VitC3

2，6-二氯酚靛酚滴定法
原理〕 〔原理〕
还原型VitC +氧化型染料→脱氢型VitC + 还原型染料 氧化型染料→ 还原型VitC +氧化型染料 脱氢型VitC
碱性： 碱性：蓝色 氧化型 酸性： 酸性：红色 2.6－ 2.6－二氯酚靛酚 （染料） 染料） 还原型： 还原型：无色
草酸 + VitC 2，6-二氯 酚靛酚
在没有其他杂质干扰时，溶液所消耗的2.6在没有其他杂质干扰时，溶液所消耗的2.6-二 2.6 标准溶液的量与抗坏血酸的浓度成正 氯酚靛酚标准溶液的量与抗坏血酸的浓度 氯酚靛酚标准溶液的量与抗坏血酸的浓度成正 比。 这种量的关系用T值表示 这种量的关系用T ml染料所能氧化的抗坏血酸的mg数 染料所能氧化的抗坏血酸的mg T值：1ml染料所能氧化的抗坏血酸的mg数 -----0.0245mg/ml -----0.0245mg/ml
[操作步骤] 操作步骤]
20ml土豆液于量筒中， ml土豆液于量筒中 草酸稀释为50 50ml 取20ml土豆液于量筒中，加1%草酸稀释为50ml 过滤 吸取滤液5ml,用染料滴定至溶液呈淡红色 用染料滴定至溶液呈淡红色， 吸取滤液5ml,用染料滴定至溶液呈淡红色，15 秒不褪色,记录所用染料体积V 秒不褪色,记录所用染料体积V1 再做一空白对照实验记录所用染料体积V 再做一空白对照实验记录所用染料体积V2
VitC
2.功能 2.功能
合成胶原蛋白：维持牙齿、骨骼、 1) 合成胶原蛋白：维持牙齿、骨骼、血管的正常 功能， 功能，促进外伤愈合 可与金属离子络合：减少金属毒物（ 2) 可与金属离子络合：减少金属毒物（铅、汞、 砷等） 镉、砷等）的吸收 强还原作用：促进三价铁还原为二价铁， 3) 强还原作用：促进三价铁还原为二价铁，利于 铁的吸收； 铁的吸收；阻断体内合成亚硝胺
缺乏症
伤口不易愈合，牙龈出血、皮下出血， 伤口不易愈合，牙龈出血、皮下出血，坏血病
VitC
3.代谢 3.代谢
食 物 实验一
血 组织 器官
尿
实验二
4.来源 4.来源
When dietitians say “vitamin C,” people think “oranges.”
But these foods are also rich in vitamin C.
食物中VitC的测定与 的测定与 食物中 人体VitC负荷试验 人体 负荷试验
VitC基本知识 VitC基本知识
VitC测定实验 VitC测定实验
VitC
（VitaminC ; ascorbic acid）
1.性质 1.性质
1)无色片状结晶,酸味， 1)无色片状结晶,酸味，非常稳定 无色片状结晶 2)极易溶于水,水中非常不稳定,可被氧、 2)极易溶于水,水中非常不稳定,可被氧、热、光、 极易溶于水 金属离子( 碱、金属离子(铜)等氧化 3)良好的还原剂（强抗氧化剂） 3)良好的还原剂（强抗氧化剂） 良好的还原剂
食物中VitC 一.食物中VitC 含量的测定
[实验目的] 实验目的]
学习食物中VitC 含量测定的方法 学习食物中 VitC含量测定的方法 ， 了解土豆 VitC 含量测定的方法， 根茎类食物） VitC的含量 的含量。 （根茎类食物）中VitC的含量。
[样品制备] 样品制备]
土豆洗净风干,取适量样品稍加切碎, 土豆洗净风干,取适量样品稍加切碎,迅速称量 加入等量的2 草酸溶液， 加入等量的2%草酸溶液，放入组织捣碎机中打 成匀浆
注 意
1.取样后应立即测定。 取样后应立即测定。 取样后应立即测定 操作过程中要迅速，因还原型VitC易氧化。 VitC易氧化 2.操作过程中要迅速，因还原型VitC易氧化。 滴定至红色不立即消失后，尽可能一滴滴地加入， 3.滴定至红色不立即消失后，尽可能一滴滴地加入， 并不断振摇，直至粉红色15秒不消失为止。 15秒不消失为止 并不断振摇，直至粉红色15秒不消失为止。
