多脏器功能不全综合征对大鼠线粒体呼吸功能的损伤及丹参的保护作用
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中起 着重要 作用 ， 益 引起 大 家的关 注 。 ３ １ 大量 实验证
（Ｐ ） ｍ ／ｇ Ｌ Ｓ ５ ｇ 体重。 ｋ 治疗组 ： 注射 Ｌ Ｓ Ｐ 前三天开始每 天尾静脉注射丹参 １ ｇ ｇ ０ ／ 体重 ， 日１ ｋ 每 次。 １ 线 粒体 的提取 ． ２ 三组动物于尾静脉注射 ＬＳ或等容生理盐水 ４ Ｐ ｈ后 ， １％水合氯醛（ ０ｍ ／ｇ 用 ０ ３ ｇ ） ０ ｋ 腹腔 内注射麻 醉 后 ， 速断头处 死 。在 预冷的 ００ ｏＬＰ Ｓ中分 离 快 ．１ｍ ｌ Ｂ ／
血栓 、 抗心 脑缺 血及调 血脂 的作用 。 对多种 动物实 验
到红棕色匀浆液。 ０ ７ ０ ４℃离心 １ ｉ， ｇ ０ｍｎ 留取上清， １ ｇ４℃离心 １ ｉ， ０ｋ ０ｍｎ 留取棕色沉淀 ， 即为线粒体 粗制 品。将蛋白溶液以 Ｂ Ａ法进行蛋 白定量 ， Ｃ 根据 定量 结果稀 释 为 １ ｇｍ ， 装保存 于一 ０℃。 ０ｍ ／ ｌ分 ７
出大 鼠心脏 、 肝脏 和肠组织 。
按线粒体提取试剂盒说 明书进行 ，将各器官组
织去 除结缔 组 织剪 成碎 片加 十倍分 离介 质 ，匀浆 得
实线粒体功能紊乱参 与了休克和多器官功能不全的 发生 。 已有 动物实 验证实 ， 内毒 素 （Ｐ ） 期 ， 出 用 Ｌ Ｓ早 就
现 了线粒 体功 能的改 变ｌ 丹参具 有抗 氧化 、 ｌ Ｊ 。 抗凝 、 抗
物研究所实验动物繁育场 ） ，雄性 ，体重 ２０ｇ２０ ０ －５ ｇ随即分组 ， ， 每组 ６只。正常对照组 ： 尾静脉注射生
理盐 水 ２５ｍ／ｇ 重 。模 型组 ： ． ｌ 体 ｋ 尾静 脉 注 射 内毒 素
ｍ ｏ ＬＡ Ｐ ｍ ｌ Ｄ 启动 ３ ／ 态呼吸。 按下式计算 Ｐ ／ Ｏ比、 态 ３ 呼吸速率（ 、 Ｖ） ４态呼吸速率（ 以及呼吸控制指数 Ｖ）
１ 线粒 体呼 吸功能检 测Ｉ１ ＿ ３ ２ ． ３
性 心 、 、 等组 织 损 伤 均有 明显保 护 作 用 ， 有 抗 肝 肺 且 炎、 增强 免疫 功能等 多方 面药理 活性 。 文章 对丹参 对 多脏 器功 能不全 综合征 大 鼠线粒 体 功能 的影 响 做 了 初 步探 讨 。
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口岸 卫 生 控 制
第 ｌ ２卷 第 ３ 期
Байду номын сангаас
实 验 研 究
多脏器 功能不全综合征对大 鼠线粒体 呼吸功能的损伤及丹参 的保 护作用
刘 萍 刘宏胜 杜 学荣 天 津市第 一 中心 医 院 （ 津 ，０ １２ 天 ３ ０９ ）
摘 要 目的 探 讨 多脏 器功能 不全综合 征对 大 鼠线粒体 呼吸功 能 的损 伤及 丹参 的保护作 用 。方法
