食品分析实验指导

食品分析实验指导 IMB standardization office【IMB 5AB- IMBK 08- IMB 2C】
食品分析与检验实验指导
目录
实验注意事项 (3)
食品中水分的测定 (4)
食品中灰分的测定 (5)
食品中蛋白质的测定 (8)
食品中脂肪的测定 (12)
食品中还原糖的测定 (15)
食品中可溶性固形物的测定 (18)
食品中可滴定酸的测定 (20)
食品中pH值的测定 (22)
食品中抗坏血酸的测定 (26)
食品中亚硝酸盐的测定 (28)
食品中铁的测定 (30)
食品理化检测基础知识 (31)
实验注意事项：
1.实验用水：除特殊要求外，一般为蒸馏水。

无二氧化碳水的制备：将蒸馏水煮沸
几分钟后冷却至室温。

所有试剂均使用分析纯试剂。

2.实验器具的洗涤：用肥皂水等洗涤剂认真刷洗实验器具的内外。

胶头滴管要拔掉
胶帽，刷洗滴管内部；移液管内刷洗不到，可将移液管插入洗涤剂中，用洗耳球反复吸取洗涤剂冲洗移液管内部，清水冲洗也依照此法；药勺每次使用前也要用洗涤剂刷洗干净。

个别洗不干净的器具要用超声波清洗。

洗涤剂刷洗后，用自来水冲洗7遍以上，再用洗瓶冲洗2次。

3.试剂的配制：要求准确配制的试剂用容量瓶定容，摇匀。

4.滴定管的选择：用盐酸、硫酸等酸性溶液滴定，使用酸式滴定管（带玻璃活塞
的）。

用氢氧化钠等碱性溶液滴定，使用碱式滴定管（带橡胶管的）。

用偏中性的溶液滴定，使用酸式或碱式滴定管都可以。

用碘液、硝酸银、2,6-二氯靛酚等需要避光的溶液滴定，使用棕色酸式滴定管。

5.液体的移取：移取20mL以下的液体，尤其是高浓度的强酸强碱、强氧化剂，要
用移液管。

移取25mL以上的液体，可以用量筒。

6.比色实验：比色皿要先用蒸馏水做配对实验。

液体高度不要超过比色皿的2/3。

一
般用试剂空白调零。

吸光度值（Abs）应在之间，小于，应提高标准液的浓度或减小样品液的稀释倍数；大于，应加大标准液或样品液的稀释倍数。

样品吸光度应在标准曲线范围内。

7.平行实验：化学分析试验一般要做三个以上平行，用以减小误差。

8.废液的处理：含有铬酸钾、重铬酸钾、氯化钡、亚铁氰化钾、2,6-二氯靛酚、对硝
基苯酚、乙醚、石油醚、丙酮、二甲苯、甲醇等有毒试剂的废液要倒入相应的废液瓶或废液桶中（水池边的白色圆塑料桶中），盖紧瓶盖或桶盖。

