05-02-010案例-蛋白酶活力测定(精)

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天津现代职业技术学院
蛋白酶活力测定
案例
案例
在蛋白酶发酵生产过程中,需要对发酵液(或成品)进行酶活 力的测定,以便对发酵过程进行相应控制。
行酶活力测定?
案例解析
在蛋白酶的发酵生产过程中,需要对发酵液中蛋白酶的活力进 行测定,以便从数据的大小来掌握发酵程度,对发酵过程进行相应 的控制。
首先,建立蛋白酶催化底物水解生成氨基酸的反应。蛋白酶催 化的底物应该是蛋白质,如果蛋白酶催化蛋白质经过彻底水解,产 物应该是各种氨基酸的混合物。这里我们可以选择底物为酪蛋白, 产物为酪氨酸。也就是我们通过在单位时间(比如10分钟)内,
酪蛋白在蛋白酶催化下生成酪氨酸的增加量来判断蛋白酶活力的 大小。
第二步,选择一个可以定量分析测定酪蛋白水解生成酪氨酸含 量的方法体系。在这里,我们可以利用酪氨酸的紫外吸收性质,即 酪氨酸在280nm处有光吸收,可以选择福林酚法或紫外分光光度法 进行测定。
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