１１ 实验 动物 与分组 ． 健 康 Ｗｉａ 大 鼠 （ 自中国科学 院 医学实 验动 ｓｒ ｔ 购
蛋 白终 浓度 为 ０５ｍｇ ｌ １ ／ｌ ． ／ ～ ． ｍｇ ，加入 呼吸底 物 ｍ ０ ｍ ５ｍｍ ｌ ｏＬ苯 噻啶 和 ５ｍ ｌ ／ ｍｏＬ谷 氨 酸 ，最 后加 入 ０２ ／ ．
人 的 Ａ Ｐ量 ， ：加人 Ａ Ｐ后线粒体氧化磷酸化所 Ｄ Ｏ Ｄ 消耗的氧原子。 ３４ 态呼吸速率 （ ３ ， ＝ （ｍ １ Ｐｏ ｉ ， Ｖ ， ） Ｖ Ｏ ｎ ｏ） ｒ ｅ Ｖ ／ ｔｎ ｆｇ， ： ｍ ）Ｏ 线粒体所消耗的氧原子量 ；ｒ ｅ ： Ｐｏ ｉ 所加人的 ｔｎ 线粒体蛋白量。 呼吸速率以 ｎ ｏ ／ ｉ ｍ ｒ 表示。 ｍ ｌ ｍｎ ｇ ｏ Ｏ ／ Ｐ
采用 大鼠 多脏 器功能 不全 综合征 （ Ｄ ） 型 ， ＭＯ Ｓ 模 实验 动 物 随机 分 为正 常对 照组 （ 只 ）感 染性ＭＯ Ｓ ６ 、 Ｄ
组（ 只） ６ 和丹 参治疗 组 （ 只） 测 定 大鼠心脏 、 脏和 肠组 织线 粒体 呼吸 功能和 呼吸链 复 合体 Ｉ、 ６ ， 肝 Ⅱ、
１ 材 料 与 方 法
采用 Ｃａｋ ｌ 氧电极进行测定 。 ｒ 将新鲜制备的线粒 体加入到呼吸反应缓 冲液内 （５ ｍ ｌ １０ｍ ｏＬ蔗糖 ， ／ ２ ５
ｍｍ ｌ ｒ — ｌ １ ｍｏ Ｌ Ｋ Ｐ ４ｐ ．）使 ｏ ＬＴ ｉ ＨＣ 和 ０ ｍ ｌ Ｈ２０ ，Ｈ ７４ ， ／ ｓ ／
（ １ ＲＣ ）
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第１ ２卷 第 ３期
刘 萍。 多脏器功能不全综 合征对大 鼠线粒体 呼吸功能 的损伤及丹参的保护作用 等 ２ 结 果
ＰＯ： Ｄ （ｍ １Ｏｎ ｌ， Ｐ： 次 反 应 中所 加 ／ Ａ Ｐｎ ｏ／ （ｍｏ ＡＤ 每 ） １
治 中发挥重要 作 用
关键词 多脏 器功 能不全 综合 征 内毒 素 线粒体 功能 线粒体 呼吸链 复合体 酶 活性 丹参
中图分 类号 Ｒ ３ 一３ 文献标识 码 Ｂ
多脏器功能不全综合征（ ｌｐｅＯｇｎＤ ｓ ｎｔ ｎ Ｍｕ ｉｌ ｒａ ｙｆ ｃｉ ｔ ｕ ｏ
Ｓｎ ｒ ｅＭ Ｄ ） 南创伤 、 ｙｄａ Ｏ Ｓ是 ｍ 失血 、 烧伤 、 休克 、 脓毒 症 、出血坏 死性 胰腺 炎 和心肺 复苏 后等 应激 源诱 发 的致命性临床综合征群。临床 上表现为两个 以上的 器官功能障碍或衰竭。Ｍ Ｄ 被认为是各种危重病 ＯＳ 最常见的死亡原因。 生命器官的缺血缺氧 、 能量代谢 障碍 、氧转运和氧消耗之间关系失调等在这一过程
Ⅳ的 酶活性 。 果 结 ＭＯ Ｓ 型组 大 鼠各 器 官线粒体 呼吸 功能 明显降低 ， Ｄ模 呼吸 链复合体 Ｉ、 Ⅳ的 酶活 性 明显减 弱 （ ＜ ．５ ， Ｐ ００ ） 丹参 治 疗组 各 器官呼 吸 功能 明 显改 善 ， 吸链 复 合体 Ｉ、 的酶 活性 明显增 呼 Ⅳ