强酸强碱性废液也要倒入废液瓶或废液桶中。

其他废液用自来水稀释后倒入下水道。

9. 醇溶的指示剂如酚酞、甲基红、溴甲酚蓝等先用95%乙醇或无水乙醇溶解后，再加水稀释。

10.实验结束上交数据包括：①取样量，精确到0.01g。

②定容体积。

③取滤液滴定或
比色的体积，精确到。

④滴定时标准液的摩尔浓度，消耗标准液的体积，精确到。

⑤比色时标准曲线的浓度、吸光度、以什么为空白、样品吸光度。

⑥水分活度、水分、灰分、脂肪、果胶、纤维素精确到，包括瓶重、干燥前（瓶+样品）重、干燥后（瓶+样品）重。

⑦简单描述实验过程、实验现象，存在问题。

1. 实验用品均用洗涤剂刷洗，自来水冲洗7-10遍。

2．实验用水均为去离子水。

3. 实验废物去除水后，倒入垃圾桶中。

4. 实验废水没有毒、对环境没有污染的可以倒入下水道；对环境有污染的分类倒入废液瓶中。

废液分类：有毒废液，有机废液，含卤素废液，无机废液，碱液，酸液，含重金属废液（重金属指的是原子量大于55的金属。

重金属约有45种，一般都是属于过渡元素。

如铜、铅、锌、铁、钴、镍、锰、镉、汞、钨、钼、金、银等）。

5. 实验完毕后，清洗自己组的实验用具，并摆放整齐。

6. 配制好的剩余试剂留给下一个班使用，不要倒掉。

7. 不要用滤纸做称量纸，试剂会粘在滤纸上。

重金属指比重大于5的金属（一般指密度大于克每立方厘米的金属）。

第一节水分
实验一食品中水分的测定
GB —2016
1 范围
本标准规定了食品中水分的测定方法。

本标准中第一法（直接干燥法）适用于在101℃～105℃下蔬菜、谷物及其制品、水产品、豆制品、乳制品、肉制品及卤菜制品、粮食（水分含量低于18%）、油料（水分含量低于13%）、淀粉及茶叶等食品中水分的测定。

不适用于水分含量低于 g/100g的样品。

第二法（减压干燥法）适用于高温易分解的样品及水分较多的样品（如糖、味精等食品）中水分的测定。

第三法（蒸馏法）适用于含水较多又有较多挥发性成分的水果、香辛料及调味品、肉与肉制品等食品中水分的测定，不适用于水分含量小于1 g/100g的样品。

第四法(卡尔·费休法)适用于食品中含微量水分的测定，不适用于含有氧化剂、还原剂、碱性氧化物、氢氧化物、碳酸盐、硼酸等食品中水分的测定。

卡尔·费休容量法适用于水分含量大于×10-3 g/100g的样品。

第一法直接干燥法
2 原理
利用食品中水分的物理性质，在 kPa(一个大气压)，温度101℃～105℃下采用挥发方法测定样品中干燥减失的重量，包括吸湿水、部分结晶水和该条件下能挥发的物质，再通过干燥前后的称量数值计算出水分的含量。

3 试剂和材料
除非另有说明，本方法所用试剂均为分析纯，水为GB/T 6682规定的三级水。

试剂
氢氧化钠(NaOH)。

盐酸(HCl)。

海砂。

试剂配制
盐酸溶液(6 mol/L)：量取50 mL盐酸，加水稀释至100 mL。

氢氧化钠溶液(6 mol/L)：称取24 g氢氧化钠，加水溶解并稀释至100 mL。

海砂：取用水洗去泥土的海砂、河砂、石英砂或类似物，先用盐酸溶液(6 mol/L)煮沸，用水洗至中性，再用氢氧化钠溶液(6 mol/L)煮沸，用水洗至中性，经105℃干燥备用。

4 仪器
扁形铝制或玻璃制称量瓶。

电热恒温鼓风干燥箱。

干燥器：内附有效干燥剂。

天平：感量为 mg。

5 分析步骤
固体试样：取洁净铝制或玻璃制的扁形称量瓶，置于101℃～105℃干燥箱中，瓶盖斜支于瓶边，加热 h，取出盖好，置干燥器内冷却 h，称量，并重复干燥至前后两次质量差不超过2 mg，即为恒重。

将混合均匀的试样迅速磨细至颗粒小于2 mm，不易研磨的样品应尽可能切碎，称取2 g～10 g试样(精确至 g)，放入此称量瓶中，试样厚
度不超过5 mm ，如为疏松试样，厚度不超过10 mm ，加盖，精密称量后，置于101℃～105℃干燥箱中，瓶盖斜支于瓶边，干燥2 h ～4 h 后，盖好取出，放入干燥器内冷却 h 后称量。

然后再放入101℃～105℃干燥箱中干燥1 h 左右，取出，放入干燥器内冷却 h 后再称量。

并重复以上操作至前后两次质量差不超过2 mg ，即为恒重。

注:两次恒重值在最后计算中，取质量较小的一次称量值。

半固体或液体试样：取洁净的称量瓶，内加10 g 海砂(实验过程中可根据需要适当增加海砂的质量)及一根小玻棒，置于101℃～105℃干燥箱中，干燥 h 后取出，放入干燥器内冷却 h 后称量，并重复干燥至恒重。

然后称取5 g ～10 g 试样(精确至 g)，置于称量瓶中，用小玻棒搅匀放在沸水浴上蒸干，并随时搅拌，擦去瓶底的水滴，置于101℃～105℃干燥箱中干燥4 h 后盖好取出,放入干燥器内冷却 h 后称量。

