猪钩端螺旋体病的发生、预防与治疗

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农业工程技术·综合版 2023年9月刊85
畜禽与水产工程
猪钩端螺旋体病的发生、预防与治疗
张晓梅1,吴红梅1,姜书明1,刘彦山2
(1.吉林省长春市德惠市畜牧总站,吉林 德惠 130300;2.吉林省长春市德惠市郭家镇综合服务中心畜牧科,吉林 德惠 130300)摘要:猪钩端螺旋体病是由钩端螺旋体感染引发的全身性感染病,感染率高、发病率低,短时间内会大范围传播,造成巨大经济损失。

该文以吉林省德惠市为研究区域,介绍了猪钩端螺旋体病的流性特点、临床症状、病理变化和诊断方法,探讨了该病的预防与治疗措施,以期为猪养殖户提供参考。

关键词:猪钩端螺旋体病;流行特点;临床症状;病理变化;诊断;预防;治疗
张晓梅,吴红梅,姜书明,等. 猪钩端螺旋体病的发生、预防与治疗[J]. 农业工程技术,2023,43(25):85~86.
德惠市隶属吉林省长春市,位于吉林省中北部,长春市东北部,辖区面积3322.24 km 2
,近年来,以政策扶持结合先进技术不断进行资源整合,大力推动猪养殖业发展。

但随着养殖规模扩大,猪钩端螺旋体病发病率呈逐年升高趋势,应制定综合性防控措施,提高生猪养殖效益。

一、流行特点
钩端螺旋体体态细长,呈“S”“C”状,病原1端或2端带钩,整体如弹簧,可通过自旋方式移动,故称螺旋体[1]。

该菌为革兰氏阴性,在外部环境中耐受力较强,低温湿润环境中可存活数月,且感染力不减,但在热、酸、碱、紫外线环境下会很快失活,一般消毒剂即可将其灭活。

钩端螺旋体病属于人畜共患病,病猪与带菌猪是主要传染源,病菌可随尿液、唾液、乳汁等排出体外,经皮肤伤口、鼻黏膜、眼黏膜、呼吸道、消化道、生殖道黏膜等进行传播,也可经吸血昆虫叮咬进行血液传播。

钩端螺旋体病一年四季均可发生,夏秋季节高发,呈地方性流行和散发性流行特点。

不同年龄、品种的生猪均可染病,其中仔猪、妊娠母猪染病后较严重,妊娠母猪染病后多出现流产、产死胎、产弱仔等问题,育成猪、成年猪染病后病情相对较轻。

二、临床症状
钩端螺旋体病潜伏期2~20天不等,感染率极高,但发病率较低,重症者少,隐性感染猪排菌期长达2个月。

根据症状急缓可将其分为急性型、慢性型2种临床类型。

1、急性型
急性型多见于保育猪和哺乳仔猪,发病较急,体温突然升高,食欲下降,惊厥,皮肤、眼结膜泛黄,皮肤干燥无弹性,被毛杂乱,尿液褐色或尿血,病死率较高,多呈散发性,偶见集中暴发。

2、慢性型
慢性型发病初期病猪精神不振,食欲下降,眼结膜泛黄或发红,体温升高,流浆液性鼻涕。

随着病情发展,病猪头颈部出现不同程度水肿,甚至全身水肿,指压留痕;胸腹部、四肢内侧、颌下皮肤出现大量丘疹、出血点、小结节;尿液茶色、黄色或血色,腥臭难闻。

部分病猪便秘,排出颗粒状硬性粪便,或腹泻排出水样稀便,机体逐渐消瘦,营养不良。

病程可延绵10~30天,
病死率50%~90%[2]。

部分病猪愈后不良,变为“僵猪”。

妊娠母猪染病后会在30天内流产,流产率高达70%,产出死胎,体表见大量出血点。

产出的弱胎无法自行吮吸乳汁、站立,基本在2天左右死亡。

三、病理变化
剖检病死猪可发现,皮肤多处可见出血点、坏死灶,皮下组织、可视黏膜等处存在黄染;心脏呈淡红色,心机切面未发现横纹;肝脏水肿,颜色多为红褐色或黄褐色,质地较脆;淋巴结肿胀明显;肾脏存在出血点与灰白色病灶;肺脏存在瘀血、出血点、血斑等;膀胱积蓄尿液为深黄色或血红色。