强 （＜ ．５ 。结论 丹参 可 以通 过 改善线 粒体 的 呼吸功 能 来减轻 各脏 器的 组织损 伤 ， ＭＯ Ｓ Ｐ ００ ） 在 Ｄ 的防
（Ｐ ） ｍ ／ｇ Ｌ Ｓ ５ ｇ 体重。 ｋ 治疗组 ： 注射 Ｌ Ｓ Ｐ 前三天开始每 天尾静脉注射丹参 １ ｇ ｇ ０ ／ 体重 ， 日１ ｋ 每 次。 １ 线 粒体 的提取 ． ２ 三组动物于尾静脉注射 ＬＳ或等容生理盐水 ４ Ｐ ｈ后 ， １％水合氯醛（ ０ｍ ／ｇ 用 ０ ３ ｇ ） ０ ｋ 腹腔 内注射麻 醉 后 ， 速断头处 死 。在 预冷的 ００ ｏＬＰ Ｓ中分 离 快 ．１ｍ ｌ Ｂ ／
血栓 、 抗心 脑缺 血及调 血脂 的作用 。 对多种 动物实 验
到红棕色匀浆液。 ０ ７ ０ ４℃离心 １ ｉ， ｇ ０ｍｎ 留取上清， １ ｇ４℃离心 １ ｉ， ０ｋ ０ｍｎ 留取棕色沉淀 ， 即为线粒体 粗制 品。将蛋白溶液以 Ｂ Ａ法进行蛋 白定量 ， Ｃ 根据 定量 结果稀 释 为 １ ｇｍ ， 装保存 于一 ０℃。 ０ｍ ／ ｌ分 ７
出大 鼠心脏 、 肝脏 和肠组织 。
按线粒体提取试剂盒说 明书进行 ，将各器官组
织去 除结缔 组 织剪 成碎 片加 十倍分 离介 质 ，匀浆 得
实线粒体功能紊乱参 与了休克和多器官功能不全的 发生 。 已有 动物实 验证实 ， 内毒 素 （Ｐ ） 期 ， 出 用 Ｌ Ｓ早 就
现 了线粒 体功 能的改 变ｌ 丹参具 有抗 氧化 、 ｌ Ｊ 。 抗凝 、 抗
物研究所实验动物繁育场 ） ，雄性 ，体重 ２０ｇ２０ ０ －５ ｇ随即分组 ， ， 每组 ６只。正常对照组 ： 尾静脉注射生
理盐 水 ２５ｍ／ｇ 重 。模 型组 ： ． ｌ 体 ｋ 尾静 脉 注 射 内毒 素
ｍ ｏ ＬＡ Ｐ ｍ ｌ Ｄ 启动 ３ ／ 态呼吸。 按下式计算 Ｐ ／ Ｏ比、 态 ３ 呼吸速率（ 、 Ｖ） ４态呼吸速率（ 以及呼吸控制指数 Ｖ）
１ 线粒 体呼 吸功能检 测Ｉ１ ＿ ３ ２ ． ３
性 心 、 、 等组 织 损 伤 均有 明显保 护 作 用 ， 有 抗 肝 肺 且 炎、 增强 免疫 功能等 多方 面药理 活性 。 文章 对丹参 对 多脏 器功 能不全 综合征 大 鼠线粒 体 功能 的影 响 做 了 初 步探 讨 。
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多脏器 功能不全综合征对大 鼠线粒体 呼吸功能的损伤及丹参 的保 护作用
刘 萍 刘宏胜 杜 学荣 天 津市第 一 中心 医 院 （ 津 ，０ １２ 天 ３ ０９ ）
摘 要 目的 探 讨 多脏 器功能 不全综合 征对 大 鼠线粒体 呼吸功 能 的损 伤及 丹参 的保护作 用 。方法
１１ 实验 动物 与分组 ． 健 康 Ｗｉａ 大 鼠 （ 自中国科学 院 医学实 验动 ｓｒ ｔ 购