[计算] 计算]
(V1 - V2)T 土豆中还原型抗坏血酸( 土豆中还原型抗坏血酸(mg/100g)= ×100 W 样品滴定时所用染料ml ml数 V ：样品滴定时所用染料ml数
1
空白滴定时所用染料ml ml数 V2：空白滴定时所用染料ml数 滴定时所用样品稀释液中含样品的克数（ W：滴定时所用样品稀释液中含样品的克数（g）1 g 0245mg/ml T：0.0245mg/ml
5.主要存在形式 5.主要存在形式
有生物活性 还原型抗坏血酸 脱氢型抗坏血酸 无生物活性 二酮古洛糖酸 新鲜食物及人类尿中的抗坏血酸主 要以还原型 还原型的形式存在 要以还原型的形式存在
还原型VitC的测定方法 还原型VitC的测定方法 VitC
滴定法 碘量法－ 碘量法－药典 2,62,6-二氯酚靛酚法 比色法 苯肼比色法 荧光法 高效液相色谱法HPLC 高效液相色谱法HPLC
实验报告要求
ห้องสมุดไป่ตู้
1.实验目的 2.实验原理 2.实验原理 3.主要操作步骤 3.主要操作步骤 4.结果 4.结果 5.分析及评价 5.分析及评价 (1) 对结果本身评价 (2) 实验过程中的误差进行分析
实验结束后的要求
各实验组清洗各自的实验器材；仪器复原； 1 . 各实验组清洗各自的实验器材；仪器复原；各种 器材按原样放置好。 器材按原样放置好。 请班长留一组同学值日，做好实验室卫生。 2 . 请班长留一组同学值日，做好实验室卫生。包括 桌面、地面及抽屉的整洁。 桌面、地面及抽屉的整洁。 清理最后的垃圾。 3.清理最后的垃圾。 检查门、 4.检查门、窗、水、电。
[评价方法] 评价方法] 空腹服用抗坏血酸500mg后 空腹服用抗坏血酸500mg后，4h尿中抗坏血 500mg 酸排出量： 酸排出量： mg缺乏 缺乏； ＜3mg缺乏； 10mg正常 3mg—10mg正常； mg 10mg正常； 10mg mg饱和 ＞10mg饱和
[操作步骤] 操作步骤] 1.清晨空腹服用抗坏血酸500mg 清晨空腹服用抗坏血酸500 1.清晨空腹服用抗坏血酸500mg 2.4h后收集尿样， 2.4h后收集尿样，记录尿总量 3.测定尿中还原性抗坏血酸的量 3.测定尿中还原性抗坏血酸的量 ml尿量于三角烧瓶中 尿量于三角烧瓶中， ml草酸稀释 草酸稀释， 取2ml尿量于三角烧瓶中，用8ml草酸稀释，立 刻用 染料滴定 记录所用染料体积V 记录所用染料体积V 淡红，保持15 15秒 淡红，保持15秒
[计算] 计算] V ×T 小时尿中还原性VitC含量( VitC含量 4小时尿中还原性VitC含量(mg) = ×N
W
滴定尿样所用染料的量（ml） V: 滴定尿样所用染料的量（ml） T：0.0245 滴定时所用尿量（ ml） W: 滴定时所用尿量（2ml） 尿总量(400ml) N：尿总量(400ml)
﹝该实验取20ml匀浆(含10g样品)→50ml, 吸取5ml， 滴定时所用克数为0.2(g/ml)×5ml=1g﹞
二.人体抗坏血酸负荷试验
[实验目的] 实验目的] 掌握VitC VitC在人体内的营养状况评价方法及尿负 掌握VitC在人体内的营养状况评价方法及尿负 荷试验的原理 [尿负荷实验原理] 尿负荷实验原理] 正常人服用大量水溶性维生素后， 正常人服用大量水溶性维生素后，若体内储量 已足，则尿中可大量排出， 已足，则尿中可大量排出，若储量很低或完全 缺乏，则尿中排出极少。 缺乏，则尿中排出极少。