HPLC测定丹葛胶囊剂中葛根素的含量

HPLC测定丹葛胶囊剂中葛根素的含量
黄平;陶秀华;邾枝花
【摘要】目的:建立高效液相色谱法测定丹葛胶囊剂中葛根素含量的测定方法.方法:色谱柱为Hypersil ODS(4.0mm×250mm,5μm);以甲醇-水-醋酸(25:75:1)为流动相;流速:1.0ml/min;检测波长:270nm进行实验.结果:线性回归方程为
Y=1.738×106X+4404.5,相关系数r=0.9998,葛根素在0.050～2.00μg范围内呈线性,平均回收率为99.83%,RSD为1.52%.结论:本方法准确可靠,稳定性、重现性好,适用于丹葛胶囊剂的含量测定.
【期刊名称】《安徽卫生职业技术学院学报》
【年(卷),期】2012(011)005
【总页数】2页(P83-84)
【关键词】丹葛胶囊;葛根素;HPLC;含量测定
【作者】黄平;陶秀华;邾枝花
【作者单位】安徽医学高等专科学校,安徽,230601
【正文语种】中文
【中图分类】R917
1.1 主要仪器及设备岛津LC-10AT型高效液相色谱仪，SPD-10ATvp紫外检测器（岛津，日本，Kyoto），N2000色谱工作站，FA-1004N型电子分析天平。

1.2 药材及试剂丹参及葛根药材购自于合肥市和义堂中药饮片厂，并具有质量合格的检验报告书；葛根素对照品（含测用），中国药品生物制品检定所提供，批号
0908-9704；甲醇（色谱纯），上海化学试剂研究所，批号20080607；95%乙
醇（分析纯），蚌埠化学试剂厂，批号20090821；冰醋酸（分析纯），宜兴市第二化学试剂厂，批号20090112；纯化水，实验室自制。

2.1 色谱条件色谱柱：Hypersil ODS色谱柱(4.0mm×250mm，5μm)；流动相：甲醇-水-醋酸（25∶75∶1）；流速：1.0ml/min；检测波长：270nm；进样量：10μl；柱温：25℃。

2.2 对照液的制备精密称取葛根素对照品2.5mg，置于10ml容量瓶中，加入30%乙醇至刻度，摇匀，再精密量取1.0ml，置于10ml容量瓶中，加30%乙醇至刻度，摇匀，即得每1ml约含0.025mg葛根素的对照液[3]。

2.3 供试品溶液的制备取丹葛胶囊颗粒，研细后，取细粉3g，精密称定，置于100ml烧瓶中，精密加入30%的乙醇50ml，称定重量，回流30min，放冷，再
称定重量，用30%的乙醇补足减失的重量，摇匀，过0.45μm滤膜滤过，取续滤
液[4]，测定葛根素的含量测定HPLC色谱图，见图1。

2.4 方法学考察
2.4.1 标准曲线的制备分别精密吸取对照品溶液0.2ml、0.4m l、0.8ml、2.0ml、4.0ml、8.0ml，用30%乙醇定容于10ml量瓶中，按照上述色谱条件分别进样，
以对照品的峰面积对浓度值作图，得回归曲线。

线性回归方程为：
Y=1.738×106X+4404.5，相关系数r=0.9998，葛根素在0.050～2.00μg范围内呈线性。

见图2。

2.4.2 精密度试验：取对照品溶液，按2.1项的色谱条件，连续进样6次，记录峰面积，计算RSD，结果见表1。

由结果可见本方法精密度良好。

2.4.3 回收率试验：精密称定已测知含量为0.840 mg·g-1样品6份，分别精密加
入含量为0.500mg·g-1葛根素对照品，按照2.3方法含量测定方法测定，测定计
算RSD，结果见表2。

2.4.4 精密度试验：精密称取同一批样品6份，制备供试品溶液，进样10μl，测定计算RSD，结果见表3。

2.4.5 稳定性试验：精密吸取同一供试品溶液，分别在0，2，4，8，12，24h进样，记录峰面积，测定计算RSD，结果见表4，符合要求。

2.5 样品的测定按2.3方法分别制备3批样品，根据3批样品的含量测定结果，本品暂定葛根素含量不得低于0.550mg·g-1。

3.1 丹葛胶囊剂中葛根素的含量相对稳定，可用于丹葛胶囊的质量控制。

3.2 在样品处理、制备供试品溶液的过程中，曾以水、不同比例的乙醇、甲醇为溶剂，回流提取和超声提取，结果表明以30%乙醇为溶剂，回流提取，样品中葛根素提取完全，而且操作简便。

3.3 参考有关文献，实验中曾考察过甲醇-水(25∶75)、甲醇-水-醋酸(25:75:0.1)以及甲醇-水-醋酸（25∶75∶1）为流动相，其中以甲醇-水-醋酸（25∶75∶1）效果最好，故选择此条件为HPLC测定葛根素的流动相。

【相关文献】
1 高风英.葛根素药理作用的研究进展[J].中草药, 2003,34(12):7～8.
2 李燕燕,边宝林,杨健,等.葛根丹参胶囊成型工艺的研究[J].中国实验方剂学杂志,2008,1(4):22～23.
3 国家药典委员会.中华人民共和国药典(2010年版2部)[S].北京:化学工业出版社,2010:312.
4 赵喜兰.HPLC测定野葛中葛根素含量的研究[J].安徽农业科学,2010,38(34):19308～19309.。