蛋 白终 浓度 为 ０５ｍｇ ｌ １ ／ｌ ． ／ ～ ． ｍｇ ，加入 呼吸底 物 ｍ ０ ｍ ５ｍｍ ｌ ｏＬ苯 噻啶 和 ５ｍ ｌ ／ ｍｏＬ谷 氨 酸 ，最 后加 入 ０２ ／ ．
人 的 Ａ Ｐ量 ， ：加人 Ａ Ｐ后线粒体氧化磷酸化所 Ｄ Ｏ Ｄ 消耗的氧原子。 ３４ 态呼吸速率 （ ３ ， ＝ （ｍ １ Ｐｏ ｉ ， Ｖ ， ） Ｖ Ｏ ｎ ｏ） ｒ ｅ Ｖ ／ ｔｎ ｆｇ， ： ｍ ）Ｏ 线粒体所消耗的氧原子量 ；ｒ ｅ ： Ｐｏ ｉ 所加人的 ｔｎ 线粒体蛋白量。 呼吸速率以 ｎ ｏ ／ ｉ ｍ ｒ 表示。 ｍ ｌ ｍｎ ｇ ｏ Ｏ ／ Ｐ
采用 大鼠 多脏 器功能 不全 综合征 （ Ｄ ） 型 ， ＭＯ Ｓ 模 实验 动 物 随机 分 为正 常对 照组 （ 只 ）感 染性ＭＯ Ｓ ６ 、 Ｄ
组（ 只） ６ 和丹 参治疗 组 （ 只） 测 定 大鼠心脏 、 脏和 肠组 织线 粒体 呼吸 功能和 呼吸链 复 合体 Ｉ、 ６ ， 肝 Ⅱ、
１ 材 料 与 方 法
采用 Ｃａｋ ｌ 氧电极进行测定 。 ｒ 将新鲜制备的线粒 体加入到呼吸反应缓 冲液内 （５ ｍ ｌ １０ｍ ｏＬ蔗糖 ， ／ ２ ５
ｍｍ ｌ ｒ — ｌ １ ｍｏ Ｌ Ｋ Ｐ ４ｐ ．）使 ｏ ＬＴ ｉ ＨＣ 和 ０ ｍ ｌ Ｈ２０ ，Ｈ ７４ ， ／ ｓ ／
（ １ ＲＣ ）
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第１ ２卷 第 ３期
刘 萍。 多脏器功能不全综 合征对大 鼠线粒体 呼吸功能 的损伤及丹参的保护作用 等 ２ 结 果
ＰＯ： Ｄ （ｍ １Ｏｎ ｌ， Ｐ： 次 反 应 中所 加 ／ Ａ Ｐｎ ｏ／ （ｍｏ ＡＤ 每 ） １
治 中发挥重要 作 用
关键词 多脏 器功 能不全 综合 征 内毒 素 线粒体 功能 线粒体 呼吸链 复合体 酶 活性 丹参
中图分 类号 Ｒ ３ 一３ 文献标识 码 Ｂ
多脏器功能不全综合征（ ｌｐｅＯｇｎＤ ｓ ｎｔ ｎ Ｍｕ ｉｌ ｒａ ｙｆ ｃｉ ｔ ｕ ｏ
Ｓｎ ｒ ｅＭ Ｄ ） 南创伤 、 ｙｄａ Ｏ Ｓ是 ｍ 失血 、 烧伤 、 休克 、 脓毒 症 、出血坏 死性 胰腺 炎 和心肺 复苏 后等 应激 源诱 发 的致命性临床综合征群。临床 上表现为两个 以上的 器官功能障碍或衰竭。Ｍ Ｄ 被认为是各种危重病 ＯＳ 最常见的死亡原因。 生命器官的缺血缺氧 、 能量代谢 障碍 、氧转运和氧消耗之间关系失调等在这一过程
Ⅳ的 酶活性 。 果 结 ＭＯ Ｓ 型组 大 鼠各 器 官线粒体 呼吸 功能 明显降低 ， Ｄ模 呼吸 链复合体 Ｉ、 Ⅳ的 酶活 性 明显减 弱 （ ＜ ．５ ， Ｐ ００ ） 丹参 治 疗组 各 器官呼 吸 功能 明 显改 善 ， 吸链 复 合体 Ｉ、 的酶 活性 明显增 呼 Ⅳ
强 （＜ ．５ 。结论 丹参 可 以通 过 改善线 粒体 的 呼吸功 能 来减轻 各脏 器的 组织损 伤 ， ＭＯ Ｓ Ｐ ００ ） 在 Ｄ 的防