与人嗜碱粒细胞释放出白三烯与组胺等[1-2]。

此外，富马酸酮替芬可通过调节CD细胞释放淋巴细胞活性，进而减少体内免疫球蛋白E的合成，起到抗炎效果。

故该药对多种哮喘病、过敏性鼻炎及湿疹等变态反应疾病均具显著疗效[3]。

本研究采用高效液相色谱串联质谱法对人血浆中的富马酸酮替芬浓度进行检测，旨在探讨富马酸酮替芬分散片健康人体药代动力学及生物利用度的特点，并评价其生物等效性，为临床合理、安全用药以及对富马酸酮替芬的进一步研究提供一定的依据，现报道如下。

1. 资料与方法
1.1一般资料
1.1.1 受试者
选取20例健康男性为受试者，受试前均自愿参加并签署知情同意书。

20名受试者无吸烟、喝酒史，无药物过敏史与慢性病史。

年龄24～34岁，平均年龄（25.3±2.4）岁，体质量56～69kg，平均（66.5±4.8）kg，身高170～181cm，平均（174.4±4.8）cm。

所有受试者均经生命体征、尿常规、心电图、血常规、胸透、消化道、精神系统及肝、肾功能等全面检查正常，试验前2周内未服用任何药物。

受试期间饮食清淡，禁止饮茶、咖啡，禁止剧烈活动。

本实验经伦理委员会批准同意。

1.1.2 仪器
API4000型液相色谱质谱联用仪；AB104电子分析天平；色谱柱ZorbaxXBD-C18柱；GS-15R贝克曼高速离心机；TG332A微量分析天平。

1.1.3 试剂及药品
山东绿因药业有限公司生产的富马酸酮替芬分散片（规格：1mg/片，批号：110101）作为受试制剂；上江苏恩华药业股份有限公司生产的富马酸酮替芬片（规格：1mg/片，批号：120613）做为参比制剂；富马酸酮替芬对照品由中国药品生物制品检定所提供，含量>99.0%；内标物盐酸苯海拉明由中国药品生物制品检定所提供，含量>99.4%；甲醇与乙腈为色谱纯；其余为分析纯。

1.2方法
1.2.1色谱、质谱条件
色谱柱：ZorbaxXBD-C18柱（4.6mm*150mm，5μm），流动相为乙腈-水-甲酸，流速0.4mL/min，柱温为室温。

质谱条件：正离子检测，离子源：离子喷雾离子化源；离子喷射电压：500V，温度：500℃；源内气体1（GS1，N2），流速：50a.u；气体2（GS2，N2），压力：10Pa；扫描方式：多重反应监测（MRM），DP电压微：70V；碰撞气压力：5Pa；定量分析时的碎片离子M/z310→M/z97（酮替芬）与M/z256→M/z167（内标物）；碰撞诱导解离（CID）电压33eV（酮替芬）与25eV（内标物）。

1.2.2血浆样品处理
取0.5mL血浆，加100？L内标溶液、100？L甲醇及100？LNa2CO3溶液，旋涡混匀，离心5min（3000r/min），取30μL上清液进行HPLC-MS/MS分析。

1.2.3实验方案
采取单剂量、双周期交叉试验设计，2次试验间隔1周，将20名受试者随机分为两组，每组10人。

用药前前12h进食清淡晚餐后禁食，于次日清晨口服受试制剂或参比制剂，单次服用剂量均为1mg，空腹温开水送服，服药后于室内休息。

用药后2h可饮水，4h进食统一低脂标准餐。

于服药前、服药后0.5、1、2、3、4、5、6、8、12、24、36h采集上肢静脉血5ml，置于无菌肝素抗凝试管内，3000r/min离心后取上层血浆，于-20℃冰箱中保存。

经1周清洗期后再依据同样方法服用受试制剂或参比制剂，并于相同时间点取血。

将采集的血浆采取高效液相色谱串联质谱法进行检测。

1.3 观察指标
观察两组制剂的药代动力学参数与富马酸酮替芬分散片的相对生物利用度。

2. 结果
2.1 药动学参数
将20名受试者服用富马酸酮替芬分散片与富马酸酮替芬片后的血药浓度数据应用BAPP2.0软件进行参数计算以及生物等效性分析，可见两种制剂的主要药代动力学参数比较无统计学差异（P>0.05）。

具体见表1。

2.2 相对生物利用度
以富马酸酮替芬分散片与富马酸酮替芬片0-t时间曲线下面积AUC0～36计算，富马酸酮替芬分散片相对于富马酸酮替芬片的生物利用度为（107.54±12.31）%。

2.3 生物等效性评价
将富马酸酮替芬分散片与富马酸酮替芬片的主要药代动力学参数Cmax、AUC经对数转换后行交叉实验方差分析，得出ln AUC0～36与ln Cmax在制剂间比较无统计学差异（P>0.05）。

进行双单侧t检验（α=0.05），AUC0～36的90%置信区间落在富马酸酮替芬片的93.9%～104.2%范围内；Cmax的90%置信区间落在富马酸酮替芬片的97.6%～108.5%范围内，富马酸酮替芬分散片的相对生物利用度为（107.54±12.31）%，由此可见，两制剂在人体内具有生物等效性。

3. 讨论
由于富马酸酮替芬制剂在口服后血浆中含量低，故紫外分光光度法与反相高效液相色谱法检测的灵敏度较低[4]。

为达到更高的灵敏性，多数研究采取的是液液萃取方法，但操作起来较为复杂。

故本研究采用了液相色谱-质谱联用法进行检测，其线性范围能达10～4000ng/L，故相对于紫外分光光度法与反相高效液相色谱法，其灵敏性显著上升，可使血浆中酮替芬浓度在极微量情况下也能保证高度的准确性与可靠性。

而在流动相的选择上，本研究采取的是乙腈-水-甲酸，其中甲酸是有机酸，能增加酮替芬的溶解，有效降低了色谱柱的损耗，同时也增强了分析的灵敏性。

本研究采取梯形法计算AUC0～36，实测tmax、cmax，通过对药代动力学参数采取方差分析与双侧t检验，结果显示，富马酸酮替芬分散片与富马酸酮替芬片的药代动力学参数比较无统计学差异，可见两种制剂在人体内的处置情况接近。

受试制剂富马酸酮替芬分散片的相对生物利用度为（107.54±12.31）%。

经生物等效性评价，两种制剂在人体内分布、吸收、消除特征接近，具有生物等效性。

参考文献：
[1] 徐家良.酮替芬及其临床应用[J].中国医刊，1991，26（1）：48.
[2] 蔡鹏，吴珺.HPLC法测定富马酸酮替芬片的含量及含量均匀度[J].西北药
学杂志，2012，27（1）：43-44.
[3] 李苗，胡兵，单晓芸.HPLC法测定富马酸酮替芬片的含量[J].中国药师，2005，8（12）：1001-1002.
[4] 国家药典委员会编.中华人民共和国药典（二部）[S].北京：中国医药科技出版社，2010：1057.。