简述酶联免疫吸附试验的原理

简述酶联免疫吸附试验的原理
酶联免疫吸附试验（enzyme-linked immunosorbent assay，简称ELISA）是一种常用的实验方法，用于检测和定量测量特定分
子（如蛋白质，抗体，抗原等）的存在和浓度。

ELISA的原理基于免疫反应和酶反应。

它通常包含以下步骤：
1. 固定：首先，在试验板上涂覆目标分子（例如抗原或抗体），使其附着在板上的固相面。

2. 阻断：使用阻断液阻止未涂覆的区域，阻止非特异性的结合。

3. 反应：将待测样本加入试验板，样本中的目标分子与固定在板上的分子相互结合。

4. 清洗：清洗试验板以去除非特异性结合的成分。

5. 标记酶：加入被标记的酶（通常是辣根过氧化物酶或碱性磷酸酶），该酶能和特异性的结合物发生结合。

6. 洗涤：清洗试验板以去除未结合的标记酶。

7. 反应：加入酶底物，使其与标记酶发生反应，产生可量化的信号。

这个信号通常是发色反应，产生可见的光学变化或荧光。

8. 停止反应：通过添加停止剂，停止酶底物的反应，防止进一步产生信号。

9. 测量：使用光谱仪或读板仪器测量光学密度或荧光强度，从而确定待测样品中目标分子的存在和浓度。

ELISA可以灵敏地检测目标分子，具有高特异性和重复性。

它被广泛应用于生物医学研究、临床诊断、药物发现和环境监测等领域。