四、诊断
无菌采集发热期病猪血液、无热期病猪尿液或病死猪肝肾组织,直接使用暗视野显微镜检查,或使用姬姆萨染色或镀银法染色后镜检,镜下发现钩端螺旋体虫体即可确诊。

五、预防措施
1、切断传播途径
猪钩端螺旋体病会通过皮肤伤口、黏膜接触、消化道和血液等途径进行传播,日常饲养中,养殖户应保持环境干燥卫生,及时清理猪圈内的粪污,带至固定点行集中处理。

圈舍每日通风换气,有条件的养殖场户可配置空气净化器,改善空气质量。

夏季将圈舍内温度控制为18~25℃,湿度控制在50%~80%,傍晚点燃兽用蚊香以驱虫防蚊,尽量避免吸血蚊虫传播病菌。

每日定时定量投喂优质饲料,及时清理槽内隔天剩余饲料。

饮水确保清洁无污染,可置办专用饮水器,安装封闭式管道输送安全水源,并于每吨水中添加130 g 维生素C、10 kg 葡萄糖,以提高猪群的抗病能力。

圈舍每周全面消毒1~2次,消毒剂可选用0.1%新洁尔灭,场内环境消毒可用1%氢氧化钠,外来车辆经常出入地面可撒铺生石灰粉进行消毒。

2、 隔离防控
除发病猪和带菌猪外,鼠类也是常见带菌体。

由于鼠类活动范围较大,难以防范,且其排出的尿液、粪便等均携带病原菌,且死亡后也会对周边水源、土壤等造成污染,进而增加生猪患病率。

养殖场需做好防鼠、灭鼠工作,外围铺设宽1 m 的小路,防止鼠类窜入养殖场;猪场内各个远离生猪生产区的角落投放适量2%鼠敌、1%安妥等灭鼠药;猪场内禁止养犬、猫、鸡、鸭等,同时防范外来犬猫进入。

生猪养殖中需实施全封闭式管理,发现仔猪发热、母猪延迟性流产等症状要及时隔离开来,安排专业兽医进行检查诊断,确诊病猪对症治疗,无害化处理流产物,并用2%~4%氢氧化钠溶液对污染圈舍进行全面消毒。

3、减少应激
天气突变、气温骤降时猪只易产生应激反应,导致自身免疫力出现暂时性下降,增加钩端螺旋体病发生率。

新建猪场应合理选址,根据当地气候变化规律沿冬季风顺风向建场,距离村庄、
DOI:10.16815/ki.11-5436/s.2023.25.048
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畜禽与水产工程连翘15 g、滑石10 g、茵陈20 g、石菖蒲15 g、藿香12 g、薄荷4 g、川贝母12 g、射干8 g、木通12 g、豆蔻10 g,研磨成粉后热水冲服,候温后服用,1剂/天,分2次服用,连用3天。

或取柴胡6 g、龙胆草9 g、黄芩8 g、木通8 g、当归3 g、枝子8 g、泽泻6 g、车前子8 g、生地8 g,加3 L 清水煎煮至200 mL,温凉后服用,1剂/天,分2次服用,连用3天,效果显著。

七、结语
猪钩端螺旋体病属于人畜共患病,生猪养殖人员应高度重视,全面了解该病的流行特点、症状表现、诊断方法等,并采取针对性预防与治疗措施,以确保生猪健康成长,助力区域内猪养殖业稳定发展。

参考文献
[1] 毕玉香. 猪钩端螺旋体病的预防与治疗[J]. 中国畜禽种业,2022,18(6):159~160.
[2] 曹静华. 猪钩端螺旋体病的诊断和防治措施[J]. 畜牧兽医科技信息,2023(2):136~138.
[3] 刘 影. 猪钩端螺旋体病的流行病学、临床症状、病理变化及防控[J]. 现代畜牧科技,2019(12):86~87.
主要交通干道、工地、居民区至少1 km 左右。

养殖户应关注天气变化,做好圈舍防风保暖措施,减少猪群应激。

猪群运输时避免暴力驱赶,动作需轻柔。

疫苗接种前3~4天,每吨饲料可掺拌黄芪多糖粉400 g,连续饲喂至接种后4天左右,以增强猪只自身的免疫水平,减少应激。

4、加强免疫接种
钩端螺旋体病高发季节,有条件的养猪场可给猪群进行钩端螺旋体多价苗预防接种,使猪产生中和抗体,降低该病发生率。

接种剂量根据生猪质量确定,一般15 kg 以下每头肌肉或皮下注射3 mL;15~40 kg 每头5 mL;40 kg 以上每头8~10 mL [3]。

发现病猪后紧急接种,可在14天内控制住疫情。

六、治疗方法
西医治疗可肌肉注射链霉素30~35 mg/kg,2次/天,连用6天;或肌肉注射地塞米松10 mg/头,2次/天,连用3天。

重症猪除注射治疗外,可使用10%葡萄糖注射液500 mL、维生素C500 mg、维生素K3注射液50 mg、安钠咖注射液0.5 g 一次性静脉注射治疗,1次/天,连用3天。