然后再放入101℃～105℃干燥箱中干燥1 h 左右，取出，放入干燥器内冷却 h 后再称量。

并重复以上操作至前后两次质量差不超过2 mg ，即为恒重。

6 分析结果的表述
试样中的水分含量,按式(1)进行计算:
1003
121⨯--=m m m m X …………………………(1) 式中：
X ——试样中水分的含量，单位为克每百克(g/100g)；
m 1 ——称量瓶(加海砂、玻棒)和试样的质量，单位为克(g)；
m 2 ——称量瓶(加海砂、玻棒)和试样干燥后的质量，单位为克(g)；
m 3 ——称量瓶(加海砂、玻棒)的质量，单位为克(g)；
100——单位换算系数。

水分含量≥1 g/100g 时，计算结果保留三位有效数字；水分含量＜1 g/100g 时，计算结果保留两位有效数字。

7 精密度
在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10%。

参考文献
[1] GB/T —2016食品安全国家标准 食品中水分的测定。

[2] 周光理主编，食品分析与检验技术，第二版，化学工业出版社，2010。

[3] 劳动和社会保障部教材办公室，食品质量检验员（国家职业资格四级），中国劳动社会保障出版社，2012.
第二节 灰分
实验一 食品中粗灰分的测定
GB —2016
1 范围
本标准第一法规定了食品中灰分的测定方法，第二法规定了食品中水溶性灰分和水不溶性灰分的测定方法，第三法规定了食品中酸不溶性灰分的测定方法。

本标准第一法适用于食品中灰分的测定(淀粉类灰分的方法适用于灰分质量分数不大于2%的淀粉和变性淀粉)，第二法适用于食品中水溶性灰分和水不溶性灰分的测定，第三法适用于食品中酸不溶性灰分的测定。

第一法食品中总灰分的测定
2 原理
食品经灼烧后所残留的无机物质称为灰分。

灰分数值系用灼烧、称重后计算得出。

3 试剂和材料
除非另有说明，本方法所用试剂均为分析纯，水为GB/T 6682规定的三级水。

试剂
乙酸镁[(CH
3COO)
2
Mg·4H
2
O]。

浓盐酸(HCl)。

试剂配制
乙酸镁溶液(80 g/L)：称取 g乙酸镁加水溶解并定容至100 mL，混匀。

乙酸镁溶液(240 g/L)：称取 g乙酸镁加水溶解并定容至100 mL，混匀。

10%盐酸溶液：量取24 mL分析纯浓盐酸用蒸馏水稀释至100 mL。

4 仪器和设备
高温炉：最高使用温度≥950℃。

分析天平：感量分别为 mg、1 mg、 g。

石英坩埚或瓷坩埚。

干燥器(内有干燥剂)。

电热板。

恒温水浴锅：控温精度±2℃。

5 分析步骤
坩埚预处理
含磷量较高的食品和其他食品
取大小适宜的石英坩埚或瓷坩埚置高温炉中，在550℃±25℃下灼烧30 min，冷却至200℃左右，取出，放入干燥器中冷却30 min，准确称量。

重复灼烧至前后两次称量相差不超过 mg为恒重。

淀粉类食品
先用沸腾的稀盐酸洗涤，再用大量自来水洗涤，最后用蒸馏水冲洗。

将洗净的坩埚置于高温炉内，在900℃±25℃下灼烧30 min，并在干燥器内冷却至室温，称重，精确至 g。

称样
含磷量较高的食品和其他食品：灰分大于或等于10 g/100g的试样称取2 g～3 g (精确至 g)；灰分小于或等于10 g/100g的试样称取3 g～10 g(精确至 g，对于灰分含量更低的样品可适当增加称样量)。

淀粉类食品：迅速称取样品2 g～10 g(马铃薯淀粉、小麦淀粉以及大米淀粉至少称5 g，玉米淀粉和木薯淀粉称10 g),精确至 g。

将样品均匀分布在坩埚内，不要压紧。

测定
含磷量较高的豆类及其制品、肉禽及其制品、蛋及其制品、水产及其制品、乳及乳制品
称取试样后，加入 mL 乙酸镁溶液(240 g/L)或 mL 乙酸镁溶液(80 g/L)，使试样完全润湿。

