05-02-010案例-蛋白酶活力测定(精)
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天津现代职业技术学院
蛋白酶活力测定
案例
案例
在蛋白酶发酵生产过程中,需要对发酵液(或成品)进行酶活 力的测定,以便对发酵过程进行相应控制。
行酶活力测定?
案例解析
在蛋白酶的发酵生产过程中,需要对发酵液中蛋白酶的活力进 行测定,以便从数据的大小来掌握发酵程度,对发酵过程进行相应 的控制。
首先,建立蛋白酶催化底物水解生成氨基酸的反应。蛋白酶催 化的底物应该是蛋白质,如果蛋白酶催化蛋白质经过彻底水解,产 物应该是各种氨基酸的混合物。这里我们可以选择底物为酪蛋白, 产物为酪氨酸。也就是我们通过在单位时间(比如10分钟)内,
酪蛋白在蛋白酶催化下生成酪氨酸的增加量来判断蛋白酶活力的 大小。
第二步,选择一个可以定量分析测定酪蛋白水解生成酪氨酸含 量的方法体系。在这里,我们可以利用酪氨酸的紫外吸收性质,即 酪氨酸在280nm处有光吸收,可以选择福林酚法或紫外分光光度法 进行测定。
蛋白酶活力测定
案例
案例
在蛋白酶发酵生产过程中,需要对发酵液(或成品)进行酶活 力的测定,以便对发酵过程进行相应控制。
行酶活力测定?
案例解析
在蛋白酶的发酵生产过程中,需要对发酵液中蛋白酶的活力进 行测定,以便从数据的大小来掌握发酵程度,对发酵过程进行相应 的控制。
首先,建立蛋白酶催化底物水解生成氨基酸的反应。蛋白酶催 化的底物应该是蛋白质,如果蛋白酶催化蛋白质经过彻底水解,产 物应该是各种氨基酸的混合物。这里我们可以选择底物为酪蛋白, 产物为酪氨酸。也就是我们通过在单位时间(比如10分钟)内,
酪蛋白在蛋白酶催化下生成酪氨酸的增加量来判断蛋白酶活力的 大小。
第二步,选择一个可以定量分析测定酪蛋白水解生成酪氨酸含 量的方法体系。在这里,我们可以利用酪氨酸的紫外吸收性质,即 酪氨酸在280nm处有光吸收,可以选择福林酚法或紫外分光光度法 进行测定。