其他同舍猪可每千克饲料中加入土霉素或金霉素0.75~1.50 g,掺拌均匀后投喂,连用6天,效果较好。

中医治疗以清热解毒、凉血化湿、退黄为主,取黄芪15 g、
工有限公司合成。

3、PCR 扩增
聚合酶链式反应(PCR)由变性、退火、延伸3个基本反应步骤构成。

①变性:加热至95℃后模板双链DNA 解离,使之成为单链;②退火:温度降至55~65℃,引物与模板DNA 单链的互补序列配对结合;③延伸:温度升高至72℃,DNA 聚合酶激活,按碱基互补配对原理,合成两条新目标DNA 双链。

重复循环上述过程就可获得更多目标DNA 双链。

本研究挑取培养基单个可疑菌落作为DNA 模板进行PCR 反应,取扩增管配制反应体系:模板DNA 5 μL,上游引物1 μL,下游引物1 μL,MiX 为12.5,ddH 2O 5.5 μL,将扩增管放入PCR 仪中。

设置PCR 扩增程序为:95℃、5 min,95℃、45 s,56℃、50 s,72℃、1 min,30个循环;最后72℃、10 min。

反应结束后,取PCR 扩增产物,经1%琼脂糖凝胶电泳检测,1号样品SS 为阳性,目的片段大小为475 bp。

4、猪圆环病毒荧光定量PCR 检测
(1)荧光定量PCR 引物设计
荧光定量PCR 检测方法相较于普通PCR 方法用作病毒检测更为灵敏,且可以对病毒进行定量检测。

本研究利用 Primer5.0针对猪圆环病毒Ⅱ型的ORF2基因设计引物,上游引物为AACAGATCAGCAGAATAAAGA,下游引物为AACGGTCACCAGACTCCC,由上海生工有限公司合成。

(2)DNA 提取
取病猪的脑、肺、脾、肝、肾、淋巴结,无菌研磨成组织匀浆液,8000 r/min 离心2 min,取上清液,按照DNA 提取试剂盒使用说明提取病料DNA。

(3)荧光定量PCR 扩增
荧光定量PCR 是指在PCR 扩增反应体系中加入荧光基团,
对扩增反应中每个循环产物荧光信号实时检测,最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。

PCR 扩增时在加入常规反应体系的同时还需要加入1个特异性的荧光探针。

本研究荧光定量PCR 反应体系为:上、下游引物各1 μL,模板2 μL,TB Green Premix Ex Taq 为10 μL,ddH 2O 补至20 μL。

将扩增管放入荧光定量PCR 仪中,设置PCR 扩增程序:95℃、2 min,95℃、15 s,53℃、30 s,40个循环;熔解段95℃、15 s,60℃、1 min,95℃、15 s,循环1次。

荧光定量PCR 检测结果表明,2份病料均为猪圆环病毒Ⅱ型阳性,1号样品Cq 值30.12,2号样品Cq 值30.85。

四、结论
近年来,动物疫病的病原复杂程度日益加强,由于猪圆环病毒Ⅱ型、猪瘟病毒、猪蓝耳病毒等免疫抑制性病原的存在,更易导致混合感染或继发感染。

2023年5月发病的安徽省池州地区某猪场60~80日龄的育肥猪群,通过病史调查排除环境、营养、应激等因素;经实验室检测,最终确定感染该猪场育肥猪的病原为猪圆环病毒Ⅱ型及猪链球菌混合感染。

参考文献
[1] 罗满林. 动物传染病学.第一版[M]. 北京:科学出版社,2013.[2] 吴华健. 猪链球菌2型疫苗株的筛选及其培养条件的优化[D]. 合肥:安徽农业大学,2018.
[3] 杨龙斌,毛天骄,吴华健,等. 江淮地区猪链球菌和肠球菌分离株的鉴定、分型及药物敏感性分析[J]. 中国预防兽医学报,2019,41(2):131.
[4] 黄晓慧,韩雪姣,刘雪兰,等. 199株猪链球菌临床分离株血清型、毒力基因及多位点序列分型分析[J]. 微生物学通报,2022,49(10):4209~4223.
(上接第84页)。

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