放置10 min 后，在水浴上将水分蒸干，在电热板上以小火加热使试样充分炭化至无烟，然后置于高温炉中，在550℃±25℃灼烧4 h 。

冷却至200℃左右，取出，放入干燥器中冷却30 min ，称量前如发现灼烧残渣有炭粒时，应向试样中滴入少许水湿润，使结块松散，蒸干水分再次灼烧至无炭粒即表示灰化完全，方可称量。

重复灼烧至前后两次称量相差不超过 mg 为恒重。

吸取3份与相同浓度和体积的乙酸镁溶液，做3次试剂空白试验。

当3次试验结果的标准偏差小于 g 时，取算术平均值作为空白值。

若标准偏差大于或等于 g 时，应重新做空白值试验。

淀粉类食品
将坩埚置于高温炉口或电热板上，半盖坩埚盖，小心加热使样品在通气情况下完全炭化至无烟，即刻将坩埚放入高温炉内，将温度升高至900 ℃±25 ℃，保持此温度直至剩余的碳全部消失为止，一般1 h 可灰化完毕，冷却至200℃左右，取出，放入干燥器中冷却30 min ，称量前如发现灼烧残渣有炭粒时，应向试样中滴入少许水湿润，使结块松散，蒸干水分再次灼烧至无炭粒即表示灰化完全，方可称量。

重复灼烧至前后两次称量相差不超过 mg 为恒重。

其他食品
液体和半固体试样应先在沸水浴上蒸干。

固体或蒸干后的试样，先在电热板上以小火加热使试样充分炭化至无烟，然后置于高温炉中，在550℃±25℃灼烧4 h 。

冷却至200℃左右，取出，放入干燥器中冷却30 min ，称量前如发现灼烧残渣有炭粒时，应向试样中滴入少许水湿润，使结块松散，蒸干水分再次灼烧至无炭粒即表示灰化完全，方可称量。

重复灼烧至前后两次称量相差不超过 mg 为恒重。

6 分析结果的表述
以试样质量计
试样中灰分的含量，加了乙酸镁溶液的试样，按式(1)计算：
100)
(230211⨯---=m m m m m X …………………………(1) 式中：
X 1 ——加了乙酸镁溶液试样中灰分的含量，单位为克每百克(g/100g)；
m 1 ——坩埚和灰分的质量，单位为克(g)；
m 2 ——坩埚的质量，单位为克(g)；
m 0 ——氧化镁(乙酸镁灼烧后生成物)的质量，单位为克(g)；
m 3 ——坩埚和试样的质量，单位为克(g)；
100——单位换算系数。

试样中灰分的含量，未加乙酸镁溶液的试样，按式(2)计算：
100)
(23212⨯--=m m m m X …………………………(2) 式中:
X 2 ——未加乙酸镁溶液试样中灰分的含量，单位为克每百克(g/100g)；
m 1 ——坩埚和灰分的质量，单位为克(g)；
m 2 ——坩埚的质量，单位为克(g)；
m 3 ——坩埚和试样的质量，单位为克(g)；
100——单位换算系数。

以干物质计
加了乙酸镁溶液的试样中灰分的含量，按式(3)计算：
100)(230211⨯⨯---=w
m m m m m X …………………………(3) 式中：
X 1 ——加了乙酸镁溶液试样中灰分的含量，单位为克每百克(g/100g)；
m 1 ——坩埚和灰分的质量，单位为克(g)；
m 2 ——坩埚的质量，单位为克(g)；
m 0 ——氧化镁(乙酸镁灼烧后生成物)的质量，单位为克(g)；
m 3 ——坩埚和试样的质量，单位为克(g)；
w ——试样干物质含量(质量分数)，%；
100——单位换算系数。

未加乙酸镁溶液的试样中灰分的含量，按式(4)计算：
100)(23212⨯⨯--=w
m m m m X …………………………(4) 式中：
X 1 ——加了乙酸镁溶液试样中灰分的含量，单位为克每百克(g/100g)；
m 1 ——坩埚和灰分的质量，单位为克(g)；
m 2 ——坩埚的质量，单位为克(g)；
m 3 ——坩埚和试样的质量，单位为克(g)；
w ——试样干物质含量(质量分数)，%；
100——单位换算系数。

