两株水源性铜绿假单胞菌的分离与鉴定

注：A，PA-0659；B，PA-0659（紫外）；C，PA-0661；D，PA-0661（紫外）。

图1 CN琼脂平板划线培养形态图
注：A，PA-0659；B，PA-0661。

图2绿脓菌素测定结果图
注：A，PA-0659；B，PA-0661。

图3产氨实验图
注：A，PA-0659；B，PA-0661。

图4革兰氏染色镜检图（油镜100×）
2.2 生化分析结果
根据VITEK 2 Compact全自动生化分析结果，发现两株分离菌PA-0659和PA-0661均能分解D-葡萄糖、
D-甘露醇、D-甘露糖、D-海藻糖、柠檬酸盐（钠）、
丙二酸盐、乳酸盐和琥珀酸盐，且COURMARATE酶、
γ-谷氨酰转移酶、β-丙氨酸芳胺酶、L-脯氨酸芳胺
酶和酪氨酸芳胺酶均为阳性；两株分离株均不分解蔗
糖、侧金盏花醇、D-塔格糖、L-阿拉伯醇、D-纤维二糖、
5-酮-葡萄糖苷、α-葡萄糖、D-麦芽糖、古老糖和D-
山梨醇，且N-乙酰-β-半乳糖氨酶、α-半乳糖苷酶、
磷酸酶、氨基乙酸芳胺酶、鸟氨酸脱羧酶、赖氨酸脱表
生化项目
生化结果PA-0659PA-
丙氨酸-苯丙氨酸-脯氨酸芳胺酶-
侧金盏花醇-吡咯烷基芳胺酶-
L-阿拉伯醇-
D-纤维二糖-
β-半乳糖苷酶-
H2S产生-β-N-乙酰葡萄糖苷酶-谷氨酰芳胺酶-
D-葡萄糖+γ-谷氨酰转移酶+
葡萄糖发酵-
β-葡萄糖苷酶-
D-麦芽糖-
A，PA-0659；B，PA-0661。

图516s rRNA进化树分析图
结论与讨论
本研究依据GB 8538—2016中规定的方法，对两批桶装水样本中的铜绿假单胞菌进行检测，通过一系列的分离鉴定，获取了两株水源性产绿脓菌素铜绿假通过对两株铜绿假单胞菌分离株的进一步研
PA-0659和PA-0661均能分解D-葡萄糖、
、D-甘露糖、D-海藻糖、柠檬酸盐（钠）、
、乳酸盐和琥珀酸盐，COURMARATE酶、谷氨酰转移酶、β-丙氨酸芳胺酶、L-脯氨酸芳胺酶和酪氨酸芳胺酶阳性，而且两株铜绿假单胞菌的生化存在差异，PA-0659脂酶阳性，PA-0661谷氨酰芳胺酶和尿素酶阳性；耐药结果表明两株PA分离株对要区别体现在PA-0659对头孢唑林和替加环素耐药根据NCCLS[22]提供的铜绿假单胞菌ATCC 27853
信息，比较发现本研究分离的两株PA表现出更强的耐药，尤其对青霉素类、四代头孢类和硝基呋喃类等抗生素，这进一步说明两株分离株有可能在自然环境中发生了变异，使其具备更强耐药性。

通过比较两株分离株在生化、耐药、毒力基因以及16s rRNA同源性，发现两株分离株均存在一定的差异，说明两株分离株的来源、生存环境，
组信息均不同，查询两批桶装水样品信息发现
水样品来自不同地区的厂家。

铜绿假单胞菌是一种常见的食源性致病菌。