动物生理学-蛙心灌流实验报告

一、实验结果
1、正常心搏曲线
2、滴加0.65%NaCl溶液
3、滴加2%CaCl2溶液2滴
4、滴加1%KCl溶液
5、滴加0.01%Adr溶液
6、滴加0.01%Ach溶液
7、加2滴0.01%阿托品和0.01%Ach
二、分析与讨论
1、正常心搏曲线
从图中可以看出本组牛蛙心跳比较微弱，再结合本组牛蛙心脏外表上有不规则小黑斑这一点，可推断出这只牛蛙可能患有心脏疾病。

2、滴加0.65%NaCl溶液
滴加0.65%NaCl溶液后，心跳减弱，这是由于用0.65%NaCl溶液灌注蛙心时，灌注液中缺乏Ca2+，以致心肌细胞动作电位2期内流Ca2+减少，细胞质Ca2+浓度减少，心肌的收缩活动也随之减弱。

3、滴加2%CaCl2溶液2滴
加入CaCl2后，心跳略微增强。

细胞外Ca2＋在细胞膜上对Na＋内流有竞争性抑制作用，称为膜屏障作用。

Ca2＋浓度增高时，Na＋内流受抑制，细胞0期除极速度与幅度减小，使兴奋性及传导性均降低。

Ca2＋浓度增高使Ca2＋内流增多，心肌收缩能力增强。

4、滴加1%KCl溶液
滴加1％KCl后，曲线的频率逐渐减小，愈来愈疏，幅度也逐渐下降。

这是因为当细胞K+浓度增高时，K+与Ca2+有竞争性拮抗作用，K+抑制细胞膜对Ca2+的转运，使进入细胞内Ca2+减少，心肌的兴奋—收缩偶联过程减弱，心肌收缩力降低。

所以心搏曲线振幅减小。

5、滴加0.01%Adr溶液
滴加肾上腺素后，蛙心收缩增强，心脏舒张完全，描记的心搏曲线幅度明显增大。

其作用机理是，肾上腺素可与心肌细胞膜上的B受体结合，提高心肌细胞和肌浆网膜Ca2+通透性，导致肌浆中Ca2+浓度增高，使心肌收缩增强。

另外，肾上腺素还有降低肌钙蛋白与Ca2+亲和力，促使肌钙蛋白对Ca2+的释放速率增加，提高肌浆网膜摄取Ca2+的速度，刺激Na+与Ca2+交换，使复极期向细胞外排出Ca2+的作用加速，这样，将使心肌舒张速度增快，整个舒张过程明显增强。

6、滴加0.01%Ach溶液
滴加乙酰胆碱后，蛙心收缩减弱，心率减慢。

其机理为：乙酰胆碱与心肌细胞膜
M受体结合，一方面提高心肌细胞膜K+通道的通透性，促使K+外流，将引起：（1）窦房强细胞复极时K+外流增多，最大复极电位绝对值增大；Ik衰减过程减弱，自动除极速度减慢。

这两方面因素导致窦房自律性降低，心率减慢。

（2）复极过程中K+外流增加，动作电位2、3期缩短，Ca2+进入细胞内减少，使心肌收缩减弱；另一方面乙酰胆碱可直接抑制Ca2+通道，减少Ca2+内流，进而使心肌收缩减弱。

7、加2滴0.01%阿托品和0.01%Ach
与只加乙酰胆碱相比，加了阿托品后再加乙酰胆碱的牛蛙心脏跳动无明显变化。

因为阿托品能与心肌细胞膜的M胆碱受体结合，妨碍乙酰胆碱与其结合，从而起抗胆碱作用，但由于心脏本身的缘故使每次收缩的时间增加了。

且在整个实验过程中，该牛蛙的心脏时不时的会停止跳动，影响实验结果。

三、结论
本次实验首先要制备离体蛙心，制备好后，蛙心插管内的液体应随蛙心室的收缩和舒张活动而上下移动。

其实质是：在心室收缩时，心室容积减少，室内压升高，将心室内的液体压入插管内，管内液面上升；在心室舒张的时候，心室容积增大，心室内压减少，将插管内液体吸入心室，管内液面下降。

但是有时候蛙心插管内液面波动不明显，其主要原因有：(1)插管内尖端出现血凝块。

此时应用接有针筒的长吸管将血凝块吸出，并将新鲜的任氏液注入，直至血液颜色变浅；
(2)插管尖端不在心室腔内，而是在心房或者脉间结缔组织等地方。

解决方法为将插管重新插入心室；(3)插管进入心室腔内过深，以致尖端抵住了心室壁。

解决方法为将插管稍稍外提，使插管口正好处于心室腔内，且开口正对着液体喷射方向。

实验过程中，必须保持蛙心插管内液面高度的恒定，若蛙心插管内液面高度发生变化，心脏收缩曲线也会相应发生变化。

所以，在实验中保持最适的液面高度，是取得较好实验结果的前提。

实验探究了几种不同溶液对蛙心跳动的影响，证实了Na+、K+、Ca2+、肾上腺素、乙酰胆碱等均对心脏收缩活动具有一定影响。

Na+使心肌的收缩活动减弱，Ca2+使心肌收缩能力增强，K+使心肌收缩力降低，心搏曲线振幅减小，阿托品则能很好地抑制乙酰胆碱的作用。

但因为实验操作技术有限以及实验材料可能出现问题（这只牛蛙可能有心脏病），导致实验结果与理论情况不是很相符。