试样中灰分含量≥10 g/100g 时，保留三位有效数字；试样中灰分含量＜10 g/100g 时，保留两位有效数字。

7 精密度
在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的5%。

参考文献
[1] GB/T —2016食品安全国家标准 食品中灰分含量的测定。

[2] 周光理主编，食品分析与检验技术，第二版，化学工业出版社，2010。

[3] 李东凤主编，食品分析综合实训，化学工业出版社，2008。

第三节 蛋白质
实验一 食品中蛋白质的测定
GB —2016
1 范围
本标准规定了食品中蛋白质的测定方法。

本标准第一法和第二法适用于各种食品中蛋白质的测定，第三法适用于蛋白质含量在10 g/100g 以上的粮食、豆类奶粉、米粉、蛋白质粉等固体试样的测定。

本标准不适用于添加无机含氮物质、有机非蛋白质含氮物质的食品的测定。

第一法 凯氏定氮法
2 原理
食品中的蛋白质在催化加热条件下被分解，产生的氨与硫酸结合生成硫酸铵。

碱化蒸馏使氨游离，用硼酸吸收后以硫酸或盐酸标准滴定溶液滴定，根据酸的消耗量计算氮含量，再乘以换算系数，即为蛋白质的含量。

3 试剂和材料
试剂
除非另有说明，本方法所用试剂均为分析纯，水为GB/T 6682规定的三级水。

所用试剂溶液应用无氨蒸馏水配制。

硫酸铜(CuSO 4·5H 2O)。

硫酸钾(K 2SO 4)。

硫酸(H 2SO 4)。

硼酸(H 3BO 3)。

甲基红指示剂(C 15H 15N 3O 2)。

溴甲酚绿指示剂(C 21H 14Br 4O 5S)。

亚甲基蓝指示剂(C 16H 18ClN 3S ·3H 2O)。

氢氧化钠(NaOH)。

95%乙醇(C 2H 5OH)。

试剂配制
硼酸溶液(20 g/L)：称取20 g 硼酸，加水溶解后并稀释至1000 mL 。

按100:1的比例加入甲基红-溴甲酚绿混合指示剂，混匀。

约pH .
氢氧化钠溶液(400 g/L)：称取40 g 氢氧化钠加水溶解后，放冷，并稀释至100 mL 。

盐酸标准溶液[c(HCl)= mol/L]：移取浓盐酸（浓度36～38%），蒸馏水稀释定容至1000ml 。

标定。

或硫酸标准溶液[c(1/2H 2SO 4)= mol/L]：移取浓硫酸（密度ml ），蒸馏水稀释定容至1000ml 。

标定。

甲基红乙醇溶液(1 g/L)：称取 g 甲基红，溶于95%乙醇，用95%乙醇稀释至100 mL 。

亚甲基蓝乙醇溶液(1 g/L)：称取 g 亚甲基蓝，溶于95%乙醇，用95%乙醇稀释至100 mL 。

溴甲酚绿乙醇溶液(1 g/L)：称取 g 溴甲酚绿，溶于95%乙醇，用95%乙醇稀释至100 mL 。

A 混合指示液：2份甲基红乙醇溶液与1份亚甲基蓝乙醇溶液临用时混合。

B 混合指示液：1份甲基红乙醇溶液与5份溴甲酚绿乙醇溶液临用时混合。

4 仪器和设备
天平：感量为1 mg 。

自动凯氏定氮仪。

5 分析步骤
自动凯氏定氮仪法
4 仪器
K1100F 全自动凯氏定氮仪，SH220N 石墨消解仪，S402废气吸收系统。

仪器操作方法见附录。

5 操作方法
样品消化：
称取充分混匀的固体试样 g ～2 g 、半固体试样2 g ～5 g 或液体试样10 g ～25 g(约当于30 mg ～40 mg 氮)，精确至 g ，至消化管中，加入催化剂和浓硫酸。

