重组G145R HBsAg亲和纯化方法的建立及其应用

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重组G145R HBsAg亲和纯化方法的建立及其应用
张波;李方和;龚劲松;田拥军;张春燕;李时君;陈妍;黄永国;杨东亮
【期刊名称】《中国生物制品学杂志》
【年(卷),期】2007(20)10
【摘要】目的建立重组乙型肝炎病毒G145R变异HBsAg抗体亲和纯化方法。

方法用抗-HBs单克隆抗体(D12- McAb)制备亲和层析胶,对2A8细胞(分泌G145R
变异HBsAg)培养上清盐析物进行亲和纯化。

采用SDS-PAGE、Western blot及ELISA,对纯化产物的纯度、特异性、含量和回收率进行鉴定,并与同法纯化的HBsAg阳性血清及r-wHBsAg提取物进行比较。

结果D12-McAb对重组真核表
达G145R变异HBsAg、HBsAg阳性血清及r-wHBsAS三者具有相似的亲和性,
产物纯度分别为90.3%、95.2%和93.1%,回收率分别为43.3%、72.0%和66.4%。

结论已成功地建立了重组G145R变异HBsAg抗体亲和纯化方法,为G145R变异
以及其他HBV免疫逃逸变异感染的深入研究奠定了重要的技术基础。

【总页数】4页(P767-770)
【关键词】乙型肝炎表面抗原;免疫逃逸变异株;单克隆抗体;亲和层析
【作者】张波;李方和;龚劲松;田拥军;张春燕;李时君;陈妍;黄永国;杨东亮
【作者单位】华中科技大学同济医学院附属同济医院实验医学研究中心
【正文语种】中文
【中图分类】R512.62;R392.11
【相关文献】
1.重组蛋白质亲和标签的选择与串联亲和纯化的应用进展 [J], 占艺;张金钟;王丽芬
2.重组人源抗HBsAg单链抗体的纯化及亲和常数测定 [J], 熊盛;任向荣;严兴;唐永红;郑业华;粟宽源;余宙耀;姚汝华
3.G145R变异HBsAg免疫检测方法的建立及其应用特征的实验研究 [J], 黄永国;李方和;龚劲松;田拥军;张春燕;彭静;张波;杨东亮
4.链霉亲和素—生物素—ELISA方法的建立及其在HBsAg测定中的应用 [J], 汪进;罗伟
5.常规的、亲和层析方法分离纯化HBsAg [J], 吕新法;张秀芝;蒋成淦;何南祥
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