phi29 dna polymerase 扩增原理

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phi29 dna polymerase 扩增原理
Phi29 DNA聚合酶是一种特殊的DNA聚合酶,可以用于DNA 扩增。

它的扩增原理如下:
1. 初始反应:在反应管中加入模板DNA,然后加入引物(正
向引物和反向引物),以及dNTPs(脱氧核苷酸三磷酸盐)。

这些引物是由研究人员设计的特定序列的DNA片段,用于指
导DNA的扩增。

2. DNA聚合:Phi29 DNA聚合酶开始结合到引物的末端,并
以引物为起始点开始合成新的DNA链。

它具有高度效率和准
确性,可以在较长的DNA序列上进行连续扩增。

3. 锁着效应:在DNA聚合过程中,Phi29 DNA聚合酶具有一
个特殊的机制,称为“锁效应”,它可以在DNA链延伸过程中,通过结合到模板DNA上的已扩增的DNA链的3'端,阻止其
回退。

这种锁效应可以显著提高扩增效率和准确性。

4. 多轮扩增:在单个的扩增循环中,Phi29 DNA聚合酶可以在模板DNA上循环进行多次DNA合成,从而产生大量的扩增
产物。

根据需要,可以进行多个扩增循环,以进一步增加扩增产物的数量。

总之,Phi29 DNA聚合酶通过结合到引物的末端,并以引物为起始点,在模板DNA上进行DNA链的合成。

它的高效性、
准确性和锁效应等特点使得它成为一种在分子生物学研究和诊断检测中广泛应用的DNA扩增工具。

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