当样品称取量～1g 时，加入浓硫酸8～10mL ，加入硫酸铜:硫酸钾（1:15）的混合物，或者1片定氮催化片。

注意不要使样品沾于消化管颈部。

液体样品用移液管插至消化管底部再放出样品；如果是固体样品，可将样品卷在长纸条中，平插入消化管底部，然后将消化管竖起，抽出纸条即可。

用SH220N 石墨消解仪进行消解，盖好排气罩，并配备S402废气吸收系统对消解过程中产生的酸性气体进行处理。

设置消解参数，进行消解。

当消化炉温度达到420℃之后，继续消化1 h ，此时消化管中的液体呈绿色透明状（用硫酸铜和硫酸钾做催化剂时）或无色至浅黄色透明状（用定氮催化片时）。

对于特别难氨化的氮化物样品，如含赖氨酸、组氨酸、色氨酸、酪氨酸或脯氨酸等时，需适当延长消化时间。

有机物分解完全 ，消化液呈蓝色或浅绿色（硫酸铜和硫酸钾做催化剂时），但含铁较多时，呈较深绿色；定氮催化片做催化剂时消化液呈无色或淡黄色。

取与处理样品相同量的定氮催化片（或硫酸铜和硫酸钾）、硫酸按同一方法做试剂空白试验，样品管多时，空白管放在消化架的四个角的位置（四个角的炉温稍低些，样品可能消化不完全）。

图1 消化炉+废气吸收装置 图2 样品消解完成
蒸馏和滴定
消解完成后，冷却至室温，用K1100F 凯氏定氮仪进行蒸馏和滴定。

6 分析结果的表述
试样中蛋白质的含量按式(1)计算：
100100
0140.0)(321⨯⨯⨯⨯⨯-=F V m c V V X …………………………(1) 式中：
X ——试样中蛋白质的含量，单位为克每百克(g/100g)；
V 1 ——试液消耗硫酸或盐酸标准滴定液的体积，单位为毫升(mL)；
V 2 ——试剂空白消耗硫酸或盐酸标准滴定液的体积，单位为毫升(mL)；
c ——硫酸或盐酸标准滴定溶液浓度，单位为摩尔每升(mol/L)；
—— mL 硫酸[c (12H 2SO 4)= mol/L]或盐酸[c(HCl)= mol/L]标准滴定溶液相当的
氮的质量，单位为克(g)；
m ——试样的质量，单位为克(g)；
V 3 ——吸取消化液的体积，单位为毫升(mL)；
F ——氮换算为蛋白质的系数，各种食品中氮转换系数见；
100 ——换算系数。

蛋白质含量≥1 g/100g时，结果保留三位有效数字；蛋白质含量＜1 g/100g时，结果保留两位有效数字。

注：当只检测氮含量时，不需要乘蛋白质换算系数F。

7 精密度
在重复条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10%。

8 注意事项：
取样量：固体≤5g，液体≤20mL。

一般氮含量＜5%以下，取样量1～5 g；含氮量5～30%，取样量～ g；含氮量＞30%，取样量～1 g。

当样品称取量～1g时，加入浓硫酸8～10mL，加入硫酸铜：硫酸钾（1:15）的混合物，或者1片定氮催化片。

若取样量较大，如固体试样超过5g，可按每克试样5mL的比例增加硫酸用量。

样品中的含氮量～20 mg，标准滴定酸溶液的摩尔浓度为L；
15～100 mg，标准滴定酸溶液的摩尔浓度为L；
30～200 mg，标准滴定酸溶液的摩尔浓度为L。

肉类食品属于动物性食品，绝大部分氮元素以蛋白质的有机氮形式存在，非蛋白氮的含量比较小，用凯氏定氮法测蛋白能比较准确地反映出肉食品中蛋白质含量。

测定肉类食品时，由于样品的性状所决定，含油脂或含糖量比较高，消化过程中会消耗一定的硫酸(1g脂肪消耗10mL硫酸，1g糖消耗4ml硫酸)，作用时间也要比一般的植物样品长，故在消化肉样品时，要保证硫酸的加入量和充足的消化时间，使样品中全部的有机氮转化为温定的硫酸铵。

一般样品中还含有其他含氮物质，测出的蛋白质为粗蛋白。

若要测定蛋白氮，则需向样品中加入15%三氯乙酸溶液，使其最终浓度为5~12%。

漩涡混合后静置5 min。

三氯乙酸能让蛋白质形成沉淀，过滤后，取一定量上清液蒸馏、滴定，测定非蛋白氮含量。

未加三氯乙酸的样品消化、蒸馏、滴定，测定总氮含量。

蛋白氮=总氮-非蛋白氮。

由于样品中常含有核酸、生物碱、含氮类脂、含氮色素等非蛋白质的含氮化合物，故本法测出的结果为粗蛋白质含量。

9K1100凯氏定氮仪操作规范
9.1样品消解（消化）
9.1.1消化管
取一干燥的消化管，平放。

用A4纸裁一长纸条，插入到消化管中一半。

将称量好的样品倒在长纸条中，将长纸条插到消化管的底部，将消化管竖起。

轻弹长纸条，让样品落到消化管的底部。

同样方法加入催化剂。

将长纸条抽出一部分，轻弹，让纸条上粘有的样品和催化剂全部落到消化管底部。

9.1.1.2移取10mL浓硫酸，沿着消化管壁缓慢流到消化管底部，加入浓硫酸后不要摇晃消化管。

注意不能快速加入浓硫酸和摇晃消化管，否则会使样品和催化剂冲起沾到消化管内壁上，使得消化不起完全，引起氮素的损失、实验结果不准确。

9.1.1.3将消化管放到消化管架上。

因SH220N石墨消解仪（消化炉）所有消化孔加热并不均匀，尽量不要使用四个角的消化孔消化样品，可以消化空白管。

如果一次消化的管不够20支，可以用小密封管（半截的消化管）代替。

否则消化时会有刺激性气体逸出。

9.1.2消解排废和废气吸收系统
涤气罐中先放入中间的发泡组件，再加入蒸馏水，不要超过黄色刻度线。

中和罐中加入10～30%的氢氧化钠溶液，不要超过黄色刻度线。

氢氧化钠溶液内加几滴甲基红和溴甲粉绿溶液（1:5），碱性条件下成蓝绿色，中性或酸性呈粉色。

也可以用碳酸钠代替氢氧化钠。

200g无水碳酸钠溶解到1L温水中，或者567g十水碳酸钠溶解到1L温水中。

干燥罐中装的是活性炭颗粒，活性炭用过1～2次后，要取出120℃烘干4h，冷却后再装回干燥罐中使用，一边填充一边震动，以保证活性炭填实。

将四氟波纹管链接排废系统的出气口及废气吸收系统的进气口。

装有消化管的消化管架放到消化炉上，消解排废系统垂直插入对应的消化管内，切勿倾斜消解排废系统，以防玻璃管损坏。

同时保证消解排废系统内的塑料密封盖能自由的盖住消化管口。

将消解排废系统接到废气吸收系统上。

检查各个罐盖的密封性及管路连接的正确性。

打开废气吸收系统的电源，调节流量计的旋钮，使磁阀的上端在1～ m3/h。

消化过程中如果出现排气管倒吸现象，请开大流量计的调节阀。

打开石墨消解仪（消化炉）电源。

进入加热设置界面。

设置加热温度和时间。

一般样品可直接设置380℃-420℃消化，但糖分或脂肪含量高的样品可采用阶段升温法，设2-3个温度，逐步升温，可防止温度过高引起的消化液上冲，导致氮素的损失。

例如，奶粉的消化可以称取，150℃,15min→200℃,15min→250℃,15min→300℃,30min →420℃,60min。

消化终点：消化液为澄清透明，蓝绿色（硫酸铜和硫酸钾作为催化剂）或浅黄色（定氮催化片作为催化剂）。

样品消解结束后，关闭消化炉的电源，但不要关闭排废系统。

将消化管架搬离消化炉，放在另一个空消化管架上冷却。

消化管冷却后，关闭排废系统，取下消解排废系统，放在滴水盘上，防止管路中的酸液滴在仪器或桌面、地面上。

蒸馏、滴定——K1100凯氏定氮仪操作规范→技术支持→在线视频→仪器操作→海能
K1100/K1100F凯氏定氮仪操作步骤，和海能K1100F全自动凯氏定氮仪的使用与操作两段视频）要打开冷却水循环器，水温设置低于20℃；排废管插入废液桶中并固定好，防止高温腐蚀性液体溅出。

酸管插入2%硼酸溶液中（添加了混合指示剂），碱管插入40%氢氧化钠溶液中，水管插入蒸馏水桶中。

滴定酸管插入滴定酸溶液中。